分子生物学实验课件.ppt

1、2022-8-1分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验生物样品（细胞、组织、细菌）细胞调节神经科学分子诊断DNA分离RNA分离质粒DNA噬菌体DNA基因组DNA总RNAmRNAcDNA重组DNAPCR遗传鉴定DNA测序DNA标记突变基因表达分子生物学实验基因表达报告基因载体基因转化报告基因检测真核转录体外转录翻译蛋白蛋白分析蛋白分离分子生物学实验分子生物学实验常规材料组织器官原生质体细胞细菌真菌酵母特殊材料少量起始材料特殊病变组织亚细胞结构分子生物学实验水稻卵细胞的分离分离准备工作材料的速冻长期保存人工气候箱、制冰机超净工作台、显微操作系统RNase-free 耗材、液氮罐超

2、低温冰箱RNase 抑制剂分子生物学实验Oligotex系列试剂盒细胞裂解匀浆去蛋白和细胞残渣温浴并结合洗脱去盐和回收旋涡混匀器离心机恒温水浴锅离心机、旋涡混匀器200 烘箱DEPC、RNase-free DNase I、RNase-free 耗材分子生物学实验分子生物学实验第一链的合成第二链的合成和扩增 酶切、纯化和片段分离cDNA检测插入载体并包装文库质量检测文库扩增及保藏恒温水浴锅、制冰机RTase、RNase抑制剂PCR仪高保真Taq酶恒温水浴锅、离心机限制性内切酶、过滤柱电泳仪器、凝胶成像系统琼脂糖恒温水浴锅超净工作台、烘箱、PCR仪培养基超低温冰箱DMSO分子生物学实验分子生物学实

3、验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验对于通过筛库技术获得的目标基因通过噬菌体载体的自切割作用生成目标质粒对于通过PCR技术获得的目标基因通过回收纯化后利用T载体等克隆并转化细菌铺板培养后通过蓝白斑，原位裂解杂交分离出含有目标质粒的单个菌落分子生物学实验PCR或RACE电泳凝胶成像系统长波紫外观察箱切胶胶回收试剂盒T载体、平末端载体转化细菌并铺板培养筛选目标菌落提取目标质粒分子生物学实验PCR或RACE琼脂水平电泳凝胶成像系统、手提紫外灯长波紫外观察箱PCR回收试剂盒胶回收试剂盒PCR仪电泳仪器恒温水浴锅、离心机Taq酶、薄壁管、矿物油琼脂糖分子生物学实验纯化产物PCR产物测序T载体、平

4、末端载体连接细菌转化、铺板培养蓝白斑筛选、菌落原位杂交质粒提取、酶切分析、测序测序仪低温冰箱杂交箱、恒温摇床、低温冰箱超净工作台、电转化仪离心机、恒温水浴锅感受态细胞、培养基、抗生素X-gal、IPTG、尼龙膜和探针限制性内切酶分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验Southern blotting基因组DNA完全消化探针制备琼脂水平电泳比活性测定印迹转膜DNA交联限制性内切酶、恒温水浴锅手提紫外灯、电泳仪器真空转膜仪紫外交联仪同位素检测仪探针制备试剂盒尼龙膜分子生物学实验制备好的尼龙膜探针（放射性或非放射性）杂交杂交箱放射自显影荧光同位素检测仪磷屏成像系统荧光扫描成像系统分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验分子生物学实验2022-8-1分子生物学实验