药品生产企业GMP培训环境监测课件.ppt

1、1环境监测一、环境监测基本概念二、环境监控方案的制定三、法规要求和检查重点环境监测-文献USP1116USP1115Sterile Drug Products Produced by Aseptic ProcessingPDA-13 Fundamentals of a Microbiological Environmental Monitoring ProgramISO-14661-1GMP 附录1 GB/T 16292 1629316294EU GMP环境监测概念目的：环境监测可帮助建立一个有针对性的、易于管理和有预防功能的程序。为确保稳定的生产环境，全面的环境控制程序应包括以下方面：a.合

2、理的厂房设计和维护 b.文件系统 c.已验证/确认的卫生清洁/消毒程序 d.可靠的过程控制 e.良好的设备管理和保养 f.进入洁净区的有效控制 g.有效的培训，证书/资格以及评估程序 h.物料及设备的质量保证 环境监测是一种评估对生产环境控制的有效性的工具。环境监测应基于科学合理的原则设计和执行环境监测程序，并与生产所在地的政府法规要求相一致。如果是为了供应国际市场，应以最严格的要求作为环境监测的基本原则（结合欧盟标准和FDA标准）环境监测环境监测程序应包括有活性和无活性的空气中悬浮微粒的环境监测程序应包括有活性和无活性的空气中悬浮微粒的日常监测。日常监测。来源于人体的活菌与皮肤的脱落物有关，

3、因此无活性微粒来源于人体的活菌与皮肤的脱落物有关，因此无活性微粒的数量高可能指示活性数量的增加。的数量高可能指示活性数量的增加。人是环境中活性和无活性微粒的主要来源。人是环境中活性和无活性微粒的主要来源。除满足法规中要求的动态监测之外，静态监测也可能是必除满足法规中要求的动态监测之外，静态监测也可能是必需的。需的。环境监测人类皮肤有1.2million/m2 微生物走能产生5，000，000个颗粒环境监测环境监测项目空气粒子监测微生物监测沉降菌监测浮游菌监测表面微生物监测环境监测-空气粒子监测生产过程中有暴露过程的产品，应证明环境中的潜在污染是受控的。0.5um或更大的微粒通常作为环境污染的指

4、标。对5.0um微粒的监测也可包括在内。微粒的尺寸和数量可同时测量。除便携式微粒计数器外，已研制出的监测系统可永久安装在生产区域，连续监测生产过程，并有集中数据存储和报警功能。环境监测-空气粒子监测激光尘埃粒子计数器基本原理光学传感器的探测激光经尘埃粒子散射后，被光敏元件接收并产生脉冲信号，该脉冲信号被输出并放大，然后进行数字信号处理，通过与标准粒子信号进行比较，将对比结果用不同的参数表示出来。环境监测-微生物监测空气中的微生物通常与固体或液体微粒有关。生物体可能粘附尘粒或其它小载体，如果没有附着，也存在自由流动的微粒悬浮在空气中。环境中主动气体取样是为了证明可能存在的活性悬浮微粒是受控的。个

5、别国家要求使用平皿暴露法和主动空气取样法。空气中悬浮微粒的监测程序可能要求使用主动和被动空气取样两种方法。（即浮游菌取样和沉降菌取样）环境监测-微生物监测浮游菌取样器原理 空气通过涡轮被吸入装置中，被吸在一个培养基平板的表面。培养后可直接计数轻便灵活，独立的电源带孔的盖板可蒸汽灭菌可测量大量空气使用标准培养基板可测量气流 需要使用辅助设备，辅助设备主体不能灭菌使用辅助设备，占用关键空间；监测时间段，关键区域多点监测可能会导致干扰次数增加。环境监测-微生物监测沉降菌监测 使用有固体营养培养基的细菌培养皿，细菌培养皿直接暴露在环境中。空气中的微粒沉积在琼脂的表面，培养后可直接计数。使用简便，不需要

