动物实验基本操作技术课件.ppt

1、1动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术 2 1-1-抓取固定抓取固定 2-2-性别鉴定性别鉴定 3-3-年龄判断年龄判断 4-4-妊娠检查妊娠检查 5-5-分组编号分组编号 6-6-常规采血常规采血 7-7-麻醉方法麻醉方法 8-8-给药途径给药途径 9-9-处死方法处死方法q目的：限制动物的活动，持安静状态目的：限制动物的活动，持安静状态 以便正确操作和记录以便正确操作和记录q要求：要求：不损伤实验动物不损伤实验动物 不影响观察指标不影响观察指标 实验者不被动物咬伤实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。1-11-1、

2、小鼠、小鼠 用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。1-21-2、大鼠的抓取与固定、大鼠的抓取与固定 1-31-3、豚鼠的抓取与固定、豚鼠的抓取与固定 豚鼠胆小易惊，性情温和，不咬人，抓取幼小豚鼠时，只需用双手捧起来，对体型较大或怀孕的豚鼠，先用手掌迅速扣住鼠背，抓住其肩胛上

3、方，以拇指和食指环握颈部，另一只手托住其臀部1-41-4、兔的抓取保定：、兔的抓取保定：步骤：步骤：1 1、用右手把兔的两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，、用右手把兔的两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，把兔提起。把兔提起。2 2、然后用左手托住兔的臀部。、然后用左手托住兔的臀部。1-61-6、犬的抓取与固定方法、犬的抓取与固定方法9 2-12-1、成年鼠：、成年鼠：雄雄鼠阴囊明显，鼠阴囊明显，雌鼠阴道开口和雌鼠阴道开口和5 5对对明显明显的乳头。的乳头。10 2-22-2、仔鼠或幼鼠：、仔鼠或幼鼠：以以生殖器与肛门的距离判定生殖器与肛门的距离判定 ：近为：近为雌，远为雄。雌，远为雄。F年龄的大致判断：

4、年龄的大致判断：3-13-1、根据形态：、根据形态：牙齿、趾爪、被毛、神态等。牙齿、趾爪、被毛、神态等。3-23-2、根据体重：、根据体重：体重与年龄呈现相关。体重与年龄呈现相关。1112引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 皮肤肉红皮肤肉红2 全身无毛全身无毛3 不开眼不开眼4 双耳粘连双耳粘连13引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 皮肤红色，颜色变淡皮肤红色，颜色变淡2双耳粘连双耳粘连14引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 皮肤变厚皮肤变厚2 黑色绒毛黑色绒毛3 两耳张开两耳张开4 能翻身能翻身15引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 绒毛绒毛2 下门齿

5、长出下门齿长出3 能爬动能爬动16引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 被毛长全被毛长全2 有听觉有听觉3 能站立能站立17引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 开眼开眼2 门齿长出门齿长出3 爬行爬行18引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 眼皮张开眼皮张开 2 能跳跃能跳跃 3 能抓东西能抓东西19引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 自行采食自行采食20引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心1 离乳离乳2 能独立生活能独立生活21不同日龄小鼠体重情况（单位：克）不同日龄小鼠体重情况（单位：克）品系初生初生1 1周周2 2周周3 3周周4 4周周5 5周

6、周6 6周周7 7周周8 8周周昆明2.015.828.3514.8022.6033.2539.2539.9040.051.955.547.9013.5521.3527.9032.8034.0734.80BALB/c1.463.505.607.4012.4516.1017.4018.6520.251.403.355.507.3211.6014.7515.6016.1018.16C57BL/61.443.505.606.9012.5718.1020.5021.6022.401.403.425.556.4012.2016.9018.4019.0020.256151.584.647.969.8319

