病原微生物细菌感染的检查方法与防治原则.课件.ppt

1、目的要求目的要求1.1.掌握：掌握：（1 1）病原菌的常规分离与鉴定方法原则和常）病原菌的常规分离与鉴定方法原则和常用的检测细菌抗原的方法。用的检测细菌抗原的方法。（2 2）人工自动免疫和人工被动免疫的概念。）人工自动免疫和人工被动免疫的概念。（3 3）常用生物制品的概念和特点。）常用生物制品的概念和特点。（4 4）细菌标本的采集与送检的主要原则。）细菌标本的采集与送检的主要原则。2.2.熟悉：熟悉：抗菌药物的主要作用机制。抗菌药物的主要作用机制。3.3.了解：了解：临床感染性疾病用药的基本原则及检临床感染性疾病用药的基本原则及检测细菌对药物敏感性的常用方法。测细菌对药物敏感性的常用方法。（一

2、）标本的采集与运送原则（一）标本的采集与运送原则一一.病原菌检测病原菌检测脑膜炎奈瑟菌（革兰染色）脑膜炎奈瑟菌（革兰染色）结核分枝杆菌（抗酸染色）结核分枝杆菌（抗酸染色）按不同目的把标本接种在普通琼脂平板、血液按不同目的把标本接种在普通琼脂平板、血液琼脂平板或选择培养基，以获得细菌的纯培养。琼脂平板或选择培养基，以获得细菌的纯培养。糖发酵试验糖发酵试验VPVP试验（试验（ViVi）甲基红试验（甲基红试验（M M）枸橼酸盐利用试验（枸橼酸盐利用试验（C C）靛基质（吲哚）试验（靛基质（吲哚）试验（I I）硫化氢试验硫化氢试验尿素分解试验尿素分解试验已知抗体（抗血清）已知抗体（抗血清）待检抗原待检

3、抗原（未知菌）（未知菌）直接法直接法玻片凝集试验（玻片凝集试验（定性试验定性试验）原理：血清学诊断双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高4倍者方有意义种类：用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。(抗原未知抗体)标本：凝集试验：肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等沉淀试验：梅毒VDRL、RPR试验等中和试验：抗“O”试验等补体结合试验：Q热柯克斯体抗体检测等主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等纸片琼脂法测量抑菌环直径第二节 细菌感染的特异性预防生物制品：人工免

4、疫的免疫原、免疫血清、细胞制剂及诊断制剂的生物性制剂。人工免疫：采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体，以增强宿主体的抗病能力。n主动免疫 自然免疫 患病、隐性感染 人工免疫 疫苗、类毒素 n被动免疫 自然免疫 胎盘、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球人工主动免疫(artificial active immunity)：将疫苗或类毒素接种于人体，使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。作用：预防人工主动免疫人工主动免疫主要生物制品：死疫苗活疫苗亚单位疫苗基因工程疫苗重组载体疫苗核酸疫苗类毒素（1 1）死）死疫苗疫苗(killed vaccine)(kil

5、led vaccine)是用物理、化学方法杀死是用物理、化学方法杀死病原微生物，但仍保持其免疫原性的一种生物制剂。病原微生物，但仍保持其免疫原性的一种生物制剂。如白百破、伤寒、流脑、乙脑、流感、钩端螺旋体等。如白百破、伤寒、流脑、乙脑、流感、钩端螺旋体等。（2 2）活疫苗（活疫苗（living vaccineliving vaccine）是通过独立变异或人工是通过独立变异或人工选择法而获得的减毒或无毒株，或从自然界直接选择出来选择法而获得的减毒或无毒株，或从自然界直接选择出来的弱毒或无毒株经培养后制成的疫苗。的弱毒或无毒株经培养后制成的疫苗。BCGBCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰质炎和麻疹疫苗等。鼠

6、疫、炭疽、脊髓灰质炎和麻疹疫苗等。偶可发生回复突变，毒力回升，接种后发病。联合疫苗在偶可发生回复突变，毒力回升，接种后发病。联合疫苗在试用中。试用中。人工主动免疫人工主动免疫活疫苗与死疫苗的区别区别点区别点活疫苗活疫苗死疫苗死疫苗制品特点减毒或无毒的疫苗死菌，仍保持免疫原性制备方法通过非正常培养得到减毒株通过物理或化学方法使病原体失活接种次数和接种量1次，量小23次，量大接种反应可在体内增殖，类似轻型感染或隐性感染在体内不增殖，可出现发热、全身或局部肿痛等反应免疫应答的类型体液免疫和细胞免疫体液免疫免疫维持时间15年或更长0.51年毒力回升与安全性有可能，对免疫缺陷者有危险不可能，安全性好疫苗

