医学微生物学球菌ppt课件(PPT 108页).pptx
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1、球菌球菌coccus1第1页,共108页。SPA的定义及生物学功能;的定义及生物学功能;链球菌的分型,甲型链球菌与肺炎链球菌的分型,甲型链球菌与肺炎 链球菌的鉴别要点;链球菌的鉴别要点;抗抗O试验的原理及用途;试验的原理及用途;脑膜炎球菌和淋病奈瑟菌的微生物脑膜炎球菌和淋病奈瑟菌的微生物 学检查。学检查。主主 要要 内内 容容2第2页,共108页。G+与与G-球菌球菌球菌球菌(coccus):个体形状呈球形或椭圆形个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌。的一大类细菌。3第3页,共108页。化脓性球菌化脓性球菌(pyogenic coccus)少数对人类有致病性的球菌,能引起机体化脓性炎少数对人类有
2、致病性的球菌,能引起机体化脓性炎症。症。根据革兰染色不同分两类:根据革兰染色不同分两类:G 球菌:葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等球菌:葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等 G球菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等球菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等4第4页,共108页。第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属 (staphylococcus)5第5页,共108页。1.形态与染色形态与染色:G、球形、葡萄串状排列、无鞭毛和芽胞。、球形、葡萄串状排列、无鞭毛和芽胞。一、一、生物学性状生物学性状6第6页,共108页。2.培养特性培养特性 易培养易培养:普通平板中生长良好、血平板生长更佳;普通平板中生长良好、血平板生长更佳
3、;产色素产色素:金黄色、白色、柠檬色(脂溶性)金黄色、白色、柠檬色(脂溶性)中等大,突起,中等大,突起,有色素,有色素,S S型菌落。型菌落。7第7页,共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(金黄色)(金黄色)表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌(白色)(白色)腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌(柠檬色)(柠檬色)8第8页,共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌有透明溶血环。有透明溶血环。表皮葡萄球菌无表皮葡萄球菌无溶血环。溶血环。9第9页,共108页。3.抗原构造抗原构造葡萄球菌葡萄球菌A蛋白蛋白(staphylococcus A protein,SPA):细胞壁表面细胞壁表面的一种单链多肽,具有多种生物学作
4、用。的一种单链多肽,具有多种生物学作用。SPAcapsuleteichoic acidpeptidoglycan10第10页,共108页。SPASPA的应用:协同凝集试验的应用:协同凝集试验SPASPA与与IgGIgG分子分子 的的FcFc段结合段结合抗原抗原葡萄球菌聚集在一起葡萄球菌聚集在一起出现凝集现象出现凝集现象11第11页,共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌(S.epidermidis)腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)性状性状金葡菌金葡菌表皮葡菌表皮葡菌腐生葡菌腐生葡菌菌落色素菌落色素 金黄色金黄色 白色白色白
5、色或柠白色或柠檬色檬色发酵甘露醇发酵甘露醇 +-凝固酶凝固酶 +-溶血性溶血性 溶血溶血 不溶血不溶血不溶血不溶血耐热核酸酶耐热核酸酶 +-SPA +-致病性致病性强强弱弱无无4.分类分类据色素、生化反应据色素、生化反应12第12页,共108页。5.抵抗力抵抗力 无芽胞菌中抵抗力最强,无芽胞菌中抵抗力最强,耐干燥耐干燥,对石炭酸、龙胆紫等敏,对石炭酸、龙胆紫等敏感。感。易产生易产生耐药性耐药性,特别对青霉素,特别对青霉素G的耐药菌株高达的耐药菌株高达90%以上。以上。由于抗生素的广泛应用,耐药菌株逐渐增多,尤其是由于抗生素的广泛应用,耐药菌株逐渐增多,尤其是耐甲氧耐甲氧西林金黄色葡萄球菌西林金
6、黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院感染最常见的致已成为医院感染最常见的致病菌。病菌。13第13页,共108页。长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触定植或感染的病人接触都是造成都是造成院内院内MRSA流行的危险因素。流行的危险因素。MRSA定植或感染的人员定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)14第14页,共108页。MRSA超级细菌?超级细菌?2007年年11月:月:J
