糖化血红蛋白实验室检测方法及标准化新进展课件.pptx
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1、糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展1958年,Allen报告,在离子交换层析上的的人血红蛋白可以分离出三个小组分,他们较HbA的负电荷更强,被命名为HbA1a,HbA1b,HbA1c。1969年Rahbar使用琼脂电泳,报告糖尿病患者的这些小血红蛋白组升高1970年代中期,弄清楚了是葡萄糖对血红蛋白HbA的非遗传修饰,产生了HbA1c1980年中期,GHb(糖化血红蛋白)检测被广泛应用,但当时结果可比性很差DCCT研究发表后,1996年起,美国正式启动了NGSP项目,推动糖化血红蛋白检测的标准化。2010年达
2、成了全球标准化共识糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展HbHbHbAHbA0 0HbAHbA1 1HbA1aHbA1aHbA1bHbA1bHbA1cHbA1cHbAHbA()HbAHbA2 2()HbFHbF()95%95%2%2%1-3.5%1-3.5%成人血红蛋白分三成人血红蛋白分三种,种,HbAHbA为主要成人为主要成人HbHb非糖化非糖化HbHb糖化糖化HbHb6-8%6-8%87-89%87-89%血红蛋白血红蛋白胎儿血红蛋白HbF在胎儿及出生6个月以内的新生儿体内为高浓度,6个月后基本降为成人水平1%1%1%1%4%-6%4%-6%HbA1a:链NH2端与其它糖成分结合的产物H
3、bA1b:HbA1c进一步代谢的产物HbA1c:链NH2端与葡萄糖结合的产物糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展1.葡萄糖与血红蛋白HbA发生糖化反应2.两步反应:先快速生成不稳定A1c,后缓慢生成稳定的A1c。3.血红蛋白HbA糖化后,负 电荷会增加糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展基于基于电电荷荷 离子交离子交换换高高压压液相色液相色谱谱法(法(HPLCHPLC)电电泳法泳法 毛毛细细管管电电泳泳基于基于结结构构 硼酸硼酸亲亲和和层层析法析法 酶酶法法 免疫法免疫法糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展HbA(2b b2)HbA1HbA0HbA1aHbA1bHbA1c非糖化成分
4、非糖化成分糖化成分糖化成分离子交换色谱和免疫法检测物离子交换色谱和免疫法检测物硼酸亲和色谱检测物硼酸亲和色谱检测物糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展A:患者红细胞裂解物被注入到带有负电荷的分析柱中B,C:因为与带负电荷树脂间的离子相互作用,带正电荷的血红蛋白分子的移动速度比带负电荷的慢D:因为HbA1c比HbA0所带负电荷强,所以首先被洗脱.E:离子交换HPLC方法能分离并鉴定其他种类Hb及一些血红蛋白变异体,在色谱图上将出现相应的分离峰Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2
5、014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展厂家厂家仪器仪器Bio-RadVARIANT II Turbo HbA1c Kit-1.0/2.0VARIANT II HbA1c ProgramD-10 Hemoglobin A1c ProgramTosohG7G8GXArkray81608180上海惠中MQ2000MQ2000PT糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展厂家厂家仪器仪器深圳普门GH-900 HbA1c AnalyzerDrew ScientificDrew DS5Diastat江苏奥迪康AC660糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展Pathology Co
6、nsultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展MiniCAP Capillary 2 Capillary2 with Flex Piercing*(Capillary2 with Flex Piercing 为Capillary2 的升级版,只多了可采原始样本管,其他参数一致)with Flex with Flex 糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展Pathology Consultation on HbA1c Methods and Inte
7、rferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展厂家厂家仪器仪器PrimusHb9210PDQ PlusUltra2Bio-RadIn2itAlereAfinionNycoCard糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展Pathology Consultation on