6、提供能量经济可沿着灌装线放置可连续监测，通过更换培养皿延长监测时间如果暴露时间太长，平皿会变干。微生物数量与空气体积无关。沉积的微粒受微粒大小、温度和通过其表面的气流/空气量的影响。环境监测-微生物监测所使用培养基的类型可能影响取样点代表菌群的检测。培养基中可加入中和剂，使得经过化学消毒剂处理的表面钝化。1.1.接触平板法接触平板法通常使用接触平板是因为其使用方便，并可提供定量结果。一般平板的直径是50mm，并且是经填充的，因此培养基形成半球型。培养基的表面可被压成一个平坦的表面，因而采样面积大约25cm。培养后计数。缺点：缺点：不适用于不规则表面 如果培养基是湿的，可能发生微生物聚集 培养基

7、的残留物必须从取样点移走环境监测-微生物监测擦拭法擦拭法此方法适用于无法使用接触平板的设备和不规则表面。擦拭物的类型包括棉花、达克龙(聚酯纤维)和藻酸钙。藻酸钙的纤维可以溶化，因此可将所有收集的微生物释放到溶液中。缺点：缺点：方法和取样可能影响结果需经处理才能培养样品3.3.表面冲洗法表面冲洗法此方法最适用于需确定内表面生物负载的大表面积区域。无菌水是常用的用于冲洗内表面的液体；然后可通过膜过滤法收集和检验。缺点：缺点：多数设备不适用需大量操作方法和取样过程可能影响结果环境监测-微生物监测浮游菌浮游菌悬浮粒子悬浮粒子被动采样（概率），时间较长，一般静态选择较多，动态适合长时间操作的区域表面取样

8、后需要清洁，动态在生产后取样，滞后采样关键，代表性强，理论上悬浮粒子一定程度上代表微生物，不适用与产尘产湿操作或者房间一般情况下所有监测项目都会做主动采样，人工采样时间较短，短暂性操作优先选择，干扰次数多根据评估选择沉降菌沉降菌表面微生物表面微生物关键关键A级、级、B级级非无菌区非无菌区环境监测-方案洁净区应制定系统的环境监测方案：包括动态监测和静态监测。产品类型 生产过程 设施/工艺设计 生产密度 法规要求 人为干扰/人员操作 环境监测历史数据如何进行环境监测？环境监测-方案01020304取样点的选择取样项目的选择取样频率和周期监测结果统计分析环境监测-方案取样位置选择时考虑因素：哪些部位

9、的微生物污染最可能对产品质量造成不良影响？在生产过程中，什么地点最容易长菌？哪些地方是清洁、消毒或灭菌时最难覆盖/接触或最难奏效的部位？什么活动会导致污染的扩散？在某一部位的取样操作，足以导致测试数据的差错或污染产品？环境监测-方案取样项目选择时考虑因素：各取样项目的优缺点活动关键性操作时长空间位置采样干扰环境监测-方案取样周期和频率考虑因素：单一取样方案不适合于所有环境。能够确定潜在的系统缺陷。成本与执行每个点的检验频率可以少于系统或区域的检验频率。在多种情况下，批生产时进行监测可以满足常规区域监测的要求。历史数据环境监测-方案监测结果的统计与分析：设定标准、行动限和警戒限 一般的，标准必须

10、符合官方或行业指南，行动限和警戒限可依据环境监测数据的历史分析制定。一旦建立了限值水平，应作为日常趋势分析的一部分定期进行回顾。限值水平不是仅影响产品的质量，也可作为确定变化的标志，因此可以在产品质量受到不良影响前采取纠正措施。为了确保空气的洁净度，及早发现偏差，对于日常的监测数据进行趋势分析，每个月和每年应对悬浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面微生物的监测结果进行统计分析和评价。对于数据的显著波动或菌群的改变所产生影响的分析，应基于有资质的人所作出的判断。环境监测-方案环境监测方案制定案例（图示：某车间环境监测风险评估内容目录）环境监测-方案1102车间环境监测风险评估（风险评估案例）XXX车间环