7、AMA刊登美国政府调查报告,被称为刊登美国政府调查报告,被称为“超级病菌超级病菌”MRSA正在美国国内蔓延,每年预计有正在美国国内蔓延,每年预计有超过超过9万人感染这一病菌,被列为世界三大最难解决感染性万人感染这一病菌,被列为世界三大最难解决感染性疾患第疾患第1位,位,年致死的人数可能超过艾滋病年致死的人数可能超过艾滋病1978年,医务人员在上海抽检了年,医务人员在上海抽检了200株金黄色葡萄球菌株金黄色葡萄球菌,分离出的,分离出的MRSA还不到还不到5%。2007年年11月:北京市卫生局关于印发月:北京市卫生局关于印发对耐甲氧西林金对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌病例监测与控制方案黄色葡萄球菌病例
8、监测与控制方案的通知的通知2010年,年,MRSA在医院内感染的分离率已高达在医院内感染的分离率已高达60%以上以上。15第15页,共108页。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1.致病物质 金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。侵袭性酶:凝固酶;外毒素:葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1(TSST-1);表面结构或蛋白:如粘附素、荚膜、肽聚糖和SPA等。16第16页,共108页。使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热,使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热,100,30min或高压灭菌后仍保持部分活性;但易被旦白酶破坏。或高压灭菌后仍保持部分活
9、性;但易被旦白酶破坏。凝固酶(凝固酶(coagulase)17第17页,共108页。分类分类:A:游离凝固酶,分泌至菌体外:游离凝固酶,分泌至菌体外 B:结合凝固酶:结合凝固酶/凝聚因子,结合于菌体表面不释放,利于凝聚因子,结合于菌体表面不释放,利于细菌凝集。细菌凝集。凝固酶原物质凝固酶原物质凝固酶样物质凝固酶样物质纤维旦白原纤维旦白原 (液态)(液态)纤维旦白纤维旦白(固态)(固态)血浆凝固血浆凝固协同因子协同因子18第18页,共108页。致病机理:致病机理:A:使周围血液使周围血液/血浆中的纤维旦白沉积于菌体表面,阻血浆中的纤维旦白沉积于菌体表面,阻碍吞噬细胞的吞噬或胞内消化作用;碍吞噬细
10、胞的吞噬或胞内消化作用;B:集聚在细菌四周,保护病菌不受血清中杀菌物质的集聚在细菌四周,保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏;破坏;C:细菌不易扩散,使感染易于局限化和形成血栓。细菌不易扩散,使感染易于局限化和形成血栓。意义:意义:鉴别有无致病性的重要指标。鉴别有无致病性的重要指标。19第19页,共108页。葡萄球菌溶素(葡萄球菌溶素(staphylolysin)损伤细胞膜的毒素,主要是损伤细胞膜的毒素,主要是 溶素;溶素;对多种哺乳动物对多种哺乳动物RBC有溶血作用有溶血作用,对白细胞、血小板、,对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用;肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细
11、胞等均有损伤作用;溶素是一种外毒素,具有良好的抗原性;经甲醛液溶素是一种外毒素,具有良好的抗原性;经甲醛液脱毒后可制成类毒素;脱毒后可制成类毒素;作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区,破坏膜的完整作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区,破坏膜的完整性导致细胞溶解。性导致细胞溶解。20第20页,共108页。杀白细胞素(杀白细胞素(leukocidin)只攻击只攻击中性粒细胞和巨噬细胞中性粒细胞和巨噬细胞;与细胞膜受体结合,使细胞膜发生构型变化,膜通透与细胞膜受体结合,使细胞膜发生构型变化,膜通透性增高,细胞浆内的颗粒排除,细胞死亡;性增高,细胞浆内的颗粒排除,细胞死亡;在抵抗宿主吞噬细胞,增强病菌侵袭
12、力方面有意义。在抵抗宿主吞噬细胞,增强病菌侵袭力方面有意义。21第21页,共108页。肠毒素(肠毒素(enterotoxin)约约50%临床分离金黄色葡萄球菌可产生;临床分离金黄色葡萄球菌可产生;耐热,抗胃肠液中蛋白酶的水解作用;耐热,抗胃肠液中蛋白酶的水解作用;产毒菌株产毒菌株污染牛奶、肉类等食物污染牛奶、肉类等食物,经,经10h便产生大量便产生大量肠毒素;肠毒素;作用机制:毒素与肠道神经细胞受体作用,刺激作用机制:毒素与肠道神经细胞受体作用,刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食物中毒。物中毒。22第22页,共108页。表皮剥脱毒素(表
