布鲁氏菌实验室检验课件.ppt

1、布鲁氏菌布鲁氏菌病原学、病原学、血清学血清学诊断诊断疾病预防控制中心疾病预防控制中心主要内容：主要内容：1 1、布鲁氏菌病原学；、布鲁氏菌病原学；2 2、布鲁氏菌诊断标准；、布鲁氏菌诊断标准；3 3、布鲁氏菌血清学实验的几种方法。、布鲁氏菌血清学实验的几种方法。（一）（一）布氏菌概述布氏菌概述 18871887年英国医生布鲁氏首先从死于年英国医生布鲁氏首先从死于“马尔他热马尔他热”的英的英国 士 兵 脾 脏 中 分 离 出 羊 种 布 氏 菌 后，布 鲁 氏 菌 属国 士 兵 脾 脏 中 分 离 出 羊 种 布 氏 菌 后，布 鲁 氏 菌 属（BrucellaBrucella)，包括包括6 6

2、个种个种1919个生物型。个生物型。羊种布氏菌（羊种布氏菌（Br Br melitensismelitensis)牛种布氏菌（牛种布氏菌（Br Br abortusabortus)猪种布氏菌（猪种布氏菌（Br Br suissuis)沙漠森林野鼠种布氏菌（沙漠森林野鼠种布氏菌（Br Br neotomaeneotomae)绵羊附睾种布氏菌（绵羊附睾种布氏菌（Br Br ovisovis)犬种布氏菌（犬种布氏菌（Br Br caniscanis)布鲁氏菌的发展史布鲁氏菌的发展史年份年份菌名菌名发现人发现人国家国家宿主宿主1887羊种菌羊种菌Bruce马尔他马尔他羊羊1897牛种菌牛种菌Bang丹

3、麦丹麦牛牛1914猪种菌猪种菌Traun美国美国猪猪1953绵羊附睾种菌绵羊附睾种菌Buadle新西兰新西兰公绵羊公绵羊1956沙漠森林鼠种菌沙漠森林鼠种菌Stoennen美国美国沙漠森林野鼠沙漠森林野鼠1966犬种菌犬种菌Carmichael美国美国小猎犬小猎犬（一）病原学概述（一）病原学概述布鲁氏菌属（布鲁氏菌属（BrucellaBrucella)包括包括6 6个种个种1919个生物型。个生物型。牛种布氏菌（牛种布氏菌（Br Br abortusabortus)：1 1、2 2、3 3、4 4、5 5、6 6、7 7、9 9型型 羊种布氏菌（羊种布氏菌（Br Br melitensisme

4、litensis)：1 1、2 2、3 3型型 猪种布氏菌（猪种布氏菌（Br Br suissuis)：1 1、2 2、3 3、4 4、5 5型型 沙漠森林野鼠种布氏菌（沙漠森林野鼠种布氏菌（Br Br neotomaeneotomae)绵羊附睾种布氏菌（绵羊附睾种布氏菌（Br Br ovisovis)犬种布氏菌犬种布氏菌 （Br Br caniscanis)1 1、形、形 态态n布鲁氏菌是一组微小的球状、球杆状、短布鲁氏菌是一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌；杆状细菌；n宽约宽约0.30.30.50.5微米、长微米、长0.60.61.51.5微米。电微米。电镜下见到的羊种菌为明显的球杆状、牛

5、种镜下见到的羊种菌为明显的球杆状、牛种菌和猪种菌为短杆状；菌和猪种菌为短杆状；n6 6种布鲁氏菌靠形态很难区分，一般来说，种布鲁氏菌靠形态很难区分，一般来说，羊种菌最小，牛种菌产次之，猪种菌较大；羊种菌最小，牛种菌产次之，猪种菌较大；n布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和夹膜。布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和夹膜。2 2、染、染 色色n涂片染色检查多为单个排列，少见成对涂片染色检查多为单个排列，少见成对短链排列。短链排列。n布鲁氏菌可被碱性染料着色；布鲁氏菌可被碱性染料着色；n革兰染色阴性；革兰染色阴性；n柯兹罗夫斯基提出用柯兹罗夫斯基提出用0.5%0.5%沙黄水溶液染沙黄水溶液染色，加热出现气泡，水

