细菌耐药监测的质量控制课件.ppt
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- 细菌 耐药 监测 质量 控制 课件
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1、细菌耐药监测的质量控制细菌耐药监测的质量控制湖南省临床检验中心赵艳华 细菌耐药性监测的的意义:监测病源微生物对抗生素的敏感性和耐药性,避开其耐药机制,指导合理用药 抓好细菌耐药性监测中的质量控制,是保证监测数据的准确性、可靠性的至关重要的环节 各成员单位进行耐药监测工作时需严格执行质量控制措施。外部质量控制体系 内部质量控制体系 内部质量控制体系:各成员单位临床微生物室(科)要建立完善的质量管理体系,建立健全室内质量控制体系;外部质量控制体系:各成员单位定期参加国家或省临床检验质量控制中心的质控考核并合格。质量控制概念的引入 历史上,现代风险管理的概念引入实验室之后,就以质量控制的形式出现。狭
2、义上指的是一项持续的、系统性的评估工作来确保终产品的一致性根据可接受的程度:事先建立好的允许限度下的精确度和准确度。细菌耐药性监测的内部质量控制体系细菌耐药性监测的内部质量控制体系 主要目标主要目标 保证实验结果的保证实验结果的准确性准确性、可可靠性靠性和和可重复性可重复性 实验室应对分析前、分析中、分析后实验室应对分析前、分析中、分析后三个阶段实行全面质量管理三个阶段实行全面质量管理 标本分析前的质量控制:标本分析前的质量控制:微生物学特殊性微生物学特殊性得到正确分析结果的得到正确分析结果的基础基础样本质量控制样本质量控制 样本质量是影响细菌学实验室结果的关键环节样本质量是影响细菌学实验室结
3、果的关键环节 实验室应给标本采集者提供标本采集和运送的指实验室应给标本采集者提供标本采集和运送的指导手册导手册 实验室应持续监测标本采集和运送过程实验室应持续监测标本采集和运送过程 实验室应对标本质和量(包括体积和数量)进行实验室应对标本质和量(包括体积和数量)进行监测监测样本质量控制样本质量控制 标本采集:标本采集:采集部位、采集数量和体积、采集采集部位、采集数量和体积、采集时机、污染时机、污染 标本保存:标本保存:保存条件、保存时间保存条件、保存时间 标本运输:标本运输:防止污染防止污染 标本验收:标本验收:标本采集时间、标本量、标本评估标本采集时间、标本量、标本评估 标本分离接种:标本分
4、离接种:病理成分的选取、选择合适的病理成分的选取、选择合适的分离培养基和方式分离培养基和方式收集和运送微生物标本的容器要求1 1、无菌、无菌2.2.无防腐剂无防腐剂3.3.足够大足够大4.4.安全严密安全严密5.5.不易碎不易碎6.6.运送培养基运送培养基 加强无生长因子或保持特定菌的培养加强无生长因子或保持特定菌的培养基避免用木质的棉试子对细菌有毒害基避免用木质的棉试子对细菌有毒害收集细菌实验的标本避免污染避免污染 抽血前,皮肤必须经过严格消毒。抽血前,皮肤必须经过严格消毒。如果可能,化脓性损伤应通过皮肤抽血,因为这如果可能,化脓性损伤应通过皮肤抽血,因为这种方法比黏膜更容易消毒液体标本比拭
5、子标本更种方法比黏膜更容易消毒液体标本比拭子标本更适合检测。适合检测。抽取物用注射器送到实验室之前应先把针头去掉,抽取物用注射器送到实验室之前应先把针头去掉,注射器口用安全帽封好。注射器口用安全帽封好。开放伤口,擦去表层分泌物,防止其它细菌干扰。开放伤口,擦去表层分泌物,防止其它细菌干扰。用拭子取伤口边缘处用拭子取伤口边缘处运送时间及运输贮存温度 运送时间运送时间-短,运输贮存温度因细菌不同而异短,运输贮存温度因细菌不同而异 标本因冷藏及标本因冷藏及pHpH改变或在氧气中暴露,可能减少很多种细改变或在氧气中暴露,可能减少很多种细菌的存活时间菌的存活时间 脑膜炎球菌,淋病奈瑟菌,流感嗜血杆菌,肺
6、炎链球菌,脑膜炎球菌,淋病奈瑟菌,流感嗜血杆菌,肺炎链球菌,布氏杆菌,沙门菌,志贺氏菌,霍乱弧菌,空肠弯曲菌及布氏杆菌,沙门菌,志贺氏菌,霍乱弧菌,空肠弯曲菌及厌养菌。厌养菌。对环境敏感菌株在运送中数量快速减少时,如果运送时间对环境敏感菌株在运送中数量快速减少时,如果运送时间太长,其它菌则成倍增长,这给需定量评价数的培养造成太长,其它菌则成倍增长,这给需定量评价数的培养造成困难(尿标本),需要寻找的细菌可同其它菌一起过度生困难(尿标本),需要寻找的细菌可同其它菌一起过度生长。长。需进行细菌学检测的所有标本,应在收集后需进行细菌学检测的所有标本,应在收集后2 2小时内小时内送到送到实验室实验室
