食品安全快速检测技术及其进展课件.ppt

1、食品安全快速检测技术及其进展食品安全快速检测技术及其进展n检测技术是保障食品质量安全的重要技术支撑。检测技术是保障食品质量安全的重要技术支撑。n快速检测技术在鲜活农产品现场监测、市场准入、快速检测技术在鲜活农产品现场监测、市场准入、进出口岸贸易、快速筛查等工作中发挥着越来越进出口岸贸易、快速筛查等工作中发挥着越来越 重要的作用。重要的作用。检测速度快，灵敏度高；检测速度快，灵敏度高；特异性、高通量；特异性、高通量；前处理简单，成本低；前处理简单，成本低；快速检测技术特点快速检测技术特点设备小型化，便携。设备小型化，便携。样品前处理样品前处理残留分析的两大基本主题残留分析的两大基本主题 检测检测

2、 传统样品前处理技术：传统样品前处理技术：索氏提取、液液分配、柱层析等。索氏提取、液液分配、柱层析等。现代样品前处理技术：现代样品前处理技术：固相萃取技术固相萃取技术(SPE)(SPE)固相微萃取技术固相微萃取技术SPMESPME）基体分散固相萃取（基体分散固相萃取（MSPDMSPD）分子印迹技术（分子印迹技术（MIPMIP）免疫亲和色谱免疫亲和色谱(IAC)(IAC)凝胶层析凝胶层析(GPC)(GPC)加速溶剂提取（加速溶剂提取（ASEASE）超临界流体萃取技术超临界流体萃取技术(SFE)(SFE)微波辅助萃取微波辅助萃取 MAEMAE）快速检测技术快速检测技术化学分析技术化学分析技术v 化

3、学检测试剂盒（试纸、卡）化学检测试剂盒（试纸、卡）v 电化学传感器电化学传感器生物分析技术生物分析技术v免疫学方法免疫学方法v分子生物学技术分子生物学技术v生物传感器技术生物传感器技术v生物芯片生物芯片遵从的标准和方法遵从的标准和方法放射免疫测定法放射免疫测定法/酶免疫法酶免疫法色谱联用分析色谱联用分析放射受体分析放射受体分析气相色谱（气相色谱（ECD/NPDECD/NPD）气相色谱（气相色谱（FIDFID）1 pg/g1 ng/g1 ug/g1 mg/g高效液相色谱高效液相色谱 (FLD/UVD)(FLD/UVD)极谱法极谱法荧光分光光度法荧光分光光度法微生物测定法微生物测定法紫外紫外/可见

4、分光光度可见分光光度比色法比色法各种方法检测范围比较各种方法检测范围比较 快速测定的生物分析方法快速测定的生物分析方法v 免疫学方法免疫学方法v 分子生物技术分子生物技术v 生物传感器技术生物传感器技术v 生物芯片生物芯片方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比化学检测技术化学检测技术 有机磷有机磷灵敏度低灵敏度低酶抑制检测技术酶抑制检测技术 有机磷和氨基甲酸酯有机磷和氨基甲酸酯 国国内内假阳性、假阴性率高，二十余家生产厂商，多种速测假阳性、假阴性率高，二十余家生产厂商，多种速测卡、速测仪，卡、速测仪，GB/T 5009.199-2003GB/T 5009.199-2003；NY/T 44

5、8-2001 NY/T 448-2001 国国外外测定样品和农药种类有限，欧美作为普查农药残留和测定样品和农药种类有限，欧美作为普查农药残留和田间实地检测的基本手段田间实地检测的基本手段 ；AOAC AOAC 官方方法官方方法 964.17964.17免疫分析法免疫分析法 有机磷类、氨基甲酸有机磷类、氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、有机氯类、三酯类、有机氯类、三嗪类、拟除虫菊酯类嗪类、拟除虫菊酯类和酰胺类等几十种农和酰胺类等几十种农药药 国国内内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品 国国外外技术成熟，灵敏度高，技术成熟，灵敏度高，F

6、AOFAO推荐方法，美国推荐方法，美国USDA USDA、EPAEPA、AOACAOAC制定了评定标准，但经认证的有限，经制定了评定标准，但经认证的有限，经EPAEPA认证的认证的免疫试剂盒约有免疫试剂盒约有4 4个厂家的个厂家的2626种试剂盒：种试剂盒：EPAEPA方法方法40104010、EPAEPA方法方法4015 EPA4015 EPA方法方法4040 4040 等等生物传感器生物传感器有机磷、氨基甲酸酯有机磷、氨基甲酸酯国国内内处于研究阶段处于研究阶段国国外外电导型生物传感器电导型生物传感器 、光寻址电位型传感器、光寻址电位型传感器 、安培型、安培型传感器传感器 ，处于研究和应用阶