7、.0022.5825.9627.9628.831.584.647.969.8315.7520.7521.8823.1224.16C3H1.444.407.709.7013.3017.2020.0021.2022.301.444.407.709.7012.1015.2017.8018.0019.27引自：方喜业医学实验动物学22引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心23引自：国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心4-1 4-1 外部检查法外部检查法4-2 4-2 摸胎法摸胎法4-3 4-3 阴道检查法阴道检查法4-4 4-4 直肠检查法直肠检查法244-5 4-5 超声波检查法超声波检查法4-

8、6 4-6 孕酮含量检查孕酮含量检查法法4-7 4-7 青蛙实验青蛙实验5-15-1、分组、分组进行动物实验时，通常采用随机分组的方法。进行动物实验时，通常采用随机分组的方法。255-25-2、编号、编号5-2-1 5-2-1 颜料标记颜料标记 颜料标记适应于较大量小动物的编号。常用的颜料颜料标记适应于较大量小动物的编号。常用的颜料有有5%5%苦味酸溶液苦味酸溶液 (黄色黄色)、2%2%硝酸银溶液硝酸银溶液 (咖啡色咖啡色)、0.5%0.5%中性品红溶液中性品红溶液 (红色红色)、煤焦油的酒精溶液、煤焦油的酒精溶液(黑色黑色)。颜料。颜料号的原则是先左后右，从上而下。号的原则是先左后右，从上而

9、下。265-2-2 5-2-2 烙印烙印 用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。烙在狗脖套的皮带颈圈上。5-2-3 5-2-3 纹身纹身 用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧，猴多在前兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。多用于猴

10、、兔的编号。275-2-4 5-2-4 号牌号牌 将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。物放错笼具而混淆编号。285-2-5 5-2-5 毛色毛色 利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。马、猫、猴等大动物的编号。5-2-6 5-2-6 剪毛剪毛 用剪刀在狗背上剪出号码，此方法简单，字用剪刀在狗背上剪出号码，

11、此方法简单，字迹清楚、可靠，便于观察。迹清楚、可靠，便于观察。5-2-7 5-2-7 打孔打孔 用打孔器在兔耳上打孔或剪口用打孔器在兔耳上打孔或剪口2930 313233343536373839404142437-17-1、全全身麻醉身麻醉7-1-1 吸入法吸入法 乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙醚棉球的广种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙醚棉球的广口瓶或干燥器内，口瓶或干燥器内，4 46 6分钟后即处于麻醉状态。如实验过分钟后即处于麻醉状态。如实验过程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不时滴

12、加乙醚维持，程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不时滴加乙醚维持，也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。7-2 7-2 局部麻醉局部麻醉 施行浸润麻醉时，用皮试针头先皮内注射，然施行浸润麻醉时，用皮试针头先皮内注射，然后换局麻长针头，由皮点进针，放射到皮点四周，后换局麻长针头，由皮点进针，放射到皮点四周，继续注射，直至要求麻醉区域的皮肤都被浸润为止继续注射，直至要求麻醉区域的皮肤都被浸润为止。根据实验操作要求的深度，可按皮下、筋膜、肌。根据实验操作要求的深度，可按皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的顺序，依次分别注入麻药，以达肉、腹膜或骨膜的顺序，依

13、次分别注入麻药，以达到浸润神经未梢的目的。每次注药前，应回抽，以到浸润神经未梢的目的。每次注药前，应回抽，以防药液误注于血管内。防药液误注于血管内。麻醉注意事项麻醉注意事项F所有麻醉药使用过量均可引起中毒，应特别注意各所有麻醉药使用过量均可引起中毒，应特别注意各种麻醉药的剂量和用药途径。种麻醉药的剂量和用药途径。F注射时，一般要求缓慢，并随时观察动物的肌肉紧注射时，一般要求缓慢，并随时观察动物的肌肉紧张性、角膜反射、去痛反射等指标。张性、角膜反射、去痛反射等指标。F动物麻醉后体温下降，要注意保暖。动物麻醉后体温下降，要注意保暖。F万一麻醉过量，应根据不同情况，积极采取措施，万一麻醉过量，应根据

