食品理化检验技术二-子情境五课件.ppt

1、“十二五”职业教育国家规划教材编写组 食品理化检验技术（第二版）子情境五 碳水化合物的测定学习情境二学习情境二 学习目标知识目标：1.了解碳水化合物的概念、分类、性质及在食品中的存在形式。2.掌握还原糖、蔗糖、总糖的测定原理、方法及适用范围。3.了解淀粉、粗纤维等的测定方法。技能目标：1.会用直接滴定法和高锰酸钾法测定食品中的还原糖。2.能进行酸水解、酶水解等基本操作。3.会使用“相当于氧化亚铜质量的葡萄糖、果糖、乳糖、转化糖的质量表”。子情境五 碳水化合物的测定 碳水化合物统称为糖类，是由碳、氢、氧三种元素组成的一大类化合物。碳水化合物糖寡糖多糖单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖、阿拉伯糖、木

2、糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖等糖醇：木糖醇、甘露糖醇、山梨醇等又称低聚糖，由3-9个单糖通过糖苷键连接而成的，包括：异麦芽糖低聚糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖是由许多单糖缩合而成的高分子化合物，如：淀粉、纤维素、果胶、黄原胶等糖类最基本的组成单位 一、碳水化合物的种类学习情境二学习情境二 二、食品中糖类物质测定的意义 脂类的概念脂类的概念学习情境二学习情境二 食品中糖类测定是食品的主要分析项目之一，在食品工业中具有十分重要的意义。1、食品加工中常需要控制一定量的糖酸比2、糖果中糖的组成及比例直接关系到其风味和质量3、糖的焦糖化作用及羰氨反应既可使食品获得诱人的色泽和风味，又能引起食品的褐变，

3、必须根据工艺需要加以控制4、食品中糖类含量也在一定程度上标志着营养价值的高低，是某些食品的主要质量指标 典型食品糖类含量国家标准国标品名糖含量GB/T 23968-2009肉松总糖含量（以蔗糖计）35g/100gGB/T 23493-2009中式香肠总糖（以葡萄糖计）22g/100gGB 18623-2002镇江香醋（4.5%，5.0%，5.5%，6.0%）还原糖（以葡萄糖计）2.00，2.20，2.30，2.50 g/100mLGB/T 14963-2011蜂蜜葡萄糖和果糖60 g/100g；蔗糖10g/100g（野桂花蜜），10g/100g（其他蜂蜜）GB/T 13662-2008 黄酒总

4、糖含量15.0g/L（干黄酒），15.1g/L40.0 g/L（半干黄酒），40.1 g/L100 g/L（半甜黄酒），100 g/L（甜黄酒）GB/T 21730-2008浓缩橙汁蔗糖（复原后）50g/kg学习情境二学习情境二 什么是还原糖？具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离半缩醛羟基的双糖都具有还原性。还原糖的测定方法是一般糖类定量的基础。还原糖：葡萄糖、果糖、乳糖和麦芽糖三、食品中糖类物质的测定方法学习情境二学习情境二 还原性还原性无还原性无还原性学习情境二学习情境二 四、还原糖的测定直接滴定法直接滴定法1高锰酸钾滴定法高锰酸钾滴定法2GB/T 5009

5、.7-2008学习情境二学习情境二 检测依据试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(费林试剂)（用还原糖标准溶液标定），根据样品消耗的体积计算还原糖含量。测定原理直接滴定法GB/T 5009.7-2008 第一法学习情境二学习情境二 适合于各类食品中还原糖的快速测定。但是测定酱油、深色果汁等样品时，因色素干扰，滴定终点常常模糊不清。适用范围 将一定量的费林试剂甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀 这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反

