维生素C注射剂的含量分析课件.ppt
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1、维生素维生素C C注射剂的含量分析注射剂的含量分析钱莺钱莺 沈红霞沈红霞 杨优杨优 郎旭东郎旭东 王勇王勇 实验目的实验目的 根据含量分析,从自主设计的处方中,选出最佳处根据含量分析,从自主设计的处方中,选出最佳处方。方。维生素维生素C C注射液注射液检查检查 PHPH值值:应为应为5.0-7.0 5.0-7.0 颜色颜色:取本品取本品,加水稀释成每加水稀释成每1ml1ml中含维生素中含维生素C50mgC50mg的溶的溶液液,照紫外可见分光光度法照紫外可见分光光度法,在在420nm420nm的波的波 长初测定吸长初测定吸光度光度,不得过不得过0.06.0.06.细菌内毒素细菌内毒素:取本品取本
2、品,依法检查依法检查,每每1mL1mL中含内毒素应小中含内毒素应小于于2.5EU.2.5EU.装量装量 装量差异装量差异 可见异物可见异物 不溶性微粒不溶性微粒 无菌无菌 含量分析方法简介含量分析方法简介 碘量法碘量法 2 2,6-6-二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法 菲林菲林B B近红外分光光度法近红外分光光度法 紫外分光光度法紫外分光光度法 旋光法旋光法 双波长薄层扫描法双波长薄层扫描法*HPLCHPLC法法*实验采用方法 碘量法碘量法 实验方法实验方法 精密称取注射剂适量,加水精密称取注射剂适量,加水50ml50ml稀释至稀释至4mg/mL4mg/mL与丙与丙酮酮2ml,2ml,摇匀摇匀,放
3、置放置5min,5min,加稀醋酸加稀醋酸4ml4ml与与 淀粉指示液淀粉指示液1ml,1ml,用碘滴定液用碘滴定液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定滴定,至溶液显蓝色并至溶液显蓝色并持续持续3030秒不褪色秒不褪色.每每1ml1ml碘滴定碘滴定(0.05mol/L)(0.05mol/L)相当于相当于8.806mg8.806mg的维生素的维生素C C。2,6-二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法 实验方法实验方法 精密量取注射液适量(约相当于维生素精密量取注射液适量(约相当于维生素C50mgC50mg),),置于置于100mL100mL容量瓶中,加偏磷酸容量瓶中,加偏磷酸-醋酸试液醋酸试
4、液20mL20mL,用水,用水稀释至刻度,摇匀;精密量取稀释液适量(约相当于稀释至刻度,摇匀;精密量取稀释液适量(约相当于维生素维生素C2mgC2mg)置)置50mL50mL锥形瓶中,加加偏磷酸锥形瓶中,加加偏磷酸-醋酸试醋酸试液液5mL5mL,用,用2 2,6-6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液现玫瑰二氯靛酚滴定液滴定,至溶液现玫瑰红色,并持续红色,并持续5S5S不褪;另取偏磷酸不褪;另取偏磷酸-醋酸试液醋酸试液5.5mL5.5mL,加水加水15mL15mL,用,用2 2,6-6-二氯靛酚滴定液滴定,作空白试二氯靛酚滴定液滴定,作空白试验校正。以验校正。以2 2,6-6-二氯靛酚滴定液浓度体积以
5、及相应二氯靛酚滴定液浓度体积以及相应维生素维生素C C滴定度计算。滴定度计算。实验方法实验方法 取两支取两支10 mL10 mL具塞比色管,其中一支加入适量的维生具塞比色管,其中一支加入适量的维生素素C C注射剂注射剂(在稀释后浓度小于在稀释后浓度小于50 mg50 mgL)L),另一支不另一支不加;然后分别依次加入加;然后分别依次加入2 mL2 mL的的Folin BFolin B试剂,用试剂,用pH3pH3三三氯乙酸溶液稀释至刻度,摇匀,反应氯乙酸溶液稀释至刻度,摇匀,反应5 min5 min后,以试后,以试剂空白为参比,使用剂空白为参比,使用l cml cm玻璃吸收池在玻璃吸收池在920
6、 nm920 nm波长处波长处测定吸光度测定吸光度A A值。平行测量值。平行测量3 3次,取平均值。次,取平均值。菲林菲林B B近红外分光光度法近红外分光光度法 菲林菲林B B近红外分光光度法近红外分光光度法 标准曲线制备标准曲线制备 分别准确配制浓度为分别准确配制浓度为0-50.0 mg/L0-50.0 mg/L的维生素的维生素C C系列标准工系列标准工作液,按上述实验方法测定吸光度作液,按上述实验方法测定吸光度 。线性回归做标准曲线。线性回归做标准曲线。根据标准曲线求出维生素根据标准曲线求出维生素C C含量。含量。紫外分光光度法紫外分光光度法 实验方法实验方法 在在10mL10mL比色管中
7、依次加入比色管中依次加入pH=9.5pH=9.5醋酸一醋酸钠缓冲溶醋酸一醋酸钠缓冲溶液液2mL2mL,1 106g/mL06g/mL甲基紫甲基紫2mL2mL;在其中一个比色管;在其中一个比色管中加人一定量的维生素中加人一定量的维生素C C注射液注射液(在稀释后浓度小于在稀释后浓度小于50 50 mgmgL L),在另一个比色管中不加维生素,在另一个比色管中不加维生素C C注射液;用注射液;用二次蒸馏水定容,摇匀。用水作空白,二次蒸馏水定容,摇匀。用水作空白,1cm 1cm 比色皿于比色皿于265nm 265nm 处,测定吸光度处,测定吸光度 。紫外分光光度法紫外分光光度法 标准曲线制备标准曲线
8、制备 分别准确配制浓度为分别准确配制浓度为0-50.0 mg/L0-50.0 mg/L的维生素的维生素C C系列标准系列标准工作液,按上述实验方法测定吸光度工作液,按上述实验方法测定吸光度 。线性回归做标准曲线。线性回归做标准曲线。根据标准曲线求出维生素根据标准曲线求出维生素C C含量。含量。旋光法旋光法 旋光度与浓度的关系旋光度与浓度的关系 精密称取精密称取105 105 干燥恒重的维生素干燥恒重的维生素C C对照品对照品0.4931g0.4931g,0.7995g0.7995g,1.0184g1.0184g,1.2503g1.2503g,1.5551g1.5551g,2.0261 g2.0
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