实验室生物安全培训-课件.ppt
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1、实验室生物安全培训-(课件)2022-7-212022-7-212目目 录录2022-7-213生物安全的概念生物安全的概念l实验室生物安全概念:避免危险生物因子造成实验室人员暴露,向实验室外扩散并导致危害的综合措施。l生物安全三个方面:人类的健康安全;人类赖以生存的农业生物安全;与人类生存有关的环境生物安全。l生物安全涉及到多个学科和领域:预防医学、环境保护、植物保护、野生动物保护、生态、农药、林业等。正确对待生物安全生物安全?!“恐惧”“无畏”生物安全防护实验室2022-7-215实验室生物安全事件实验室生物安全事件l2003年以来,新加坡、台湾和北京相继发生实验室人员SARS病毒感染传播
2、事件。2022-7-216实验室生物安全事件实验室生物安全事件l历史上,立克次体的命名。2022-7-217实验室感染概况实验室感染概况l80%80%是不明原因的感染。是不明原因的感染。l20%20%感染的原因是明确的。感染的原因是明确的。80%80%是由工作人员操作失误引起的;是由工作人员操作失误引起的;20%20%是由设备故障引起的。是由设备故障引起的。l导致感染最多的导致感染最多的4 4种实验室事故种实验室事故溢出和溢出和泼洒泼洒针头和注射器针头和注射器锐器、碎玻璃锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤2022-7-218什么是生物危害?什么是生物危
3、害?l生物危害:指有害或有潜在危害的生物因子对人、环境、生态和社会造成的危害或潜在危害。l.2022-7-219实验室生物危害l实验室生物危害:指在微生物和生物医学实验室研究过程中对人、环境、生态和社会造成的危害和对环境造成的污染。2022-7-2110实验室生物安全的概念实验室生物安全的概念l实验室生物安全主要考虑实验室生物安全主要考虑:l通过在通过在实验室实验室设计建造、使用设计建造、使用个体个体防护设施、严防护设施、严格遵从标准化的格遵从标准化的工作及操作程序和规程工作及操作程序和规程等方面采等方面采取综合措施,确保取综合措施,确保实验室工作人员实验室工作人员不受实验对象不受实验对象的感
4、染,确保的感染,确保周围环境周围环境不受实验对象的污染。不受实验对象的污染。遵守法律法规:遵守法律法规:国家法律法规:中华人民共和国传染病防治法(2004)国务院424号令:病原微生物实验室生物安全管理条例实验室生物安全通用要求(GB19489-2004)卫生部文件:人间传染的病原微生物名录:(2006.01.11)危险品航空安全运输细则2022-7-2112二、实验室生物安全级别2022-7-2113感染性微生物的危险度等级分类2022-7-2114BSC:生物安全柜;GMT:微生物学操作技术规范。BSL-4BSL-3BSL-2BSL-12022-7-2115生物安全水平分级生物安全水平分级
5、l根据生物因子危害程度和采取的防护措施,将生物安全防护根据生物因子危害程度和采取的防护措施,将生物安全防护水平(水平(biosafety level,BSL)分为)分为4级(级(BSL-1、BSL-2 BSL-2、BSL-3、BSL-4表示);动物实验室以表示);动物实验室以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示。表示。l一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物;l二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物;l三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死三级适用于主