6、洗后用色，加热出现气泡，水洗后用0.5%0.5%孔雀孔雀绿或绿或1%1%美兰复染，布鲁氏菌呈美兰复染，布鲁氏菌呈红色红色，其，其它细菌呈绿色和兰色。它细菌呈绿色和兰色。布鲁氏菌布鲁氏菌：革兰阴性，革兰阴性，长约长约0.6-1.5m,宽约宽约0.3-0.6m,用柯氏染色染成红用柯氏染色染成红色色,无鞭毛、不形成无鞭毛、不形成芽胞和荚膜。芽胞和荚膜。3 3、培养特性、培养特性1.1.布鲁氏菌培养营养要求高：布鲁氏菌培养营养要求高：需要各种氨基酸和各种金属离子，有的菌种需需要各种氨基酸和各种金属离子，有的菌种需要血清才能生长。要血清才能生长。2.2.生长缓慢：生长缓慢：一般需经一般需经4 46 6天

7、，有的甚至天，有的甚至21213030天才能长出菌落。天才能长出菌落。3.3.生长所需温度：生长所需温度：20204040，最适为，最适为37,37,超过超过4242则不生长。则不生长。4.4.C0C02:2:绵羊附睾种菌和牛种菌的某些生物型菌需严格绵羊附睾种菌和牛种菌的某些生物型菌需严格的的C0C02 2(5(51010)。（4 4）细菌变异细菌变异n布氏菌在各种理化因素作用下易发生变异布氏菌在各种理化因素作用下易发生变异;n即从光滑型（即从光滑型（S S）变为非光滑型变为非光滑型粗糙粗糙(R)R)或粘液或粘液(M)M)状。状。n变异菌落常比光滑型稍长，表面有颗粒。变异菌落常比光滑型稍长，表

8、面有颗粒。菌落颜色为灰白色或褐色，菌落颜色为灰白色或褐色，（5 5）抵抗力抵抗力 n布氏菌在合适条件下能生存布氏菌在合适条件下能生存很长时间很长时间，有，有较高的抗灭活能力。较高的抗灭活能力。n对湿热、紫外线和各种射线以及常用的消对湿热、紫外线和各种射线以及常用的消毒剂、抗生素、化学药物比较敏感；毒剂、抗生素、化学药物比较敏感；n对对低温低温和和干燥有较强干燥有较强的抵抗力，故可用冷的抵抗力，故可用冷冻真空干燥法保存菌种。冻真空干燥法保存菌种。布氏菌在自然条件下的生存能力自然条件自然条件生存时间（天）生存时间（天）自然条件自然条件生存时间（天）生存时间（天）水水50120奶油奶油2565尘尘4

9、120奶酪奶酪2190粪粪2172冻肉冻肉1447畜舍墙棚畜舍墙棚4150腌肉腌肉2045地面地面4150培养基培养基60318衣服衣服3080干燥胎膜干燥胎膜120皮毛皮毛45120腐败脏器腐败脏器死亡死亡鲜牛乳鲜牛乳2550人工胃液人工胃液2050 (1)(1)对物理因子的抵抗力对物理因子的抵抗力 物理因子对布氏菌的影响物理因子对布氏菌的影响物理因子物理因子 生存时间生存时间 物理因子物理因子 生存时间生存时间湿热湿热5656 6060分钟以上分钟以上 干热干热8080 6060分钟以上分钟以上湿热湿热6363 6060分钟以上分钟以上 干热干热9090 6060分钟以上分钟以上湿热湿热8

10、080 3030分钟以上分钟以上 干热干热100100 7 7分钟以上分钟以上湿热湿热9090 10 10分钟以上分钟以上 直射阳光直射阳光 1 14 4小时小时湿热湿热100100 半分钟死亡半分钟死亡 散射阳光散射阳光 7 78 8天天 (2)(2)对化学因子的抵抗力对化学因子的抵抗力 化学因子对布氏菌的影响化学因子对布氏菌的影响 药物名称药物名称 浓度浓度(%)(%)生存时间生存时间 药物名称药物名称 浓度浓度(%)(%)生存时间生存时间 新洁尔灭新洁尔灭 0.1 300.1 30秒钟秒钟 漂白粉漂白粉 0.20.22.52.5 2 2分钟以内分钟以内 石炭酸石炭酸 1 12 2 1 1

