化学发光免疫临床意义课件.ppt
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- 化学 发光 免疫 临床意义 课件
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1、化学发光免疫的临床应用化学发光免疫的临床应用(chinawangshuqiang163)全自动免疫定量分析的发展改变了临床实验室的面目及与临床的关系、提高了医疗质量及临床实验室诊断的地位。这些方法的灵敏度和特异性都比较高,一般都能满足临床要求。更重要的是,其中有些能在很短的时间内完成测定、大多数相当稳定(能进行室内质控,不需要每天做标准曲线)。因此,这些方法的应用极大地改变了临床实验室的秩序。化学发光免疫分析是继放射免疫、酶联免疫、荧光免疫、时间分辨免疫以后的新一代免疫分析技术。它扩大了免疫检测范围,使检测项目越来越多。现已应用于甲状腺、生殖激素、心肌损伤和肿瘤标志物、传染病、贫血、骨代谢等方
2、面。定量免疫方法的灵敏度比较 酶免疫分析(ELISA).10-9 g/L 放射免疫分析(RIA).10-12 g/L 化学发光免疫(CLIA)10-15g/L 免疫分析方法的不精确度(CV%)手工酶免疫分析(ELISA).15%放射免疫分析(RIA).10%化学发光免疫分析(CLIA).5%内分泌激素分析的临床应用1内分泌系统和激素:内分泌系统包括分泌各种激素的内分泌腺,例如脑垂体前叶分泌泌乳素(PRL)、促黄体激素(LH)、促卵泡激素(FSH)和促甲状腺激素(TSH);。内分泌腺还可分为两大类,一类是受下丘脑-垂体-内分泌腺轴反馈控制,例如:甲状腺、性腺和肾上腺皮质。另一类不受下丘脑-垂体-
3、内分泌腺轴控制,例如:甲状旁腺、肾上腺髓质和胰腺等。丘脑下部丘脑下部垂体垂体甲状腺甲状腺性腺性腺肾上腺肾上腺皮质皮质不受丘脑下部不受丘脑下部-垂体控制的垂体控制的腺体:腺体:甲状旁腺甲状旁腺肾上腺髓质肾上腺髓质胰腺胰腺内分泌系统内分泌系统甲状腺疾病实验室诊断认识甲状腺疾病 发病过程通常缓慢而不易觉察 其症状常被患者疏忽 该病有可能被误诊为其他疾病(例如高脂血症、月经失调、更年期或抑郁症)甲状腺功能减退的广泛影响甲状腺机能减退:不同风险的人群精神病人女性35岁男性35岁男性60岁妊娠产后有家族史最近症状变化女性55岁糖尿病自身免疫病高胆固醇血症锂、干扰素甲状腺手术/放疗最低风险 甲状腺机能减退
4、最高风险甲状腺功能亢进的广泛影响甲亢的常见原因 弥漫性毒性增生 -Graves病(自身免疫性变异)-抗原特异性T抑制细胞先天性缺乏 -美国人发病率为4%,女:男比为5:1(3050岁)弥漫性及多节结甲状腺肿(女:男比为5:1,50%为毒性增生)毒性(单节结)腺瘤 甲亢的不常见原因 急性或亚急性甲状腺炎(病毒或细菌引起的)桥本氏(自身免疫性)甲状腺炎 淋巴细胞/浆细胞浸润 抑制性T细胞缺陷 年龄3050岁的病人,女:男之比为10:1 De Quervans病(亚急性拇指腱鞘纤维化)淋巴细胞性甲状腺炎(无疼痛,亚急性)产后甲状腺炎 甲状腺机能亢进的其他原因 甲状腺癌(乳头状、囊泡样、退行性、髓样)
