逆转录病毒(2)课件(PPT 132页).pptx

1、BBMC新传染病的阴影新传染病的阴影第1页，共132页。BBMCn初期的开始症状像伤风、流感、全身疲劳无力、食欲减退、发热、体重减少。n后期机会性感染和恶性肿瘤频发。n12月1日作为该病的全球防治日。新传染病的临床症状新传染病的临床症状第2页，共132页。BBMC新传染病的阴影新传染病的阴影病原体病原体HIV免疫系统损伤机会性感染机会性感染恶性肿瘤恶性肿瘤AIDSAIDS第3页，共132页。BBMCHIV如何感染机体？HIV如何损伤机体？第4页，共132页。BBMCHIV生物学性状如何及实验室诊断？HIV如何预防？第5页，共132页。第第2828章逆章逆转录病毒转录病毒（Retravirida

2、e)Retraviridae)nRNARNA肿瘤病毒亚科肿瘤病毒亚科(HTLV)(HTLV)n慢病毒亚科慢病毒亚科（HIVHIV）n泡沫病毒亚科泡沫病毒亚科第6页，共132页。BBMC定义:一大类含有逆转录酶的RNA病毒。三个独有特性：三个独有特性：n逆转录逆转录:逆转录酶逆转录酶(reverse transcriptase)使病毒使病毒RNA合成合成DNA；n细胞转化细胞转化:病毒可激活前癌基因病毒可激活前癌基因(proto-oncogenes)成为癌基因成为癌基因(oncogenes)，使细胞恶变；，使细胞恶变；n细胞破坏细胞破坏:某些逆转录病毒具有细胞毒性，如某些逆转录病毒具有细胞毒性，

3、如HIV可破坏可破坏T淋巴淋巴细胞。细胞。逆转录病毒第7页，共132页。BBMC共同特点：共同特点：n病毒为球形病毒为球形80-120nm80-120nmn有两条相同有两条相同+ssRNA+ssRNAn含有依赖含有依赖RNARNA的的DNADNA多聚酶多聚酶n病毒复制通过病毒复制通过DNADNA中间体中间体n病毒核酸能整合于宿主染色体上病毒核酸能整合于宿主染色体上逆逆转录病毒转录病毒第8页，共132页。BBMC病 例 田XX，中年男性，1989年，因“肺炎”入院治疗，经对症处理好转出院。一个月后，又因“感冒引起肺炎”而入院。查体：体温3839间，已持续1周，无明显诱因，乏力，伴有腹泻，后转入传

4、染科治疗。转科不久，全身淋巴结肿大，背部出现皮肤卡波济肉瘤，视力下降，后左眼失明，体重减轻。实验室检查：CD4+细胞（400ul），CD4CD8为0.5（正常范围为1.21.8）。6个月后患者死亡。病史记载患者生前于1984年被派往非洲工作，有不 良性行为史，无输血或静脉吸毒史。第9页，共132页。人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（human human immunodeficiency virus,HIV)immunodeficiency virus,HIV)第10页，共132页。BBMCnHIVHIV是获得性免疫缺陷综合症（是获得性免疫缺陷综合症（acquired acquired im

5、munodeficiency syndrome,AIDS immunodeficiency syndrome,AIDS 艾滋病艾滋病)的病原体，艾滋病具有高度致死性与惊人的的病原体，艾滋病具有高度致死性与惊人的蔓延速度！可以称之为蔓延速度！可以称之为“超级癌症超级癌症”，“世世纪杀手纪杀手”第11页，共132页。BBMC世界艾滋病发展史世界艾滋病发展史第12页，共132页。BBMCHIVHIV历史历史n从去年秋天起，我们就开始接诊发热伴有体重减轻的患者。到这个春天，他们都患上了一种在正常人群中非常罕见的肺炎。他们都是男性同性恋者。我打电话给一位同事，我们一起给的发病率与病死率每周报告（）写了一

6、篇文章。这篇文章发表以后，我们的电话就响个不停。全国各地的医师都打电话来说，他们有同样的病例。”年月5日第13页，共132页。BBMC世界第一例：n1981年年6月月5日日美国乔治亚州亚特兰大市，由美国联邦政府卫生统计机构疾病控制中心出版的患病率和死亡率周报，第一次报道了一种“可能是细胞免疫功能紊乱”的疾病。报道列举了几个月后被称为艾滋病的最初五个病例：“在1980年10月至1981年5月间，5个同性恋年轻男子在加利福尼亚州洛杉矶市三所医院里接受经活体检验被确定为卡氏肺囊虫肺炎的治疗。2名病人死亡。对5名病人的观察表明，他们似乎细胞免疫功能缺损，一般的接触便可使他们受到感染，例如肺囊虫肺炎和念