6、应，生成红色的氧化亚铜沉淀 继续滴定，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点 根据样液的消耗量可以算出还原糖的含量。滴定过程中颜色的变化 蓝色 紫红色 无色学习情境二学习情境二 蓝色蓝色无色无色这个过程发生了什么？这个过程发生了什么？次甲基蓝也是一种氧化剂，但在测定条件下氧化能力比铜离子弱，故还原糖先与铜离子反应，铜离子完全反应后，稍过量的还原糖与次甲基蓝指示剂反应，使之由蓝色变为无色，指示终点。学习情境二学习情境二 试剂：费林试剂甲液：(15.00g无水硫酸铜+0.05g次甲基蓝1000mL)费林试剂乙液：(50.00g酒石酸钾钠+75.00g氢

7、氧化钠溶解后+4g亚铁氰化钾1000mL)乙酸锌溶液亚铁氰化钾溶液1mg/mL葡萄糖标准溶液注：1、费林试剂甲液和乙液要分别贮存，用时才能混合原因：酒石酸铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。2、在费林试剂乙液中加入亚铁氰化钾，可以使所生成的氧化亚铜的红色沉淀与之形成可溶性的无色络合物，使终点便于观察。澄清剂 一、仪器及试剂的准备学习情境二学习情境二 1mg/mL葡萄糖标准溶液的配制精确称取1.0000g经过98100干燥2h至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后移入到1000mL的容量瓶中，加入5ml盐酸(防止微生物生长)，用水稀释到1000mL。（此溶液葡萄糖浓度相

8、当于1.0mg/mL）学习情境二学习情境二 仪器：25mL的酸式滴定管、可调电炉、150mL锥形瓶4个、10mL量筒、5mL移液管2根、250mL容量瓶1个、250mL锥形瓶2个、漏斗2个、50mL烧杯1个学习情境二学习情境二 样品预处理共分两大步骤：提取样品液澄清样品液一般食品：称取粉碎后的固体试样2.5g5g或混匀后的液体试样5g25g，精确至0.001g，置250mL容量瓶中，加50mL水，慢慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液备用。酒精性饮料：称取约100g混匀后的试样，精确至0.01g，置于蒸发皿中，用氢

9、氧化钠（40g/L）溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移入250mL容量瓶中，以下按自“慢慢加入5mL乙酸锌溶液”起依法操作。含大量淀粉的食品：称取10g20g粉碎后或混匀后的试样，精确至0.001g，置250mL容量瓶中，加200mL水，在45水浴中加热1h，并时时振摇。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200mL上清液置另一250mL容量瓶中，以下按自“慢慢加入5mL乙酸锌溶液”起依法操作。碳酸类饮料：称取约100g混匀后的试样，精确至0.01g，试样置蒸发皿中，在水浴上微热搅拌除去二氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀

10、后备用。二、试样处理学习情境二学习情境二 澄清剂 适用范围及作用 优缺点中性醋酸铅 植物性的萃取液，它可除去蛋白质、丹宁、有机酸、果胶。脱色力差，不能用于深色糖液的澄清，否则加活性炭处理。且铅盐有毒，使用时需注意。醋酸锌和亚铁氰化钾 常用于沉淀蛋白质，对乳制品最理想。主要是生成的亚铁氰酸锌（白色沉淀）与蛋白质共同沉淀。CuSO4-NaOH 用于牛乳等样品。碱性醋酸铅 适用深色的蔗糖溶液，可除色素，有机酸，蛋白质，胶体物质缺点：沉淀颗粒大，可带走果糖。活性炭 能除去植物样品中的色素，适用于颜色较深的糖液。吸附糖类造成糖（蔗糖损失大68%）的损失。澄清n方法：提取液中加入一定量澄清剂混匀静置过滤，

11、得待测液学习情境二学习情境二 澄清剂的用量用量必须适当：太少，达不到澄清的目的。太多，会使分析结果产生误差。中性醋酸铅先加13mL饱和醋酸铅溶液（30%），静置15分钟，向上清液中加入几滴中性醋酸铅溶液，如有沉淀就重复，无，则沉淀完全。乙酸锌和亚铁氰化钾溶液5075mL样液加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5mL。硫酸铜和氢氧化钠溶液5075mL样液加入10mL硫酸铜溶液和4mL氢氧化钠溶液。学习情境二学习情境二 直接滴定法选用乙酸锌和亚铁氰化钾作为澄清剂，各5mL注意：乙酸锌和亚铁氰化钾混合形成白色的氰亚铁酸锌沉淀，能使溶液中的蛋白质等共同沉淀下来。采用中性醋酸铅做澄清剂时，澄清后的样液中残留

