环境卫生学监测及标本采集方法(69张幻灯片)课件.ppt
- 【下载声明】
1. 本站全部试题类文档,若标题没写含答案,则无答案;标题注明含答案的文档,主观题也可能无答案。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
2. 本站全部PPT文档均不含视频和音频,PPT中出现的音频或视频标识(或文字)仅表示流程,实际无音频或视频文件。请谨慎下单,一旦售出,不予退换。
3. 本页资料《环境卫生学监测及标本采集方法(69张幻灯片)课件.ppt》由用户(三亚风情)主动上传,其收益全归该用户。163文库仅提供信息存储空间,仅对该用户上传内容的表现方式做保护处理,对上传内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知163文库(点击联系客服),我们立即给予删除!
4. 请根据预览情况,自愿下载本文。本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
5. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007及以上版本和PDF阅读器,压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 环境 卫生学 监测 标本 采集 方法 69 幻灯片 课件
- 资源描述:
-
1、 微生物标本的采集微生物标本的采集 医院重点部门的医护人员手、空气、物表的医院重点部门的医护人员手、空气、物表的微生物学监测应在清洁或消毒以后,医疗操作前微生物学监测应在清洁或消毒以后,医疗操作前进行。如遇有医院感染流行或疑似环境污染时,进行。如遇有医院感染流行或疑似环境污染时,则需要立即进行监测,通过环境微生物检测,可则需要立即进行监测,通过环境微生物检测,可以及时发现传染源及传播途径。测定物品污染程以及时发现传染源及传播途径。测定物品污染程度或考核消毒措施的效果,都以样品所含微生物度或考核消毒措施的效果,都以样品所含微生物的数量来计算。因此样品采集要有代表性。送检的数量来计算。因此样品采集
2、要有代表性。送检时间一般不超过时间一般不超过2小时。小时。环境类别环境类别范围范围标准标准空气空气(cfu/m3)物体表面物体表面(cfu/cm2)医务人员手医务人员手(cfu/cm2)I类类 层流洁净手术室、层流洁净层流洁净手术室、层流洁净病房病房1055II类类 普通手术室、产房、新生儿室普通手术室、产房、新生儿室(母婴同室病房)、早产儿室、(母婴同室病房)、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病菌区、烧伤病房、重症监护病房房20055III类类 儿科病房、妇产科检查室、注儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、射室、换药室、治疗室
3、、供应供应室清洁区室清洁区、急诊室、化验室、急诊室、化验室、各类普通病房和房间各类普通病房和房间500105IV类类 传染病房传染病房1515 无菌吸管(无菌吸管(0.5ml、5ml、10ml)、)、L棒、棉拭棒、棉拭子子、规格板、规格板、普通琼脂平板、普通琼脂平板、10ml生理盐水等生理盐水等 1、手卫生监测:、手卫生监测:采样时间:一般情况下每季度监测一次。当采样时间:一般情况下每季度监测一次。当发生医院感染流行、高度怀疑或确定与医务人员发生医院感染流行、高度怀疑或确定与医务人员手的污染有关时,应及时进行监测。常规监测在手的污染有关时,应及时进行监测。常规监测在洗手后从事治疗操作前,特殊监
4、测随时采样。洗手后从事治疗操作前,特殊监测随时采样。采样方法:棉拭子涂布法和直接压印法,采样方法:棉拭子涂布法和直接压印法,棉拭子涂布法棉拭子涂布法 被检人五指并拢,用浸湿灭菌生理盐水的棉被检人五指并拢,用浸湿灭菌生理盐水的棉拭子在医护人员手指曲面从指根到指端往返涂擦拭子在医护人员手指曲面从指根到指端往返涂擦2次,并随之转动采样棉拭子,采完后剪去操作次,并随之转动采样棉拭子,采完后剪去操作者手接触部分,将棉拭子投入者手接触部分,将棉拭子投入10ml灭菌生理盐灭菌生理盐水试管内立即送检。水试管内立即送检。棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂
5、布法 检验方法:检验方法:1 1、将每个采样管敲打、将每个采样管敲打80次或次或1分钟,分钟,2 2、用灭菌吸管取、用灭菌吸管取0.2mlml于营养琼脂平板中,再用无菌于营养琼脂平板中,再用无菌L L棒涂棒涂布整个平板表面,置布整个平板表面,置36 1温箱培养温箱培养24小时观察结果计小时观察结果计算菌落数算菌落数 计算方法:计算方法:菌落数菌落数/C=平均菌落数平均菌落数稀释倍数稀释倍数 采样面积采样面积0.2手消毒效果要求:手消毒效果要求:u卫生手消毒,监测的细菌菌落总数应卫生手消毒,监测的细菌菌落总数应10cfu/cu外科手消毒,监测的细菌菌落总数应外科手消毒,监测的细菌菌落总数应5cf