14、不同情况，积极采取措施，如给予苏醒剂，或注射强心剂。如给予苏醒剂，或注射强心剂。（一）口服给药（一）口服给药 （1）鼠类）鼠类：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。道或误入气管。灌胃一般要借

15、助于开口器、灌胃管进行。先将动灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否中，沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正确插入胃中，未误，若无气泡产生，表明灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。入气管。动物种类动物种类灌胃针深度灌胃针深度每次灌胃量每次灌

16、胃量小白鼠小白鼠3cm3cm1ml1ml大白鼠、豚鼠大白鼠、豚鼠 5cm5cm1-4ml1-4ml兔兔 15cm15cm80-100ml80-100ml犬犬约约20cm20cm200-250ml200-250ml（二）注射给药法（二）注射给药法注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用用4#4#针头，兔、猫、犬、猪、猴用针头，兔、猫、犬、猪、猴用68#68#针头）。针头）。皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮肤，右手持注射器，使

17、针头水平刺入皮下，推送肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针刺药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为0.1-0.1-0.3ml/10g.0.3ml/10g.皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠、小鼠和豚鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注、小鼠和豚鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；家兔可在背部或耳根部作皮下注射：猫、犬则射；家兔可在背部或耳根部作皮下注射：猫、犬则在大腿外侧作皮下注射。在大腿外侧作皮下注射。将注射部位脱毛、消毒，用

18、左手拇指和食指压住将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随之肤表层刺入皮内，然后向上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液慢慢注入一定量的药液,会感到有很大阻力会感到有很大阻力.F缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内隆起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内.如很快消失如很快消失,就可能注入皮下就可能注入皮下,应重换部位再注应重换部位再注射射,如果注射完毕后马上拔针如果注射完毕后马

19、上拔针,药液会从针孔漏药液会从针孔漏出出,所以需注射后所以需注射后5min5min再拔出再拔出.肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可注射。，即可注射。大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉；大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉；家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：犬、猴等大型动物选臂部注射。犬、猴等大型动物选臂部注射。腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏移向上腹

20、，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置,注射器沿注射器沿4545角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。（1 1）小鼠和大鼠：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共）小鼠和大鼠：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有有3 3根，根，左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各1 1根，两侧尾静脉比较容根，两侧尾静脉比较容易固

21、定，故常被采用。注射时，先将动物固定在暴易固定，故常被采用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用露尾部的固定器内，尾部用45504550的温水浸润几的温水浸润几分钟或用分钟或用75%75%酒精棉球反复擦拭使血管扩张，并使表酒精棉球反复擦拭使血管扩张，并使表皮角质软化。皮角质软化。动物动物 灌胃灌胃 皮内注射皮内注射 皮下注射皮下注射 肌肉注射肌肉注射 腹腔注射腹腔注射 静脉注射静脉注射 小鼠小鼠 0.9 0.1 1.5 0.2 1.0 0.8 大鼠大鼠 5.0 0.1 5.0 0.5 2.0 4.0 兔兔 200 0.2 10 2.0 5.0 10 猫猫 150 0.2 10 2.0 5.0 10 猴猴 300 0.3 50 3.0 10 20 狗狗 500 0.3 100 4.0 _ 100空气栓塞：免空气栓塞：免40ml,40ml,狗狗100ml100ml急性失血：大动物麻醉后股动脉放血急性失血：大动物麻醉后股动脉放血液氮法：速冻。液氮法：速冻。微波法：对动物的中枢神经系统进行微波照射。微波法：对动物的中枢神经系统进行微波照射。化学药物：二氧化碳，三氯甲烷化学药物：二氧化碳，三氯甲烷 乙醚，氯化钾，乙醇。乙醚，氯化钾，乙醇。脱臼断髓：颈椎脱臼脱臼断髓：颈椎脱臼81