12、有铅离子，在测定过程中加热样液时，铅能与还原糖（特别是果糖）结合生成铅糖化合物，结果使测得的还原糖含量偏低。因此必须除铅。常用的除铅剂有草酸钠、草酸钾、硫酸钠、磷酸钠、磷酸氢二纳等。本法是根据一定量的碱性酒石酸铜溶液（铜离子量一定）消耗的样液量来计算样液中还原糖含量，反应体系中铜离子的含量是定量的基础，所以样品在处理时，不能用铜盐（硫酸铜氢氧化钠）作为澄清剂。学习情境二学习情境二 1、碱性酒石酸铜溶液的标定 2、样品溶液的预测定 3、样品溶液测定 三、样品还原糖含量测定 学习情境二学习情境二 学习情境二学习情境二 1、碱性酒石酸铜溶液的标定学习情境二学习情境二 计算每10mL（甲、乙各5mL）

13、费林试剂相当于葡萄糖的质量m1（mg）m1=Vcm1：每10mL费林试剂相当于葡萄糖的质量，mgc葡萄糖标准溶液的浓度，mg/mL；V标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。注为了提高准确度，要求用哪种还原糖表示结果就用相应的还原糖标定碱性酒石酸铜溶液。学习情境二学习情境二 准确吸取费林试剂甲液和乙液各5mL150mL锥形瓶加水10mL玻璃珠3粒加热使其在2分钟内沸腾趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液（注：需要始终保持溶液的沸腾状态）待溶液蓝色变浅时，趁热以每1d/2s的速度滴定直至溶液蓝色刚好褪去为终点记录消耗体积V12.样品溶液的预滴定学习情境二学习情境二 3.样品溶液测定吸取费林试

14、剂甲液和乙液各5.00mL3个150mL锥形瓶中加水10mL加玻璃珠3粒从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积V1少1mL的样品溶液加热使其在2分钟内沸腾沸腾30s趁热以每1d/2s的速度继续滴加样液直至蓝色刚好褪去为终点记录消耗样品溶液的体积V2同法平行操作3份，取平均值。学习情境二学习情境二 四、结果记录并分析处理 计算公式：还原糖（以葡萄糖计）X=式中：X 试样中还原糖含量，g/100g；m样品质量，g；m110mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg；V测定时平均消耗样品溶液的体积，mL；250样品的总体积，mL。有效数字：试样中还原糖含量10 g/100 g 时，保留三位有效数

15、字；试样中还原糖含量10 g/100 g 时，保留二位有效数字。精密度：在重复性条件下的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值10%10010002501Vmm学习情境二学习情境二 注：样液中还原糖浓度过高时，适当稀释再进行正式测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约10mL左右。当浓度过低时则采取直接加入10mL样品液，免去加水10mL，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积，与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差，再乘以标准溶液的浓度，就相当于10mL样液中所含还原糖的量m2。（公式中V=10mL,m1改为m2)学习情境二学

16、习情境二 本方法所用的氧化剂碱性酒石酸铜的氧化能力较强，醛糖和酮糖都能被氧化，所以测得的是总还原糖量。试样处理过程中加入醋酸锌及亚铁氰化钾作为蛋白质沉淀剂，这两种试剂混合形成白色的氰亚铁酸锌沉淀，能使溶液中的蛋白质共同沉淀下来，主要用于乳制品及富含蛋白质的浅色糖液，其澄清效果较好。样品稀释液中还原糖浓度不宜过高或过低，需根据预测实验加以调节，最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度（即约为0.1%为宜）。在碱性酒石酸铜乙液中加入亚铁氰化钾的目的是使之与Cu2O生成可溶性的无色配合物，不再析出红色沉淀，消除沉淀对观察滴定终点的干扰，使终点更为明显。配制葡萄糖标准溶液时，加盐酸的目的是防腐。碱性酒石酸铜