6、要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素;疾病的致病微生物或其毒素;l四级适用于对人体具有高度的危险性四级适用于对人体具有高度的危险性,通过汽溶胶途径传播,通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素物或其毒素 2022-7-2116一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 BSL-1 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于适用于对健康成年人已知无致病作用对健康成年人已知无致病作用的微生物,的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。
7、如用于教学的普通微生物实验室等。lE.coli2022-7-2117BSL-1BSL-1实验室实验室1)1)普通建筑物,防节肢动物和啮齿动物。普通建筑物,防节肢动物和啮齿动物。2)2)每个实验室设洗手池,宜靠近出口处。每个实验室设洗手池,宜靠近出口处。3)3)实验室门口设挂衣装置,个人便装与工作服分开。实验室门口设挂衣装置,个人便装与工作服分开。4)4)实验室各表面平整、易清洁、不渗水、耐腐蚀。实验室各表面平整、易清洁、不渗水、耐腐蚀。5)5)实验台面防水,耐腐蚀、耐热。实验台面防水,耐腐蚀、耐热。6)6)橱柜和实验台牢固,保持一定距离以便于清洁。橱柜和实验台牢固,保持一定距离以便于清洁。7)
8、7)如有可开启的窗户,应设置纱窗。如有可开启的窗户,应设置纱窗。8)8)保证工作照明,避免不必要的反光和强光。保证工作照明,避免不必要的反光和强光。9)9)有适当的消毒设备。有适当的消毒设备。2022-7-2118典型的一级生物安全水平实验室典型的一级生物安全水平实验室不需要特殊的一级和二级不需要特殊的一级和二级屏障、除需要洗手池外,屏障、除需要洗手池外,依靠标准的微生物操作即依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。可获得基本的防护水平。2022-7-2119二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室 BSL-2 实验室结构和设施、安全操作规程、安全实验室结构和设施、安全操作规程、安全设
9、备适用于设备适用于对人或环境具有中等潜在危害对人或环境具有中等潜在危害的微生物的微生物。2022-7-2120BSL-2BSL-2实验室实验室1)1)满足满足BSL-1BSL-1的要求。的要求。2)2)实验室门带锁并可自动关闭,门应有可视窗。实验室门带锁并可自动关闭,门应有可视窗。3)3)应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。4)4)在实验室内使用专门的工作服,戴乳胶手套。在实验室内使用专门的工作服,戴乳胶手套。5)5)在实验室工作区域外有存放个人衣物的条件。在
10、实验室工作区域外有存放个人衣物的条件。2022-7-2121BSL-2BSL-2实验室实验室6)6)建筑内应配备建筑内应配备高压蒸汽灭菌器。7)7)在实验室内配备生物安全柜。在实验室内配备生物安全柜。8)8)设洗眼设施,必要时应有应急喷淋装置。设洗眼设施,必要时应有应急喷淋装置。9)9)通风,如使用窗户自然通风应有防虫纱窗。通风,如使用窗户自然通风应有防虫纱窗。10)10)有可靠的电力和应急照明,必要时设备用电源。有可靠的电力和应急照明,必要时设备用电源。11)11)实验室出口有在黑暗中可明确辨认的标识实验室出口有在黑暗中可明确辨认的标识。2022-7-2122BSL-2BSL-2实验室实验室
11、l在处理危险度在处理危险度2 2 级 或 更 高 危 险级 或 更 高 危 险度 级 别 的 微 生度 级 别 的 微 生物 时,在 实 验物 时,在 实 验室 门 上 应 标 有室 门 上 应 标 有国 际 通 用 的 生国 际 通 用 的 生物 危 害 警 告 标物 危 害 警 告 标志。志。2022-7-2123典型的二级生物典型的二级生物安全水平实验室安全水平实验室2022-7-2124三级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室BSL-3 实验室结构和设施、安全操作规程、安全实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重通过呼吸途径使人传染