5、TSH分泌(细胞的)垂体瘤 碘摄入 医源性甲亢(甲状腺毒症)T3型甲亢 药物诱导的甲亢 恶性肿瘤(异位分泌TSH的绒毛膜癌)甲状腺肿样卵巢肿瘤甲状腺状况稳定的门诊病人 当甲状腺状况稳定而下丘脑垂体机能完好时,TSH比FT4更能够检出轻微的(亚临床)甲状腺激素过量或不足 TSH的高诊断灵敏度反映了TSH和FT4间的对数/线性关系,即垂体对FT4异常的反应甲功试验在甲减中的应用原则 仅在临床可疑或风险因子存在时进行甲状腺功能试验 不推荐在无症状的较年轻的成人(35岁)中测定甲状腺功能 单测定TSH对于甲状腺功能减退诊断的起始步骤是足够的 推荐FT4(而不是FT3)用于原发性甲状腺功能减退的诊断 当
6、需要考虑成本时,总T4也能满足需要 除非有特殊的临床原因,不推荐在原发性甲状腺功能减退中常规测定甲状腺抗体 推荐仅仅用TSH作为原发性甲状腺功能减退治疗结果的监测 推荐将实验室检查用于鉴别诊断 1.甲状腺过氧化物酶(TPO)抗体:推荐采用特异性的免疫学方法测定,为最敏感的自身免疫性甲状腺病变的指标 2.甲状腺球蛋白(TG)抗体:很少提高TPO Ab的灵敏度,因为若检出TG Ab,而无TPO Ab的人很少有甲状腺功能障碍 3.TSH受体抗体:在Graves病中增高推荐以下自身抗体用于鉴别诊断TPO抗体测定的临床用途 自身免疫性甲状腺疾病的诊断 自身免疫性甲状腺疾病的风险因子 甲状腺功能减退患者使
7、用干扰素、IL-2、乙胺碘呋酮或锂治疗的风险因子 产后甲状腺炎的风险因子甲功试验在甲亢中的应用原则 若无临床症状,任何年龄都不推荐进行甲亢的实验室筛查 TSH测定的功能灵敏度小于0.02mU/L方可用于可疑的甲亢的初次测定 FT4测定仅用于TSH抑制(FT3 FT4 T3 T4 TSH还可诊断亚临床的甲亢和甲减 甲亢时,5-脱碘活性增加,T3T4 治疗后恢复正常先后:FT4 T4 FT3 T3TSH 随访有效性:FT4 TSH T4 FT3 FT4 甲减诊断有效性:TSHFT4FT3 T4 T3 甲低病人TSH符合率100%(FT4符合率79.5%,T4 53.8%)下丘脑-垂体-内分泌腺轴激
8、素测定报告的判读规律 垂体激素的异常与内分泌腺激素的异常一致时,病变在垂体。内分泌腺激素的异常与垂体激素的异常不一致时,病变在内分泌腺。促卵泡激素(FSH)和促黄体激素(LH)是垂体前叶激素,其对应的性腺有卵巢和睾丸,性腺激素是雌二醇(E2)和睾酮。促肾上腺皮质激素(ACTH)是垂体前叶激素,其对应的内分泌腺体是肾上腺皮质,腺体的激素是皮质醇。性激素测定的临床应用 性激素水平与诸多疾病密切相关。女性有固定的生理周期,系由于激素周期性变化所造成。妊娠过程无不与激素相关。胎盘是最大、激素品种最多的内分泌腺体。性激素测定的目的是了解脑垂体和性腺(卵巢、睾丸)的功能,推测神经中枢和下丘脑的功能。促性腺
9、激素的主要作用 促卵泡激素(FSH):刺激卵巢内卵泡的发育;对男性刺激性激素结合球蛋白的生成,使曲细精管腔内的睾酮维持在较高水平 促黄体激素(LH):促排卵、促黄体成熟;对男性促进睾丸间质细胞增生,合成和分泌雄激素LH、FSH分泌异常闭经育龄妇女LH、FSH持续低于参考值的下限:下丘脑功能障碍GnRH 脑垂体功能障碍席汉氏症等育龄妇女LH、FSH持续高于参考值的上限:卵巢功能障碍雌激素人体雌激素主要由卵巢合成并分泌,为甾体类激素。天然雌激素主要有:雌二醇(estradiol,E2)雌三醇(estriol,E3)雌 酮(estraterone,E1)非妊娠时育龄妇女体内主要是雌二醇雌激素的正常范