11、5 5分钟分钟 红红 汞汞 2 72 7分钟分钟 来苏儿来苏儿 2 12 13 3分钟分钟 过锰酸钾过锰酸钾 0.10.10.2 70.2 71515分钟分钟 来苏儿来苏儿 3 13 1分钟以内分钟以内 甲甲 醛醛 0.2 200.2 20分钟以上分钟以上 氯亚明氯亚明 0.2 50.2 57 7分钟分钟 乳乳 酸酸 0.50.5 1 1分钟以内分钟以内 氯亚明氯亚明 0.5 30.5 35 5分钟分钟 氢氧化钾氢氧化钾 2 32 3分钟分钟 升升 汞汞 0.05 1 0.05 1分钟以内分钟以内 肥皂肥皂 2 20 2 20分钟以上分钟以上主要化学药品对三型菌的影响主要化学药品对三型菌的影响

12、 浓度浓度 布鲁氏菌生存时间布鲁氏菌生存时间(分钟分钟)化学药品名称化学药品名称 (%)(%)羊型羊型 牛型牛型 猪型猪型 石石 碳碳 酸酸 1 5 3 5 1 5 3 5 石石 碳碳 酸酸 2 1 2 1 2 1 2 1 来来 苏苏 儿儿 2 3 1 3 2 3 1 3 来来 苏苏 儿儿 3 3 瞬间瞬间 瞬间瞬间 瞬间瞬间 漂白粉澄清液漂白粉澄清液 0.2 1-2 0.2 1-2 瞬间瞬间 瞬间瞬间 漂白粉乳剂漂白粉乳剂 2.5 1-2 2.5 1-2 瞬间瞬间 瞬间瞬间 肥肥 皂皂 水水 2 20 20 20 2 20 20 20（二）布鲁氏菌分离培养（二）布鲁氏菌分离培养n采用何种方法

13、、采用何种方法、n取何种材料、取何种材料、n何种培养基何种培养基 n实验室条件实验室条件布氏菌的分离培养布氏菌的分离培养n一、一、从可疑病人分离布氏菌从可疑病人分离布氏菌 n血培养：血培养：3030天未培养出菌，可定位阴性天未培养出菌，可定位阴性 。n骨髓培养：抽取骨髓（接种双相培养基）骨髓培养：抽取骨髓（接种双相培养基）n尿培养：尿培养：n其他病原材料培养其他病原材料培养:乳、脑脊液、关节液乳、脑脊液、关节液和滑囊液分离布氏菌，参照血培养观察和滑囊液分离布氏菌，参照血培养观察结果，结果，1515天不长菌定为阴性天不长菌定为阴性 二、从牲畜材料中分离布氏菌二、从牲畜材料中分离布氏菌 n 从牲畜

14、流产羔检菌：从牲畜流产羔检菌：n 从胎衣检菌：从胎衣检菌：n 从阴道分泌物检菌：从阴道分泌物检菌：n 尿液检菌：尿液检菌：n 乳汁检菌：乳汁检菌：n 脓汁检菌：脓汁检菌：n 血液培养：血液培养：n 脏器检菌：脏器检菌：我国出菌宿主及材料我国出菌宿主及材料n我国从人、羊、牛、猪、犬、鹿、马、骆驼等家畜及黄我国从人、羊、牛、猪、犬、鹿、马、骆驼等家畜及黄羊、岩羊、黄鼠、黄胸鼠等野生动物检出布氏菌。从牧羊、岩羊、黄鼠、黄胸鼠等野生动物检出布氏菌。从牧区水塘水和羊毛中也检出过布氏菌。区水塘水和羊毛中也检出过布氏菌。n出菌材料有血液、关节液、滑囊液、骨髓、脑髓液、胸出菌材料有血液、关节液、滑囊液、骨髓、

15、脑髓液、胸液、淋巴结、乳汁、脓汁、胆汁、尿、阴道分泌物、等液、淋巴结、乳汁、脓汁、胆汁、尿、阴道分泌物、等2020余种。余种。n由于取材难易等原因，人多由血液、关节液、滑囊液、由于取材难易等原因，人多由血液、关节液、滑囊液、骨髓出菌；羊多由流产羔、胎盘、死羔检出菌；牛多由骨髓出菌；羊多由流产羔、胎盘、死羔检出菌；牛多由流产犊、乳汁检出菌；猪多由流产仔猪、胎盘出菌。流产犊、乳汁检出菌；猪多由流产仔猪、胎盘出菌。布氏菌的鉴定及分型布氏菌的鉴定及分型 (一一)常规确定布氏菌属细菌的方法常规确定布氏菌属细菌的方法n菌落生长时间和形态菌落生长时间和形态;n菌体形态和染色菌体形态和染色;n布氏菌血清凝集试