13、皮剥脱毒素(exfoliative toxin)由质粒编码产生的一种蛋白质,可水解宿主表皮粒层的细由质粒编码产生的一种蛋白质,可水解宿主表皮粒层的细胞内桥胞内桥桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中可引起烫伤样皮肤综合征可引起烫伤样皮肤综合征(SSSS),表现为弥漫性红斑和水疱,表现为弥漫性红斑和水疱形成,继以表皮上层大片脱落,受损部位的炎症反应轻微。形成,继以表皮上层大片脱落,受损部位的炎症反应轻微。23第23页,共108页。毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)由噬菌体由噬菌体I群感染和产生。引起机体发热,增加对内群感染和产生
14、。引起机体发热,增加对内毒素的敏感性毒素的敏感性;多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征(toxic shok syndrome,TSS)。病人的临床表现主要包括急病人的临床表现主要包括急性高热、低血压、性高热、低血压、猩红热样皮疹伴脱屑,严猩红热样皮疹伴脱屑,严重者发生休克。重者发生休克。24第24页,共108页。2.所致疾病所致疾病感染类型感染类型 所致疾病所致疾病侵袭性侵袭性 局部感染局部感染 全身感染全身感染毒素性毒素性 食物中毒食物中毒 烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征 SSSS 毒性休克综合征毒性休克综合征TSS25第25页,共108页。26第26页,
15、共108页。2013年,年,7月月18日,有网友爆料在福建泉州一家医院内的女婴日,有网友爆料在福建泉州一家医院内的女婴在恒温箱内烤死的事件,引来了很多网友的关注。在恒温箱内烤死的事件,引来了很多网友的关注。据悉,一名刚刚出生据悉,一名刚刚出生12天的女婴在恒温箱内死亡,其家属称孩子是天的女婴在恒温箱内死亡,其家属称孩子是被活活烤死,孩子的背部和腿部均有严重的溃烂,并且全身焦黑惨不忍睹。被活活烤死,孩子的背部和腿部均有严重的溃烂,并且全身焦黑惨不忍睹。死婴的家属找医院要说法,院方出面解释称,恒温箱的最高温度在死婴的家属找医院要说法,院方出面解释称,恒温箱的最高温度在3737度,度,根本不可能将初
16、生的婴儿烤死,因此也不能百分百的确定女婴的死与恒温根本不可能将初生的婴儿烤死,因此也不能百分百的确定女婴的死与恒温箱有直接关系。箱有直接关系。医院方面也站出来称,孩子是因为感染了葡萄球菌性烫伤样医院方面也站出来称,孩子是因为感染了葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征。因此身体的外表看上去就像烫伤一样。皮肤综合征。因此身体的外表看上去就像烫伤一样。福建泉州福建泉州“医院保温箱烤死婴儿医院保温箱烤死婴儿”事件事件27第27页,共108页。28第28页,共108页。人类凝固酶阴性葡萄球菌(人类凝固酶阴性葡萄球菌(CNSCNS)感染中以)感染中以表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌的感染最为常见。的感染最为常见。CNSCN
17、S主要引起以下几种感染:泌尿系感染,主要引起以下几种感染:泌尿系感染,细菌性心内膜炎,败血症等,其中大多为医院细菌性心内膜炎,败血症等,其中大多为医院内感染。此外,心脏起搏器安装、置换人工心内感染。此外,心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。凝固酶阴性葡萄球菌的感染。凝固酶阴性葡萄球菌的致病性凝固酶阴性葡萄球菌的致病性29第29页,共108页。3.免疫性 人体有一定的天然免疫力,只有当皮肤黏膜受伤后,宿主免疫力降低时,才易引起葡萄球菌感染。感染后能获得一定的免疫力,但不强,难以防止再次感染。30第30
18、页,共108页。三、微生物学检查三、微生物学检查 标本采集标本采集 检查程序检查程序 检查方法检查方法31第31页,共108页。1.1.标本采集标本采集 根据病情采集标本根据病情采集标本 种类:脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、种类:脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意:无菌操作,避免污染。注意:无菌操作,避免污染。32第32页,共108页。2.检查程序检查程序脓液、咽拭子、穿刺液脓液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液尿液、痰液脑脊液血液脑脊液血液粪便、呕吐粪便、呕吐物物直接涂片染色直接涂片染色增菌培养增菌培养分离培养分离培养(血平板)(血平板)分