7、珠菌等。”第14页，共132页。BBMCn年一名刚果籍男子死于一种不明原因的疾病。多年之后，对该男性的血液标本分析使其成为第一例确证成为第一例确证的感染者。的感染者。n年美国加利福利亚州和纽约的医师报告，卡氏肺孢子虫肺炎（）和一种罕见的肿瘤卡波济肉瘤（）在男性同性恋人群中暴发。美国疾病控制与预防中心（）报道了相关消息。这是医务界对这是医务界对广泛关注的开始。广泛关注的开始。该综合征当时被命名为男性同性恋相关性免疫缺陷症（）。第15页，共132页。BBMC卡波氏肉瘤卡波氏肉瘤简介简介:是一种恶性肿瘤，特征是：多种梭形细胞形成血管窦，是一种恶性肿瘤，特征是：多种梭形细胞形成血管窦，见见核分裂，可以

8、看到玻璃小体，艾滋病病人常并发此病。核分裂，可以看到玻璃小体，艾滋病病人常并发此病。第16页，共132页。BBMCn年这种综合征被发现与血液相关。不止在男性同性恋人群中，在女性、男性异性恋、吸毒者、血友病患者、接受输血者和婴儿，也发现了这种综合征的病例。这种综合征被重新命名为免疫系统缺陷综这种综合征被重新命名为免疫系统缺陷综合征（）。合征（）。美国疾病控制与预防中心将其定义为一种流行病。另外个国家报告发现了病例。另外个国家报告发现了病例。n年法国巴斯德研究所的研究人员在医师的领导下分离出了一种逆转录病毒，他们称它为淋巴腺病相关性病毒（）。后来，这种病毒被认为是的致病因子。发现病例的国家已达个。

9、发现病例的国家已达个。第17页，共132页。BBMCn年美国政府宣布，美国国立癌症研究所的医师分离出了一种引起的、被称为的病毒。（年之后，和被认定为同一种病毒。一个国际委员会将其命名为人类免疫缺陷病毒，）。美国卫生和人类服务部预计疫苗将在年内进行人体试验。被美国研究人员称为“号患者”的 死去。这名加拿大籍空中服务生曾与数十名在美国最早被确定患有的男性同性恋者发生过性行为。n年美国食品与药物管理局批准了由的实验室研发并由美国卫生部申请专利的诊断试剂盒。法国巴斯德研究学院就试剂盒专利权问题对美国卫生部提起诉讼。最终，法美两家机构同意分享试剂盒的专利使用费。男影星 成了第一个死于的公众人物。，一名岁

10、的患的美国血友病患者被拒绝在他所在的公立学校继续读书。第18页，共132页。BBMCn年 世界卫生组织（）颁布了全球战略。n年批准成为第一个抗药物。英国的戴安娜王妃在英格兰开设了一所专为患者服务的医院。她与患者握手的照片改变了以往人们对患者和感染者的态度。美国总统里根，在其任职年后，首次在公众场合提到这一名词。美国开始了第一个教育项目。n年 总干事长宣布每年月日为世界艾滋病日。第19页，共132页。BBMCn世界艾滋病日的历史世界艾滋病日的历史：1988年，世界卫生组织规定，每年的年，世界卫生组织规定，每年的12月月1日为日为世界艾滋病日世界艾滋病日，1996年以后更名为年以后更名为世界艾滋病

11、宣传运动世界艾滋病宣传运动。每年。每年12月月1日前后，日前后，全世界各地围绕艾滋病的预防与控制和统一的全世界各地围绕艾滋病的预防与控制和统一的宣传主题，开展形式多样的宣传活动。宣传主题，开展形式多样的宣传活动。第20页，共132页。BBMC全球艾滋病疫情状况全球艾滋病疫情状况第21页，共132页。BBMCOver 16000 new HIV infections a daynMore than 95%are in developing countriesn1600 are in children under 15 years of agenAbout 14000 are in persons

12、 aged 15 to 49 years,of whom:n over 40%are womenn over 50%are 15-24 year olds第22页，共132页。BBMCAIDSAIDS全球重要的公共卫生问题全球重要的公共卫生问题 第23页，共132页。BBMC第24页，共132页。BBMCHIVHIV在全球范围内的传播速度惊人在全球范围内的传播速度惊人第25页，共132页。BBMC2008年全球新增年全球新增HIV感染者感染者430万，万，HIV感染者总数达感染者总数达3950万万。第26页，共132页。BBMC2008年根据最新评估结果，中国现有年根据最新评估结果，中国现有H

13、IV感染者约感染者约70万，其中万，其中艾滋病病人约艾滋病病人约7.5万万。第27页，共132页。BBMC1212月月1 1日世界艾滋病日日世界艾滋病日第28页，共132页。BBMC艾滋病的影响第29页，共132页。BBMC（一）对经济发展的影响1、国家为防治艾滋病拨巨款 据估计，我国一个艾滋病病人的医疗费用和间接损失大约6.4万-8.6万，是人均国民生产总值的2.9-3.9倍。据专家估计，世界每年将为艾滋病付出5000亿美元的代价，这使发达国家损失生产总值为1%，发展中国家损失生产总值3%。2、严重影响国民经济发展 18-45岁年龄的人是易感艾滋病的高发人群，这些人社会最强壮的劳动力，随着艾