8、HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展厂家厂家仪器仪器试剂盒试剂盒RocheCobas生化系列机型糖化血红蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)Tina-quant系列试剂盒Hitachi生化系列机型开放或罗氏试剂Siemens Dimension等生化系列机型糖化血红蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)ADVIA生化分析系统糖化血红蛋白A测定试剂盒(乳胶凝集法)DCA Vantage(POCT)糖化血红蛋白检测试剂盒(免疫乳胶凝集抑制法)BeckmanAU生化系列机型糖化血红蛋白检测试
9、剂盒(比色法)Beckman其他生化系列AbbottARCHITECT生化仪系列糖化血红蛋白测定试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法)Randox(朗道)血红蛋白A1c检测试剂盒(乳胶增强免疫比浊法)德国胡曼糖化血红蛋白(HbA1c)测定试剂盒JEOL Ltd(希森美康代理)糖化血红蛋白检测试剂盒(酶法)Sekisui(积水)Medical糖化血红蛋白检测试剂盒(酶法)Audit Diagnostics(北京欧迪代理)糖化血红蛋白测定试剂盒(直接法)国产厂商国产生化分析系统国产生化试剂糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展方法方法原理原理优势优势挑战挑战酶法使用特别作用于氨基酸末端糖化的缬氨酸的
10、酶检测HbA1c不受变异体的分析干扰不能发现血红蛋白变异体免疫法使用针对糖化的链氨基酸末端的抗体检测HbA1c在使用新一代的试剂盒时分析不受大多数常见变异体的干扰不能发现血红蛋白变异体,新一代的试剂盒依然会受到少见变异体的分析干扰硼酸亲和层析法糖化的血红蛋白被绑定在硼酸基团树脂时,非糖化的血红蛋白组分直接流出分析柱最小的Hb变异体分析干扰检测的是总糖化血红蛋白,而不是 HbA1c,不能发现血红蛋白变异体离子交换HPLC基于电荷分离血红蛋白组分能够发现常见的血红蛋白变异体 变异体被共洗脱时易被干扰 毛细管电泳法基于电荷分离血红蛋白组分能够发现血红蛋白变异体工作流程Pathology Consul
11、tation on HbA1c Methods and Interferences,Am J Clin Pathol 2014;141:5-16糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展在第59届美国糖尿病学会年会上,HbA1c监测的重大影响与胰岛素问世相提并论,并将前者作为血糖控制的金标准2014年ADA指南推荐:对于治疗达标(血糖控制稳定)的患者,每年应该至少进行两次HbA1c检测。对更改治疗方案或血糖控制未达标患者,应每年进行四次HbA1c检测在临床上,无论用什么方法反映血糖的变化,最终都要以HbA1c的变化作为最终评价一种药物或一个治疗方案在血糖控制上是否有效的指标Diabetes Ca
12、re Volume 37,Supplement 1,January 2014“中国糖化血红蛋白教育计划”教材糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展2010年ADA率先正式推荐HbA1c诊断DM,推荐原因之一就是在美国HbA1c已高度标准化2011年WHO推荐有条件的地方采用HbA1c 诊断糖尿病中国?糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展HbA1c临床应用推荐鉴于HbA1c检测在我国尚不普遍,检测方法的标准化程度不高,测定HbA1c的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿病的诊断的要求。本指南仍不推荐在我国采用HbA1c诊断糖尿病。但对于采用标准化检测方法,并有严格质量控制,正常参考值在4.0%
13、6.0%的医院,HbA1c6.5%可作为诊断糖尿病的参考。中华糖尿病杂志2014年7月第6卷第7期糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展实验室指标参与临床评估、作为诊断标准,除了检测指标固有的先天优势外,具有符合要求的准确性精密度(CV)正确度(Bias)糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展CV%6.0%A1C6.5%A1C7.0%A1C25.76-6.246.24-6.766.72-7.2835.64-6.366.11-6.896.58-7.4255.4-6.65.85 7.156.3 7.7不同室内CV对 A1C 分析的影响(95%的可信区间)正常人和病人无法区分血糖控制好坏无法区分
14、糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展Copyright 2010 American Association for Clinical Chemistry小小的偏倚将的偏倚将导导致很大人群的致很大人群的误诊误诊糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展日本标准化瑞典标准化中国标准化之路糖化血红蛋白实验室检测方法和标准化新进展HbA1cTotalGHBHbA1在DCCT和UKPDS结果发表之前,美国有800个试验室在做A1C检测,CAP实验调查显示在不同的实验室,用不同的检测方法得出的A1C结果存有巨大的差异。糖化血
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