6、u/c 直接压印法:采样时被检人直接压印法:采样时被检人5指并拢,将平皿上培养指并拢,将平皿上培养基表面直接压贴在手掌根部至指尖曲面基表面直接压贴在手掌根部至指尖曲面1020秒后送检。秒后送检。将所采样本直接置将所采样本直接置36 1温箱培养温箱培养24小时,根据小时,根据平皿面积计算细菌总数。平皿面积计算细菌总数。可根据自身条件选用沉降法(空气暴露法)或空气采可根据自身条件选用沉降法(空气暴露法)或空气采样器法。样器法。采样时间:采样时选在消毒处理后,操作前进行采样,采样时间:采样时选在消毒处理后,操作前进行采样,采样前应关好门窗,在无人走动的情况下,静止采样前应关好门窗,在无人走动的情况下
7、,静止10分钟进分钟进行采样。行采样。沉降法沉降法:A:布点方法:布点方法:室内面积室内面积30m2设四角及中央设四角及中央5点,点,4角的布点位置距墙壁角的布点位置距墙壁1m处,离地面垂直高度为处,离地面垂直高度为80-150cm。室内面积室内面积30m2设内、中、外对角线设内、中、外对角线3点,内、外点的布点位点,内、外点的布点位置距墙壁置距墙壁1m处,离地面垂直高度为处,离地面垂直高度为80-150cm。B:采样方法:将普通营养琼脂平板或血平板(直径:采样方法:将普通营养琼脂平板或血平板(直径9cm)放)放在室内各采样点处,采样高度距地面在室内各采样点处,采样高度距地面1.5m,内外及四
8、角距墙,内外及四角距墙1m,采样时,将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露,采样时,将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5分钟,盖分钟,盖好并将平皿置于好并将平皿置于37 温箱培养,温箱培养,24小时观察结果,并计算小时观察结果,并计算5个个平板的平均菌落数。洁净手术室则暴露平板的平均菌落数。洁净手术室则暴露30分钟。分钟。计算公式:菌落数计算公式:菌落数/m3 50000N ATA平板面积(平板面积(C)T平板暴露于空气的时间(平板暴露于空气的时间(min)N平均菌落数平均菌落数3 3、物体表面的采样、物体表面的采样(1 1)棉拭子采样法)棉拭子采样法 对于平面物体,用对于平面物体,用5cm5cm5c
9、m5cm大小的标准灭菌规格版,放大小的标准灭菌规格版,放在被检物体表面,用用浸湿灭菌生理盐水的棉拭子在规格版在被检物体表面,用用浸湿灭菌生理盐水的棉拭子在规格版内横竖往返均匀涂抹各内横竖往返均匀涂抹各5 5次,并随之转动棉拭子,连续采样次,并随之转动棉拭子,连续采样1 14 4个规格板面积。用无菌剪刀剪去手接触部分,将棉拭子装个规格板面积。用无菌剪刀剪去手接触部分,将棉拭子装入放有入放有10ml10ml灭菌生理盐水试管中。灭菌生理盐水试管中。对于门把手,金属,玻璃等曲面小型物体则采用棉拭子对于门把手,金属,玻璃等曲面小型物体则采用棉拭子直接在物体表面按一定顺序涂抹采样,敷料,卫生纸等一次直接在
10、物体表面按一定顺序涂抹采样,敷料,卫生纸等一次性物品采样时,用无菌法取样品性物品采样时,用无菌法取样品5g5g,放入装有,放入装有10ml10ml灭菌生理灭菌生理盐水试管中。盐水试管中。4 4、透析液微生物监测、透析液微生物监测5 5、使用中消毒剂监测、使用中消毒剂监测常用消毒剂中和剂及其浓度表 消毒剂消毒剂中和剂及其浓度中和剂及其浓度甲醛甲醛亚硫酸钠(亚硫酸钠(0.1%0.5%)氨水氨水双甲酮(双甲酮(0.1%1.0%)+吗啉(吗啉(0.6%1.0%)戊二醛戊二醛甘氨酸(甘氨酸(1.0%);赖氨酸);赖氨酸亚硫酸钠(亚硫酸钠(0.1%0.5%)双甲酮(双甲酮(0.1%1.0%)+吗啉(吗啉(
11、0.6%1.0%)过氧乙酸过氧乙酸硫代硫酸钠(硫代硫酸钠(0.1%0.5%)含氯消毒剂类含氯消毒剂类硫代硫酸钠(硫代硫酸钠(0.1%1.0%)季铵盐类季铵盐类吐温吐温80(0.5%3.0%)卵磷脂(卵磷脂(0.3%)硫代硫酸钠(硫代硫酸钠(0.1%0.5%)亚硫酸钠(亚硫酸钠(0.1%0.5%)碘(溴)制剂碘(溴)制剂亚硫酸钠(亚硫酸钠(0.1%0.5%);卵磷脂();卵磷脂(0.1%0.3%)硫代硫酸钠(硫代硫酸钠(0.1%);半胱氨脂();半胱氨脂(0.1%)酚类酚类吐温吐温80(1%10%);卵磷脂();卵磷脂(0.1%0.3%)氯已定氯已定卵磷脂(卵磷脂(1.0%2.0%)汞制剂汞制剂