12、上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗常已有预防传染的疫苗。2022-7-2125BSL-3BSL-3实验室实验室l在建筑物中在建筑物中自成隔离区自成隔离区或为独立建筑物。或为独立建筑物。l由由清洁区、半污染区和污染区清洁区、半污染区和污染区组成。污染区和半污组成。污染区和半污染区之间应设染区之间应设缓冲间缓冲间。l污染区与半污染区之间、半污染区和清洁区之间应污染区与半污染区之间、半污染区和清洁区之间应设置设置传递窗传递窗。l我国的第一个我国的第一个P3P3实验室建于实验室建于19871987年,当时主要用于年,当时主要用于艾
13、滋病研究。艾滋病研究。2022-7-2126某某BSL3 实验室设计图实验室设计图2022-7-2127BSL-3BSL-3实验室实验室l围护结构围护结构l实验室内表面应光滑、耐腐蚀、防水;所有缝隙应实验室内表面应光滑、耐腐蚀、防水;所有缝隙应可靠密封,防震、防火。可靠密封,防震、防火。l围护结构外围墙体应有适当的抗震和防火能力。围护结构外围墙体应有适当的抗震和防火能力。l天花板、地板、墙间交角均为天花板、地板、墙间交角均为形且可靠密封。形且可靠密封。l不应有可开窗户不应有可开窗户;内设窗户应防破碎、防漏气。内设窗户应防破碎、防漏气。l出入口处应采用防止节肢动物和啮齿动物的设计。出入口处应采用
14、防止节肢动物和啮齿动物的设计。2022-7-2128BSL-3BSL-3实验室实验室l送排风系统送排风系统l独立的送排风系统以控制独立的送排风系统以控制气流方向气流方向和和压力梯度压力梯度。l送风口和排风口的布置对面分布,送风口和排风口的布置对面分布,上送下排上送下排。l送排风系统应为送排风系统应为直排式直排式,不得采用回风系统。,不得采用回风系统。l应安装风机和生物安全柜启动应安装风机和生物安全柜启动自动联锁装置自动联锁装置。2022-7-2129BSL-3BSL-3实验室实验室l环境参数环境参数l相对室外大气压,污染区为相对室外大气压,污染区为-40Pa-40Pa,并与生物安全,并与生物安
15、全柜等装置内气压保持安全合理压差。柜等装置内气压保持安全合理压差。2022-7-2130BSL-3BSL-3实验室实验室l其他其他l实验室所需实验室所需压力设备不应影响室内负压梯度压力设备不应影响室内负压梯度。l实验室应设置实验室应设置通讯系统通讯系统。l实验记录等资料应通过计算机实验记录等资料应通过计算机等发送至实验室外。等发送至实验室外。l清洁区设置清洁区设置淋浴淋浴装置。装置。2022-7-2131典型的三级生物典型的三级生物安全水平实验室安全水平实验室2022-7-2132四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室BSL-4 实验室结构和设施、安全操作规程、安全实验室结构和设施、安全
16、操作规程、安全设备适用于设备适用于对人体具有高度的危险性,通过气对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。2022-7-2133BSL-4BSL-4实验室实验室lP4P4实验室是指生物安全四级实验室,专门用实验室是指生物安全四级实验室,专门用于开展于开展烈性传染病烈性传染病的研究,是全球生物安全的研究,是全球生物安全最高级别的实验室,目前国内尚无一家。最高级别的实验室,目前国内尚无一家。lP4P4实验室的安全措施比实验室的安全措施比P3P3实验室更严格,
17、研实验室更严格,研究人员入内不仅要穿全封闭的防护服,还要究人员入内不仅要穿全封闭的防护服,还要携带氧气瓶。携带氧气瓶。l中国军事医学科学院在建准中国军事医学科学院在建准P4P4实验室。实验室。2022-7-2134与外界沟通与外界沟通2022-7-2135动物实验室的生物安全动物实验室的生物安全l参照参照BSL1-4BSL1-4实验室的要求,还应考虑动物实验过程实验室的要求,还应考虑动物实验过程产生的潜在生物危害的防护。产生的潜在生物危害的防护。l应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择的等选择专用于动物的专用于动物的生物安全柜、动物饲养
