生化试剂产品及临床意义介绍(优质)课件.ppt
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1、产品介绍售后服务部 2007-01产品分类:1、临床化学检验试剂 生化全系列2、临床化学检验仪器 蓝宝石600全自动生化分析仪 (Sapphire 600-Audit Diagnostics)国内临床生化试剂最齐全之一含已注册和正在申报中:已注册已注册ALTASTALPGGTCHEAFU(试)TBA-ITBA-VTPALBTBILDBILPAADA (试)CR-苦CR-酶BUNUAB2-MG(试)GLU-HKGLU-OXGSPAMYTGTCHHDL-CLDL-CAPOA1APOBLPaCKCKMBLDHHBDHCaMgPCu(试)ZnFeCO2ASO(试)CRP(试)RF (试)申报中申报中5
2、-NTGPDAAFPNAGCSFCYS-CMALBHbA1cD3-HACELDH1C3C4IgAIgGIgMTRF生化试剂分类:酶类:AMY,CK,CK-MB,HBDH,LDH,LDH1,ALT,AST,ALP,GGT,AFU,CHE,5-NT,ADA,NAG,ACE,GPDA基质类:TP,ALB,GLU,GSP,TBIL,DBIL,UA,BUN,CR,TBA 1,5-AG,D3-H,CSF,CYS-C,TRP,血脂类:TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LP(a)电解质:Ca,Mg,P,Cl,Cu,Fe,Zn,CO2免疫类:ASO,RF,CRP,B2-MG,HBA1C
3、,C3,C4,IgA,IgG,IgM,PA,MALB,AFP生化试剂临床应用肝功能TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT;TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5-NT,GPDA,PA肾功能UA,BUN,CR,B2-MG,NAG,mALB,UP,CSF,CYC心肌酶谱LDH-L,HBDH,CK,CK-MB,LDH1血脂TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LP(a)风湿三项ASO,RF,CRP血糖GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H心血管HS-CRP,ACE电解质CA,MG,P,CL,CU,FE,ZN,CO2胰腺AMY其他C3,C
4、4,IgA,IgG,IgM 肝胆疾病肝胆疾病的生物化学检测的生物化学检测1.1.肝脏的生理功能肝脏的生理功能1.1.代谢功能:代谢功能:三大物质(糖、蛋白质和脂类)的三大物质(糖、蛋白质和脂类)的同化、储存和异化;核酸代谢、维生素的活化同化、储存和异化;核酸代谢、维生素的活化和储藏;激素的灭活及排泄;胆红素、胆酸的和储藏;激素的灭活及排泄;胆红素、胆酸的生成;铁、铜等金属的代谢生成;铁、铜等金属的代谢2.2.排泄功能:排泄功能:对胆红素和某些染料的排泄对胆红素和某些染料的排泄3.3.解毒功能:解毒功能:生物转化功能(同化、异化)生物转化功能(同化、异化)4.4.物质合成功能物质合成功能:凝血和
5、纤溶因子、纤溶抑制因:凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的灭活清除子的生成及对活性凝血因子的灭活清除2.2.肝功能实验的内容肝功能实验的内容蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查 (TP(TP、ALBALB、PAPA、AFP)AFP)胆红素代谢检查(胆红素代谢检查(TBILTBIL、DBILDBIL)胆汁酸代谢检查(胆汁酸代谢检查(TBATBA)摄取、排泄功能检查摄取、排泄功能检查血清肝酶谱的检查(血清肝酶谱的检查(ALTALT、ASTAST、ALPALP、GGTGGT、)、)蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查肝脏是蛋白质代谢的主要的器官,许多蛋白质如白蛋肝脏是蛋白质代谢的主要
6、的器官,许多蛋白质如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等都由肝细胞合成,当肝细胞受损时,合成上述蛋白的都由肝细胞合成,当肝细胞受损时,合成上述蛋白的功能降低,蛋白质的合成量就减少;功能降低,蛋白质的合成量就减少;-球蛋白虽然不是肝细胞合成,但当肝实质细胞受损,球蛋白虽然不是肝细胞合成,但当肝实质细胞受损,间质细胞增生时,球蛋白的生成增加;间质细胞增生时,球蛋白的生成增加;因此,在肝脏疾病时,可表现出血液中蛋白质质和量因此,在肝脏疾病时,可表现出血液中蛋白质质和量的改变;的改变;其主要表现为白蛋白减少,纤维蛋白原减少,球蛋白其主要表现为
