新编食品中的真菌毒素课件.ppt
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1、第四章 食品中的真菌毒素mycotoxins 本章讨论如下问题:本章讨论如下问题:一、一、真菌及其毒素的概述真菌及其毒素的概述 二、二、曲霉及其毒素曲霉及其毒素 三、三、镰孢菌毒素镰孢菌毒素 四、青霉及其毒素四、青霉及其毒素 五、其它真菌毒素五、其它真菌毒素 六、重要的真菌毒素管理及允许量标准六、重要的真菌毒素管理及允许量标准第一节第一节真菌真菌及及真菌毒素真菌毒素概述概述Fungi and mycotoxinsFungi and mycotoxins一、真菌、真菌毒素及真菌毒素中毒 1.1.真菌真菌真核微生物真核微生物不含叶绿素,无根茎叶,以寄生或不含叶绿素,无根茎叶,以寄生或腐生方式生存腐
2、生方式生存有性和无性繁殖有性和无性繁殖 2.2.真菌毒素真菌毒素 3.3.真菌毒素中毒真菌毒素中毒真菌在其所污染的食品中产生的真菌在其所污染的食品中产生的有毒代谢产物有毒代谢产物(粮食、饲料等)(粮食、饲料等)次级代谢产物次级代谢产物真菌毒素引起的对人体健康的各种损害真菌毒素引起的对人体健康的各种损害 产毒真菌寄生在粮食或饲料上、在适产毒真菌寄生在粮食或饲料上、在适宜条件下产生有毒代谢产物宜条件下产生有毒代谢产物 本身含有毒素的真菌本身含有毒素的真菌真菌毒素污染的食物真菌毒素污染的食物判断下列中毒是否属于真菌毒素中毒判断下列中毒是否属于真菌毒素中毒 1 1)外表类似食用菌子实体的有毒真菌,如毒
3、蘑菇。)外表类似食用菌子实体的有毒真菌,如毒蘑菇。2 2)在粮食作物的生长过程中、病原真菌感染这些作物,)在粮食作物的生长过程中、病原真菌感染这些作物,并形成毒素残留在其中如麦角中毒。并形成毒素残留在其中如麦角中毒。3 3)真菌引起食品的腐败变质,产生有毒有害物质,并)真菌引起食品的腐败变质,产生有毒有害物质,并导致食品感官性状的明显受化,如腐烂的柑橘。导致食品感官性状的明显受化,如腐烂的柑橘。4.4.霉菌霉菌 是指菌丝体比较发达而又无子实体的真菌的俗称。凡是指菌丝体比较发达而又无子实体的真菌的俗称。凡是在基质上长成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状菌丝体的是在基质上长成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状菌丝体的
4、真菌称为霉菌。是一些丝状真菌的通称。真菌称为霉菌。是一些丝状真菌的通称。5.5.霉菌毒素霉菌毒素 是由霉菌产生的二级代谢产物。是由霉菌产生的二级代谢产物。有些霉菌广泛应用于食品工业,有些霉菌广泛应用于食品工业,如酿造业(酒,醋、酱油)如酿造业(酒,醋、酱油)二、真菌及真菌毒素对食品的污染 粮食及其加工制成品、水果、干果、乳及乳制品、发酵食粮食及其加工制成品、水果、干果、乳及乳制品、发酵食品和动物饲料等品和动物饲料等 玉米、大米、花生、小麦被污染真菌毒素的种类最多玉米、大米、花生、小麦被污染真菌毒素的种类最多 危害:真菌引起的食品变质;真菌毒素引起的中毒危害:真菌引起的食品变质;真菌毒素引起的中
5、毒据不完全统计全世界每年平均有据不完全统计全世界每年平均有2 2的谷物由于霉变不能食用的谷物由于霉变不能食用三、产毒真菌的种类和产毒特点 能产生毒素的真菌被称之为产毒真菌能产生毒素的真菌被称之为产毒真菌 产毒真菌只是真菌中的一少部分产毒真菌只是真菌中的一少部分 产毒菌种中也可能只有一部分菌株产毒产毒菌种中也可能只有一部分菌株产毒 同一菌株的产毒能力也会表现出可变性与差异性同一菌株的产毒能力也会表现出可变性与差异性 同一菌种或菌株往往可以产生几种不同的毒素同一菌种或菌株往往可以产生几种不同的毒素 而同一毒素也可由几种真菌产生而同一毒素也可由几种真菌产生 产毒真菌产生毒素需要一定的条件产毒真菌产生