14、滋病病毒感染者发病数及艾滋病病人的死亡数急剧增加，讲导致劳动力大量丧失，直接影响经济发展。3、给家庭、社会增加负担 据专家估计，一个艾滋病病人的医疗费用相当于我国家庭年收入的1.1倍，对家庭和个人来说都无法承受。另外，青壮年大多数承担抚养孩子和赡养老人的义务，一旦早逝，严重影响家庭和下一代的生活。且艾滋病病毒潜伏期长，可能给艾滋病感染者和病人周围的人带来恐惧，使人们无法安心工作。第30页，共132页。BBMC（二）对社会稳定的影响 1、因病致贫 艾滋病人不仅失去了生活来源，还要担负治疗费用，加重了负担，导致很多艾滋病病人及其家庭因病致贫。他们为了治病可能卖血卖身，反复使用治疗仪器，进一步导致艾

15、滋病的传播。因为艾滋病病毒感染而贫困的现象，加大了部分地区的贫富差距，严重影响当地的社会稳定。2、加深艾滋病感染者对社会的仇视 艾滋病的流行会给人们造成一定的恐惧，加剧了人们对艾滋病病人和感染者的偏见和歧视，人们更加排斥感染者和患者，是的艾滋病病人和感染者缠身对社会的仇视，从而采取报复的手段，危害社会的安定。同时，由于人们 歧视，一些感染者不敢公开自己的身份，原来家人和朋友，转入地下，成为隐性的传染源。3、损害国家的声誉 在全球一体化的大形势下，艾滋病防治工作如果开展不好，会影响国家在国际上的声誉。如1992年泰国发生的政治动乱、法国内阁政府危机等。第31页，共132页。BBMC（三）对国家进

16、步的影响1、劳动力的缺乏 感染艾滋病的多数是青壮年，他们是一个国家的主要劳动力，他们过早死亡，使得国家损失了一批创造财富的人。这样会导致国家在将来的某些年份主要劳动力不足，在小国甚至会发生无青壮年可用，严重阻碍社会的进步。2、社会负担加重 艾滋病给个人、家庭和社会的影响颇为巨大。在心理上由于人们对艾滋病的其实和恐惧，是一些人丧失了对生活的勇气。在生活上，其感染者和家属一般都会失去工作，并且要担负昂贵的医疗费用，造成生活困难。如果父母死亡，留下受感染的艾滋病孤儿和老人，必然会加重社会的负担。3、对教育的影响在性教育方面：艾滋病的流行使得各国政府加强对国民的性教育，但由于人们的思想惯性尤其是生物本

17、能，使得性教育面临困难，会造成教育资源的浪费。第32页，共132页。BBMC入学率方面：艾滋病的肆虐，儿童成为最无辜的牺牲品。有的儿童因此退学，加之艾滋病导致一些地区出生率下降，使入学率下降。知识就是力量，入学率的减少会影响一个国家的发展。4、法律法规的修改 随着艾滋病的流行，各国都制定了与其相关的法律法规，这在某种程度上是个进步，可以保证控制艾滋病有关措施的执行，但是它又带来了新的社会问题，使立法变得更加复杂，在保护艾滋病病人和保护公众权益之间发生了矛盾。世界卫生组织曾说过，其影响程度大大超过了艾滋病本身，他会深刻影响到公共卫生法律的应用和作用。第33页，共132页。BBMC（四）对军队的影

18、响1、影响兵源 艾滋病病毒感染者一旦进入部队，会引起一系列的心理和思想不良影响。2、影响血源 特别是战时血源，前线部队的血源大多来自部队内部成员，在士兵中若被传染，会通过数学传染艾滋病。3、造成重大经济损失 在现代化军队，由于武器装备精良而复杂，培训费用昂贵，发现艾滋病病毒感染者势必提前退伍，这对部队是一大损失，同时治疗费用昂贵。第34页，共132页。BBMC2011政治宣言政治宣言n 承诺各国加大行动力度，于2015年制止并开始扭转艾滋病病毒的蔓延趋势。n 宣言呼吁各国联合起来，力争到2015年普及对艾滋病的预防、治疗和关爱服务，阻止并扭转艾滋病病毒的蔓延，缓解其造成的影响。n 宣言为抗击艾

19、滋病制定了具体的目标，包括争取到2015年将艾滋病病毒的性传播率减少50，在使用注射药物人群中的传播率减少50，消除母婴传播，大幅减少因艾滋病而死亡的孕产妇人数，并让1500万名艾滋病病毒感染者接受抗逆转录病毒治疗等。n宣言特别承诺特别承诺消除性别不平等和基于性别的虐待和暴力，增强女性保护自己不受艾滋病感染的能力，并呼吁各国建立相关法律及政策框架，消除与艾滋病病毒有关的轻蔑、歧视和暴力。第35页，共132页。BBMCn传染源：传染源：HIV的感染者和的感染者和AIDS患者患者n传播途径：传播途径：性行为性行为 血行传播：带血行传播：带HIVHIV的血制品、器官移的血制品、器官移植、植、人工受精

