天然药物活性成分研究.课件.ppt
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1、基本操作技术与应用基本操作技术与应用1.天然药物活性成分的研究(了解内容)2.天然产物的提取方法(掌握内容)3.天然产物的分离方法(掌握内容)4.色谱分离法(掌握内容)5.天然产物的结构测定(熟悉内容)研究途径临床调查收集原料成分提取分离成分预试验活性筛选文献资料调研结构确定动物试验临床试验提取的基本知识 什么是提取?提取的思路(已知成分、未知成分)提取前预处理(一般过2号筛为宜,同时注意酶的影响)基本原理相似相溶 影响因素(溶剂的选择、方法选择、时间、温度、粉碎度等)极性极性 常用溶剂极性排列顺序:石油醚苯无水乙醚氯仿乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇甲醇水 官能团的极性排列顺序:烷烃卤代烃醚酯酮醛酰胺
2、胺醇水酚羧酸溶剂分类与特点(一)水:价廉,安全,对细胞的穿透能力强。适用于无机盐、糖类、鞣质、氨基酸与蛋白质、有机酸盐、生物碱盐、苷类化合物的提取。亲水性有机溶剂:甲醇、乙醇、丙酮等。1.特点:可与水任意比混溶,毒性低、价廉、回收方便,对细胞的穿透能力强。2.适用于多种成分的提取,其中,乙醇又称为“万能溶剂”。溶剂分类与特点(二)亲脂性有机溶剂:石油醚、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯等。1.特点:选择性强、回收方便、但易燃、有毒、价贵。2.适用于挥发油、油脂、叶绿素、树脂、游离生物碱、苷元等成分的提取。提取技术与方法(一)溶剂法:1.仅限于低分子量、含量高的成分的提取。2.根据“相似相溶”的原则进行
3、提取。(二)其他方法 根据化合物的特殊性质选择特殊的提取方法。1.水蒸气蒸馏法2.升华法共9种方法溶剂提取法1.浸渍法2.渗漉法3.煎煮法4.回流法5.连续回流法6.超声提取法7.超临界流体萃取法浸渍法 分为冷浸法(室温)和温浸法(4060)。常用溶剂:水、酸水、碱水、稀醇等。适用于遇热易被破坏的成分或含大量淀粉、粘液质、果胶、树胶等多糖类成分的提取。缺点:提取时间长、溶剂用量大、提取效率低、用水作溶剂时易发霉。渗漉法 适用范围与提取溶剂同浸渍法。步骤:浸润、装筒、排气、浸渍、渗漉。优点:提取效率较高。缺点:提取时间长、溶剂用量大。煎煮法 药房及家庭中最为常用的中药提取方法。常用溶剂:水 适用
4、于对热稳定的成分的提取。含多糖类成分量大的药材因煎煮后呈糊状,不宜用本法。回流法 最常用的提取方法。对热不稳定的成分不适用。提取效率较高。选择什么试剂?适用于什么成分?连续回流法 浸渍法和回流法的特点兼有。对热不稳定的成分慎用。提取时间长。超声提取法 利用超声波振动产生的能量在提取液中产生“空化现象”提取有效成分。优点:操作简便,几乎适用于各种溶剂的提取,提取时间短,效率高。超临界流体萃取法 超临界流体(supercritical fluid,SF):当某物质处于临界温度和临界压力以上时可形成一种既非液体又非气体的单一相态,将这一状态的物质称为超临界流体。目前最常用的是CO2-SFE技术。水蒸
5、气蒸馏法 适用于具有挥发性,可与水蒸气一起蒸馏出来,与水不反应,又难溶于水的化合物的提取。升华法 适用于有升华性,升华温度适当,遇热较稳定的化合物的提取。可分为常压升华和减压升华两种。关于提取问题小结 极性(溶剂的极性、化合物的极性)提取溶剂的分类与特点 提取的原理 提取的方法与适用范围分离方法(一)分离前处理(二)结晶与重结晶(三)分离方法1.系统溶剂分离法2.两相溶剂萃取法3.沉淀法 6.透析法 9.色谱法4.吸附法(补充)7.分馏法5.盐析法(补充)8.升华法分离前处理提取液一般体积较大,目标成份浓度低,需要先浓缩提高浓度,然后再进行分离工作。浓缩的方法1.常压蒸馏2.减压蒸馏3.薄膜蒸
6、发常压蒸馏 适用于有效成分受热不易分解,低沸点有机溶剂(氯仿、乙醚、石油醚等)的提取液的浓缩。减压蒸馏 适用于溶剂沸点高,有效成分受热易分解的提取液的浓缩。薄膜蒸发 浓缩效率高,受热时间短,特别适用于浓缩水或稀醇为溶剂的提取液。结晶与重结晶(一)结晶的条件(掌握)(二)结晶溶剂的选择(熟悉)(三)制备结晶的方法 1.晶核的形成 2.晶链的延长(四)结晶纯度的判断(重点掌握)结晶的条件 被分离化合物纯度高;呈过饱和状态;最适结晶温度:510;充分放置。结晶溶剂的选择(理想溶剂)一1.不与结晶物质起化学反应;2.杂质与结晶物质在溶剂中的溶解度相差大;3.目的物在溶剂中的溶解度随温度不同有显著差别;
7、4.溶剂沸点不宜太高或太低(可在60 );5.溶剂沸点低于化合物的熔点;6.溶剂沸点低于结晶温度;7.能给出较好的晶形,无剧毒。结晶溶剂的选择 二 常用溶剂:甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等。其他不常用溶剂:二甲基亚砜、乙腈、甲酰胺、二甲基甲酰胺、冰醋酸等。混合溶剂?如何选择与使用如何选择与使用 水-乙醇;乙醇乙醚;石油醚苯;水丙酮;乙醚乙酸乙酯乙醇等。结晶纯度的判断1.一定的晶形、均匀的色泽;2.有固定的熔点,熔距较小;3.TLC:经过三种以上展开剂展开得均一圆形的斑点。系统溶剂分离法 目前是研究成分不明的天然产物的最常用方法。选择34种不同极性的溶剂,由低极性到高极性分步对粗提物进行分离
8、。手续复杂、对化学性质不稳定,容易引起分解、异构化的产物应特别注意。两相溶剂萃取法(一)基础知识1.原理2.分配系数与分离因子(二)萃取方法基础知识一、原理 利用混合物中各成分在两种互不混溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的目的。二、分配系数与分离因子1.分配系数(K)K=C有机相/C水相2.分离因子()=KA/KB假设KA=10,KB=0.1,则=100 当100时,一次简单的萃取就可以完成分离;当10100,需萃取1012次;当2时,需要完成100次以上的萃取;当1时,理论上无法完成萃取分离的目的。萃取方法1.简单萃取法(掌握)2.pH梯度萃取法(重点掌握)(补充)3.逆流连续萃取法(了解)
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