7、段，并未广泛推广使用，处于研究和应用阶段，并未广泛推广使用农药快速检测技术农药快速检测技术方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比免免疫疫分分析析法法 ELISAELISA方法方法兽药的单残兽药的单残留检测留检测国内国内盐酸克仑特罗、磺胺二甲嘧啶试剂盒、试纸等盐酸克仑特罗、磺胺二甲嘧啶试剂盒、试纸等2020余种产品，假阳余种产品，假阳性率高，市场占有率大约性率高，市场占有率大约50%50%左右左右 兽药的单残兽药的单残留检测、多留检测、多残留检测残留检测 国外国外广泛应用，意大利广泛应用，意大利TecnaTecna公司、美国公司、美国IdexxIdexx公司、英国公司、英国RandoxRa

8、ndox公司、公司、LaboratoriesLaboratories公司和德国公司和德国R-BiophanmR-Biophanm公司等均有产品，公司等均有产品，20012001年国年国家质检总局推荐家质检总局推荐RandoxRandox公司的公司的ELISAELISA试剂盒作为动物激素和抗生试剂盒作为动物激素和抗生素残留的首选筛查方法，素残留的首选筛查方法，AOACAOAC的官方网站上登记有的官方网站上登记有1515个厂家的个厂家的100100多种商品试剂盒，经多种商品试剂盒，经FDAFDA认证或认证或AOACAOAC确证的试剂盒占确证的试剂盒占5050多种多种 放射免放射免疫方法疫方法检测同

9、一类检测同一类抗生素抗生素国内国内DB33/T 473-2004DB33/T 473-2004：放射免疫快速检测：放射免疫快速检测-内酰胺类、磺胺类和氨内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类链霉素型药物残留量基糖苷类链霉素型药物残留量检测同一类检测同一类抗生素抗生素国外国外美国美国CHARM ScienceCHARM Science公司公司Charm6600/7600Charm6600/7600抗生素快速检测系统，抗生素快速检测系统，可测可测-内酰胺类、氯霉素类、四环素类、磺氨类、邻氯青霉素内酰胺类、氯霉素类、四环素类、磺氨类、邻氯青霉素等，等，FDAFDA认可认可胶体金胶体金试纸条试纸条少数兽药少数兽

10、药国内国内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品 国外国外灵敏度比灵敏度比ELISAELISA试剂盒低试剂盒低5 51010倍，特异性差，仅适合残留限量要倍，特异性差，仅适合残留限量要求不高的少数兽药的粗筛求不高的少数兽药的粗筛 蛋白蛋白芯片芯片多残留兽药多残留兽药的检测的检测国内国内有微阵列芯片产品，但因价格相对较高，未推广使用有微阵列芯片产品，但因价格相对较高，未推广使用国外国外有多种商品化芯片，但灵敏度需进一步提高有多种商品化芯片，但灵敏度需进一步提高兽药快速检测技术兽药快速检测技术方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比生物化学生物化学快速

11、检测快速检测大肠菌群大肠菌群国国内内鲜乳中菌落总数快速测定鲜乳中菌落总数快速测定 （SN/T 1749-2006SN/T 1749-2006）；畜禽产品大肠菌群）；畜禽产品大肠菌群快速测定技术规范（快速测定技术规范（NY/T 824-2004NY/T 824-2004）；大肠菌群的快速检测（）；大肠菌群的快速检测（GB/T GB/T 4789.32-20024789.32-2002）肠杆菌科肠杆菌科,李斯特菌李斯特菌,葡萄状球菌葡萄状球菌国国外外基于生物化学原理开发的商品化的试剂盒和自动化系统，基于生物化学原理开发的商品化的试剂盒和自动化系统，FDAFDA细菌细菌分析手册分析手册列出了列出了1

12、717个厂家的分析系统，基于生物化学、脂肪酸、核个厂家的分析系统，基于生物化学、脂肪酸、核酸等进行检测酸等进行检测 免疫免疫分析法分析法（ELISAELISA、侧流式侧流式技术）技术）单一微生物、单一微生物、多种微生物多种微生物国国内内大肠菌群大肠菌群ELTSEELTSE快速检验方法（快速检验方法（WS/T 116-1999WS/T 116-1999）。）。国国外外自动自动ELISAELISA系统官方认可，但交叉反应导致的假阳性率高系统官方认可，但交叉反应导致的假阳性率高 ，美国，美国BiocontrolBiocontrol系统、瑞士系统、瑞士DiffchambDiffchamb系统和美国系统