20、、污染注射器人工受精、污染注射器 母婴垂直传播母婴垂直传播第36页，共132页。BBMC第37页，共132页。BBMC第38页，共132页。BBMC第39页，共132页。BBMC我国的传播特点我国的传播特点 p吸毒、性传播和采供血途径传播并存吸毒、性传播和采供血途径传播并存p经性传播途径呈上升趋势经性传播途径呈上升趋势 p自高危人群向普通人群扩散自高危人群向普通人群扩散 第40页，共132页。BBMCAIDS 流行的一般规律流行的一般规律由高危人群开始由高危人群开始 一般人群一般人群同性恋IDU妓女嫖客家庭妇女儿童第41页，共132页。BBMCn易感者易感者第42页，共132页。BBMC感染过

21、程感染过程第43页，共132页。BBMCn感染过程感染过程第44页，共132页。BBMC血清转换（窗口期）n从艾滋病病毒感染到血清艾滋病病毒抗体转阳，这一段时间称为窗口期n输血传播时抗体转阳时间较短，2-8周，性传播时稍长，2-3个月n第三代试剂，3周后阳转,30d达90%n95%的感染者在5.8个月之内发生阳转第45页，共132页。BBMC临床潜伏期：临床潜伏期：3-53-5年或更长，体内有年或更长，体内有HIVHIV增殖，但增殖，但不表现临床症状不表现临床症状AIDSAIDS相关综合征期：相关综合征期：HIVHIV病毒大量复制，免病毒大量复制，免疫系统损伤，临床症状开始出现疫系统损伤，临床

22、症状开始出现免疫缺损期：典型免疫缺损期：典型AIDSAIDS期，严重免疫缺陷期，严重免疫缺陷，合并各种并发症及机会感染和恶性肿瘤合并各种并发症及机会感染和恶性肿瘤n感染过程感染过程第46页，共132页。BBMCHIV感染的三种转归n典型病程 (5-10年)70-80%n快速进展病例(2-3年)10-15%n长期无进展病例 小于5%HIV感染超过十年，在未经抗病毒治疗的前提下，CD4+细胞500mm3,病毒载量200/ml时,多为常见细菌感染n如链球菌、嗜血流感杆菌等nCD4200/ml时，可能出现机会性感染n如CMV、PCP、曲霉菌等n结核：CD4较高时多表现为典型结核 低时则变的不典型第50

23、页，共132页。BBMCHIV相关的胃肠道感染n食道感染：多发于CD4200时n念珠菌感染nCMV感染（溃疡）多发于CD450时n胃部感染：多为CMVn肠道感染：沙门氏菌、志贺杆菌、空肠弯曲菌、孢子虫、组织胞浆菌nCD450时，可出现鸟分支杆菌、CMV第51页，共132页。BBMC常见的机会性感染n病毒感染：巨细胞病毒；单纯疱疹病毒n细菌感染：结核；鸟分枝杆菌；流感嗜血杆菌；链球菌；沙门氏菌n真菌感染：念珠菌病；隐球菌病；曲霉菌病n原虫感染：卡氏肺囊虫肺炎；弓形体病；隐孢子虫病第52页，共132页。BBMC卡氏肺囊虫肺炎（PCP）n临床特点：发热、干咳、盗汗、进行性 呼吸急促、紫绀、听诊正常或

24、细湿罗音nX-线：间质性肺炎改变，上中肺野明显n血气：低氧血症n确诊：染色或单克隆抗体间接免疫荧光n实验检测原虫第53页，共132页。BBMCCMV感染nCMV视网膜炎：漂浮物感，视力模糊，视野丧失。眼底：非特异性视网膜炎n多发性神经根炎：小腿登高不对称，无力，麻木，疼痛、进行性肌肉弛缓，下肢轻瘫，反射消失nCMV脑炎：发热，头痛，惊厥n脑脊液：多核白细胞增多n抗-CMV抗体阳性第54页，共132页。BBMC单纯疱疹病毒（HSV）感染n口唇感染：疼痛性溃疡n食管炎：疼痛、吞咽困难，影响进食n脑炎：不常见。但一旦发生危及生命。生殖系感染：丘疹，疱疹，溃疡n肛门直肠感染：严重的肛门直肠疼痛n肛门四

25、周溃疡、便秘第55页，共132页。BBMC隐球菌脑膜炎隐球菌脑膜炎n临床特点：发热、头痛、呕吐、精神或/和性格的改变；脑膜刺激征不明显n脑脊液：蛋白，糖正常或轻度异常；淋巴细胞增多n确诊：脑脊液墨汁染色查找新型隐球菌第56页，共132页。BBMC念珠菌感染n口腔：鹅口疮、口角炎n食管炎：溃疡、糜烂，吞咽痛、吞咽困难n阴道炎：白色凝乳状分泌物，外阴瘙痒、烧灼样痛第57页，共132页。BBMC弓形体感染n弓形体脑炎：发热，头痛，意识模糊，惊厥癫痫发作，共济失调，颅神经麻痹n视网膜脉络膜炎：难与CMV引起的鉴别 n弓形体肺炎：与PCP难鉴别。nCT和MRI：多环状强化性损害n抗-弓形体抗体阳性第58