6、毒素需要一定的条件曲霉菌属曲霉菌属黄曲霉、赭曲霉、杂色曲霉、烟曲霉、构巢曲霉和寄生曲霉等青霉属青霉属岛青霉、桔青霉、黄绿青霉、红色青霉、扩展青霉、圆弧青霉、纯绿青霉、斜卧青霉等镰孢菌属镰孢菌属禾谷镰孢菌、三隔镰孢菌、玉米赤霉菌、梨孢镰孢菌、尖孢镰孢菌、雪腐镰孢菌、串珠镰孢菌、拟枝孢镰孢菌、木贼镰孢菌、茄病镰孢菌、粉红镰孢菌等多种其它真菌其它真菌如麦角菌属、鹅膏菌属、马鞍菌属和链格孢菌属等四、真菌毒素的种类与检测 种类种类霉菌毒素霉菌毒素蕈类毒素蕈类毒素 检测方法检测方法1 1)理化检测法:包括层析法、气相色谱法、液相色谱)理化检测法:包括层析法、气相色谱法、液相色谱法等法等2 2)生物学检测法
7、:包括皮肤毒性试验、致呕吐实验、)生物学检测法:包括皮肤毒性试验、致呕吐实验、种子发芽实验等种子发芽实验等3 3)免疫化学检测法:即利用抗原抗体反应的原理进行)免疫化学检测法:即利用抗原抗体反应的原理进行真菌毒素检测真菌毒素检测检测研究进展检测研究进展:气相色谱法及气气相色谱法及气-质联用法质联用法酶免疫检测法酶免疫检测法化学发光酶免疫检测化学发光酶免疫检测蛋白质芯片蛋白质芯片“十五十五”国家重大科技专项国家重大科技专项食品安全关键技术研究进展:食品安全关键技术研究进展:研制出具有自主知识产权的快研制出具有自主知识产权的快速、高效免疫检测试剂盒:赭速、高效免疫检测试剂盒:赭曲霉毒素曲霉毒素A
8、A、T2-T2-毒素、黄曲霉毒素、黄曲霉毒素毒素B1B1、总黄曲霉毒素、玉米、总黄曲霉毒素、玉米赤霉酮、伏马菌素赤霉酮、伏马菌素B1B1、脱氧雪、脱氧雪腐镰刀菌烯醇腐镰刀菌烯醇免疫胶体金试纸条:黄曲霉毒免疫胶体金试纸条:黄曲霉毒素素B1B1、赭曲霉毒素、赭曲霉毒素A A、玉米赤霉、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、桔青霉素桔青霉素五、真菌毒素的毒性作用及中毒特点 1.1.真菌毒素的毒性作用真菌毒素的毒性作用真菌毒素有几百种,主要作用于实质器官,据此可将真菌真菌毒素有几百种,主要作用于实质器官,据此可将真菌毒素分为毒素分为7 7种:种:肝毒、肾毒、神经毒、造血组织毒、光
9、过敏性皮肤毒、胃肝毒、肾毒、神经毒、造血组织毒、光过敏性皮肤毒、胃肠道毒、呼吸道毒、以及类性激素样物质。肠道毒、呼吸道毒、以及类性激素样物质。2.2.真菌毒素的中毒特点真菌毒素的中毒特点1 1)与食物有联系,从可疑食物中可检出真菌或毒素,从)与食物有联系,从可疑食物中可检出真菌或毒素,从患者排泄物中可检出毒素;患者排泄物中可检出毒素;2 2)发病有季节性和地区性,但无传染性;)发病有季节性和地区性,但无传染性;3 3)有时并发维生素缺乏,但用维生素治疗无效;)有时并发维生素缺乏,但用维生素治疗无效;4 4)小分子有机化合物,不能刺激机体产生抗体;)小分子有机化合物,不能刺激机体产生抗体;5 5
10、)化学药物和抗生素的疗效很差或无效。)化学药物和抗生素的疗效很差或无效。六、真菌性食物中毒的预防与控制 1.1.预防措施预防措施1 1)合理耕作、灌溉和施肥、适时收获)合理耕作、灌溉和施肥、适时收获 2 2)减少粮食及饲料的含水量)减少粮食及饲料的含水量3 3)降贮藏温度)降贮藏温度 4 4)改进贮藏方式)改进贮藏方式5 5)抗性育种)抗性育种6 6)加入)加入防霉药剂防霉药剂7 7)加强污染的检测和检验,严格执行食品卫生标准)加强污染的检测和检验,严格执行食品卫生标准预防预防去毒去毒微生物去毒微生物去毒辐射去毒辐射去毒氨熏蒸去毒氨熏蒸去毒吸附去毒吸附去毒食盐去毒食盐去毒搓洗去毒搓洗去毒加碱去
