浅谈WS银染法的应用课件.ppt

1、浅谈WarthinStarry银染法的应用BackgroundnW-S法首先在1920年由Warthin和Starry 作为显示螺旋体的一种特殊染色方法提出,其原理是一种嗜银反应。nW-S法除可显示螺旋体外还可显示放线菌、猫抓病球杆菌、尘埃颗粒、胃幽门螺杆菌、黑色素颗粒、真菌、球菌及神经纤维等。Warthin AS,Chronister AC(1920).A more rapid and improved method of demonstrating spirochetes in tissues(Warthin and Starrys cover-glass method).American

2、 Journal of Syphilis 4:97103.IntroductionnThe WarthinStarry stain(WS)is a silver nitrate-based staining method(a silver stain)used in histology.nIt was first introduced in 1920 by American pathologists Aldred Scott Warthin(1866-1931)and Allen Chronister Starry(1890-1973),for the detection of spiroch

3、etes.nIt has been considered the best stain for detection of spirochetes,and is also used to stain Helicobacter pylori,Lawsonia intracellularis,Microsporidia,and particulates.WS法在Hp感染诊断中的应用Fig 1A.Helicobacter pylori colonized on the surface of regenerative epithelium,stained with the Warthin-Starry

4、method;Fig 1B.Clusters of bacteria(arrow)shown on WarthinStarry stain.1A1AWarthinStarry银染法的应用传统的Warthin-starry染色法n传统的Warthin-starry染色法是用1 g硝酸银加100 ml酸化水配制成1%硝酸银染液。该方法显色时间长,染色效果差,幽门螺杆菌检出率低,且呈现灰色,不易被病理医师所辨识,易出现假阴性的结果。另一方面,如果加热时控制不好,温度过高,会导致切片中标本呈现干枯状,染色出现非特异的结果。改良Warthin-starry染色法n因胃镜活检标本病理诊断的需要,北京大学第

5、三医院消化科病理室自1988 年以来，以Warthin-Starry 银染法为基础加以改进，开展Hp 银盐染色技术。该法改进后的20 余年,制片数十万张,至今组织仍着色牢固稳定。韩亚京韩亚京.幽门螺杆菌银盐染色方法改进幽门螺杆菌银盐染色方法改进J.北京医科大学学报北京医科大学学报,1998,05:86.不同之处n使用此改进法和Warthin-Starry 方法的不同之处主要为试剂配制简便组织着色牢固稳定,成本低廉。两方法不同之处为:n试剂配制简化,仅为双蒸水。而W-S 法为醋酸盐缓冲液,其改良法为柠檬酸盐缓冲液；n所用玻璃器皿、载物片等预先行化学洁净处理,活性银还原范围局限,切片银污染程度较小

6、,观察对比清晰；n本法可使用立式玻璃染缸成批集中染色(每缸811 张),提高制片效率。优点n经改进后的改良Warthin-starry染色法显色时间明显缩短,染色效果易于控制,幽门螺杆菌呈现黑色,易于辨识,检出率明显提高。其次,通过银染法与改良染色法结果的比较可以看出,两种染色方法对于幽门螺杆菌的检出率是相同的,而且改良Warthin-starry染色法诊断可靠,不会出现假阳性的染色结果。应用价值n改良Warthin-starry染色法是一种较为经济实用的染色法,它有着试剂配制简便,诊断准确迅速等特点,在一般的实验室即可得到广泛的开展,在幽门螺杆菌的检测中具有独特的优势和很高的应用价值。图2

7、应用改良W-S 法可见胃粘膜腺体陷窝内可见簇状或片状的幽门螺杆菌超声波改良W-S 染色法n南京军区南京总医院病理科孟奎，马恒辉，周晓军等提出一种更加快捷的Warthin-starry 染色方法。n他们利用超声波高速振荡的原理,在70 水浴加温下,促进银溶液中的离子加速运动,从而促使胃幽门螺杆菌快速有效地结合银离子,加速显色，结果可靠，快速方便。孟奎孟奎,马恒辉马恒辉,周晓军等周晓军等.一种快捷的一种快捷的 Warthin-Starry染色方法染色方法J.中华消化内镜杂中华消化内镜杂志志,2002,19(1):55.图3 应用改良W-S 法可见胃粘膜粘液下可见簇状或片状的幽门螺杆菌总结nW-S染

8、色是一种较传统的特殊染色方法,尽管其染色时间较长,染色条件较严格,在某些应用领域也出现了替代手段,但作为一种能直观查见病原体的敏感且特异的检测方法,W-S染色在病理诊断中仍发挥着重要作用,其操作所需设备简单,便于各级医院开展使用。王雷明王雷明,于文娟于文娟,钟延丰钟延丰.改良银染法在病理诊断中的应用改良银染法在病理诊断中的应用J.诊断病理学杂志诊断病理学杂志,2012,03:231-232.ConclusionnW-S银染法是组织切片染色法中效果最好的一种，检出率较高，为侵入性取材方式下诊断Hp感染的“金标准”。n但是传统方法操作较繁琐技术要求高，且费时、价格昂贵，故临床应用率较低。n改良W-S 法应用于Hp诊断，方法合理，价格低廉，诊断准确率高，适合在基层医疗单位病理室作为常规的检测方法。Thank you!