生物化学习题及答案课件.ppt
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1、绪论第一章第一章 蛋白质蛋白质 第二章第二章 核核 酸酸 第三章第三章 酶酶 第四章第四章 维生素维生素 第五章第五章 生物膜生物膜 第六章第六章 代谢总论代谢总论第七章第七章 生物氧化生物氧化 第八章第八章 糖代谢糖代谢第九章第九章 脂代谢脂代谢第十章第十章 蛋白质的酶促降解和氨基酸代谢蛋白质的酶促降解和氨基酸代谢 第十一章第十一章 核酸的酶促降解及核苷酸代谢核酸的酶促降解及核苷酸代谢第十二章第十二章 核酸的生物合成核酸的生物合成第十三章第十三章 蛋白质的生物合成蛋白质的生物合成 1、氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸:
2、(答案)(a)含有一个羟基。(b)含有一个氨基。(c)含有一个具有芳香族性质的基团。(d)含有分支的脂肪族烃链。(e)含有硫。(f)含有一个在pH 710范围内可作为亲核体的基团或原子,指出该亲核基团或原子。第一章第一章 蛋白质化学蛋白质化学l2、一种氨基酸的可解离基团可以带电或中性状态存在,这取决于它的pK值和溶液的pH。(a)组氨酸有3种可解离基团,写出相应于每个pK 值的3种解离状态的平衡方程式。每种解离状态下的组氨酸分子的净电荷是多少?(b)在pH1、4、8和12时,组氨酸的净电荷分别是多少?将每一pH下的组氨酸置于电场中,它们将向阴极还是阳极迁移?(答案)l3、某种溶液中含有三种三肽
3、:Tyr-Arg-Ser,Glu-Met-Phe 和Asp-Pro-Lys,-COOH基团的pKa 为3.8;-NH3基团的pKa为8.5。在哪种pH(2.0,6.0或13.0)下,通过电泳分离这三种多肽的效果最好?(答案)l4、利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被pH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。(答案)l(a)Asp和Lys(b)Arg和Met(c)Glu和Val(d)Gly和Leu(e)Ser和Ala5、氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58的色氨酸(色氨酸的分子量为204)。(a)试计算牛血清白蛋白的最小分子量(假设每个蛋白分子只含有一个色氨酸残基)。(b
4、)凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70,000,试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基?(答案)l6、胃液(pH1.5)的胃蛋白酶的等电点约为1,远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官能团?什么样的氨基酸才能提供这样的基团?l(答案)l7、已知某蛋白是由一定数量的链内二硫键连接的两个多肽链组成的。1.00g该蛋白样品可以与25.0mg还原型谷胱甘肽(GSH,MW307)反应。(答案)(a)该蛋白的最小分子量是多少?(b)如果该蛋白的真实分子量为98240,那么每分子中含有几个二硫键?(c)多少mg的巯基乙醇(MW78.0)可以与起始的1.00g该蛋白完全反应?