13、和美国DetexDetex系统是系统是ELISAELISA主流主流产品，美国的产品，美国的RealReal系统、系统、VIPVIP系统是侧流式技术的典型代表，在官方系统是侧流式技术的典型代表，在官方网站上查到网站上查到7070多个厂家生产的多个厂家生产的8 8种微生物的种微生物的8484个检测产品，其中包括个检测产品，其中包括1212个个AOACAOAC方法方法DNADNA分析法分析法 单一微生物单一微生物国国内内大多是模仿国外先进技术，且在试制阶段，各质检监督部门所用快速大多是模仿国外先进技术，且在试制阶段，各质检监督部门所用快速检测方法大多为国外技术和设备，已开发出食源性致病菌实时荧光检测

14、方法大多为国外技术和设备，已开发出食源性致病菌实时荧光PCRPCR检测试剂、猪链球菌检测试剂、猪链球菌2 2型多重型多重PCRPCR检测试剂等检测试剂等国国外外FDAFDA细菌分析手册细菌分析手册列出的基于列出的基于DNADNA技术（技术（PCRPCR、探针）的商品化检、探针）的商品化检测法有测法有4 4个厂家建立的个厂家建立的7 7种微生物的种微生物的1616种方法，种方法，8 848h48h可得准确结果、可得准确结果、比培养方法快速，比免疫分析方法灵敏；但操作较繁锁，检测费用较比培养方法快速，比免疫分析方法灵敏；但操作较繁锁，检测费用较高，且未经验证认可高，且未经验证认可微生物快速检测技术

15、微生物快速检测技术方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比免疫分析法：免疫分析法：侧流式免疫吸附侧流式免疫吸附法（胶体金法）、法（胶体金法）、ELISAELISA黄曲霉毒素、黄曲霉毒素、脱 氧 雪 腐 镰脱 氧 雪 腐 镰刀 菌 烯 醇刀 菌 烯 醇（呕 吐 毒（呕 吐 毒素）、伏 马素）、伏 马菌 素、玉 米菌 素、玉 米赤 霉 烯 酮、赤 霉 烯 酮、T-2T-2毒素等毒素等国国内内一步式黄曲霉毒素快速检测试纸、检测试剂盒，玉米一步式黄曲霉毒素快速检测试纸、检测试剂盒，玉米赤酶烯酮检测试剂盒、赭曲酶素赤酶烯酮检测试剂盒、赭曲酶素A A检测试剂盒、伏马菌检测试剂盒、伏马菌素素B1B1检测

16、试剂盒、河豚毒素检测试剂盒、检测试剂盒、河豚毒素检测试剂盒、T2T2毒素检测毒素检测试剂盒等，我国部分质检部门检测黄曲霉毒素使用美试剂盒等，我国部分质检部门检测黄曲霉毒素使用美国国CHARMCHARM公司生产的公司生产的Charm II 7600Charm II 7600系统及系统及ROSAROSA抗生素抗生素快速检测仪快速检测仪国国外外ELISAELISA是主流技术，美国是主流技术，美国USDAUSDA要求在官方检查中使用经要求在官方检查中使用经认证的快速检测方法，测定谷物中的黄曲霉毒素、脱认证的快速检测方法，测定谷物中的黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）、伏马菌素、玉米赤氧雪腐镰刀

17、菌烯醇（呕吐毒素）、伏马菌素、玉米赤霉烯酮等，目前霉烯酮等，目前USDAUSDA已认可已认可1010种黄曲霉毒素种黄曲霉毒素ELISAELISA试剂试剂盒，检测下限盒，检测下限5ppb5ppb；1212种呕吐毒素试剂盒，灵敏度在种呕吐毒素试剂盒，灵敏度在0.25-5ppm0.25-5ppm范围内，其他经范围内，其他经AOACAOAC认证或确证的毒素检测认证或确证的毒素检测试剂盒有玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和试剂盒有玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和T-2T-2毒素毒素 毒素快速检测技术毒素快速检测技术重金属快速检测技术 方法方法检测对象检测对象国内外对比国内外对比酶抑制检测技术酶抑制检测技术 砷、铅、汞

18、、砷、铅、汞、镉等镉等国内国内研究阶段，还没有经过认证的快速检测方法研究阶段，还没有经过认证的快速检测方法 国外国外脲酶抑制法，限于饮用水中汞的测定脲酶抑制法，限于饮用水中汞的测定 免疫分析法免疫分析法 国内国内研究阶段，未有真正推广使用的商品化产品研究阶段，未有真正推广使用的商品化产品 国外国外成功用于液体样品中的铟成功用于液体样品中的铟()()、汞、汞()()、镉、镉()()、铅铅()()和铀和铀()()等的检测，固体样品重金属提取方法等的检测，固体样品重金属提取方法需进一步研究需进一步研究 化学或传感器检测化学或传感器检测国内国内重金属快速测定仪，检汞管速测盒和检砷管速测盒重金属快速测定