7、的稳定性相对不稳定相对稳定（3 3）基因工程疫苗：）基因工程疫苗：目的基因目的基因 原核或真核细胞原核或真核细胞 基因产物基因产物 （如乙肝疫苗）（如乙肝疫苗）（4 4）重组载体疫苗：）重组载体疫苗：蛋白质抗原基因蛋白质抗原基因 减毒的病毒或细菌减毒的病毒或细菌 基因整合基因整合 基因产物基因产物 疫苗疫苗 转入转入 培养培养 表达表达 导入导入人工主动免疫人工主动免疫（5 5）亚单位疫苗：）亚单位疫苗：除去病原体的核酸，提取其表面抗原制备的疫苗。除去病原体的核酸，提取其表面抗原制备的疫苗。如脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌表面的特异性多糖如脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌表面的特异性多糖+吸吸附剂制成疫

8、苗（不含类脂、无毒）、流感疫苗、乙肝疫附剂制成疫苗（不含类脂、无毒）、流感疫苗、乙肝疫苗等，这种疫苗防止减毒活疫苗回复突变和肿瘤病毒潜苗等，这种疫苗防止减毒活疫苗回复突变和肿瘤病毒潜在的致癌作用。在的致癌作用。（6 6）DNADNA疫苗：疫苗：即基因疫苗或核酸疫苗（第三代疫苗），这种核酸即基因疫苗或核酸疫苗（第三代疫苗），这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原，诱导产生细胞毒既是载体又能在真核细胞中表达抗原，诱导产生细胞毒杀伤功能的杀伤功能的T T细胞，有效预防病毒、胞内寄生菌及寄生虫细胞，有效预防病毒、胞内寄生菌及寄生虫引起的传染。引起的传染。人工主动免疫人工主动免疫抗毒素丙种球蛋白(麻疹

9、、甲肝、脊髓灰质炎)人工被动免疫(artificial passive immunity)注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫，作用及时。作用：治疗，紧急预防主要生物制品：人工被动免疫人工被动免疫区别要点人工主动免疫人工被动免疫免疫物质抗原抗体或细胞因子等接种次数13次1次免疫出现时间慢，24周快，立即免疫维持时间长，数年数月短，23周人工主动免疫与人工被动免疫的区别第三节、细菌感染的治疗第三节、细菌感染的治疗思 考 题一、名词解释一、名词解释1活菌（疫）苗活菌（疫）苗 2死菌（疫）苗死菌（疫）苗 3类毒素类毒素 4抗毒素抗毒素 5人

10、工被动免疫人工被动免疫 6人工主动免疫人工主动免疫二、问答题二、问答题1简述进行细菌学检查时对标本采集和送检过程应简述进行细菌学检查时对标本采集和送检过程应遵守的原则。遵守的原则。2列表比较人工自动免疫与人工被动免疫的区别。列表比较人工自动免疫与人工被动免疫的区别。3列表比较活疫苗与死疫苗的主要区别。列表比较活疫苗与死疫苗的主要区别。4简述病原菌检出的主要程序。简述病原菌检出的主要程序。（2 2）协同凝集：用）协同凝集：用SPASPA测脑膜炎奈瑟菌、志贺菌、沙门菌菌可测脑膜炎奈瑟菌、志贺菌、沙门菌菌可溶性抗原作早期诊断。溶性抗原作早期诊断。（3 3）免疫荧光技术（）免疫荧光技术（IFIF）：痢疾志贺菌荧光）：痢疾志贺菌荧光AbAb培养基培养基+粪粪便标本便标本 荧光球。荧光球。（4 4）对流免疫电泳）对流免疫电泳(CIE):(CIE):测测脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌（5 5）免疫印迹技术）免疫印迹技术（1 1）酶免疫技术（）酶免疫技术（EIAEIA）：淋病奈瑟菌、肠道菌检测。）：淋病奈瑟菌、肠道菌检测。（四）病原菌核酸的检测（四）病原菌核酸的检测n1、核酸杂交技术、核酸杂交技术n2、PCR技术技术n3、基因芯片技术、基因芯片技术（gene chips）