11、毒加碱去毒加工去毒加工去毒放置去毒放置去毒挑选去毒挑选去毒 2.2.去毒措施去毒措施第二节第二节 曲霉及其毒素曲霉及其毒素 曲霉及其毒素曲霉及其毒素主要有:主要有:黄曲霉毒素黄曲霉毒素赭曲霉毒素赭曲霉毒素杂色曲霉毒素杂色曲霉毒素黄曲霉毒素是研究最早黄曲霉毒素是研究最早也是目前研究最为清楚的一类曲霉毒素也是目前研究最为清楚的一类曲霉毒素一、黄曲霉毒素(一、黄曲霉毒素(aflatoxinaflatoxin,AFTAFT)黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉在生长繁殖过程中黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉在生长繁殖过程中所产生的一种对人类危害极为突出的一类强致癌物质。所产生的一种对人类危害极为突出的一类强致
12、癌物质。(一)黄曲霉毒素的发现19611961年首先从霉年首先从霉变花生粉中提取变花生粉中提取19601960年英国伦敦年英国伦敦郊区发生郊区发生“火鸡火鸡X X病病黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1 B1 黄曲霉毒素黄曲霉毒素GG黄曲霉毒素黄曲霉毒素BlBl、B2B2、G1G1、G2G2黄曲霉毒素黄曲霉毒素MM MlMl和和M2M2衍生物、异构物衍生物、异构物和相似物和相似物很多学者对纸层析法提取的黄曲霉毒很多学者对纸层析法提取的黄曲霉毒素进行了进一步分析,用氯化铝薄层素进行了进一步分析,用氯化铝薄层层析后经紫外线照射,可观察到两种层析后经紫外线照射,可观察到两种光亮点,一为蓝紫色荧光,称之为黄光亮点
13、,一为蓝紫色荧光,称之为黄曲霉毒素曲霉毒素B1B1,另一为黄绿色荧光,命,另一为黄绿色荧光,命名为黄曲霉毒素名为黄曲霉毒素G G(二)黄曲霉毒素的种类与结构 黄曲霉毒素是一类结构类似的化合物黄曲霉毒素是一类结构类似的化合物 目前已知黄曲霉毒素除了常见的目前已知黄曲霉毒素除了常见的AFBl、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2、AFB2a、AFG2a、AFBM2、AFGM2a外,尚有多种黄曲霉毒素的代谢产物、异构物和外,尚有多种黄曲霉毒素的代谢产物、异构物和相似物相似物 通常所说的通常所说的AFT是指是指AFB1(三)黄曲霉毒素的理化性质 在紫外光照射下,在紫外光照射下,B B族毒素
14、发出蓝紫色荧光,而族毒素发出蓝紫色荧光,而G G族毒素发族毒素发出黄绿色荧光出黄绿色荧光 热稳定性非常好,分解温度高达热稳定性非常好,分解温度高达280280 难溶于水、己烷、乙醚、石油醚难溶于水、己烷、乙醚、石油醚 可溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺(可溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺(DMFDMF)(四)黄曲霉毒素产生的条件 由由黄曲霉黄曲霉和和寄生曲霉菌寄生曲霉菌生长繁殖产生生长繁殖产生 这两种霉菌在自然界中普遍存在,易污染食品,尤其是这两种霉菌在自然界中普遍存在,易污染食品,尤其是花花生和玉米生和玉米 黄曲霉毒素对食品的污染及其程度受地区和季节因素以及黄曲霉毒素对食品的
15、污染及其程度受地区和季节因素以及作物生长、收获、贮存的不同条件影响作物生长、收获、贮存的不同条件影响(四)黄曲霉毒素产生的条件 1温度温度 2pH 3湿度湿度 4基质基质 5盐盐 6空气空气 7微量元素微量元素 8其它霉菌其它霉菌(五)黄曲霉毒素的毒性 主要作用于动物的肝脏主要作用于动物的肝脏引起肝脏组织引起肝脏组织的损伤的损伤导致肝癌导致肝癌 诱发肿瘤的敏感性诱发肿瘤的敏感性易诱发肿瘤易诱发肿瘤不易诱发瘤不易诱发瘤但有中毒症状但有中毒症状u 急性毒性、慢性毒性、三致作用 1.1.急性毒性急性毒性根据对动物的半致死量根据对动物的半致死量(LD50)(LD50),黄曲霉毒素属于剧毒物,黄曲霉毒素