26、页，共132页。BBMC分支杆菌感染n结核杆菌感染：肺部的原发灶，淋巴管炎及肺门淋巴结核。晚期病例不典型n胸片表现为多发性或间质性变化n鸟分支杆菌感染：n胃肠道感染：腹泻、腹痛、消化不良厌食、体重下降和肝脾肿大n肺部感染：胸片表现为局灶性，进一步发展可形成空洞。第59页，共132页。BBMC第60页，共132页。BBMC第61页，共132页。BBMCn“艾滋病恐惧症艾滋病恐惧症”是一种与是一种与艾滋病艾滋病有关的有关的神经神经症症。艾滋病恐惧症症状者往往具有过度执拗、。艾滋病恐惧症症状者往往具有过度执拗、要求过度精确及过分坚持的人格特性。他们常要求过度精确及过分坚持的人格特性。他们常常错误地把

27、心理恐惧所引起的一些自主神经症常错误地把心理恐惧所引起的一些自主神经症状，认定为艾滋病的症状，每次看医生后，在状，认定为艾滋病的症状，每次看医生后，在阴性检查结果和医生细致解释后，心理负担可阴性检查结果和医生细致解释后，心理负担可得到暂时的解脱。但没过多久，新的疑虑会再得到暂时的解脱。但没过多久，新的疑虑会再次产生，使其不得不再次到医院要求检查。次产生，使其不得不再次到医院要求检查。第62页，共132页。BBMC 免 疫 性n宿主对宿主对HIV免疫应答包括免疫应答包括体液体液和和细胞细胞。n体液免疫产生多种抗体，可降低急性期病毒抗原量，但体液免疫产生多种抗体，可降低急性期病毒抗原量，但不能清除

28、病毒，不能清除病毒，检测抗体可用于诊断检测抗体可用于诊断。n细胞免疫，包括细胞免疫，包括ADCC(antibody dependent cell-mediated cytotoxicity)、CTL(cytotoxic T cell)和和NK细胞。细胞。CTL对对HIV感染细胞的杀伤以及阻止病毒扩散起重要作用，但感染细胞的杀伤以及阻止病毒扩散起重要作用，但不不能清除有能清除有HIV潜伏的感染细胞潜伏的感染细胞。n宿主的免疫力不足是宿主的免疫力不足是HIV一经感染就终身携带的原因一经感染就终身携带的原因。第63页，共132页。BBMC 与逃避宿主免疫系统的防御作用有关：HIV直接损伤CD4T细胞

29、；病毒基因组与细胞染色体整合，细胞不表达或 仅表达少量病毒结构蛋白，形成“无抗原”状态；病毒包膜糖蛋白基因的高度变异性导致不断出 现新抗原；受感染的单核-巨噬细胞是病毒长期的储存细胞。HIV为什么能引起潜伏感染？第64页，共132页。BBMC第65页，共132页。BBMC第66页，共132页。BBMC 正常CD4+T细胞数1000个/uln在在HIV感染个体，感染个体，CD4+T细胞数每年以每微升细胞数每年以每微升60个的速度降个的速度降低，大约感染后低，大约感染后10年左右数目降至年左右数目降至 0；n感染后约感染后约 7 年年CD4+T细胞数降至细胞数降至400200：全身系统症状，全身系

30、统症状，皮肤的感染，细菌感染最常见；皮肤的感染，细菌感染最常见；n感染后约感染后约 8 年年CD4+T细胞降至细胞降至200以下：以下：免疫系统衰竭，发生免疫系统衰竭，发生严重的机会感染，如卡氏肺囊虫肺炎，荚膜组织胞浆菌病和严重的机会感染，如卡氏肺囊虫肺炎，荚膜组织胞浆菌病和弓行体病；弓行体病；n感染后约感染后约10 年年CD4+T细胞降至细胞降至50或以下或以下：免疫功能完全丧失。：免疫功能完全丧失。鸟型结核分支杆菌引起广泛性的感染，鸟型结核分支杆菌引起广泛性的感染，CMV感染也常见。感染也常见。第67页，共132页。BBMC HIV对CD4+T细胞损害的机制1）病毒感染对细胞的直接杀伤作用

31、病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；HIV增殖时可产生大量未整合的病毒cDNA,干扰细胞的正常生物合成；导致CD4+T细胞融合，形成多核巨细胞，丧失正常分裂能力，导致细胞溶解。第68页，共132页。BBMCHIV对CD4+T细胞损害的机制2)免疫病理所引起的细胞损伤：免疫病理所引起的细胞损伤：n受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异性性CTL的识别，或特异性抗体介导的的识别，或特异性抗体介导的ADCC作用而作用而破坏细胞；破坏细胞；nHIV诱导自身免疫，激活大量诱导自身免疫，激活大量CD4+T细胞，造成细胞，造成细胞