17、甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上拿下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。为了提高测定的准确度，用哪种还原糖表示结果就用相应的还原糖标定碱性酒石酸铜溶液，如用葡萄糖表示结果就用葡萄糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。技术提示学习情境二学习情境二 滴定必须在沸腾条件下进行原因一是可以加快还原糖与铜离子的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。三是氧化亚铜极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入。样品的预测目

18、的一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求（1mg/mL左右），测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可调节样品中还原糖浓度，使预测时消耗样液量在10mL左右。二是通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少1mL左右的样液，只留下1mL左右样液在续滴定时加入，以保证在1分钟内完成续滴定工作，提高测定的准确度。学习情境二学习情境二 准确称量2g牛乳样品，用水稀释后移至100mL的容量瓶中，加水置刻度。准确称取两份费林试剂甲、乙液各10mL放入锥形瓶中。一份用标准的1g/L的葡萄糖溶液滴定，消耗标准溶液20mL，一份用样液进行滴定，消耗样

19、液19.5mL，求样品中还原糖的含量（以葡萄糖计）？例题讲解学习情境二学习情境二 高锰酸钾滴定法GB/T 5009.7-2008 第二法学习情境二学习情境二 适用范围试样经除去蛋白质后，其中还原糖把铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，而三价铁盐则被定量地还原为亚铁盐，以高锰酸钾溶液滴定生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量，计算氧化亚铜含量，再查表得还原糖量。测定原理适用于各类食品中还原糖的测定，有色样液不受限制。优点：准确度和重现性都优于直接滴定法。缺点：操作复杂、费时，需使用特制的高锰酸钾法糖类检索表。此法以测定反应过程中产生的定量的Fe2+为计算依据，因此，在样品处理时，不能

20、用乙酸锌和亚铁氰化钾作为澄清剂，以免引入 Fe+2，并且加入的硫酸铁溶液要稍微过量。测定必须严格按规定的操作条件进行，必须控制好热源强度保证在4min内加热至沸，沸腾时间2min也要准确，否则误差较大。实验时可先取50mL水，加费林试剂甲、乙液各25mL，调整热源强度，使其在4min内加热至沸、维持热源强度不变，再正式测定。此法所用碱性酒石酸铜溶液是过量的，即保证把所有的还原糖全部氧化后，还有过剩的Cu2+存在。所以，煮沸后的反应液应呈蓝色（酒石酸钾钠铜络离子）。如不呈蓝色，说明样液含糖浓度过高，应调整样液浓度，或减少样液取用体积。在过滤及洗涤氧化亚铜沉淀的整个过程中，应使沉淀始终在液面以下，

21、避免氧化亚铜暴露于空气中而被氧化。当样品中的还原糖有双糖（如麦芽糖、乳糖）时，由于这些双糖的分子中仅有一个还原基，测定结果将偏低。还原糖与碱性酒石酸铜的反应过程十分复杂，除上述反应外，还伴随有副反应。此外，不同的还原糖还原能力也不同，反应生成的Cu2O量也不相同。因此，不能根据生成的Cu2O量按反应式直接算出还原糖含量，而需利用经验检索表。技术提示学习情境二学习情境二 五、蔗糖的测定高效液相色谱法高效液相色谱法1酸水解法酸水解法2GB/T 5009.8-2008学习情境二学习情境二 检测依据试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。酸水

22、解法GB/T 5009.8-2008 第二法学习情境二学习情境二 测定原理水解条件要严格控制，因为在此水解条件下，蔗糖可水解而其他糖类水解很少可忽略不计。学习情境二学习情境二 用转化糖标准溶液来标定碱性酒石酸铜溶液（可以减少误差）学习情境二学习情境二 精确称取2.36g炼乳，加少量水溶解转移至250ml容量瓶中，缓慢加澄清剂定容，静置分层。干滤，取滤液放入滴定管中，滴定费林试剂，消耗11.28ml，另取滤液50ml至250ml容量瓶中，加入5ml6mol/l的盐酸，摇匀，置68-70水浴锅中恒温水解15min，冷却，中和，定容至刻度，移入碱式滴定管。滴定费林试剂，消耗13.52ml；计算：炼乳