11、境监测风险评估.docx环境监测-法规要求与检查重点悬浮粒子的要求：附录1 第九、十条1、A级区确认时的采样量不少于1m32、洁净区的动态监测悬浮粒子的动态监测关键操作的全过程，对A级区进行粒子监测，持续的A级粒子监测A级区的监测频率、取样量，及时发现人为干预、偶发事件及任何系统的破坏B级区：类似于A级区，采样频率、采样量可以调整C级区：质量风险管理原则确定D级区：一般不作要求（法规：必要时）（法规：必要时）自净时间应达到规定要求（15-20min自净）大粒子沉降（采样管的长度和弯曲）灌装或分装头前的粒子超标，产尘/产湿区域的粒子监测。环境监测-法规要求与检查重点取样量和取样点ISO14644

12、-1 B.4.2 节有明确的采样量的计算公式：采样量（升）=(20/级别中最大粒子限度）1000，显然对于A 级，采样量为(20/20)1000=1 米3 从上式中可见，级别要求越低，取样量就越小 级别A级B级C级D级按5um计算静态1000L689.66L6.90L0.69L注：GMP实施指南实验室与质量控制分册（P280规定单次采样量不小于28.3L）最少采样量L/次洁净级别10010 000100 000300 0000.5m5.662.832.832.835m8.58.58.58.5GB/T16292 5.4.3条款（P7）环境监测-法规要求与检查重点取样量和取样点GB/T 16292

13、-2010面积（面积（m2）洁净级别洁净级别10010000100000102322102042220408224010016421002004010320040080206400100016040131000200040010032200080020063取样点数由B.1.1公式：取样点数 A为洁净区面积，例如10米5米的区域，取样点应为8（取整数）ANlISO14644-1和GB/T 16292-2010环境监测-法规要求与检查重点取样点：GB/T 16292-2010布置要求：静态监测：动态监测：结合风险制定环境监测-法规要求与检查重点取样量和取样点ISO14644-1:2015 环境监

14、测-法规要求与检查重点取样量和取样点ISO14644-1:2015 环境监测-法规要求与检查重点取样量和取样点GB/T 16294-2010（沉降菌）沉降菌的结果和限值环境监测-法规要求与检查重点取样量和取样点GB/T 16294-2010（浮游菌）注意采样体积和结果单位之间的换算环境监测-法规要求与检查重点无菌区使用预制平板：一般采用三层包装形式去除最外层包装 放入传递窗开启紫外灯消毒或用酒精喷洒外表面消毒处理 一般进入无菌区要从一般区传到C级，C级传到B级。没传递一次做一次上述操作。根据规定使用消毒剂。环境监测-法规要求与检查重点 使用前脱去最后一层包装 在使用前在平皿上做好标记。标记在带

15、培养基的一侧。在监测点放置好平皿之后立即填写记录。注意“做标记”对无菌区的污染。采样结束后，收回培养皿，将培养皿放置在无菌容器中。在记录上填写收回时间。环境监测-法规要求与检查重点环境监测平皿/棉签自制外购平皿的促生长试验和适用性检查、记录平皿的使用效期平皿在使用过程中因实际使用环境的区别以及操作方法的区别，增加额外的使用有效性确认。棉签采样结果环境监测-法规要求与检查重点环境监测操作检查1.动、静态监测时间控制 动态：人员操作、设备运转、对产品的影响 静态：清洁消毒方法、消毒剂使用以及其使用频率的有效性2.是否按照方案执行检查 周期执行 监测项目、区域和点数量的执行（过程中和确认）3.监测结

16、果 过程中的污染行为（平皿领用、传递、使用和转移、废弃、结果观察）观察计数（菌落计数器）结果统计分析环境监测-法规要求与检查重点环境监测操作检查4.环境监测真实性 公司采购培养皿数量 培养皿领用、销毁、培养数量、环境监测记录使用培养皿数量账目一致性 现场检查时根据环境监测记录核实培养箱中的培养皿数量5.现场操作 现场观察培养皿数量，回来核对 现场观察操作环境监测时间，核对和记录是否能对上 根据环境监测记录对照录像进行核对等6.环境监测仪器的数据完整性 目前我们还没做好，正在准备风险评估环境监测-法规要求与检查重点停电停电设备维修设备维修超标超标/警戒警戒/行动限行动限改造改造停产停停产停/不停空调不停空调