18、设施、生物安全柜、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。2022-7-2136三、生物安全设备三、生物安全设备l1.1.超净台超净台 l2.2.通风橱通风橱l3.3.生物安全柜生物安全柜 2022-7-2137 超净台超净台l正压柜l气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面,被样品污染的气流排出柜外,没有循环气流。l超净台保护样品不受污染,适用于普通实验室适用于普通实验室或或1 1级生物安全水平中级生物安全水平中对对人员和环境无保护要求人员和环境无保护要求的实验的实验。2022-7-2138通风橱通风橱l是实验室,特别是化学实验是实验
19、室,特别是化学实验室的一种大型设备。用途是室的一种大型设备。用途是减少实验者和有害气体的接减少实验者和有害气体的接触。触。l通风橱是保护人员防止有通风橱是保护人员防止有毒化学烟气危害的一级屏障。毒化学烟气危害的一级屏障。它可以作为作为重要的安全它可以作为作为重要的安全后援设备,像在化学实验过后援设备,像在化学实验过程失败,化学烟雾、尘埃和程失败,化学烟雾、尘埃和有毒气体产生时有效排出有有毒气体产生时有效排出有害气体,保护工作人员和实害气体,保护工作人员和实验室环境。验室环境。2022-7-2139生物安全柜生物安全柜 Biological Safety Cabinetsl生物安全柜的要求生物安
20、全柜的要求:l颗粒经颗粒经HEPAHEPA过滤去除过滤去除l气流为层流气流为层流l气流有方向气流有方向HEPA(High efficiency particulate air Filter),高效空气过滤器,达到HEPA标准的过滤网,对于0.1um和0.3um的有效率达到99.998%,HEPA网的特点是空气可以通过,但细小的微粒却无法通过。2022-7-2140Class I 生物安全柜生物安全柜l可开启前窗在负压下操作可开启前窗在负压下操作l表面风速在表面风速在0.36m/s0.36m/s,排,排出的气体经出的气体经HEPA HEPA 过滤过滤l保护操作人员和环境保护操作人员和环境l适用于
21、要求生物安全等级适用于要求生物安全等级1 1、2 2、3 3的工作的工作l适用于适用于样品不需保护样品不需保护的实的实验工作验工作2022-7-2141Class II 生物安全柜生物安全柜2022-7-2142l所有的二级生物安全柜同一级生物安全柜一样,能够保护操作人员和实验室环境免受危害。l二级安全柜也能够保护产品样本在微生物操作过程中免受污染。l二级生物安全柜可以在一、二、三级生物 安全水平的生物因子操作中使用。2022-7-2143Class II 生物安全柜的分类生物安全柜的分类2022-7-2144Class II生物安全柜空气流向生物安全柜空气流向2022-7-2145生物安全柜
22、放置生物安全柜放置l五个远离点(气流)五个远离点(气流)门门 风扇风扇 空调空调 开着的窗户开着的窗户 人员活动频繁的区域人员活动频繁的区域l摆放要求摆放要求 稳固的平台或支架稳固的平台或支架 两侧、后面和上端留两侧、后面和上端留30cm30cmAir Register设备设备首选位置首选位置候选位置候选位置工工 作作 台台设备2022-7-2146反面反面教材教材生物安全柜的使用生物安全柜的使用准备:准备:在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设备,在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设备,充分做好准备工作。充分做好准备工作。用消毒液彻底洗净手和手臂、穿长袖工作服和手套。准备好消毒剂和
23、处理遗撒事件的物品准备好消毒剂和处理遗撒事件的物品。尽量减少房间内的走动,保证正常气流。尽量减少房间内的走动,保证正常气流。前窗开至适当高度,打开安全柜的灯和风机。让生物安全柜工作区排气几分钟之后再开始工作生物安全柜的使用操作:操作:消毒桌面(70%乙醇,也可以用1:100 漂白水,但要注意使用完毕后必须要用无菌水擦走,使用紫外线作为表面消毒的效果不一定能完全无菌)安全柜内只放本次实验所需的物品。所有物品离前窗至少15cm,即在隔栅之后,所有污染性的操作尽量远离工作区域的后部。大物体之间要保持一定距离。生物安全柜的使用操作:干净和被污染的物品分开放置;被污染的物品尽量不要进入干净区域,应放置在
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