5、l8、一个含有13个氨基酸残基的十三肽的氨基酸组成为:Ala,Arg,2 Asp,2Glu,3Gly,Leu,3Val。部分酸水解后得到以下肽段,其序列由Edman降解确定,试推断原始寡肽的序列。(答案)(a)Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Glu-Ala(b)Val-Asp-Val-Asp-Glu(c)Val-Asp-Val(d)Glu-Ala-Leu-Gly-Arg(e)Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu(f)Leu-Gly-Argl9、下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr 异硫氰酸苯酯 丹黄酰氯 脲 6mol/LHCl-巯基乙醇 水合茚三酮 过甲酸 胰蛋白酶
6、 胰凝乳蛋白酶 其中哪一个最适合完成以下各项任务(答案)(a)测定小肽的氨基酸序列。(b)鉴定肽的氨基末端残基。(c)不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂?(d)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。(e)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。(f)在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。l10、由下列信息求八肽的序列。(a)酸水解得 Ala,Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val(b)Sanger试剂处理得DNP-Ala。(c)胰蛋白酶处理得Ala,Arg,Thr 和 Leu,Met,Phe,2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。(d)溴化氰
7、处理得 Ala,Arg,高丝氨酸内酯,Thr,2Val,和 Leu,Phe,当用Sanger试剂处理时,分别得DNP-Ala和DNP-Leu(答案)11、在结晶肽的1.49A)和C=N双键(1.27A)之间。他们也X-射线研究中,Linus Pauling和Robert corey发现肽链中的肽键(C-N)长度(1.32A)介于典型的C-N单键(发现肽键呈平面状(与肽键相连接的4个原子位于同一个平面)以及两个碳原子彼此呈反式(位于肽键的两侧)与肽键连接。(答案)(a)肽键的长度与它的键的强度和键级(是单键、双键或三键)有什么关系?(b)从Pauling等人的观察,就肽键旋转能得出什么看法?l1
8、2、羊毛衫等羊毛制品在热水中洗后在电干燥器内干燥,则收缩。但丝制品进行同样处理,却不收缩。如何解释这两种现象?(答案)l13、人的头发每年以15至20cm的速度生长,头发主要是角蛋白纤维,是在表皮细胞的里面合成和组装成“绳子”。角蛋白的基本结构单元是-螺旋。如果-螺旋的生物合成是头发生长的限速因素,计算-螺旋链的肽键以什么样的速度(每秒钟)合成才能解释头发每年的生长长度?(答案)l14、合成的多肽多聚谷氨酸(Glu)n),当处在pH3.0以下时,在水溶液中形成螺旋,而在pH5.0以上时却为伸展的形态。(答案)(a)试解释该现象。(b)在哪种PH条件下多聚赖氨酸(Lys)会形成-螺旋?l15、一
9、个-螺旋片段含有180个氨基酸残基,该片段中有多少圈螺旋?计算该-螺旋片段的轴长。(答案)l16、如何用二氧化碳与水的反应来解释Bohr效应?(答案)(a)写出由二氧化碳和水形成碳酸氢根的方程式,并解释H和CO2在血红蛋白氧合中的作用。(b)解释向休克病人静脉注射碳酸氢根的生理学依据。l17、一个寡聚蛋白(MW72000)是由相同亚基组成的,该蛋白可以完全解离并与2,4-二硝基氟苯反应。由100mg该蛋白可以获得5.56M的DNP-Gly,该蛋白含有几个亚基?(答案)l18、对怀孕的哺乳动物中氧的转运研究显示在同样条件下测量婴儿和母亲的血液氧饱和曲线明显不同。这是因为婴儿的红细胞中含有结构不同
