动物实验基本操作技术ppt课件(1).ppt
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1、2022-8-11第九章 动物实验基本操作技术2022-8-12动动物物实实验验准准备备引进引进动物动物动动物物抓抓取取固固定定动动物物编编号号标标记记给药给药途径途径和方和方法法动物动物麻醉麻醉体液体液采集采集实验实验外科外科技术技术操作操作术术前前准准备备术术中中技技术术术术后后护护理理动物动物处死处死动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术一、大、小鼠的抓取固定一、大、小鼠的抓取固定第一节第一节 实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定固固定定盒盒二、豚鼠的抓取固定法二、豚鼠的抓取固定法三、家兔的抓取固定法三、家兔的抓取固定法以上抓取方法都是错误的以上两种固定方法均不正确一、大、小鼠的一
2、、大、小鼠的性别鉴定性别鉴定第二节第二节 性别鉴定性别鉴定外生殖器和肛门距离长,中间有毛的是雄性Female Male 二、兔的性别鉴定一、大、小鼠一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄(大、小情况基本一样)根据形态鉴定日龄(大、小情况基本一样)第第三三节节 年龄的大致判断年龄的大致判断日龄日龄/d/d外观形态特征外观形态特征1 1仔鼠裸体鲜红仔鼠裸体鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带瘢痕脱落脐带瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行日龄日龄/d/d外观形态特征外观形态特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛,门齿长出全身被白毛,门齿长出13131515眼皮张开,能
3、跳跃,能抓取东西眼皮张开,能跳跃,能抓取东西1818以后以后能自行采食,独立生活能自行采食,独立生活 2.根据体重鉴定日龄根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应小鼠日龄与体重的对应日龄日龄/d初生初生 5 10 15 20 25 30体重体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.0 大鼠日龄与体重的对应大鼠日龄与体重的对应日龄日龄/d 初生初生 10 20 30 40 10 20 30 40 体重体重/g 6 67 177 1725 3525 3550 5550 5590 10090 100150150日龄日龄/d/d50 60 70 8050 60 70 80体重
4、体重/g/g150150210 170210 170240 210240 210270 240270 240320320 三、家兔三、家兔 家兔的家兔的门齿门齿和和爪爪随年龄增长而增长,是年龄鉴随年龄增长而增长,是年龄鉴别的重要标志。别的重要标志。青年兔:门齿洁白,短小,排列整齐;青年兔:门齿洁白,短小,排列整齐;老年兔:门齿暗黄老年兔:门齿暗黄,厚而长厚而长,排列不整齐排列不整齐,有破损有破损1岁家兔岁家兔趾趾爪爪:红色与白色长度相等;红色与白色长度相等;1岁以下:红多于白;岁以下:红多于白;1岁以上:白多于红。岁以上:白多于红。五、犬五、犬 犬的年龄主要以犬的年龄主要以牙齿牙齿的生长情况、
5、磨损程度、的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。外形颜色等情况综合判定。年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白,牙尖圆钝白,牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐,洁白光亮。门齿有牙长齐,洁白光亮。门齿有尖突尖突2 2岁岁下门齿下门齿尖突部分磨平尖突部分磨平3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始上、下门齿开始磨损磨损呈微斜面,并呈微斜面,并发黄发黄6 68 8岁岁门齿
6、门齿磨成齿根磨成齿根,犬齿发黄、磨损,犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损,犬齿不齐全,牙根黄,唇边胡须全白门齿磨损,犬齿不齐全,牙根黄,唇边胡须全白第四节第四节 妊娠检查妊娠检查妊娠诊断妊娠诊断(pregnancy diagnosis):在配种以后能及时掌:在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况,采用临床和实验室的方法进行检查。的异常情况,采用临床和实验室的方法进行检查。通过妊娠检查,可以及时地对雌性动物加强护理或再通过妊娠检查,可以及时地对雌性动物加强护理或
7、再次配种,以保护母体和胎儿的正常发育,避免胎儿早次配种,以保护母体和胎儿的正常发育,避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。期死亡和流产及减少繁育时间的损失。外部检查法外部检查法摸胎法摸胎法阴道检查法阴道检查法直肠检查法直肠检查法超声波检查法超声波检查法孕酮含量测定法孕酮含量测定法青蛙试验青蛙试验第五节第五节 分组与编号分组与编号动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标记动物实验前对实验动物进行随机分组和编号标记 一、随机分组:随机数字表(随机抽样原理)一、随机分组:随机数字表(随机抽样原理)(一)(一)为二组为二组 例:设有雄性例:设有雄性Wistar大鼠大鼠12只,按体重大小依只,按体
