动物传染病抗体检测技术课件.ppt
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1、动物传染病抗体的检测2015.7.11血清学试验的类型凝集试验凝集试验沉淀试验沉淀试验补体结合试验补体结合试验中和试验中和试验免疫标记技术免疫标记技术凝集试验的类型凝集试验的类型 -直接凝集试验和间接凝集试验直接凝集试验和间接凝集试验u 直接凝集试验:颗粒性抗原与抗体进行的凝集试验直接凝集试验:颗粒性抗原与抗体进行的凝集试验l平板凝集试验平板凝集试验全血平板凝集试验,用于鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫全血平板凝集试验,用于鸡白痢、鸡败血支原体病的检疫血清平板凝集试验,用于布氏杆菌病的检疫血清平板凝集试验,用于布氏杆菌病的检疫l 试管凝集试验试管凝集试验凝集试验凝集试验颗粒性抗原颗粒性抗原(细菌等
2、)(细菌等)抗体抗体凝集现象凝集现象鸡白痢的平板凝集试验鸡白痢的平板凝集试验-种鸡场中鸡白痢的净化种鸡场中鸡白痢的净化血液血液抗抗原原阴性阴性血清血清阳性阳性血清血清抗抗原原抗抗原原1 加诊断抗原加诊断抗原2 加鸡的全血、加鸡的全血、阳性血清、阴阳性血清、阴性血清性血清3 混匀混匀4 静置静置2min,观察结果。观察结果。血清平板凝集试验 -牛羊病的初筛试管凝集试验 -牛羊病的确诊间接凝集试验:可溶性抗原和抗体进行的凝集试验,需颗粒性载体的参与。间接血凝试验:红细胞为载体如猪瘟间接血凝抗体的检测 致敏红细胞致敏红细胞红细胞红细胞抗原抗原红细胞红细胞抗原抗原致敏红细胞致敏红细胞被检抗体被检抗体红
3、细胞凝集红细胞凝集 原理:原理:猪瘟病毒的抗原结合与红细胞制成正向间接猪瘟病毒的抗原结合与红细胞制成正向间接血凝抗原。血凝抗原。被检血清中如有猪瘟抗体可与红细胞表面被检血清中如有猪瘟抗体可与红细胞表面的病毒相结合,出现红细胞凝集。的病毒相结合,出现红细胞凝集。正向间接血凝检测猪瘟抗体 1.加稀释液:加稀释液:第一排的第一排的1-9孔、第三排孔、第三排1-3孔、孔、5-6孔,第四排的孔,第四排的1-12孔每孔加入稀释液孔每孔加入稀释液50ul;2.倍比稀释:倍比稀释:被检血清稀释:每个检样用一排进行倍比稀释,吸取被检血清稀释:每个检样用一排进行倍比稀释,吸取50ul被检血清加入第一被检血清加入第
4、一排的第一孔,倍比稀释到第排的第一孔,倍比稀释到第9孔;孔;阴性血清稀释:吸取阴性对照血清阴性血清稀释:吸取阴性对照血清50ul第三排孔的第一孔,倍比稀释到第第三排孔的第一孔,倍比稀释到第3孔;第孔;第5、6孔为稀释液对照,不加血清;孔为稀释液对照,不加血清;阳性血清稀释:吸取阳性对照血清阳性血清稀释:吸取阳性对照血清50ul加入第四排的第一孔,倍比稀释到第加入第四排的第一孔,倍比稀释到第12孔;孔;2.加猪瘟正向间接血凝抗原,每孔各加猪瘟正向间接血凝抗原,每孔各50ul;以上各孔加入抗原;以上各孔加入抗原25ul;振荡混匀;振荡混匀1min;3.反应:反应:37C孵育孵育2h;4.观察结果:
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