16、验布氏菌血清凝集试验;(二二)特殊方法：特殊方法：n1 1细菌细菌DNADNA鸟嘌呤十胞嘧啶克分子百分比鸟嘌呤十胞嘧啶克分子百分比(C+CMOLC+CMOL)的测定的测定;n2 2布氏菌布氏菌DNADNA与可疑菌与可疑菌DNADNA杂交试验杂交试验;n3 3应用色谱技术鉴定布氏菌应用色谱技术鉴定布氏菌;布氏菌属的种、型鉴定方法布氏菌属的种、型鉴定方法 初代分离培养对二氧化碳的需要初代分离培养对二氧化碳的需要 硫化氢产生试验硫化氢产生试验 染料抑菌试验染料抑菌试验 单项特异性血清单项特异性血清A A、M M、R R凝集试验凝集试验 粗糙型（粗糙型（R R型）血清凝集试验（玻片、试管法）型）血清凝

17、集试验（玻片、试管法）噬菌体裂解试验噬菌体裂解试验 尿素酶活性试验尿素酶活性试验布鲁氏菌分离用培养基布鲁氏菌分离用培养基n血清葡萄糖琼脂培养基血清葡萄糖琼脂培养基n胰酶大豆培养基胰酶大豆培养基n土豆琼脂培养基土豆琼脂培养基n胰示琼脂胰示琼脂nAlbimiAlbimi琼脂培养基琼脂培养基n肝琼脂培养基肝琼脂培养基n土豆土豆+10%+10%马血清培养基马血清培养基 效果最好效果最好 SAT滴度与培养阳性的符合率0 010102020303040405050606070708080909010010020204040808016016032032064064012801280符合率符合率BSLBSL

18、2 2：实验室设施实验室设施(二级屏障二级屏障)人间布病诊断方法和判定标准人间布病诊断方法和判定标准1 1、流行病学接触史：流行病学接触史：密切接触家畜、野生动物、畜产品、密切接触家畜、野生动物、畜产品、布鲁氏菌培养物等或生活在疫区内的居民。布鲁氏菌培养物等或生活在疫区内的居民。2 2、临床症状和体征、临床症状和体征:应排除其他疑似疾病。应排除其他疑似疾病。3 3、实验检查：、实验检查：病原分离病原分离 试管凝集试管凝集试验试验 补体结合试验补体结合试验 抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验参考：（参考：（皮内变态反应皮内变态反应试验试验、虎红平板凝集试验）虎红平板凝集试验）人间布病血清学阳性判定标准

19、人间布病血清学阳性判定标准病原分离病原分离:检出布鲁氏菌；检出布鲁氏菌；试管凝集试管凝集试验试验:1:100(+)1:100(+)及以上为阳性；及以上为阳性；补体结合试验补体结合试验:1:1:10(10(+)+)及以上为阳性；及以上为阳性；抗人球蛋白试抗人球蛋白试:1:400(:1:400(+)+)及以上为阳性；及以上为阳性；人间布病诊断方法和判定标准人间布病诊断方法和判定标准 凡具备凡具备1 1、2 2和第和第3 3项中的任何一项检项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。查阳性即可确定为布病病人。对已确诊的慢性布病病人和接种过对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依菌苗

20、的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效价高低，皮变反据，血清学试验效价高低，皮变反应仅供参考。应仅供参考。(1(1）布氏菌素皮内变态反应试验布氏菌素皮内变态反应试验原理：原理：当机体受布氏菌抗原作用之后，导致当机体受布氏菌抗原作用之后，导致T T细胞细胞过敏。致敏过敏。致敏T T细胞再遇到相同抗原后进行分化，细胞再遇到相同抗原后进行分化，衍变，产生能释放各种淋巴因子的效应细胞，局衍变，产生能释放各种淋巴因子的效应细胞，局部的皮肤变态反应就是各种淋巴因子综合作用的部的皮肤变态反应就是各种淋巴因子综合作用的结果，是一种迟发型变态反应。结果，是一种迟发型变态反应。注意：注意：布氏菌素注射后，不会

