《微生物学与免疫学》2原核微生物课件.ppt
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- 微生物学与免疫学 微生物学 免疫学 微生物 课件
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1、原核微生物原核微生物王莹王莹 微生物教研室微生物教研室蓝细菌蓝细菌 微藻微藻 原生动物原生动物 病毒病毒 细菌细菌 真菌真菌 原核微生物的类群原核微生物的类群细菌(真细菌)细菌(真细菌)细菌的形态和大小细菌的形态和大小细菌细胞的结构与功能细菌细胞的结构与功能细菌的繁殖细菌的繁殖放线菌放线菌放线菌的形态、大小和结构放线菌的形态、大小和结构放线菌的繁殖放线菌的繁殖放线菌的菌落放线菌的菌落古生菌古生菌蓝细菌蓝细菌其它几种原核微生物其它几种原核微生物立克次体立克次体衣原体衣原体支原体支原体螺旋体螺旋体细菌的致病性细菌的致病性放线菌的细胞结构放线菌的细胞结构n细菌(细菌(bacteria)是一类)是一类
2、具有细胞壁具有细胞壁,以,以无无性二分裂性二分裂方式进行繁殖的方式进行繁殖的原核细胞型原核细胞型微生微生物。物。一、细菌的形态和大小一、细菌的形态和大小 使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测量使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测量 1.细菌的大小细菌的大小球菌:直径;球菌:直径;杆菌:宽杆菌:宽 长长 螺旋菌:宽螺旋菌:宽 长长 菌名菌名 直径或宽直径或宽长长/(m m m m)乳链球菌乳链球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌大肠杆菌枯草芽胞杆菌枯草芽胞杆菌霍乱弧菌霍乱弧菌 0.5 0.5 1 1 0.8 0.8 1 1 0.5 0.5 (1 (1 3)3)(0.8(0.8 1.2)1
3、.2)(1.21.2 3 3)(0.2(0.2 0.6)0.6)(1(1 3)3)细菌细胞的大小细菌细胞的大小n球状:球菌球状:球菌n杆状:杆菌杆状:杆菌n螺旋状:螺形菌螺旋状:螺形菌2.细菌的形态细菌的形态(1).球菌球菌(coccus)n菌体呈球形或近似球形菌体呈球形或近似球形,以典型的二均分裂方式繁以典型的二均分裂方式繁殖殖,分裂后产生的新细胞常保持一定的空间排列方分裂后产生的新细胞常保持一定的空间排列方式式.根据细胞分裂的方向及分裂后的各子细胞的空根据细胞分裂的方向及分裂后的各子细胞的空间排列状态不同间排列状态不同,可将球菌分为以下几种可将球菌分为以下几种:n单球菌、双球菌、链球菌、四
4、联球菌、八叠球菌、单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等。葡萄球菌等。a.a.单球菌(单球菌(single coccussingle coccus)分裂后的细胞分散而单独存在分裂后的细胞分散而单独存在的球菌的球菌.如尿素微球菌如尿素微球菌(Micrococcus Micrococcus ureaeureae)b.b.双球菌双球菌(Diplococcus(Diplococcus)分裂后两个球菌成对排列分裂后两个球菌成对排列的为双球菌的为双球菌.如肺炎双球菌如肺炎双球菌 (Diplococcus pneumoniaeDiplococcus pneumoniae)c.c.链球菌链球菌
