应用微生物第一章-第三节-微生物胞外多糖及其应用课件.ppt

1、1第一章第一章 微生物在工业领域中的应用微生物在工业领域中的应用生物技术专业生物技术专业应用微生物学应用微生物学课程课程23456野油菜黄单胞菌（野油菜黄单胞菌（Xanthomonas campestrisXanthomonas campestris）7黄原胶（黄原胶（XanthanXanthan gum gum）89胞内胞内玉米淀粉玉米淀粉葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖-6-磷酸磷酸葡萄糖葡萄糖-1-磷酸磷酸UDP-GlcGDP-ManUDP-GlcA-Glc-Glc-n Man-Ac GlcAMan=pyrUTPPPGTPPPHMP途径途径C55-Lipid-pp特异糖基特异糖基转移

2、酶转移酶糖基载体酯糖基载体酯焦磷酸化酶焦磷酸化酶乙酰基转乙酰基转移酶移酶丙酮酸转丙酮酸转移酶移酶多糖聚多糖聚合酶合酶UTP-Glc焦焦磷酸化酶磷酸化酶GTP-Man焦焦磷酸化酶磷酸化酶UDP-Glc脱氢酶脱氢酶淀粉酶淀粉酶胞外胞外C55-Lipid-p+pAcPyrMembrane葡萄糖葡萄糖胞膜胞膜UTPPP胞壁胞壁10淀粉酶N.K-01细胞诱变比值大加碘液 证明是淀粉水解圈R水解圈(mm)R菌落(mm)玉米淀粉平板筛选淀粉酶活性高的菌株，检测黄原胶合成速率和产量筛选淀粉酶活性高的菌株，检测黄原胶合成速率和产量11LPS合成pep合成C55-Lipid-PXanthan gumC55-Lip

3、id-P共利用顺序：共利用顺序：先用于胞壁多糖合成，后用于胞外多糖合成。先用于胞壁多糖合成，后用于胞外多糖合成。先长细胞，后合成胞外多糖先长细胞，后合成胞外多糖Xanthan gum是次生代谢产物还是初级代谢产物？是次生代谢产物还是初级代谢产物？12载体脂焦磷酸化酶C55-Lipid-PPC55-Lipid-PP引物胞壁多糖或胞外多糖无活性有活性载体脂焦磷酸化酶：最适pH7.0黄原胶发酵液pH5.0以下，终止合成流加NH4Cl，调pH7.0，促进黄原胶合成13C55-Lipid-PPC55-Lipid-P焦磷酸化酶C55-Lipid-P无运载活性有运载活性杆菌肽Bacitrain影印C55-L

4、ipid-P含量高不长菌落（C55-Lipid-P含量低）小菌落(C55-Lipid-P含量高)含杆菌肽？含杆菌肽？在高浓度杆菌肽平板上长出的菌落C55-Lipid-P含量高1415细胞生长和dextrans合成同时进行，不进入细胞合成细胞物质合成细胞物质厌氧代谢厌氧代谢Gru蔗糖n蔗糖n果糖葡聚糖蔗糖酶诱导葡6葡6葡6dextrans葡葡3131分解聚合能量16171000330009500015700021900027pH765V(CP)菌体蛋白（）0.54 0.43 0.32 0.21 0.10 8 16 24 32 40 48 56 64 72 80 88菌体蛋白pH产量(g/L)玉米

5、淀粉()残余淀粉粘度X.Campestris.N.K-01 1200L罐黄原胶发酵过程中代谢变化产量18COO OOCCa+Ca+(OH)2192021GlcGlcGlcGlcGlcGlc支链：-1.3链GlcGlcGlc-1.422GlcGlcnGlc-1、4键Glc-1、6键23GlcGlcnMan-AcGlcAMan=pyr(并非皆有pyr)-1、4键Ac|24PyrGal|GlcA|Gal|nGlcFucFucAc|25结冷胶主链结构是葡萄糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖以2 1 1摩尔比聚合而成的四碳重复单元的长链分子。天然结冷胶与低乙酰基结冷胶在结构上的不同点在于：前者在第一个葡萄糖分子C2 处被甘油酸酯化,C6处被乙酸酯化。天然结冷胶的分子结构（7）.结冷胶结冷胶2627螺旋共聚体螺旋共聚体升温、高剪切升温、高剪切降温、低剪切降温、低剪切不规则线团不规则线团双股螺旋双股螺旋28粘浓曲线粘浓曲线29粘剪曲线粘剪曲线3031COO-Na+，K+，Mg2+，Ca2+COO-+Cr3+32333435363738产胶的氧化酶阳性！产胶的氧化酶阳性！39鞘氨醇胶与免疫多糖及其应用鞘氨醇胶与免疫多糖及其应用