10、的血红蛋白F(a2g2),而母亲的红细胞含有一般的血红蛋白A(a2g2)。(a)在生理状况下,哪一种血红蛋白对氧有更高的亲和性。请解释。(b)不同的氧亲和性有何生理意义?)当所有的2,3-二磷酸甘油酸(BPG)从血红蛋白A和F中移去后,测得的氧饱和曲线往左移。不过此时的血红蛋白A比血红蛋白F对氧有更高的亲和性。当加回 BPG时,氧饱和曲线又恢愎正常情形。BPG对血红蛋白的氧亲和性有何影响?用以上资料解释婴儿和母亲的血红蛋白的不同氧亲和性?(答案)l19、下列变化对肌红蛋白和血红蛋白的氧亲和性有什么影响?(答案)(a)血液中的pH由7.4下降到7.2。(b)肺部CO2分压由6kPa(屏息)减少到
11、2kPa(正常)。(c)BPG水平由5mM(平原)增加到8mM(高原)。l20、蛋白质A对配体X结合的解离常数为Kd106M,而蛋白质B对X结合的Kd109M。哪个蛋白对X有更高的亲和性?(答案)l 答:蛋白质B对X有更高的亲和性。蛋白质B对CX的半饱和浓度比蛋白质A的低得多。返回l 答案:(a)Ser(S),Thr(T),Tyr(Y)(b)Asn(N),Gln(Q),Arg(R),Lys(K)(c)Phe(F),Trp(W),Tyr(Y),(d)Ile(I),Leu(L),Val(V)(e)Cys(C),Met(M)(f)可以作为亲核试剂的侧链基团或原子有位于Ser(S),Thr(T)和Ty
12、r(Y)中的-OH;位于Cys(C)和Met(M)中的硫原子,位于Asp(D)和Glu(E)中的-COO-;以及位于His(H)和Lys(k)中的氮原子。l(a)、(b)l答:pH=6.0比pH=2.0或pH=13.0时电泳能提供更好的分辨率。因为在pH6.0的条件下每种肽都带有不同的净电荷(+1,-1,和0),而在pH2.0的条件下净电荷分别为+2,+1和+2,在pH13.0的条件下净电荷分别为-2,-2和-2。l 答:(a)Asp(b)Met(c)Glu(d)Gly(e)Serl 答:(a)32,100g/mol(b)2l答:COO;Asp,Glul 答:(a)MW24560;(b)4个二
13、硫键;(c)6.35mgl该肽链的序列可以通过将肽片段的相同序列重叠排列起来获得整个序列。l(a)Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Alal(b)Val-Asp-Val-Glul(c)Val-Asp-Vall(d)Glu-Ala-Leu-Gly-Argl(e)Val-Gly-Gly-Glu-Ale-Leu-Gly-Argl(f)Leu-Gly-ArglVal-Asp-Val-Asp-Glu-Val-Gly-Gly-GluAla-Leu-Gly-Argl答:(a)异硫氰酸苯酯。(b)丹黄酰氯。(c)脲;-巯基乙醇还原二硫键。(d)胰凝乳蛋白酶。(e)CNBr。(f)胰蛋白酶ll答:Ala-
14、Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phel答:(a)键越短其强度越高,而且其键级越高(在单键以上)。肽键的强度比单键强,键的特性介于单键和双键之间。(b)在生理温度下,肽键旋转比较困难,因为它有部分双键特性。ll 答答:羊毛是由羊毛是由角蛋白组成的。角蛋白组成的。角蛋白由两条链构成,相角蛋白由两条链构成,相互盘绕,每条链自身又有所盘绕,因此互盘绕,每条链自身又有所盘绕,因此角蛋白就是一个螺旋角蛋白就是一个螺旋的螺旋结构,可以将它想象成两个弹簧互相围绕着同一个轴盘的螺旋结构,可以将它想象成两个弹簧互相围绕着同一个轴盘绕而成。因此绕而成。因此角蛋白有着很好的弹性。当在纺成毛线的时候,