5、(Streptococcus)分裂是沿一个平面进行,分裂是沿一个平面进行,分裂后细胞排列成链状分裂后细胞排列成链状.如乳链球菌如乳链球菌 (Streptococcus lactisStreptococcus lactis)d.d.四联球菌四联球菌 分裂是沿两个相垂直的分裂是沿两个相垂直的平面进行,分裂,分裂后每平面进行,分裂,分裂后每四个细胞在一起呈田字形四个细胞在一起呈田字形.如四联微球菌如四联微球菌 (Micrococcus tetragenusMicrococcus tetragenus)e.e.八叠球菌八叠球菌 按三个互相垂直的平按三个互相垂直的平面进行分裂后,每八个面进行分裂后,每八
6、个球菌在一起成立方体形球菌在一起成立方体形.如藤黄八叠球菌如藤黄八叠球菌 (Sarcina ureaeSarcina ureae)f.f.葡萄球菌葡萄球菌(staphylococcus)分裂面不规则,多个球菌分裂面不规则,多个球菌聚在一起,像一串串葡萄。聚在一起,像一串串葡萄。如金黄色葡萄球菌如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus)(2).杆菌(杆菌(bacillus)n杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同,菌体细胞的长短、粗细杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同,菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。等都有所差异。n短杆菌、长杆
7、菌、棒杆菌、梭状、梭杆状、月亮状、分支状、竹节状短杆菌、长杆菌、棒杆菌、梭状、梭杆状、月亮状、分支状、竹节状等。等。短杆菌短杆菌长杆菌长杆菌梭状芽胞杆菌梭状芽胞杆菌n一般情况下一般情况下,同一种杆菌的宽度比较稳定同一种杆菌的宽度比较稳定,但它的但它的长度经常随培养时间、培养条件的不同而有较大长度经常随培养时间、培养条件的不同而有较大的变化。的变化。n杆菌举例杆菌举例:n大肠杆菌(大肠杆菌(Escherichia coli)n枯草芽胞杆菌(枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)n北京棒杆菌(北京棒杆菌(Corynebacteriun Pekinensis)n苏云金芽胞杆菌(苏云金芽胞
8、杆菌(Bacillus thuringiensis)Single bacillusDiplobacillistreptobacilliCoccobacillusTwobacillitogether-DiplobacilliChainsofbacilliarecalledStreptobacilliPalisades-RodssidebysideorinX,VorYfigures杆菌排列状态杆菌排列状态杆菌端部特征杆菌端部特征 螺旋状的细菌称为螺旋菌。螺旋状的细菌称为螺旋菌。根据其弯曲情况分为:根据其弯曲情况分为:弧菌弧菌(vibrio):螺旋不满一圈,菌体呈弧形或逗号螺旋不满一圈,菌体呈弧形或
9、逗号形形;例:霍乱弧菌、逗号弧菌例:霍乱弧菌、逗号弧菌螺旋菌螺旋菌(spirillum):螺旋满螺旋满26环,螺旋状环,螺旋状;例:干酪螺菌例:干酪螺菌 比较:比较:螺旋体螺旋体(spirochaeta):旋转周数在旋转周数在6环以上,环以上,菌体柔软。菌体柔软。例:梅毒密螺旋体例:梅毒密螺旋体(3).螺旋菌(螺旋菌(spirillum)螺旋菌螺旋菌弧菌弧菌螺旋体螺旋体柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日阿托氏菌阿托氏菌(丝状丝状)、具有子实体的粘细菌等是特、具有子实体的粘细菌等是特殊形态的细菌。殊形态的细菌。细菌特殊形态细菌特殊形态丝状的亮发菌长有