16、属于剧毒物,其毒性为氰化钾的其毒性为氰化钾的l0l0倍,砒霜的倍,砒霜的6868倍倍黄曲霉毒素中以黄曲霉毒素中以B1B1的毒性最强,的毒性最强,G2G2的毒性最弱的毒性最弱主要表现为肝脏细胞变性、坏死、出血等以及肾脏细胞变主要表现为肝脏细胞变性、坏死、出血等以及肾脏细胞变性、坏死性、坏死 2.2.慢性毒性慢性毒性主要表现为动物生长障碍肝脏出现慢性损害等主要表现为动物生长障碍肝脏出现慢性损害等动物LDLD5050(mg/kgmg/kg体重)体重)动物LDLD5050(mg/kgmg/kg体重)体重)豚鼠1.41.4羊2.02.0小白鼠9.09.0猫、狗0.50.51.01.0大鼠10.210.2
17、雏鸭0.340.34虹鳟鱼2.032.03猕猴2.22.27.87.8家兔0.30.3猪(6-7kg6-7kg)0.620.62鸡6.36.3鲶鱼10.010.015.015.0(5d5d)u 急性毒性、慢性毒性、三致作用 3 3三致作用三致作用AmesAmes实验和仓鼠细胞体外转化实验中均表现为强致突变实验和仓鼠细胞体外转化实验中均表现为强致突变性,它对大鼠和人均有明显的致畸作用性,它对大鼠和人均有明显的致畸作用家畜、鱼类、禽类、灵长类等诱发实验性肝癌或其它肿瘤家畜、鱼类、禽类、灵长类等诱发实验性肝癌或其它肿瘤黄曲霉毒素是目前所知致癌性最强的化学物质黄曲霉毒素是目前所知致癌性最强的化学物质(
18、六)黄曲霉毒素对食品的污染及限量标准 主要污染粮油及其制品,如花生、花生油、玉米、玉米油、主要污染粮油及其制品,如花生、花生油、玉米、玉米油、大米、棉籽等。大米、棉籽等。乳乳 黄曲霉毒素黄曲霉毒素BlBl是目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素是目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素我国规定我国规定/GB2761-2019/GB2761-2019:WHOWHO推荐推荐:食品、饲料中黄曲霉毒素(食品、饲料中黄曲霉毒素(AFTAFT总量)最高允许量总量)最高允许量标准为标准为15ug/kg15ug/kg。不合格的等级有:。不合格的等级有:30-50 ug/kg30-50 ug/kg为低毒,为低毒,50-1
19、00 ug/kg50-100 ug/kg为中毒,为中毒,100-1000 ug/kg100-1000 ug/kg为高毒,为高毒,1000 ug/kg1000 ug/kg以上为投毒以上为投毒(七)检测方法 薄层色谱、液相色谱、薄层色谱、液相色谱、ELISAELISAGB/T 5009.22-2019 GB/T 5009.22-2019 食品中黄曲霉毒素食品中黄曲霉毒素BlBl的测定的测定 GB/T 5009.23-2019 GB/T 5009.23-2019 食品中黄曲霉毒素食品中黄曲霉毒素BlBl、B 2B 2、GlGl、G2G2的测的测定定 GB/T 5009.24-2019 GB/T 50
20、09.24-2019 食品中黄曲霉毒素食品中黄曲霉毒素MlMl与与BlBl的测定的测定GB/T 18979-2019 GB/T 18979-2019 食品中黄曲霉毒素的测定食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法高效液相色谱法和荧光光度法GB/T 18980-2019 GB/T 18980-2019 乳和乳粉中黄曲霉毒素乳和乳粉中黄曲霉毒素M,M,的测定的测定 免疫亲和层免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法析净化高效液相色谱法和荧光光度法SN/T 1736-2019 SN/T 1736-2019 进出口蜂蜜中黄曲霉毒素的检验方法进出口蜂蜜中黄曲霉