7、白蛋白减少,纤维蛋白原减少,球蛋白的增多等;的增多等;因此,测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化,因此,测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化,可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。1.1.总蛋白、白蛋白的检测总蛋白、白蛋白的检测 总蛋白的检测总蛋白的检测双缩脲法双缩脲法蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的,二价铜离子在碱性溶液中与合而成的,二价铜离子在碱性溶液中与蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物,蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物,在在540nm540nm有吸收峰,并与蛋白含量有吸收峰,并与蛋白含量 成正成正比。比。蛋白蛋白+
8、Cu+Cu2+2+Cu Cu 蛋白络合物(紫红色)蛋白络合物(紫红色)白蛋白的检测白蛋白的检测溴甲酚绿终点法溴甲酚绿终点法 血清中白蛋白与溴甲酚绿(血清中白蛋白与溴甲酚绿(BCGBCG)在)在pH4.15pH4.15环境中结合生成绿色复合物,溶环境中结合生成绿色复合物,溶液由黄色变为绿色,在液由黄色变为绿色,在600nm600nm有吸收峰,有吸收峰,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,从而其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,从而测出白蛋白含量。测出白蛋白含量。白蛋白白蛋白+溴甲酚绿溴甲酚绿白蛋白白蛋白-BCG-BCG复合物复合物与溴甲酚紫法的比较与溴甲酚紫法的比较溴甲酚绿法操作简单、快速,既可手工溴甲酚绿
9、法操作简单、快速,既可手工操作,也能自动化分析,是目前国内最操作,也能自动化分析,是目前国内最常用方法。常用方法。溴甲酚绿法除与白蛋白结合外,还与部溴甲酚绿法除与白蛋白结合外,还与部分球蛋白结合,对血清白蛋白特异性较分球蛋白结合,对血清白蛋白特异性较溴甲酚紫法稍差溴甲酚紫法稍差溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度临床意义临床意义血清总蛋白与白蛋白升高血清总蛋白与白蛋白升高 急性失水、肾上腺皮质功能亢进急性失水、肾上腺皮质功能亢进血清总蛋白与白蛋白降低血清总蛋白与白蛋白降低 肝细胞损害合成减少:肝炎、肝硬化、肝癌肝细胞损害合成减少:肝炎、肝硬化、肝癌 总蛋白总蛋白60
10、g/L,60g/L,白蛋白白蛋白25 g/L25 g/L,低蛋白血,低蛋白血症症 营养不良:摄入不足营养不良:摄入不足 丢失过多:肾病、烧伤、大出血丢失过多:肾病、烧伤、大出血 消耗增加:结核、甲亢、恶性肿瘤消耗增加:结核、甲亢、恶性肿瘤血清总蛋白与白蛋白升高血清总蛋白与白蛋白升高 TPTP80g/L80g/L(高蛋白血症)(高蛋白血症)A A 35g/L35g/L(高球蛋白血症)(高球蛋白血症)慢性肝病、慢性肝病、M M蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病血清血清TPTP降低降低 生理性减少(生理
11、性减少(e.g.3ye.g.3y)、免疫功能抑制、先天性)、免疫功能抑制、先天性低低TPTPA/GA/G倒置倒置 肝功能损伤、肝功能损伤、M M蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多发性骨髓瘤肝癌、多发性骨髓瘤血清前白蛋白测定血清前白蛋白测定免疫比浊法免疫比浊法 标本中标本中PABPAB与特异性抗体反应形成不溶性与特异性抗体反应形成不溶性复合物,可在复合物,可在340nm340nm测定该复合物的浊度,测定该复合物的浊度,与同样处理的标准品比较,得出标本中与同样处理的标准品比较,得出标本中PABPAB的含量。的含量。临床意义临床意义降低:见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝
12、降低:见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝硬化、肝癌,硬化、肝癌,(因为半衰期比因为半衰期比ALBALB短,短,PAPA的变化远较的变化远较ALBALB敏感敏感),故对早期肝炎、,故对早期肝炎、急性重肝具有特殊诊断价值急性重肝具有特殊诊断价值升高:升高:HodgkinHodgkin病(恶性淋巴瘤的一种独病(恶性淋巴瘤的一种独特类型特类型)胆红素代谢检查胆红素代谢检查胆红素主要是在网状内皮系统中,由衰胆红素主要是在网状内皮系统中,由衰老老RBCRBC的血红蛋白分解后形成的血红蛋白分解后形成生成后在血液中与白蛋白聚合,此时尚生成后在血液中与白蛋白聚合,此时尚未与其它化合物结合,称为未与其它化合物结合,称为