8、重大小依次编为次编为1,2,3,12号,试用完全随机的方号,试用完全随机的方法,分为甲、乙两组。法,分为甲、乙两组。分组方法:随机点落在是随机数字表上第分组方法:随机点落在是随机数字表上第21行行第第31列的列的78,则从,则从78开始,由上向下抄开始,由上向下抄12个随机个随机数字,如下:数字,如下:随机数字:随机数字:78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41随机数字的奇数代表甲组,偶数代表乙组:随机数字的奇数代表甲组,偶数代表乙组:动物编号:动物编号:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12组组 别:乙别:乙 乙乙 甲甲 甲甲 甲甲 乙乙 甲甲 甲甲
9、 乙乙 乙乙 甲甲 甲甲乙组乙组5个,甲组个,甲组7个,两组数字不等个,两组数字不等继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组,继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组,从上面最后一随机数字从上面最后一随机数字41,接下去抄一个数为,接下去抄一个数为62,以以7除之除之(因甲组原分配因甲组原分配7只只)得得6,即把原分配在,即把原分配在甲组的第甲组的第6个甲个甲(即即11号大鼠号大鼠)调入乙组。调入乙组。如果甲组多两个,则接下去抄两个数。分别如果甲组多两个,则接下去抄两个数。分别以以8,7除之,余数即指要调入乙组的第几个甲,除之,余数即指要调入乙组的第几个甲,余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调
10、整后余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为:各组鼠的编号为:组别组别 鼠的编号鼠的编号 甲组甲组 3 4 5 7 8 12 乙组乙组 1 2 6 9 10 11 (二二)为三组:为三组:A组、组、B组、组、C组组 分组方法:落点是随机数字表第分组方法:落点是随机数字表第40行行17列的列的08,则从则从08开始,自左到右抄开始,自左到右抄12个随机数字,个随机数字,以以3除各除各随机数字,若余数为随机数字,若余数为l,即该鼠归,即该鼠归A组;余数为组;余数为2,归人归人B组;余数为组;余数为3,归入,归入C组。组。动物编号:动物编号:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1
11、1 12 随机数字:随机数字:08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除除 3 余数:余数:2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 组组 别:别:B C A B C B C C A A C A 调整组别:调整组别:B (三)(三)每个动物为一组:每个动物为一组:例:设有例:设有A,B,C,D,E,F代表的代表的6只家兔,只家兔,试用完全随机法将其每只分为一组。试用完全随机法将其每只分为一组。分组方法:从随机数字表上用铅笔任指一点,若分组方法:从随机数字表上用铅笔任指一点,若为第为第21行第行第17列的列的33,则从,则从33向左抄用向左抄用6个数字,然个
12、数字,然后分别以后分别以6,5,4,3,2,l除之。凡除不尽的,即除之。凡除不尽的,即将余数写下。将余数写下。随机数字随机数字 33 46 9 52 68 7 除除 数数 6 5 4 3 2 1 余余 数数 3 1 1 1 2 1 随机排列随机排列 C A B D F E 二、编号标记方法二、编号标记方法 实验动物分组后,为了区分、观察并记录每个个体的实验动物分组后,为了区分、观察并记录每个个体的反应情况,必须给每只动物进行编号标记。反应情况,必须给每只动物进行编号标记。1体表颜料着色法体表颜料着色法 一般对短期试验的白色动物可一般对短期试验的白色动物可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学
13、药品有:用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有:红色:红色:0.5中性红或品红溶液;中性红或品红溶液;黄色:黄色:35苦味酸溶液或苦味酸溶液或8090苦味酸酒精苦味酸酒精饱和液;饱和液;咖啡色:咖啡色:2硝酸银溶液;硝酸银溶液;黑色:煤焦油酒精溶液。黑色:煤焦油酒精溶液。左 前 腿左 前 腿上部为上部为1,左腰部为左腰部为2,左后腿为左后腿为3,头部为头部为4,背部为背部为5,尾基部为尾基部为6,右侧从前至后依次为右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色。用黄色表示个位数,红色表示十位数。表示个位数,红色表示十位数。2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法第六节第
14、六节 常规采血方法常规采血方法 一、大、小鼠的采血方法一、大、小鼠的采血方法 1颈静脉或颈动脉采血颈静脉或颈动脉采血 2股静脉或股动脉采血股静脉或股动脉采血 3心脏采血心脏采血 4尾部采血尾部采血 5眼眶采血眼眶采血 6断头取血断头取血2022-8-139眼窝静脉丛采血尾部采血2022-8-140心脏采血二、豚鼠的采血方法二、豚鼠的采血方法 1耳缘剪口采血耳缘剪口采血 2心脏采血方法同大、小鼠。心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血后肢背中足静脉采血三、家兔的采血方法三、家兔的采血方法 1.心脏采血心脏采血 2.耳中央动脉采血耳中央动
15、脉采血 3.耳静脉采血耳静脉采血 4.颈总动脉颈总动脉 四、狗、猫的采血方法 1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血 2股动脉采血 3.心脏采血同大、小鼠心脏采血。4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血。采血方法的选择,决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、
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