10、附属丝的红微菌二、细菌细胞的结构二、细菌细胞的结构n基本结构基本结构(所有细菌细胞(所有细菌细胞 都具有)都具有)n特殊结构特殊结构(部分细菌细胞(部分细菌细胞 所特有)所特有)1.细胞壁细胞壁2.细胞膜细胞膜3.细胞质及内含物细胞质及内含物4.核物质核物质1.荚膜荚膜2.芽孢芽孢3.鞭毛鞭毛4.菌毛菌毛原生质体原生质体1.细胞壁(细胞壁(cell wall)除支原体外,所有原核生物都有细胞壁,是细胞膜外具有一定除支原体外,所有原核生物都有细胞壁,是细胞膜外具有一定硬度和韧性的壁套。硬度和韧性的壁套。(1)作用作用 维持菌体固有形态,对细胞起保护作用。维持菌体固有形态,对细胞起保护作用。作为细
11、胞内外物质交换的第一屏障。作为细胞内外物质交换的第一屏障。能阻止胞外大分子物质或颗粒状物质的通过,而不妨碍溶能阻止胞外大分子物质或颗粒状物质的通过,而不妨碍溶液和小分子或小颗粒的进入。液和小分子或小颗粒的进入。决定细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的特异敏感性。决定细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的特异敏感性。对具有鞭毛的细菌来说,细胞壁的存在是鞭毛运动的对具有鞭毛的细菌来说,细胞壁的存在是鞭毛运动的 必要条件,即细胞壁对鞭毛的运动起着力学支点的作用。必要条件,即细胞壁对鞭毛的运动起着力学支点的作用。正常的细胞分裂所必需。正常的细胞分裂所必需。(2)基本结构基本结构细胞壁主要是由细胞壁主要是由肽聚糖
12、肽聚糖(peptidoglycan)组成,)组成,此外还含有此外还含有磷壁酸磷壁酸、脂多糖脂多糖等特殊成分。等特殊成分。依据细胞壁的结构与化学组成不同,革兰氏染色法依据细胞壁的结构与化学组成不同,革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性细菌(将细菌分为革兰氏阳性细菌(G+)和革兰氏阴性)和革兰氏阴性细菌(细菌(G-)N-乙酰葡萄糖胺乙酰葡萄糖胺(NAG,简为简为G)肽聚糖肽聚糖 N-乙酰胞壁酸乙酰胞壁酸(NAM,简为简为M)短肽短肽 聚合而成多聚合而成多层网状结构层网状结构的大分子化的大分子化合物合物 (1)双糖单位:双糖单位:GM重复交联构成骨架重复交联构成骨架 (2)短肽侧链:短肽侧链:4个个aa
13、组成组成 L-丙氨酸丙氨酸(Ala)D-谷氨酸谷氨酸(Glu)L-赖氨酸赖氨酸(Lys)二氨基庚二酸二氨基庚二酸 D-丙氨酸丙氨酸(Ala)短肽连接在短肽连接在N-乙酰胞壁酸上乙酰胞壁酸上 (3)肽桥:肽桥:金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)G+:5个甘氨酸个甘氨酸(Gly)构成的短肽构成的短肽 大肠杆菌大肠杆菌(E.coli)G-:无,短肽直接相联无,短肽直接相联 革兰氏阳性细菌肽聚糖单体革兰氏阳性细菌肽聚糖单体革兰氏阴性细菌肽聚糖单体革兰氏阴性细菌肽聚糖单体细胞壁的基本骨架细胞壁的基本骨架肽聚糖肽聚糖G G+和和G G-肽聚糖肽聚糖G+(S.aureus)G-(E.coli)
14、双糖单体双糖单体一致(一致(M-GM-G)四肽侧链四肽侧链L-AlaL-AlaD-gluD-gluL-LysL-LysD-AlaD-AlaL-AlaL-AlaD-gluD-gluMesoMeso-DAP-DAPD-AlaD-Ala交联方式交联方式有肽桥(有肽桥(5Gly5Gly)无肽桥,四肽侧链无肽桥,四肽侧链直接相连直接相连结构结构结构紧密,交联度结构紧密,交联度大,三维立体结构大,三维立体结构结构松散,交联度结构松散,交联度小,小,二维平面结构二维平面结构v青霉素对细胞壁的作用青霉素对细胞壁的作用与与转肽酶转肽酶结合,使该酶结合,使该酶失活,抑制了侧链末端失活,抑制了侧链末端的的丙氨酸丙氨