13、非结合胆红非结合胆红素素(间接胆红素间接胆红素IBILIBIL或游离胆红素或游离胆红素)非结合胆红素被转运到肝脏,经肝细胞非结合胆红素被转运到肝脏,经肝细胞摄取后,通过肝脏的生物转化作用,与摄取后,通过肝脏的生物转化作用,与葡萄糖醛酸结合后葡萄糖醛酸结合后 称为称为结合胆红素结合胆红素(直直接胆红素接胆红素DBILDBIL)胆红素代谢检查胆红素代谢检查结合胆红素由胆道排入肠腔,被细菌还原成结合胆红素由胆道排入肠腔,被细菌还原成尿尿胆原胆原尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取,其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入摄取,其中大部分又转变成胆红素随胆汁排
14、入肠腔,形成肠腔,形成“肝肠循环肝肠循环”残留肠腔的尿胆原氧化后,以残留肠腔的尿胆原氧化后,以粪胆素粪胆素排出排出因此,当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结因此,当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍,可导致血中合、转运、排泄等过程发生障碍,可导致血中胆红素增高,形成胆红素增高,形成黄疸。黄疸。总胆红素总胆红素(T-BIL)(T-BIL)改良化学氧化法改良化学氧化法总胆红素在表面活性剂存在下,被化学总胆红素在表面活性剂存在下,被化学氧化剂氧化,生成胆绿素,测定氧化剂氧化,生成胆绿素,测定450nm450nm处处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。吸光度的减少与总胆红素的浓
15、度成正比。化学氧化剂化学氧化剂 pH8.2pH8.2 胆红素胆红素胆绿素胆绿素 表面活性剂表面活性剂直接胆红素直接胆红素(D-BIL)(D-BIL)改良化学氧化法改良化学氧化法直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在下,被化学氧化剂氧化,生成胆绿素,测定下,被化学氧化剂氧化,生成胆绿素,测定450nm450nm处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成正比。正比。化学氧化剂化学氧化剂 pH3.0pH3.0 胆红素胆红素 胆绿素胆绿素 间胆抑制剂间胆抑制剂与重氮盐法的比较与重氮盐法的比较重氮法中的改良重氮法中的改良J-GJ-G法有
16、较高的灵敏度、法有较高的灵敏度、精密度和较宽的线性,但试剂无法长期精密度和较宽的线性,但试剂无法长期稳定,溶血有负干扰,且叠氮钠作为防稳定,溶血有负干扰,且叠氮钠作为防腐剂时能破坏偶氮试剂,导致呈色不完腐剂时能破坏偶氮试剂,导致呈色不完全;全;改良化学氧化法与改良化学氧化法与J-GJ-G法有很好的相关性法有很好的相关性(R=0.994R=0.994);抗溶血();抗溶血(Hb7.4Hb7.4);不);不受脂肪乳、受脂肪乳、VitCVitC、肝素等干扰因素的影、肝素等干扰因素的影响;双试剂可以长期保持稳定响;双试剂可以长期保持稳定临床意义 增高:见于肝脏疾病,如原发性胆汁性增高:见于肝脏疾病,如
17、原发性胆汁性肝硬化、急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝硬化、急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬化;化;肝外疾病如溶血性黄疸、新生儿黄肝外疾病如溶血性黄疸、新生儿黄疸、胆石症、胰头癌、输血错误等也可疸、胆石症、胰头癌、输血错误等也可见总胆红素也增高。见总胆红素也增高。胆汁酸测定胆汁酸测定酶循环法酶循环法 (第五代胆汁酸测定方法学)(第五代胆汁酸测定方法学)胆汁酸被胆汁酸被3 3-羟基类固醇脱氢酶及羟基类固醇脱氢酶及Thio-Thio-NADNAD特异性地氧化,生成特异性地氧化,生成3-3-酮类固醇及酮类固醇及Thio-NADHThio-NAD
18、H,3-3-酮类固醇在酮类固醇在3 3-羟基类固羟基类固醇脱氢酶及醇脱氢酶及NADHNADH存在下,生成胆汁酸和存在下,生成胆汁酸和NADNAD+,循环往复从而放大微量的胆汁酸,循环往复从而放大微量的胆汁酸量,测定生成的量,测定生成的Thio-NADHThio-NADH的吸光度与标的吸光度与标准比较,得出胆汁酸含量。准比较,得出胆汁酸含量。酶循环法测定反应式酶循环法测定反应式Thio-NAD+Thio-NADH+H+胆汁酸 3-羟基类固醇脱氢酶 3-酮类固醇 NAD+NADH+H+临床意义临床意义总胆汁酸升高总胆汁酸升高 肝损害:肝炎、肝硬化、肝癌肝损害:肝炎、肝硬化、肝癌 胆道阻塞:胆管梗阻