15、角蛋白有着很好的弹性。当在纺成毛线的时候,外力会将蛋白进行一定程度的拉扯,使得螺旋的间隙变大,而外力会将蛋白进行一定程度的拉扯,使得螺旋的间隙变大,而水洗时这些螺旋在水分子的帮助下重新恢复了旧有的结构,因水洗时这些螺旋在水分子的帮助下重新恢复了旧有的结构,因此会发生皱缩此会发生皱缩.而丝制品中的主要成分是丝心蛋白,它主要是由而丝制品中的主要成分是丝心蛋白,它主要是由呈现呈现折叠构象的多肽链组成的,丝中的折叠构象的多肽链组成的,丝中的-折叠含有一些小折叠含有一些小的、包装紧密的氨基酸侧链,所以比羊毛中的的、包装紧密的氨基酸侧链,所以比羊毛中的-螺旋更稳定,螺旋更稳定,水洗和干燥其构象基本不变。水
16、洗和干燥其构象基本不变。l答:每秒钟大约需合成43个肽键。(要考虑到-螺旋的每一圈含有3.6个氨基酸残基,螺距为0.54nm)。l答:(a)由可离子化侧链的氨基酸残基构成的-螺旋对pH值的变化非常敏感,因为溶液的pH值决定了侧链是否带有电荷,由单一一种氨基酸构成的聚合物只有当侧链不带电荷时才能形成-螺旋,相邻残基的侧链上带有同种电荷会产生静电排斥力从而阻止多肽链堆积成-螺旋构象。Glu侧链的pKa约为4.1,当pH值远远低于4.1(大约3左右)时,几乎所有的多聚谷氨酸侧链为不带电荷的状态,多肽链能够形成-螺旋。在pH值为5或更高时,几乎所有的侧链都带负电荷,邻近电荷之间的静电排斥力阻止螺旋的形
17、成,因此使同聚物呈现出一种伸展的构象。(b)Lys侧链的pK为10.5,当pH值远远高于10.5时,多聚赖氨酸大多数侧链为不带电荷的状态,该多肽可能形成一种-螺旋构象,在较低的pH值时带有许多正电荷的分子可能会呈现出一种伸展的构象。l答:该片段中含有50圈螺旋,其轴长为27nm。ll 答:二氧化碳与水的反应说明了为什么当CO2的浓度增加时,同时会引起pH值下降,迅速进行新陈代谢的组织所产生的CO2/SUB与水反应生成了碳酸根离子和H。(a)该反应生成的H降低了血液的pH值,从而稳定了血红蛋白的脱氧形式(T构象),净结果是P50的增加,即血红蛋白对氧的亲和力降低,于是更多的氧气被释放到组织中。C
18、O2也可以通过与四条链的N端形成氨甲酸加合物降低血红蛋白对氧气的亲和力、该加合物使脱氧构象(T)保持稳定,因而进一步增加了P50,并且促进了氧气向组织中的释放。(b)休克病人组织中严重缺乏氧气供应,碳酸盐静脉给药为组织提供了一种CO2的来源,通过降低血红蛋白对氧气的亲和力,CO2促使氧合血红蛋白向组织中释放氧气l 答:4个亚基。l:(a)当氧分压为4kPa时,HbA只有33的氧饱和度,而HbF为58,表明HbF比HbA对氧的亲和性更高。(b)HbF对氧的高亲和性可确保氧可以由母体血液流向胎盘中的胎儿血液。(c)当结合BPG时,与HbF相比,HbA氧饱和曲线发生了更大的漂移,表明HbA结合BPG
19、比HbF结合BPG更紧密,而结合BPG就减少了对氧亲和性。答:对肌红蛋白氧亲和性的影响:(a)没有影响(b)没有影响(c)没有影响对血红蛋白氧亲和性的影响:(a)降低(b)增加(c)降低1、比较蛋白质螺旋中的氢键和DNA双螺旋中的氢键,并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。(答案)l2、一段双链DNA包含1000个碱基,其组成中G+C占58%,那么在DNA的该区域中胸腺嘧啶残基有多少?(答案)l第二章第二章 核酸核酸l3、双螺旋DNA一条链的碱基序列为(5)GCGCAATATTTCTCAAAATATTGCGC-3,写出它的互补链。该DNA片段中含有什么特殊类型的序列?该双链DNA有能力形成另外一
20、种结构吗?(答案)l4、用适当的碱基取代下面序列中的X,给出一个完整的反向重复结构。(答案)5GATCATXXXXXX 33XXXXXXXXXXXX 5l5、两个DNA分子,其长度相等,碱基组成不同,一个含有20%(A+T),另一个含有60%(A+T),哪个分子的Tm较高?(答案)l6、有二个DNA样品,分别来自两种未确认的细菌,两种DNA样品中的腺嘌呤碱基含量分别占它们DNA总碱基的32和17。这两个DNA样品的腺嘌呤,鸟嘌呤,胞嘧啶和胸腺嘧啶的相对比例是多少?其中哪一种DNA是取自温泉(64)环境下的细菌,哪一种DNA是取自嗜热菌?答案的依据是什么?(答案)l7、溶液A中含有浓度为1M的2