15、酸与五肽桥的连与五肽桥的连接,破坏了细菌细胞壁接,破坏了细菌细胞壁的完整性(即抑制肽聚的完整性(即抑制肽聚糖合成最后阶段的交联糖合成最后阶段的交联作用作用转肽反应转肽反应,对,对G+G+和和G-G-都一样)都一样),故仅对,故仅对生生长着的菌长着的菌有效,主要是有效,主要是G G+菌菌。青霉素作用位点青霉素作用位点v溶菌酶对细胞壁的作用溶菌酶对细胞壁的作用n可切断可切断NAMNAM和和NAGNAG之间之间的的-1-1,4-4-糖苷键糖苷键,引引起细菌裂解。起细菌裂解。n对对GG菌,在菌,在EDTAEDTA存存在下,受溶菌酶作用。在下,受溶菌酶作用。n溶菌酶处理后的菌细溶菌酶处理后的菌细胞应保存
16、在弱高渗胞应保存在弱高渗(0.1-0.2M0.1-0.2M)蔗糖液中。)蔗糖液中。溶菌酶作用位点溶菌酶作用位点细菌细胞壁的结构细菌细胞壁的结构v革兰氏阳性菌细胞壁:革兰氏阳性菌细胞壁:由肽聚糖和磷壁酸组成由肽聚糖和磷壁酸组成 磷壁酸:磷壁酸:占占40%40%。G+G+菌所菌所特有特有,其主链由数十个磷其主链由数十个磷酸甘油或磷酸核糖醇组酸甘油或磷酸核糖醇组成成,有的还有由有的还有由D DAlaAla和和还原糖组成的侧链。还原糖组成的侧链。肽聚糖肽聚糖:占占30-70%,30-70%,不同菌种中不同菌种中肽聚糖肽聚糖(肽链肽链)组分不同。组分不同。G G+细胞壁特有成分细胞壁特有成分n磷壁酸(磷
17、壁酸(teichoicteichoic acid acid)结合环境中的某些阳离子,如结合环境中的某些阳离子,如MgMg+,CaCa+,提高细胞膜表面酶活性提高细胞膜表面酶活性构成细胞壁的表面抗原成分构成细胞壁的表面抗原成分噬菌体吸附的特异性受体噬菌体吸附的特异性受体调节细胞自溶调节细胞自溶与细菌致病性有关:黏附性与细菌致病性有关:黏附性细菌细胞壁的结构细菌细胞壁的结构v革兰氏阴性菌细胞壁:革兰氏阴性菌细胞壁:分内壁层和外壁层。分内壁层和外壁层。内壁层:内壁层:紧贴胞膜紧贴胞膜,仅由仅由1 12 2层肽聚糖分子构成层肽聚糖分子构成,占细占细胞壁干重胞壁干重5-10%,5-10%,无磷壁酸。无磷
18、壁酸。外壁层:外壁层:位于肽聚糖层的外位于肽聚糖层的外部。部。脂多糖脂多糖;脂蛋白、脂蛋白、包括包括:蛋白质层蛋白质层:基质蛋白、基质蛋白、外壁蛋白外壁蛋白;磷脂磷脂.G G-细胞壁特有成分细胞壁特有成分n脂多糖(脂多糖(lipopolysaccharidelipopolysaccharide,LPS,LPS):):n多糖部分多糖部分:核心多糖核心多糖n O-多糖多糖(抗原成分抗原成分,O抗原抗原)n类脂部分类脂部分:类脂类脂A(内毒素成分内毒素成分)结合环境中的某些阳离子,如结合环境中的某些阳离子,如MgMg+,CaCa+,提高,提高细胞膜表面酶活性细胞膜表面酶活性与细菌致病性有关(内毒素)
19、:类脂与细菌致病性有关(内毒素):类脂A A的致热的致热作用作用o-o-抗原构成细胞壁的表面抗原成分抗原构成细胞壁的表面抗原成分噬菌体吸附的特异性受体噬菌体吸附的特异性受体细菌的染色法细菌的染色法活菌染色活菌染色简单染色法简单染色法抗酸染色抗酸染色普通染色普通染色特殊染色特殊染色正染色正染色负染色负染色死菌染色死菌染色细菌染色细菌染色复杂染色法复杂染色法芽孢染色法芽孢染色法细胞壁染色法细胞壁染色法鞭毛染色法鞭毛染色法革兰氏染色革兰氏染色丹麦学者丹麦学者C.Gram(革兰)(革兰)于于1884年发明了一种鉴别年发明了一种鉴别不同类型细菌的染色方法。不同类型细菌的染色方法。革兰氏染色革兰氏染色革兰
20、氏染色与细胞壁:革兰氏染色与细胞壁:1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染2、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细 胞呈无色。胞呈无色。4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对、用一种与结晶紫具有不同颜色