32、免疫缺损。细胞免疫缺损。3)HIV感染诱导感染诱导T细胞凋亡：细胞凋亡：n病毒激活病毒激活T细胞凋亡基因，表达细胞凋亡基因，表达FAS受体。受体。第69页，共132页。BBMC 第70页，共132页。BBMC靶细胞被破坏的临床意义是什么?n T细胞死亡：细胞死亡：HIV诱导血中诱导血中T细胞以每年每微升细胞以每年每微升60个的速率下降，而个的速率下降，而T辅助细胞在细胞免疫、激活和诱导巨噬细胞、嗜中性粒细胞辅助细胞在细胞免疫、激活和诱导巨噬细胞、嗜中性粒细胞、B淋巴细胞等中起重要作用，因此淋巴细胞等中起重要作用，因此CD4+T细胞的破坏将细胞的破坏将导致免疫缺陷的发生。导致免疫缺陷的发生。n多

33、核巨细胞形成多核巨细胞形成：HIV感染的重要生物学特征感染的重要生物学特征 HIV不需接触血液，可在细胞和细胞间扩散，逃避血不需接触血液，可在细胞和细胞间扩散，逃避血液循环中抗体的中和。液循环中抗体的中和。第71页，共132页。BBMC靶细胞被破坏的临床意义是什么？nB淋巴细胞淋巴细胞：HIV并不感染并不感染B淋巴细胞，但可激活淋巴细胞，但可激活B细胞产生大量无功细胞产生大量无功能的免疫球蛋白，不能清除病毒能的免疫球蛋白，不能清除病毒,可导致高可导致高球蛋白血症。球蛋白血症。n单核细胞和巨噬细胞单核细胞和巨噬细胞：临床意义有两方面：临床意义有两方面：1）单核）单核-巨噬细胞作为巨噬细胞作为HI

34、V复制增殖复制增殖的的“避难所避难所”，逃避免疫系统的清除；，逃避免疫系统的清除；2）单核）单核-巨噬细胞巨噬细胞可以通过可以通过BBB，因此，因此HIV得以进入中枢神经系统引起脑得以进入中枢神经系统引起脑部疾病。部疾病。第72页，共132页。BBMC HIV分类 (逆转录病毒科慢病毒属灵长类免疫缺陷病毒亚属）nHIV-1:全球流行全球流行；毒株各主要基因间的变异率小；毒株各主要基因间的变异率小；实验室的临床研究主要以实验室的临床研究主要以HIV-1为主。为主。nHIV-2:西非流行西非流行；与；与HIV-1间各基因的变异率可达间各基因的变异率可达 60%，而与，而与SIV mac基因间变异率

35、只有基因间变异率只有30%；毒力较弱，引起的病程较长，症状较轻。毒力较弱，引起的病程较长，症状较轻。n SIV:猴免疫缺陷病毒，感染猕猴，引起与人艾滋病猴免疫缺陷病毒，感染猕猴，引起与人艾滋病 相似的疾病。相似的疾病。从进化上HIV-2与SIV的关系比与HIV-1的关系更近。在疫苗研究中，SIV感染模型对HIV-2参考价值大于对HIV-1。第73页，共132页。BBMCn球形，直径球形，直径100100120nm120nm第74页，共132页。BBMC 生物学特性 核酸核酸：两条两条相同单正链相同单正链RNA与核衣壳与核衣壳 蛋白蛋白(P7)结合，形成双体结构结合，形成双体结构 衣壳衣壳：双层

36、双层 内层为衣壳蛋白（内层为衣壳蛋白（P24)外层为内膜蛋白（外层为内膜蛋白（P17)包包 膜膜:脂质双层脂质双层刺刺 突突:gp120,gp41 形态与结构核衣壳第75页，共132页。BBMC第76页，共132页。BBMC生物学特性n由由2条相同正链条相同正链RNA在在5端通过氢键连接成二聚体端通过氢键连接成二聚体 n基因组全长约基因组全长约9700碱基；碱基；n结构基因结构基因:gag、pol、envn调节基因调节基因:tat、rev、nef、vif、vpr、vpu/vpxn两端的长末端重复序列两端的长末端重复序列(LTRs)，含有启动子、增强子、，含有启动子、增强子、TATA序列等多个特

37、定调控区，对病毒基因组转录的调控序列等多个特定调控区，对病毒基因组转录的调控起关键作用。起关键作用。基因组第77页，共132页。BBMC第78页，共132页。BBMC 结构基因ngag 编码主要结构蛋白：编码主要结构蛋白：核衣壳蛋白（核衣壳蛋白（p7)、衣、衣 壳蛋白壳蛋白(p24)、内膜蛋白、内膜蛋白(p17)，具有抗原性。，具有抗原性。npol 编码蛋白水解酶、整合酶和逆转录酶。编码蛋白水解酶、整合酶和逆转录酶。nenv 编码包膜刺突编码包膜刺突：糖蛋白：糖蛋白gp120和和gp41。gp120有中和抗体和有中和抗体和CD4分子结合位点分子结合位点(高变区高变区V1-V5)，gp41介导病