21、使人感染布病；也不会布氏菌素注射后，不会使人感染布病；也不会导致常规检测的抗体增加。导致常规检测的抗体增加。器材及试剂：器材及试剂：布氏菌素、酒精棉球，布氏菌素、酒精棉球，1 1mlml注射器，测量尺注射器，测量尺皮内变态反应操作方法皮内变态反应操作方法1.1.每次注射前必须详细询问职业、健康情况曾否每次注射前必须详细询问职业、健康情况曾否接种过布氏菌活菌苗等。接种过布氏菌活菌苗等。2.2.前臂掌侧中部皮肤用前臂掌侧中部皮肤用75%75%酒精棉球消毒，待干酒精棉球消毒，待干后，用后，用1 1mlml注射器皮内注射注射器皮内注射0.10.1mlml。3.3.判定反应时间：注射后判定反应时间：注射

22、后2424、4848h h各观察一次各观察一次（以（以4848H H结果为准）。结果为准）。4.4.判定反应标准：阳性反应局部红肿达判定反应标准：阳性反应局部红肿达2 2x2cmx2cm或或面积面积4 4cmcm2 2皮内变态反应皮内变态反应注意事项注意事项 部位：要皮内注射，切勿皮下注射部位：要皮内注射，切勿皮下注射 剂量：为剂量：为0.10.1mlml，注射后应在注射部位有小注射后应在注射部位有小白泡隆起，注射液不得从针口漏出。白泡隆起，注射液不得从针口漏出。消毒：用酒精，切勿用碘酒，以免引起假阳消毒：用酒精，切勿用碘酒，以免引起假阳性反应。性反应。面积计算：浸润、伪足都属于测量范围面积计

23、算：浸润、伪足都属于测量范围 制品浑浊，有摇不散的沉淀，有异物，安瓶制品浑浊，有摇不散的沉淀，有异物，安瓶有裂纹，标签不清，过期失效者不可使用。有裂纹，标签不清，过期失效者不可使用。保存：保存：布氏菌素于布氏菌素于4-104-10冷暗处冷暗处.皮内变态反应皮内变态反应禁忌禁忌 既往有各种过敏史者，既往有各种过敏史者，支气管哮喘病者支气管哮喘病者 不可使用不可使用评价：评价：此法敏感性较好，呈阳性反应的人只此法敏感性较好，呈阳性反应的人只表示受过布氏菌感染，不能做最后判定。表示受过布氏菌感染，不能做最后判定。此法用于流行病学调查和大量检疫，此法用于流行病学调查和大量检疫，所以布病监测时为初诊方法

24、，若皮变阳所以布病监测时为初诊方法，若皮变阳性，应采血进一步做特异性抗体检测。性，应采血进一步做特异性抗体检测。（2 2）试管凝集试验）试管凝集试验原理：原理：Ag+AbAg-AbNaclNacl电介质电介质布氏菌侵入机体后，就会刺激布氏菌侵入机体后，就会刺激机体产生特异性抗体，这种抗机体产生特异性抗体，这种抗体可与相应抗原（布氏菌体）体可与相应抗原（布氏菌体）发生特异性结合，在电介质作发生特异性结合，在电介质作用下，就会形成肉眼可见的凝用下，就会形成肉眼可见的凝集反应，我们就是用已知抗原集反应，我们就是用已知抗原查未知抗体。查未知抗体。试管凝集反应步骤试管凝集反应步骤1 1、加入倍比稀释受检

25、血清、加入倍比稀释受检血清0.50.5mlml2 2、加入、加入1 1：1010稀释布氏菌抗原稀释布氏菌抗原0.50.5mlml3737度度2424小时观察结果小时观察结果同时配置比浊管便于结果判定同时配置比浊管便于结果判定0.50.50.50.5试管凝集反应（试管凝集反应（SATSAT）示意图示意图(1)(1)0.50.50.50.50.50.5稀释血清稀释血清1:251:501:1001:2001:4000.5弃去弃去稀释度稀释度比浊管的制备比浊管的制备管号1:20稀释抗原生理盐水清亮度标记10.001.00100%+20.250.7575%+30.500.5050%+40.750.252

26、5%+51.000.000%-每次试验须作三种对照每次试验须作三种对照 阴性血清对照阴性血清对照 阳性血清对照阳性血清对照 抗原对照抗原对照结果判定：结果判定：根据各管中上层液体的清亮度记录凝集反根据各管中上层液体的清亮度记录凝集反应程度（滴度），特别是应程度（滴度），特别是50%50%清亮度（清亮度（+）对判）对判定结果关系较大，一定要与比浊管对比判定。定结果关系较大，一定要与比浊管对比判定。+等于完全凝集，上层液等于完全凝集，上层液100%100%清亮。清亮。+等于几乎完全凝集，上层液等于几乎完全凝集，上层液75%75%清亮。清亮。+等于显著凝集，上层液等于显著凝集，上层液50%50%清亮