23、中乳糖及蔗糖的含量。（10ml费林溶液相当于9.83mg的转化糖；相当于13.33mg的乳糖）样品中乳糖含量：12.5%样品中蔗糖含量：27.8%例题讲解学习情境二学习情境二 六、总糖的测定学习情境二学习情境二 总糖:具有还原性的糖(葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等）或在测定条件下能水解成还原性单糖的碳水化合物总量。营养学上是指能被人体消化、吸收利用的糖类物质的总和，包括淀粉。食品分析中的总糖不包括淀粉，因为在测定条件下，淀粉的水解作用很微弱。测定方法以还原糖的测定和蔗糖的测定为基础。直接滴定法学习情境二学习情境二 总糖(以转化糖计,%)=式中：F10ml碱性酒石酸铜溶液相当的转化糖的质量，mg；

24、V1样品处理液总体积，ml；V2测定时消耗样品水解液体积，ml；m样品质量，g。计算学习情境二学习情境二 检测依据酶水解法酶水解法酸水解法酸水解法12 GB/T 5009.9-2008淀粉的总量七、淀粉的测定学习情境二学习情境二 淀粉广泛存在于植物的根、茎、种子等组织中，是人类食物的重要组成部分，也是提供给人体热能的主要来源。淀粉包括直链淀粉和支链淀粉。不同来源的淀粉所含这两种淀粉的比例是不同的。如：粳米：直链淀粉的含量约为16%24%糯米：支链淀粉的含量高达98%100%直链淀粉可与碘生成深蓝色络合物，支链淀粉加入碘后呈现的紫红色。淀粉的基本知识学习情境二学习情境二 淀粉性质水溶性：直链淀粉

25、不溶于冷水，可溶于热水；支链淀粉常压下不溶于水，只有在加热并加压时才能溶解于水。醇溶性：不溶于浓度在30%以上的乙醇溶液。水解性：在酸或酶的作用下可以水解，最终水解产物为葡萄糖。旋光性：淀粉水溶液具有旋光性。注：淀粉不溶于冷水，也不溶于乙醇、乙醚或石油醚等有机溶剂，故可用这些溶剂淋洗、浸泡除去淀粉水溶性糖或脂肪等杂质。学习情境二学习情境二 淀粉测定的意义食品中的淀粉，有的来自原料，有的是生产过程中为了改变食品的物理性状作为添加剂而加入的。如：1、在雪糕、棒冰等冷饮食品中作为稳定剂2、火腿肠中常使用淀粉做增稠剂，增加肉制品的持水性和组织形态。淀粉含量是某些食品中主要的质量指标，是食品生产管理中常

26、做的分析项目。学习情境二学习情境二 1、酶水解法 测定原理 样品经除去脂肪和可溶性糖后，在淀粉酶的作用下，使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精，在用盐酸进一步水解为葡萄糖,然后按还原糖的测定方法测定葡萄糖含量，再换算成淀粉含量。学习情境二学习情境二 适用范围适于含非淀粉多糖较多的样品，利用淀粉酶有严格的专一性，只水解淀粉而不水解其他多糖，过滤后可除去其他多糖。结果准确，操作繁琐、费时，而且酶催化活力的稳定性受PH值和温度的影响很大，使用受到一定限制。说明：脂肪的存在会防碍酶对淀粉的作用及可溶性糖类的除去，故应用乙醚脱脂；若样品中脂肪含量较少，可省略用淀粉酶前，应确定其活力及水解时加入量。用碘液检验学