7、各种标本的运送及贮存条件各种标本的运送及贮存条件标本标本运送运送贮存温度贮存温度血血血培养瓶血培养瓶 室温或室温或37 脓脓、脑脊液脑脊液、胸水、胸水、心包液心包液、腹水、关节腹水、关节滑液滑液、鼻窦分泌物鼻窦分泌物 短时间内运送短时间内运送:标本在标本在带帽的注射器内保证厌带帽的注射器内保证厌氧条件氧条件;长时间运送:;长时间运送:使用运送培基使用运送培基室温,不用培养,避免室温,不用培养,避免冷藏冷藏支气管肺泡灌洗液、痰,支气管肺泡灌洗液、痰,其它分泌物其它分泌物 、便、便 立刻送检(立刻送检(2-3小时)小时)冷藏冷藏眼眼、耳、耳 、嘴、咽、嘴、咽、鼻、尿道、生殖道鼻、尿道、生殖道、直肠
8、、直肠、伤口伤口拭子放在运送培养基拭子放在运送培养基(4小时运送时间小时运送时间)室温,不培养室温,不培养痰标本合格标准痰标本合格标准 痰标本留取后应先涂片痰标本留取后应先涂片,进行革兰染色进行革兰染色镜检合镜检合格后格后再接种再接种痰标本鳞状上皮细胞白血球细菌种类合格=101-3种不合格=25/低倍3种拒收标本指标 除非不能再采集的标本,否则不予检测;如果培养或检测,要对结果进行说明。书写错误 容器问题 干燥试子 厌养菌容器无菌、无防腐剂、足够大、安全严密不易碎、运送培养基、无生长因子或保持特定菌的培养基、避免用木质的棉试子对细菌有毒害细菌学实验室检测方法确认细菌学实验室检测方法确认临床细菌
9、学实验室选择的检测方法临床细菌学实验室选择的检测方法 准确性和重复性好准确性和重复性好 检测结果的临床相关性好检测结果的临床相关性好 更换新的检测方法更换新的检测方法 应证明其准确度和精密度良好应证明其准确度和精密度良好 应在工作人员具备相应的操作能力和具备研判和应在工作人员具备相应的操作能力和具备研判和报告结果的能力后进行报告结果的能力后进行细菌学实验室检测方法确认细菌学实验室检测方法确认不需确认的试验方法不需确认的试验方法 SFDA批准的一般试验不需进行确认试验批准的一般试验不需进行确认试验 单个试剂和培养基通过日常质控进行检测,不需单个试剂和培养基通过日常质控进行检测,不需进行确认试验进
10、行确认试验 需确认的试验方法需确认的试验方法 如抗菌药物敏感试验如抗菌药物敏感试验 血培养血培养 非培养的检测方法非培养的检测方法 SFDA批准试验方法的改良方法批准试验方法的改良方法 未经未经SFDA批准的方法批准的方法 自己开发的方法自己开发的方法细菌学实验室检测方法确认细菌学实验室检测方法确认确认的内容确认的内容 实验室可否获得与制造商相同的检测结果实验室可否获得与制造商相同的检测结果 非商品检测方法应与可接受的参考方法进行比较非商品检测方法应与可接受的参考方法进行比较 应评价方法的敏感性、特异性、准确性、精密度应评价方法的敏感性、特异性、准确性、精密度和预测值和预测值细菌学实验室检测方
11、法确认细菌学实验室检测方法确认方法确认需方法确认需 至少至少2020个阳性标本和个阳性标本和20-5020-50个阴性标本个阴性标本 至少检测至少检测12-1512-15个种的个种的5050株菌株菌 与参考方法比较,新方法的敏感性和特异性应与参考方法比较,新方法的敏感性和特异性应95%95%经方法学确认的试验方法,在实践中应记录其质经方法学确认的试验方法,在实践中应记录其质控资料、人员能力、控资料、人员能力、PTPT结果、仪器校准、临床相结果、仪器校准、临床相关性等资料,达到临床确认关性等资料,达到临床确认分析中质量控制分析中质量控制 常规仪器和设备常规仪器和设备 成品商业培养基(诊断抗血清)
12、、试剂成品商业培养基(诊断抗血清)、试剂设备的质量控制设备的质量控制 预防性维护与保养可保证仪器的精确性和使用寿预防性维护与保养可保证仪器的精确性和使用寿命命 按照制造商的建议,有计划的定期检查可减少仪按照制造商的建议,有计划的定期检查可减少仪器故障和维修需要器故障和维修需要 明确维护保养的责任是保障设备完好的前提明确维护保养的责任是保障设备完好的前提 商家的支持是保障设备完好的后盾商家的支持是保障设备完好的后盾设备的质量控制设备的质量控制 新设备的检查,包括如安全性、配件、有无破损新设备的检查,包括如安全性、配件、有无破损等等 新设备比对实验(与旧设备比对或与参考设备或新设备比对实验(与旧设