27、。清亮。+等于有凝集出现，液体等于有凝集出现，液体25%25%清亮。清亮。-等于无凝集，液体不清亮。等于无凝集，液体不清亮。人的诊断标准：人的诊断标准：1:100+1:100+为阳性，为阳性，1:50+1:50+为可疑。为可疑。评价：试管凝集试验是评价：试管凝集试验是WrightWright和和SampleSample于于18981898年首先年首先建立的，是布病诊断在国际上唯一的全标化方建立的，是布病诊断在国际上唯一的全标化方法，使用广泛，经久不衰。特异性好，也较敏法，使用广泛，经久不衰。特异性好，也较敏感，实用性强，诊断、流调、监测均适用。感，实用性强，诊断、流调、监测均适用。缺点：缺点：

28、有前带现象。有前带现象。不能区别人工免疫和自然感染。不能区别人工免疫和自然感染。产生一定的交叉反应。产生一定的交叉反应。慢，需要两天。慢，需要两天。（3 3）、虎红平板凝集试验）、虎红平板凝集试验 (一一)器材及试剂器材及试剂 清洁脱脂玻片或有凹型孔的玻片，清洁脱脂玻片或有凹型孔的玻片，0 0.1 1毫升毫升吸管或微量加样器、牙签或细铁丝。虎红平吸管或微量加样器、牙签或细铁丝。虎红平板凝集抗原、被检血清。板凝集抗原、被检血清。(二二)操作方法操作方法 在玻片上加在玻片上加0 0.0303毫升被检血清，然后加入虎毫升被检血清，然后加入虎红平板抗原红平板抗原0 0.0303毫升，摇匀或用牙签混匀，

29、毫升，摇匀或用牙签混匀，在在5 5分钟内判定结果。判定级别同平板凝集分钟内判定结果。判定级别同平板凝集反应。亦可只分为反应。亦可只分为(+)(+)阳性，阳性，(-)(-)阴性两类。阴性两类。评价评价 简便、快速易行，具有较好的特异性，简便、快速易行，具有较好的特异性，有一定的敏感性，检查牛的阳性率稍有一定的敏感性，检查牛的阳性率稍 高于绵山羊。高于绵山羊。该法可用于大面积检疫该法可用于大面积检疫。（4 4）、补体结合试验）、补体结合试验(CFT)原理 受检系统受检系统 指示系统指示系统 溶血反应溶血反应 补体结合试验补体结合试验1.仅有抗体仅有抗体抗体补体红细胞溶血素阳性阳性阴性阴性2.2.仅

30、有抗原仅有抗原抗原红细胞溶血素补体阳性阳性阴性阴性3.3.抗原抗体反应抗原抗体反应抗原抗体补体红细胞溶血素阴性阴性阳性阳性补体结合试验（补体结合试验（CFTCFT）补体滴定须做对照补体滴定须做对照 结果结果抗原对照抗原对照 （加抗原不加补体）（加抗原不加补体）补体对照补体对照 （加补体不加抗原）（加补体不加抗原）溶血素对照溶血素对照（加溶血素和绵羊红细胞）（加溶血素和绵羊红细胞）优点：优点：补体结合试验是一种传统的免疫学技术，补体结合试验是一种传统的免疫学技术，特异性强。它所查的免疫蛋白主要是特异性强。它所查的免疫蛋白主要是IgGIgG类，此法不仅与布病临床表现、病期有类，此法不仅与布病临床表现、病期有较好一致性，常用于鉴别诊断。较好一致性，常用于鉴别诊断。缺点：参与反应的成分多，缺点：参与反应的成分多，影响因素复杂，操作影响因素复杂，操作 烦琐，不适与普查。烦琐，不适与普查。斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）n一种具有简便、快速、微量、敏感、一种具有简便、快速、微量、敏感、特异、试剂稳定等优点的检测血清中特异、试剂稳定等优点的检测血清中抗布鲁氏菌特异性抗体的方法抗布鲁氏菌特异性抗体的方法谢谢