21、0个碱基对的DNA分子,溶液B中含有0.05M的400个碱基对的DNA分子,所以每种溶液含有的总的核苷酸残基数相等。假设DNA分子都有相同的碱基组成。(答案)(a)当两种溶液的温度都缓慢上升时,哪个溶液首先得到完全变性的DNA?(b)哪个溶液复性的速度更快些?l8、一DNA样品,为线性的双螺旋。取部分样品涂布在栅板上,温度维持在20用电子显微镜观察;另取部分样品进行同样的操作,只是温度为60,30分钟后,用电子显微镜观察。发现线性的双螺旋中出现了一些眼形(也称之形)结构,请解释此现象?这种现象能提供什么有用的信息?(答案)l9、两条长度、浓度都相同的单链DNA探针加入到从人细胞系中提取的DNA
22、片段混合组分中。一个探针与核糖体RNA的某个区域互补,另一个与球蛋白mRNA的某个区域互补。加热混合物使DNA片段变性,然后再冷却。为什么核糖体RNA探针形成双链(答案)l10、如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA含有6.4109对核苷酸,试计算人体DNA 的总长度为多少千米?这个长度相当于地球与太阳之间距离(2.2109千米)的多少倍?l(答案)l答:2.21011千米;100倍返回l 答:在-螺旋中,一个残基上的羧基氧与旋转一圈后的(该残基后面)第四个残基上的-氨基中的氮形成氢键,这些在肽链骨架内原子间形成的氢键大致平行于该螺旋的轴,氨基酸侧链伸向骨架外,不参与螺旋内的氢键形成。在
23、双链DNA中糖-磷酸骨架不形成氢键,相反在相对的两条链中互补的碱基之间形成2个或3个氢键,氢键大致垂直于螺旋轴。在-螺旋中,单独的氢键是很弱的,但是这些键的合力稳定了该螺旋结构。尤其是在一个蛋白质的疏水内部,这里水不与氢竞争成键。在DNA中形成氢键的主要作用是使每一条链能作为另一条链的模板,尽管互补碱基之间的氢键帮助稳定螺旋结构,但在疏水内部碱基对之间的堆积对螺旋结构的稳定性的供献更大。返回l答:如果58%的残基是G+C,42%的残基必定为A+T。因为每一个A与相对链上的一个T相配,A残基的数量与T残基的数量相等,因而21%或420个残基为T(20000.21=420)。ll 答:(5)GCG
24、CAATATTTTGAGAAATATTGCGC-3,含有回文序列;单链内可形成发卡结构;双链可形成十字结构。l答:5GATCATATGATC 33CTAGTATACTAG 5ll答:含有20%(A+T)的DNA分子具有更高的Tm。因为它含有80%(G+C)。因为G-C碱基对之间存在3个氢键,所以使富含G/C的DNA变性需要更多的能量。ll 答:一个DNA含量为32A、32T、18G和18C,另一个为17A、17T、33G和33C,均为双链DNA。前一种取自温泉的细菌,后一种取自嗜热菌,因为其GC含量高,变性温度高因而在高温下更稳定。l答:(a)溶液A中的DNA将首先被完全变性,因为在20个碱基
25、对螺旋中的堆积作用力比在400个碱基对螺旋中的力小很多,在DNA双链的末端的DNA的碱基对只是部分堆积。在片段短的分子中这种末端效应更大。(b)在溶液A中复性的速率更大。成核作用(第一个碱基对的形成)是一个限速步骤,单链分子的数目越大,重新形成碱基对的机率就越大,因而在溶液A中的DNA(含有2M单链DNA)将比溶液B中的DNA(含有0.1M单链DNA)更快地复性。l 答:眼形结构是由于双螺旋DNA局部片段解旋形成的。这些片段富含AT碱基对,AT比GC的热稳定性差。用这种方法可以检测DNA双螺旋链中碱基组成上的差别。ll答:因为核糖体RNA基因是多拷贝的。在人体内的任一个细胞中,核糖体RNA基因
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