38、毒包膜与宿主细胞膜融合。介导病毒包膜与宿主细胞膜融合。第79页，共132页。BBMC 调节基因ntat 编码反式激活转录因子。编码反式激活转录因子。nrev 调节调节mRNA的剪接和促进的剪接和促进mRNA转运至细胞质转运至细胞质。nnef 提高提高HIV的复制能力和感染性。的复制能力和感染性。最近实验表明感染最近实验表明感染nef 缺陷缺陷HIV-1的机体的机体没有患没有患艾滋病，也无艾滋病，也无T细胞的破坏，提示细胞的破坏，提示nef 可作为疫苗的靶点可作为疫苗的靶点。第80页，共132页。BBMC HIV基因组的变异性nHIV基因组的易变性是发展基因组的易变性是发展HIV疫苗的障碍：疫苗

39、的障碍：env 基因基因：编码：编码gp120糖蛋白区域为高变区；可将糖蛋白区域为高变区；可将 HIV-1分为分为AF、H、O 8个亚型。个亚型。pol 基因基因：编码逆转录酶的区域突变率高。：编码逆转录酶的区域突变率高。nef 基因基因：nef 缺失个体不发病，可作为疫苗的靶点。缺失个体不发病，可作为疫苗的靶点。nHIV基因组的易变性使病毒逃脱宿主免疫系统以及基因组的易变性使病毒逃脱宿主免疫系统以及疫苗诱生的抗体。疫苗诱生的抗体。第81页，共132页。BBMC HIV的复制 吸附、穿入细胞吸附、穿入细胞:刺突刺突(gp120)细胞受体细胞受体(CD4)和和共受共受 体体(CXCR4、CCR5

40、)，膜融合，膜融合(gp41);脱壳脱壳:胞浆内胞浆内,释放释放RNA;逆转录逆转录:胞浆内胞浆内,逆转录酶逆转录酶,RNA酶酶H;RNA()cDNA(-)RNA:DNA杂交体杂交体dsDNA细胞核细胞核 整合至宿主细胞染色体整合至宿主细胞染色体:细胞核内细胞核内,整合酶整合酶,形成前病毒；形成前病毒；前病毒活化前病毒活化:LTR(启动子启动子,增强子增强子),RNA多聚酶多聚酶;DNARNA非结构蛋白结构蛋白拼接成mRNA加帽加尾成子代RNA核衣壳出芽释放第82页，共132页。BBMCssRNAssRNAprovirusdsDNARNA:DNA第83页，共132页。BBMC HIV吸附靶细胞

41、受体分子模式图吸附靶细胞受体分子模式图CCR5：单核-巨噬细胞 （早期）CXCR4：T淋巴细胞 （晚期）辅助受体第84页，共132页。BBMC潜伏感染第85页，共132页。BBMC 在HIV的复制过程中，逆转录酶、整合酶和蛋白水解酶起关键性作用，可作为筛选抗HIV药物的重要靶位。第86页，共132页。BBMC生物学特性 n培养特性培养特性:敏感细胞为带敏感细胞为带CD4受体的细胞受体的细胞;敏感动物为恒河猴敏感动物为恒河猴,黑黑猩猩猩猩,但感染过程和症状与人不同。但感染过程和症状与人不同。n抵抗力抵抗力:较弱较弱;对热对热(56、30min可灭活）、脂溶剂、氧化剂可灭活）、脂溶剂、氧化剂敏感（

42、敏感（0.2%次氯酸钠、次氯酸钠、0.3%H2O2和和50%乙醇处理乙醇处理5min可灭可灭活活),但在室温但在室温(2022)活性可保存活性可保存7天。天。对紫外线、对紫外线、X 射线和射线和r射线不敏感射线不敏感第87页，共132页。BBMCn抵抗力弱，抵抗力弱，56305630minmin灭活，室温可保存灭活，室温可保存7 7天天nWHOWHO建议：建议：0.5%0.5%次氯酸钠次氯酸钠0.1%0.1%漂白粉漂白粉5%5%福尔马林福尔马林 10-3010-30minmin70%70%乙醇乙醇2 2戊二醛戊二醛煮沸煮沸 20min20min高压灭菌高压灭菌 20min20min第88页，共

43、132页。BBMC实验室检查n血常规：WBC减少、RBC、HB减少n免疫学：CD4计数下降、CD4/CD8倒置n病原学：抗-HIV、P24、病毒载量第89页，共132页。BBMC实验室检查n在血清阳转前可以存在HIV抗原血症和病毒血症。出现高滴度的P24抗原血症（持续2-4周），1200-4200pg/ml；在外周血中也很容易分离到病毒n窗口期时：HIV抗体阴性，诊断主要依靠P24抗原（特异性100%，敏感性80%，）或病毒载量（特异性90%，敏感性100%）第90页，共132页。BBMC 病毒载量(Viral load)n过去用过去用CD4数确定数确定HIV感染的严重性，机会感染的感染的严重