19、仪，检汞管速测盒和检砷管速测盒 国外国外电化学传感器：阳极溶出伏安仪，检测时间电化学传感器：阳极溶出伏安仪，检测时间5min5min，电，电极为一次性使用，检出限达极为一次性使用，检出限达ngng级；生物传感器：基于级；生物传感器：基于脲酶抑制法测汞脲酶抑制法测汞重金属快速检测技术重金属快速检测技术显色前显色前 显色后显色后快速检测技术和试剂快速检测技术和试剂 我国的成就我国的成就快速检测仪器和设备快速检测仪器和设备 我国的成就我国的成就 农药残留快速检测技术农药残留快速检测技术u 问题：酶抑制技术虽然价廉（分析一个样品问题：酶抑制技术虽然价廉（分析一个样品平均需平均需1.51.5元左右元左右

20、 ），但假阳性率高，且检），但假阳性率高，且检测对象受限等。测对象受限等。u 建议：除解决建议：除解决“关键酶关键酶”问题，重点发展具问题，重点发展具有有“类特异性类特异性”的免疫分析技术，这也是国的免疫分析技术，这也是国外目前发展的主流技术。外目前发展的主流技术。存在的问题及建存在的问题及建议议n 问题：兽药残留快速检测问题：兽药残留快速检测50%50%以上依赖进口仪器和试以上依赖进口仪器和试剂盒（卡），价格较高，如莱克多巴胺检测试剂盒剂盒（卡），价格较高，如莱克多巴胺检测试剂盒32003200元元/96/96次，而国产试剂盒因价格与国外进口产品次，而国产试剂盒因价格与国外进口产品差距不大（

21、是进口产品价格的差距不大（是进口产品价格的80%80%左右），推广受到左右），推广受到限制。限制。n 建议：重点发展建议：重点发展“类类”兽药残留免疫检测试剂盒和兽药残留免疫检测试剂盒和生物芯片，扩大检测靶标物的范围。如国产快速检生物芯片，扩大检测靶标物的范围。如国产快速检测试剂盒市场占有率增加，价格将会有所下降测试剂盒市场占有率增加，价格将会有所下降。存在的问题及建存在的问题及建议议 兽药残留快速检测技术兽药残留快速检测技术 存在的问题及建存在的问题及建议议微生物快速检测技术微生物快速检测技术 我国致病微生物快速检测的主流技术为国外技术和我国致病微生物快速检测的主流技术为国外技术和产品。产品

22、。建议：重点发展免疫分析技术、建议：重点发展免疫分析技术、PCRPCR技术、技术、DNADNA探针探针检测技术。检测技术。毒素快速检测技术毒素快速检测技术 关于毒素的快速检测技术在国内应用较少，由无锡关于毒素的快速检测技术在国内应用较少，由无锡微生物研究所生产的黄曲霉毒素微生物研究所生产的黄曲霉毒素M1M1检测试剂盒（检测试剂盒（800800元元/24/24孔）和黄曲霉毒素孔）和黄曲霉毒素B1B1检测试剂盒（检测试剂盒（400400元元/24/24孔）有一孔）有一定应用；而玉米赤酶烯酮检测试剂盒、呕吐毒素检测试定应用；而玉米赤酶烯酮检测试剂盒、呕吐毒素检测试剂盒等（剂盒等（40004000元元

23、/96/96孔左右）均为进口产品。孔左右）均为进口产品。建议：发展重要毒素的免疫分析技术。建议：发展重要毒素的免疫分析技术。检测速度要求越来越快检测速度要求越来越快检测方法的灵敏度要求越来越高检测方法的灵敏度要求越来越高检测方法的类特异性要求越来越高检测方法的类特异性要求越来越高多种污染物同时分析多种污染物同时分析检测方法的操作更简便、易操作检测方法的操作更简便、易操作检测方法的检测方法的“无试剂化无试剂化”、仪器的微型化和便携化、仪器的微型化和便携化 结语结语 针对我国农产品质量安全快速检测技术现针对我国农产品质量安全快速检测技术现状，根据我国国情和已有研究基础，整和各方状，根据我国国情和已有研究基础，整和各方研究力量，重点突破农药、兽药、致病微生物、研究力量，重点突破农药、兽药、致病微生物、毒素等的快速检测，实现稳定、特异、灵敏、毒素等的快速检测，实现稳定、特异、灵敏、快速、低成本检测目标，方便市场流通领域的快速、低成本检测目标，方便市场流通领域的各种检测和鉴定需求。各种检测和鉴定需求。