13、备比对或与参考设备或方法比对)方法比对)设备运行记录、维护保养记录、维修记录设备运行记录、维护保养记录、维修记录 制定和执行标准操作规程制定和执行标准操作规程 培训操作人员培训操作人员设备的质量控制设备的质量控制 培养箱、冰箱、水浴箱培养箱、冰箱、水浴箱 每天有温度记录每天有温度记录 二氧化碳培养箱二氧化碳培养箱 每天检查每天检查CO2CO2含量含量 高压灭菌器和干热灭菌器高压灭菌器和干热灭菌器 应有温度记录装置和应有温度记录装置和灭菌指示剂灭菌指示剂 厌氧罐或厌氧箱厌氧罐或厌氧箱 美篮为指示剂,无氧时应无色美篮为指示剂,无氧时应无色 生物安全柜生物安全柜 更换滤网由专门技术人员进行更换滤网由
14、专门技术人员进行 细菌培养仪细菌培养仪 对每批培养瓶进行生长试验。保证对每批培养瓶进行生长试验。保证在有效期内使用在有效期内使用 微生物鉴定仪微生物鉴定仪 及时更新系统操作软件及时更新系统操作软件 使用细菌鉴定仪要注意维持比色的清洁,不要在比色板上方添加试剂;取、放鉴定条要小心,以免打翻溢出;比 色完毕即将比色板送入机体内。定期请工程师校对比色、比浊系统,也可用标准菌株作质控对照 仪器设备质量控制标准仪器设备质量控制标准 设备 控制标准 允许范围 高压灭菌器 121 121 孵育箱 35 1 水温箱 37 1 冰箱冰箱 4 2 低温冰箱 -20 5 二氧化碳培养菌二氧化碳培养菌 5%10%10
15、%培养基质量控制 1 1 一般性状一般性状 培养基的一般性状包括外观、厚度、培养基的一般性状包括外观、厚度、pH pH 值等值等 液体培养基、固体培养基液体培养基、固体培养基2 2 无菌试验无菌试验 压力蒸汽灭菌后倾注的固体培养基压力蒸汽灭菌后倾注的固体培养基 灭菌后无菌操作分装的液体培养基灭菌后无菌操作分装的液体培养基 无需高压灭菌只需煮沸消毒的选择性培养基无需高压灭菌只需煮沸消毒的选择性培养基培养基名称培养基名称 质控菌株质控菌株 ATCCATCC 鉴定标准鉴定标准 血平板血平板 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌化脓性链球菌化脓性链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌 25923259
16、231961519615630563052592225922 中度到大量生长中度到大量生长生长,生长,-溶血溶血生长,生长,溶血溶血生长生长 巧克力平板巧克力平板 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 102111021113090130904309643096 生长生长生长生长生长生长 伊红美蓝平伊红美蓝平板板 鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌大肠埃希菌大肠埃希菌粪肠球菌粪肠球菌 140281402825922259222921229212 生长,无色到琥珀色菌落生长,无色到琥珀色菌落生长,蓝黑菌落,金属光泽生长,蓝黑菌落,金属光泽部分抑制部分抑制 麦康凯平板麦康凯平
17、板 大肠埃希菌大肠埃希菌奇异变形杆菌奇异变形杆菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌粪肠球菌粪肠球菌 2592225922124531245314028140282921229212 生长,红色菌落生长,红色菌落生长,生长,无色菌落,迁徒现象部分抑制无色菌落,迁徒现象部分抑制生长,无色菌落生长,无色菌落部分抑制部分抑制 11 种常用培养基的质量鉴定种常用培养基的质量鉴定SS SS 平板平板 鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌福氏志贺菌福氏志贺菌粪肠球菌粪肠球菌大肠埃希菌大肠埃希菌 1402814028120221202229212292122592225922 生长,无色菌落,有或无黑心生长,无色菌落,有或无黑心生
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