44、性，机会感染的机率，对抗病毒治疗的反应。机率，对抗病毒治疗的反应。n病毒载量病毒载量:即用即用PCR检测血浆中检测血浆中HIV RNA含量表含量表示，与机会感染的机率、示，与机会感染的机率、AIDS预后和死亡的机率预后和死亡的机率呈正相关。呈正相关。n病毒载量已成为比病毒载量已成为比CD4数更好的指标，用于预测数更好的指标，用于预测AIDS发展和对治疗的反应。发展和对治疗的反应。第91页，共132页。BBMC病毒载量与5年内进入AIDS阶段的关系血浆HIV病毒载量 5年内发展为AIDS的百分比Copies/ml36270 62第92页，共132页。BBMC第93页，共132页。BBMC实验室诊

45、断处理原则n所有HIV检测应该在受检者知情同意下进行n可疑病例首先行初筛实验n初筛实验室HIV抗体阳性标本应尽快送确认实验室确认，确认之前不得通知受检者n经确认的阳性结果原则上只通知受检者本人或亲属，不得泄露n提供HIV检测前后咨询，提供预防HIV传播的信息n为检测结果阳性者提供必要的支持和帮助第94页，共132页。BBMCn直接检测病毒或其组成部分直接检测病毒或其组成部分(P24(P24或核酸）或核酸）n检测人体检测人体HIVHIV免疫反应免疫反应HIVHIV特异性抗体特异性抗体 从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均为为1-31-3个月，有一小部分个月

46、，有一小部分HIVHIV感染者出现延迟反感染者出现延迟反应应第95页，共132页。BBMCP24P24抗原测定抗原测定第96页，共132页。BBMCP24P24抗原测定抗原测定结果报告和解释结果报告和解释nHIV-1 P24HIV-1 P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认抗原的阳性结果必须经过中和试验确认nHIV-1 P24HIV-1 P24抗原阳性仅作为抗原阳性仅作为HIVHIV感染的辅助诊断依据，不能依感染的辅助诊断依据，不能依此确诊此确诊nHIV-1 P24HIV-1 P24抗原阴性结果只表示在本试验中无反应，不能抗原阴性结果只表示在本试验中无反应，不能排除排除HIVHIV感染感染第

47、97页，共132页。BBMCHIVHIV核酸检测核酸检测第98页，共132页。BBMCHIVHIV核酸检测核酸检测定性检测定性检测n用于用于HIVHIV感染的辅助诊断。通常使用感染的辅助诊断。通常使用PCRPCR或或RT-PCRRT-PCR技术，使技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量涵盖所有的或常见的毒株，也可使或自行设计，应尽量涵盖所有的或常见的毒株，也可使用复合引物。用复合引物。n通常根据扩增产物的电泳图像判定结果，阳性结果还要进通常根据扩增产物的电泳图像判定结果，阳性结果还要进行核酸序列测定来确定。行核

48、酸序列测定来确定。nHIVHIV核酸检测阴性核酸检测阴性,只可报告本次实验结果阴性，不可排除只可报告本次实验结果阴性，不可排除HIVHIV感染。感染。nHIVHIV核酸检测阳性核酸检测阳性,可作为诊断可作为诊断HIVHIV感染的辅助指标，不单感染的辅助指标，不单独用于独用于HIVHIV感染的诊断。感染的诊断。n报告核酸定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引报告核酸定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。物序列。第99页，共132页。BBMCHIVHIV核酸检测核酸检测定量检测定量检测n常用于监测常用于监测HIVHIV感染者的病程进展和抗病毒治疗效果。目感染者的病程进展和抗病毒治疗效果

49、。目前常用的方法有逆转录前常用的方法有逆转录PCRPCR实验（实验（RT-PCRRT-PCR）、核酸序列扩增）、核酸序列扩增实验（实验（NASBANASBA）、分支）、分支DNADNA杂交实验（杂交实验（bDNAbDNA）等，这几种进口）等，这几种进口试剂盒的最低检测限为试剂盒的最低检测限为20-5020-50拷贝拷贝/毫升毫升n按照仪器读数报告结果，应注明使用的试验方法、样品按照仪器读数报告结果，应注明使用的试验方法、样品种类和样品量种类和样品量n测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。注意低于最低检测限的结果不能排除注意低于最低检测限

50、的结果不能排除HIVHIV感染。感染。n应附上仪器打印的数据应附上仪器打印的数据第100页，共132页。BBMCHIVHIV核酸检测核酸检测样品的采集和处理样品的采集和处理n用于用于HIVHIV核酸检测的样品有全血、血浆、组织和其他分泌物，核酸检测的样品有全血、血浆、组织和其他分泌物，有时还包括生物制品有时还包括生物制品n采集样品应避免微生物和核酸污染。避免采集样品应避免微生物和核酸污染。避免RNARNA酶造成的降解酶造成的降解，采样后，采样后4-84-8小时内处理。处理后的样品应分装、标记，冻存小时内处理。处理后的样品应分装、标记，冻存于于-20-20以下，以下，RNARNA类样品冻存于类样