19、引起的胆汁淤积胆道阻塞:胆管梗阻引起的胆汁淤积 小肠污浊综合症小肠污浊综合症 l与第一代胆汁酸测定试剂相比与第一代胆汁酸测定试剂相比 成倍提高了测定灵敏度,克服了第一代酶成倍提高了测定灵敏度,克服了第一代酶比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问题。题。同时由于灵敏度提高的原因,循环酶法试同时由于灵敏度提高的原因,循环酶法试剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些试剂隔离开来。试剂隔离开来。血清酶学检查血清酶学检查肝脏是酶含量最丰富的器
20、官,肝细胞损肝脏是酶含量最丰富的器官,肝细胞损伤时,许多酶如伤时,许多酶如ALTALT、ASTAST、GGTGGT、ALPALP释释放入血,导致血浆酶水平升高放入血,导致血浆酶水平升高1.1.肝脏疾病时酶活力改变的机制肝脏疾病时酶活力改变的机制酶合成异常酶合成异常肝细胞释放增加肝细胞释放增加 2.2.对肝脏疾病诊断意义的分类对肝脏疾病诊断意义的分类反映肝细胞病变和坏死的酶(反映肝细胞病变和坏死的酶(ALTALT,ASTAST)反映肝、胆淤滞的酶反映肝、胆淤滞的酶反映肝纤维化的酶反映肝纤维化的酶反映肝细胞合成功能的酶(反映肝细胞合成功能的酶(CHECHE)反映肝细胞病变和坏死的酶反映肝细胞病变和
21、坏死的酶 谷氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶,谷氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶,ALTALT)连续监测法连续监测法 (IFCCIFCC)ALTALT催化催化L-L-丙氨酸的氨基转移,生成丙酮丙氨酸的氨基转移,生成丙酮酸。丙酮酸与酸。丙酮酸与NADHNADH在在LDHLDH的催化下反应生的催化下反应生成乳酸和成乳酸和NADNAD+。NADHNADH在在340nm340nm处有特异吸处有特异吸收峰,其被氧化的速率与血清中收峰,其被氧化的速率与血清中ALTALT的活的活性成正比,在性成正比,在340nm340nm处测定处测定NADHNADH下降速率,下降速率,即可测出即可测出ALTALT活性。活性。天门冬氨酸
22、氨基转移酶(谷草转氨酶,天门冬氨酸氨基转移酶(谷草转氨酶,ASTAST)连续监测法连续监测法 (IFCCIFCC)ASTAST催化催化L-L-天冬氨酸的氨基转移与天冬氨酸的氨基转移与MDHMDH催催化的反应偶联,使化的反应偶联,使NADHNADH氧化生成氧化生成NAD+NAD+。NADHNADH在在340nm340nm处有特异吸收峰,其被氧化处有特异吸收峰,其被氧化的速率与血清中的速率与血清中ASTAST的活性成正比,在的活性成正比,在340nm340nm处测定处测定NADHNADH下降速率,即可测出下降速率,即可测出ASTAST活性。活性。与赖氏法的比较与赖氏法的比较连续监测法多用于自动化生
23、化分析仪,连续监测法多用于自动化生化分析仪,准确性好、精密度高。准确性好、精密度高。赖氏法多用于手工操作,实验条件要求赖氏法多用于手工操作,实验条件要求不高,便于基层医疗单位开展,但重复不高,便于基层医疗单位开展,但重复性差,准确性差。性差,准确性差。临床意义临床意义急性病毒肝炎急性病毒肝炎ALTALT:500-1000U/L500-1000U/L,并且,并且ASTALT ASTALTASTALT多见多见 一些药物或毒物所致升高:氯丙嗪、异烟肼、一些药物或毒物所致升高:氯丙嗪、异烟肼、奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒腺苷脱氨酶(腺苷脱氨酶(ADA
24、ADA)酶比色法酶比色法 ADAADA腺嘌呤核苷腺嘌呤核苷+H+H2 2O O次黄嘌呤核苷次黄嘌呤核苷+NH+NH3 3 PN PN 次黄嘌呤核苷次黄嘌呤核苷+Pi+Pi次黄嘌呤次黄嘌呤+磷酸核糖磷酸核糖 XODXOD 次黄嘌呤次黄嘌呤+2H+2H2 2O+2OO+2O2 2 2H2H2 2O O2 2+尿酸尿酸 PODPOD 2H 2H2 2O O2 2+4-AAP+TOOS+4-AAP+TOOS醌化合物醌化合物 在波长在波长546nm546nm处测定醌化合物生成速率,计算处测定醌化合物生成速率,计算出出ADAADA活力。活力。临床意义临床意义 类似类似ALTALT,对反映急性肝损害的残存病
25、变,对反映急性肝损害的残存病变和慢性肝损害比和慢性肝损害比ALTALT为先,(并且为先,(并且ADAADA在在鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也有应用)有应用)。反映肝细胞合成功能的酶反映肝细胞合成功能的酶胆碱酯酶(胆碱酯酶(CHE)CHE)硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成丁酸和硫代胆碱,硫代胆碱再与丁酸和硫代胆碱,硫代胆碱再与5 5、5 5二二硫代硫代-2-2-硝基苯甲酸反应生成硝基苯甲酸反应生成5-5-巯基巯基-2-2-硝基苯甲酸,通过在硝基苯甲酸,通过在405nm405nm处测定处测定5-5
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