21、毒素的检验方法 高效液高效液相色谱法相色谱法 GB/T 17480-2019 GB/T 17480-2019 饲料中黄曲霉毒素饲料中黄曲霉毒素B1B1的测定酶联免疫吸附法的测定酶联免疫吸附法黄曲霉毒素胶体金试纸条黄曲霉毒素胶体金试纸条(A A)银染增强胶体金试纸条银染增强胶体金试纸条(B B)(八)安全防控措施花生、大豆、米谷、小麦等在贮存前应将其水分含量迅花生、大豆、米谷、小麦等在贮存前应将其水分含量迅速降至速降至8-13%8-13%以下,并贮存在干燥的地方、以下,并贮存在干燥的地方、75%75%相对湿度相对湿度以下,室温以下,室温1010以下以下贮存期间注意通风防潮贮存期间注意通风防潮减少
22、食品表面环境的氧浓度减少食品表面环境的氧浓度加强对贮存和市售粮油豆谷等农产品检验加强对贮存和市售粮油豆谷等农产品检验化学防霉(溴甲烷、二氯乙烷化学防霉(溴甲烷、二氯乙烷)豆类、谷类应先淘洗后烹煮豆类、谷类应先淘洗后烹煮挑选霉变粒挑选霉变粒二、赭曲霉毒素(二、赭曲霉毒素(OchratoxinOchratoxin)赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属中的某些菌种所产生的一赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属中的某些菌种所产生的一组次级代谢产物。赭曲霉毒素能毒害所有的家畜家禽,也组次级代谢产物。赭曲霉毒素能毒害所有的家畜家禽,也能毒害人类,因此对人体健康和畜牧业的发展都有很大的能毒害人类,因此对人体健康和畜牧业的发展都
23、有很大的危害。危害。(一)基本化学结构与理化性质(一)基本化学结构与理化性质 赭曲霉毒素的赭曲霉毒素的7 7种结构类似的化合物中赭曲霉毒种结构类似的化合物中赭曲霉毒素素A A(OTAOTA)是毒性最强的)是毒性最强的 赭曲霉毒素溶解于极性有机溶剂,微溶于水和稀赭曲霉毒素溶解于极性有机溶剂,微溶于水和稀的碳酸氢盐的碳酸氢盐 毒素具有耐热性毒素具有耐热性(二)主要产毒菌株(二)主要产毒菌株 由曲霉属和青霉属的某些种产生由曲霉属和青霉属的某些种产生 洋葱曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉、赭曲霉、黑洋葱曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉、赭曲霉、黑曲霉等曲霉等 疣孢青霉、圆弧青霉等疣孢青霉、圆弧青霉等 (三)赭曲霉毒素
24、的毒性(三)赭曲霉毒素的毒性 1 1急、慢性毒性急、慢性毒性 肾脏毒和肝脏毒肾脏毒和肝脏毒 不同动物毒性差异大不同动物毒性差异大 2 2致病性致病性 肾脏的严重病变、肝脏的急性功能障碍、脂肪变性、肾脏的严重病变、肝脏的急性功能障碍、脂肪变性、透明变性及局部性坏死透明变性及局部性坏死 3 3三致作用三致作用 长期摄入也有致癌、致畸和致突变性长期摄入也有致癌、致畸和致突变性 动物实验动物实验(四)赭曲霉毒素对食品的污染及限量标准(四)赭曲霉毒素对食品的污染及限量标准 赭曲霉毒素常存在于玉米、小麦、大麦、燕麦和赭曲霉毒素常存在于玉米、小麦、大麦、燕麦和其它原料中其它原料中 GB 13078.2-20
25、19 GB 13078.2-2019 饲料卫生标准饲料卫生标准 饲料中赭曲霉毒素饲料中赭曲霉毒素A A和和玉米赤霉烯酮的允许量玉米赤霉烯酮的允许量 (五)赭曲霉毒素检测方法(五)赭曲霉毒素检测方法 薄层色谱、高效液相色谱、薄层色谱、高效液相色谱、ELISAELISA GB/T 5009.96-2019 GB/T 5009.96-2019 谷物和大豆中赭曲霉毒素谷物和大豆中赭曲霉毒素A A的测定的测定 SN/T 1746-2019 SN/T 1746-2019 进出口大豆、油菜籽和食用植物油中进出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素赭曲霉毒素A A的检验方法的检验方法三、杂色曲霉素(三、杂色曲
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