12、硫代硫酸钠;亚硫酸钠;半胱氨脂(硫代硫酸钠;亚硫酸钠;半胱氨脂(0.1%)醇类醇类吐温吐温80酸类酸类碱类碱类碱类碱类酸类酸类结果判断结果判断6 6、压力蒸汽灭菌效果监测、压力蒸汽灭菌效果监测效果判定阳性对照阳性对照阴性对照阴性对照试验管试验管结果结果黄黄紫紫紫紫灭菌认可灭菌认可黄黄紫紫黄黄灭菌失败灭菌失败7 7、内镜消毒灭菌效果监测、内镜消毒灭菌效果监测u采样时间:消毒、灭菌后,使用前。采样时间:消毒、灭菌后,使用前。u采样方法:监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注采样方法:监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取射器抽取10ml10ml含相应中和剂的缓冲液,从待检内镜活检含相应中和剂的
13、缓冲液,从待检内镜活检口注入,用无菌试管从活检出口收集,及时送检。口注入,用无菌试管从活检出口收集,及时送检。u检测方法:将送检液充分震荡,取检测方法:将送检液充分震荡,取0.5ml0.5ml,加入,加入2 2只直只直径径90mm90mm无菌平皿,每个平皿分别加入已经熔化的无菌平皿,每个平皿分别加入已经熔化的4545左右左右营养琼脂营养琼脂151518ml18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,于,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,于3535培养培养4848小时后计数。小时后计数。u细菌菌落数细菌菌落数/件件2 2个平皿菌落数平均值个平皿菌落数平均值208 8、医疗用品的监测、医疗用品的监测u包括一次性医
14、疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。u采样时间:在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。采样时间:在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。u采样方法:操作人员在认真清洁消毒手后,在净化台内采样方法:操作人员在认真清洁消毒手后,在净化台内用无菌的方法,将拟检测的医疗用品:缝合针、针头、手用无菌的方法,将拟检测的医疗用品:缝合针、针头、手术刀片等小件物品投入术刀片等小件物品投入5ml5ml灭菌的生理盐水或营养肉汤内,灭菌的生理盐水或营养肉汤内,对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌生理盐水的棉拭子
15、反复涂擦采样,并将棉拭子投入生理盐水的棉拭子反复涂擦采样,并将棉拭子投入5ml5ml灭菌灭菌的生理盐水溶液中。的生理盐水溶液中。u检测方法:将采样管振打检测方法:将采样管振打8080次,用无菌吸管吸取次,用无菌吸管吸取1ml1ml待检待检样品于灭菌平皿内,加入已融化的样品于灭菌平皿内,加入已融化的4545左右的营养琼脂左右的营养琼脂151518ml18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置3737温箱培养温箱培养4848小时,观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。小时,观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。微生物让人类步步为营,微生物让人类步步为营,我们应该追求:我们
16、应该追求:“准确的病原学诊断准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提是准确的病原学诊断的前提基本原则基本原则1.1.及时采集微生物标本作病原学检查及时采集微生物标本作病原学检查2.2.在抗菌药物使用前采集标本在抗菌药物使用前采集标本3.3.采样时严格执行无菌操作采样时严格执行无菌操作4.4.采样后立即送检采样后立即送检5.5.棉拭子标本宜用运送培养基棉拭子标本宜用运送培养基7.7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂.8.8.送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注
17、明来源和检验目的正确正确留取细菌培养的临床标本留取细菌培养的临床标本v 血液标本血液标本v 血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。正常人的血液是无菌的,如从患者血液中检出细菌,一般正常人的血液是无菌的,如从患者血液中检出细菌,一般应视为病原菌(排除采集标本或其他操作过程污染),提应视为病原菌(排除采集标本或其他操作过程污染),提示有菌血症或败血症。示有菌血症或败血症。1 1、采血时间及次数一般应在抗生素治疗前,发热初期、采血时间及次数一般应在抗生素治疗前,发热初期或高峰时抽血。伤寒患者应在发热一星期内抽血。化脓性或高峰时抽血。伤寒患