27、习情境二学习情境二 2、酸水解法样品经乙醚除去脂肪，85%的乙醇除去可溶性糖类之后，用酸水解淀粉成还原性的单糖（葡萄糖），然后按还原糖测定的方法测定葡萄糖含量，再把葡萄糖折算为淀粉含量。换算系数为：0.9淀粉水解反应:(C6H10O5)nnH2OnC6H12O6 根据反应式，淀粉与葡萄糖重量之比为:162:180=0.9:1 即0.9g淀粉水解后生成1g葡萄糖，0.9即淀粉的水解系数。葡萄糖结构式学习情境二学习情境二 测定原理适用范围酸水解法适用于淀粉含量较高，而半纤维素等其他多糖含量较少的样品。对富含半纤维素及果胶质的样品，因为淀粉水解的时候，他们也水解为木糖、阿拉伯糖等还原糖，使测定结果偏

28、高特点：操作简单、应用广泛，但是选择性及准确性不及酶法。学习情境二学习情境二 仪器设备：水浴锅电炉酸式滴定管锥形瓶（3个）碘量瓶（磨口锥形瓶）冷凝管50mL量筒250mL量筒漏斗500mL容量瓶 仪器设备及试剂的准备v试剂：v乙醚、v乙醇（85%）、v6mol/L盐酸、v10及40%氢氧化钠溶液、v乙酸铅溶液、v硫酸钠溶液、v甲基红指示剂、v费林试剂甲液、乙液v葡萄糖标准溶液学习情境二学习情境二 样品预处理 捣碎或粉碎处理称取除去样品中脂肪除去可溶性糖类物质火腿肠研磨成匀浆准确称取5g左右于滤纸中过滤除石油醚加50mL石油醚分5次提取脂肪用用150mL85%150mL85%乙醇乙醇分数次分数次

29、洗涤残渣洗涤残渣滤干乙醇溶液滤干乙醇溶液以以100mL100mL水把漏斗中残渣水把漏斗中残渣全部移至全部移至250mL250mL磨口锥形瓶中磨口锥形瓶中除去可溶性糖类物质除去脂肪学习情境二学习情境二 用150mL85%乙醇分数次洗涤残渣滤干乙醇溶液以100mL水把漏斗中残渣全部移至250mL磨口锥形瓶中（1）淀粉的酸水解（2）费林试剂的标定（3）样品溶液的预测定（4）样品溶液测定 淀粉含量测定 学习情境二学习情境二 （1）淀粉的酸水解上述250mL锥形瓶加入30mL盐酸（1+1）接好装冷凝管置沸水浴中回流2小时可以保证盐酸中的浓度不发生变化空白试验：250mL锥形瓶中加入100mL水，30mL

30、盐酸（1+1），沸水浴回流2h学习情境二学习情境二 冷却后加2滴甲基红先用40%氢氧化钠调到黄色再用盐酸（1+1）调到刚好变为红色加20mL 20%醋酸铅摇匀后放置10分钟加入20mL 10%硫酸钠溶液摇匀后用水转移至500mL容量瓶中,定容过滤，弃去初滤液20mL收集滤液供测定用调调中性沉淀蛋白质、果胶等杂质除去过多的铅学习情境二学习情境二 （2）标定同“还原糖测定”中的“直接滴定法”（3）样液的预测定同“还原糖测定”中的“直接滴定法”（4）样液的测定同“还原糖测定”中的“直接滴定法”（5）试剂空白试验学习情境二学习情境二 X=式中：X试样中淀粉的含量，g/100g；A1测定用试样中水解液还原糖质量，mg；A2试剂空白中还原糖质量，mg；0.9还原糖（以葡萄糖计）折算成淀粉的换算系数；m试样质量，g；V测定用试样水解液体积，mL；500试样液总体积，mL。10010005009.0)(21VmAA计算公式学习情境二学习情境二 干葡萄酒是指含糖（以葡萄糖计）小于或等于4.0g/L的葡萄酒。或者当总糖与总酸（以酒石酸计）的差值小于或等于2.0g/L时，含糖最高为9.0g/L的葡萄酒。试设计试验检验葡萄酒样品中总糖含量，并判断是否符合要求。学习情境二学习情境二