21、的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色兰氏阳性细菌继续保持深紫色G+菌和菌和 G-菌细胞壁的结构和化学组成菌细胞壁的结构和化学组成 结构结构 化学组成化学组成 G+菌菌 厚厚(3080nm)、肽聚糖肽聚糖,占胞壁重量的,占胞壁重量的60-90%结构致密均匀结构致密均匀 磷壁酸磷壁酸 细胞壁与细胞膜外层紧密相连细胞壁与细胞膜外层紧密相连 G-菌菌 薄薄(1520nm),结构复杂,结构复杂 分为两层分为两层 外膜外膜 双层类脂双层类脂 脂多糖
22、脂多糖(LPS)、多糖、蛋白质、多糖、蛋白质 内层内层 肽聚糖肽聚糖,无磷壁酸,无磷壁酸 细胞壁的外膜与细胞膜细胞壁的外膜与细胞膜 水解酶;结合蛋白;化学受体水解酶;结合蛋白;化学受体 之间存在明显的壁膜间隙之间存在明显的壁膜间隙 革兰氏染色的机制革兰氏染色的机制 细菌的不同显色反应是由于细菌细胞壁细菌的不同显色反应是由于细菌细胞壁对乙醇的通透性对乙醇的通透性和抗脱色能力和抗脱色能力的差异,主要在于细胞壁的结构和特殊化学组成。的差异,主要在于细胞壁的结构和特殊化学组成。G+菌菌 G-菌菌 结晶紫结晶紫(CV)初染初染 紫色紫色 紫色紫色 碘液碘液(I)媒染媒染 紫色紫色 紫色紫色 形成不溶性复
23、合物形成不溶性复合物 (CV-I复合物)复合物)(CV-I复合物)复合物)酒精酒精 脱色脱色 保持紫色保持紫色 脱去紫色脱去紫色 (乙醇使厚的(乙醇使厚的肽聚糖层脱水肽聚糖层脱水,(乙醇处理不但破坏了胞壁外(乙醇处理不但破坏了胞壁外 导致孔径变小,由于导致孔径变小,由于 CV-I 膜,还可能损伤肽聚糖层和膜,还可能损伤肽聚糖层和 复合物分子太大,不能通过复合物分子太大,不能通过 溶解脂质溶解脂质,被乙醇溶解,被乙醇溶解 CV-I 细胞壁。)细胞壁。)复合物从细胞中渗漏出来,)复合物从细胞中渗漏出来,)番红番红 复染复染 紫色紫色 红色红色Gram StainGram StainFigure 1
24、-A Gram stain of Gram+Staphylococcus cells.Figure 2-Gram stain of Gram-E.coli cells细胞壁缺陷型细菌细胞壁缺陷型细菌实验室或宿主实验室或宿主体内形成体内形成在自然界长期进化中形成在自然界长期进化中形成支原体支原体缺壁突变缺壁突变L型细菌型细菌人工去壁人工去壁基本去尽基本去尽原生质体原生质体(G)部分去除部分去除圆球体圆球体(G)共同点共同点:细菌呈球形、对渗透压敏感、对噬菌体不敏感、即:细菌呈球形、对渗透压敏感、对噬菌体不敏感、即使有鞭毛,也不能运动。使有鞭毛,也不能运动。(1)L型细菌(型细菌(L-form b
25、acteria)细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。1935年,因英国李斯年,因英国李斯德(德(Lister)预防研究所首先发现而得名。)预防研究所首先发现而得名。最早发现的最早发现的L型细菌是念珠状链杆菌(型细菌是念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis),随后,在大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链随后,在大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等20多种细菌中均有发现。多种细菌中
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