18、者应在发热一星期内抽血。化脓性脑膜炎应在发热脑膜炎应在发热1 12 2天内抽血,亚急性心内膜炎的患者除天内抽血,亚急性心内膜炎的患者除在发热期采血外,要多次抽血(在发热期采血外,要多次抽血(2424小时内小时内3 3次)和增次)和增加抽血量(可增至加抽血量(可增至1010毫升)。毫升)。2 2、抽血部位及抽血量以无菌方法从患者肘静脉、股动、抽血部位及抽血量以无菌方法从患者肘静脉、股动脉采血。采血量以培养基的脉采血。采血量以培养基的1/101/10为宜,成人一次采血为宜,成人一次采血5 51010,婴儿为,婴儿为1 12 2,血液抽出后,立即以无菌手续,血液抽出后,立即以无菌手续注入血培养瓶,充
19、分混合后送检。注入血培养瓶,充分混合后送检。v采血培养前质量保证采血培养前质量保证:v静脉穿刺程序静脉穿刺程序 v1.70%1.70%酒精擦拭静脉穿刺点酒精擦拭静脉穿刺点 3030秒钟秒钟v2.1%2.1%2%2%碘酊碘酊3030秒或秒或10%10%碘伏消毒碘伏消毒6060秒秒,从穿刺点从穿刺点向外画圈消毒向外画圈消毒,直径直径3cm3cmv3.70%3.70%酒精脱碘酒精脱碘v培养瓶接种程序培养瓶接种程序 v1.70%1.70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待待6060秒秒v2.2.用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。后
20、注入血液。v1.1.皮肤消毒尤为重要,因为其主要的病原菌为皮皮肤消毒尤为重要,因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性的葡萄球菌肤定植菌如凝固酶阴性的葡萄球菌 2.在穿刺前或穿刺期间,防止静脉滑动,用戴乳在穿刺前或穿刺期间,防止静脉滑动,用戴乳胶手套固定静脉,不可接触静脉穿刺点胶手套固定静脉,不可接触静脉穿刺点v3.3.用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次穿刺,应换针头)直接注入血培养瓶。第二次穿刺,应换针头)直接注入血培养瓶。v血培养瓶在采血接种后必须马上送检血培养瓶在采血接种后必须马上送检v血培养瓶在采血接种后在室温中不得超过数小时血培养
21、瓶在采血接种后在室温中不得超过数小时v血培养瓶不得在采血接种后放入冰箱或冷冻血培养瓶不得在采血接种后放入冰箱或冷冻正确正确留取细菌培养的临床标本留取细菌培养的临床标本v 骨髓标本骨髓标本v 正常人的骨髓是无菌的,若从患者骨髓中检出细菌(排除正常人的骨髓是无菌的,若从患者骨髓中检出细菌(排除污染)提示细菌性骨髓炎或菌血症、败血症。污染)提示细菌性骨髓炎或菌血症、败血症。v 标本采集标本采集v 1 1、标本采集部位和时间一般用骨髓穿刺针从髂骨采集、标本采集部位和时间一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本,最好在用药前,发热初期或高热期采集,阳性骨髓标本,最好在用药前,发热初期或高热期采集,阳性检出率较
22、高。检出率较高。v 2 2、标本采集注意事项:严格无菌操作。标本采集后、标本采集注意事项:严格无菌操作。标本采集后立即注入血培养瓶,送检。立即注入血培养瓶,送检。正确正确留取细菌培养的临床标本留取细菌培养的临床标本 我国痰细菌培养现状我国痰细菌培养现状 标本送检率低标本送检率低v结果重复性差结果重复性差v报告速度慢报告速度慢v感染菌与污染菌不易区分感染菌与污染菌不易区分v药敏结果与治疗反应存在差距药敏结果与治疗反应存在差距咳痰标本咳痰标本正确正确留取细菌培养的临床标本留取细菌培养的临床标本v咳痰标本不合格,你退检吗?咳痰标本不合格,你退检吗?v如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于如果低倍视野下鳞状上
23、皮细胞大于1010个,应不做个,应不做或仅在特殊要求时做培养。或仅在特殊要求时做培养。v如做培养,报告中注明如做培养,报告中注明“镜检结果表明标本口咽镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显分泌物污染明显”。v复旦大学中山医院的做法复旦大学中山医院的做法 痰液外观:脓性,粘脓,粘液,水样痰液外观:脓性,粘脓,粘液,水样.痰标本质量评价:合格,不理想(建议重送)痰标本质量评价:合格,不理想(建议重送)临床上约半数咳痰标本不合格!临床上约半数咳痰标本不合格!正确正确留取细菌培养的临床标本留取细菌培养的临床标本v 痰标本痰标本v 痰标本的细菌学检查对于呼吸道感染的诊断有重要意义。痰标本的细菌学检查对于呼吸
展开阅读全文