19、离培养分离培养(高盐甘露醇平(高盐甘露醇平板)板)取可疑菌落取可疑菌落鉴定试验药敏试验鉴定试验药敏试验涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶其他鉴定试验报告报告初初 报报33第33页,共108页。3.检查方法检查方法 直接涂片镜检直接涂片镜检 适用于:正常情况下无菌的标本(如脑脊液)适用于:正常情况下无菌的标本(如脑脊液)伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等初步报告:初步报告:“查见革兰阳性葡萄状排列球菌,疑为葡萄球菌查见革兰阳性葡萄状排列球菌,疑为葡萄球菌”或:或:“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”34第34页,共108页。分离培养分离培养
20、 50ml50ml葡萄糖肉汤(增菌)葡萄糖肉汤(增菌)浑浊浑浊无菌(无菌(7 7天)天)报告:报告:无菌生长无菌生长脑脊液、脓液、脑脊液、脓液、穿刺液、咽拭、穿刺液、咽拭、尿液尿液血平板血平板血液标本血液标本5ml5ml粪便、粪便、呕吐物呕吐物高盐甘露醇高盐甘露醇平板平板3718-24h35第35页,共108页。药敏实验药敏实验36第36页,共108页。鉴定试验鉴定试验(1)血浆凝固酶试验:金黄色葡萄球菌()血浆凝固酶试验:金黄色葡萄球菌(+)(2)甘露醇发酵试验:金黄色葡萄球菌()甘露醇发酵试验:金黄色葡萄球菌(+)(3)耐热核酸酶试验:金黄色葡萄球菌()耐热核酸酶试验:金黄色葡萄球菌(+)
21、(4)肠毒素测定:)肠毒素测定:金黄色葡萄球菌产生金黄色葡萄球菌产生(5)SPA检测:检测:金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(6)凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定)凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定37第37页,共108页。肠肠 毒毒 素素 测测 定定病人呕吐物、粪便、剩余食物病人呕吐物、粪便、剩余食物高盐肉汤高盐肉汤3724h分离培养分离培养肉汤煮沸肉汤煮沸30min30min,离心,取上清夜离心,取上清夜幼幼 猫猫观察症状(观察症状(4h4h出现)出现)38第38页,共108页。SPA 的的 检检 测测致病性葡萄球菌致病性葡萄球菌 (SPA)SPA)兔抗羊红细胞兔抗羊红细胞AbAb(Ig
22、GFcIgGFc)SRBC致敏羊红细胞致敏羊红细胞39第39页,共108页。防防注意消毒注意消毒隔离隔离注意个人注意个人卫生卫生防止院内防止院内交叉感染交叉感染防止耐药防止耐药菌株产生菌株产生治治抗菌素抗菌素药敏试验药敏试验自身菌自身菌苗疗法苗疗法四、防治原则四、防治原则40第40页,共108页。第二节第二节 链球菌属链球菌属 (Streptococcus)41第41页,共108页。类别类别溶血现象溶血现象名称名称致病性致病性甲型溶血性甲型溶血性链球菌链球菌草绿色溶血草绿色溶血环环 溶血溶血多为条件致病菌多为条件致病菌乙型溶血性乙型溶血性链球菌链球菌完全溶血环完全溶血环 溶血溶血致病力强致病力
23、强丙型链球菌丙型链球菌不溶血不溶血无致病性无致病性1、根据溶血现象分类:按在血平板上培养后是否产生溶血分类42第42页,共108页。根据溶血现象分类根据溶血现象分类 甲甲型型溶溶链链乙乙型型溶溶链链丙丙型型链链球球菌菌43第43页,共108页。2、抗原结构分类:根据细胞壁中抗原结构(C多糖抗原)不同,分成AV 20个血清群,对人致病的链球菌菌株90%属A群。对人类致病的对人类致病的A群链球菌多数呈现乙型溶血群链球菌多数呈现乙型溶血。44第44页,共108页。一、生物学特性一、生物学特性1.形态与染色形态与染色 G+,球形或椭,球形或椭圆形,呈链状排列,圆形,呈链状排列,无鞭毛、无芽胞,无鞭毛、
24、无芽胞,有荚膜。有荚膜。A A 群群 链链 球球 菌菌45第45页,共108页。2.2.培养特性培养特性条件:多数为兼性厌氧菌,营养要求较高,条件:多数为兼性厌氧菌,营养要求较高,血平血平板板生长良好,生长良好,溶血;液体:液体:沉淀生长沉淀生长。形成长链形成长链及及絮状沉淀絮状沉淀46第46页,共108页。链球菌菌落(血平板):链球菌菌落(血平板):细小,灰白色,圆形,细小,灰白色,圆形,突起,光滑,湿润,边缘整突起,光滑,湿润,边缘整齐,菌落周围齐,菌落周围有有溶血溶血。47第47页,共108页。3.生化反应生化反应 活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。菊糖
25、(菊糖(-)胆汁溶菌试验(胆汁溶菌试验(-)optochinoptochin敏感试验(敏感试验(-)触酶触酶(-)(区别于葡萄球菌属)(区别于葡萄球菌属)(区别甲链与肺链)(区别甲链与肺链)48第48页,共108页。4.抗原构造抗原构造 多糖抗原(多糖抗原(C C抗原):群特异性。抗原):群特异性。蛋白抗原(蛋白抗原(M M、T T、R R、S S):型特异性,与致病有关的):型特异性,与致病有关的是是M M蛋白抗原蛋白抗原。核蛋白抗原:无特异性。核蛋白抗原:无特异性。抵抗力不强,抵抗力不强,60 30min60 30min被杀死,对常用消毒剂敏感。被杀死,对常用消毒剂敏感。干燥尘埃中生存数月
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