10、围与分泌调节血清雌二醇浓度 青春期前:73 pmol/L 育龄年龄:100 2200pmol/L,呈周期性变化 绝经后:持续 100pmol/L。FSH刺激卵泡发育,分泌雌二醇雌激素分泌异常雌二醇水平降低 闭经1、下丘脑-垂体功能障碍(FSH)2、卵巢功能障碍(FSH)雌二醇水平升高 功血卵巢功能性肿瘤(FSH正常)孕激素 卵巢合成并分泌的甾体类激素,天然的孕激素有:孕 酮(Progesterone):又称黄体酮是人体主要的天然孕激素 孕二醇:降解产物 妊娠时,胎盘合成大量的孕酮雄激素 甾体激素,天然的雄激素有:睾丸酮、二氢睾丸酮,脱氢睾酮,脱氢表雄酮等。正常范围(血清浓度)血清浓度):正常成
11、年男性:12 34 nmol/L 正常育龄妇女:约为0.2 3.0nmol/L雄激素的合成和分泌 男性:睾丸合成并分泌女性:主要由卵巢合成并分泌男性雄激素水平过低见于:下丘脑-垂体功能障碍(FSH)、睾丸发育不良或功能障碍(FSH)、甲亢、肝硬化、肾功能损害女性雄激素水平过高见于:排卵障碍、雌激素合成障碍、女性患男性化肿瘤、XYY女性、先天性肾上腺皮质增生促乳素的分泌 促乳素(Prolactin,PRL,也译为泌乳素、催乳素等):垂体前叶分泌的一种蛋白激素 青春期前:300ng/ml:95闭经。PRL升高的原因 下丘脑PIF减少 垂体泌乳素瘤 甲状腺功能低下 早孕及妊娠 卵子受精后第三天由输卵
12、管进入子宫,第七天着床,分泌HCG,着床一周以上,即月经过期五天之内可测得HCG升高(550 IU/L)。(1)HCG动态测定:间隔三天,复测其值应上升一倍,(特别是停经四到十周间)(2)孕激素测定:黄体期大于20天即提示怀孕,血清P25ng/mL(相反小于12天为黄体功能不足)。(3)基础体温:排卵后基础体温上升20天以上。(4)B超检查:妊娠5周可见孕囊,(一般HCG2000mIU/mL),6周可见胎芽,7周可见心搏,8周可见胎动,10周可见胎头。异位妊娠(Ectopic pregnancy)受精卵在宫外着床,95%在输卵管(78%在壶腹部,12%在峡部,5%在伞部),一般在停经6周左右后
13、,出现阴道不规则出血,腹痛。检测HCG,其值低于同期正常妊娠,约为50%,动态测定48小时增长66%,72小时增长不足一倍,P5ng/mL。另超声检查发现附件区有妊娠物或心搏,阴超宫内无孕囊,刮宫未见绒毛,刮宫后HCG不下降。异常妊娠 滋养细胞疾病时,HCG的裂解酶活性增高,使HCG裂解,和双链解离,造成HCG和FHCG异常增高,其中FHCG甚至可高达正常妊娠时的4100倍。良性葡萄胎:HCG浓度明显超过同期正常妊娠,最高可达240万mIU/mL。2侵蚀性葡萄胎(恶性葡萄胎):葡萄胎刮除后60天,HCG仍未降,甚至升高。3绒毛膜癌(choriocarcinoma):刮宫后60天,HCG不降,且
14、有阴道,肺部转移。正常妊娠从第11周后HCG下降,至第16周为峰值的1/5。而如上三种疾病第10周以后不见下降,仍逐步上升。流产(Abortion)妊娠40周前终止,胎儿重不足1000g者为流产。12周发生者为早期流产,1228周发生者为晚期流产。流产原因有:孕卵异常,母体黄体功能不足,生殖道异常,TORCH感染,免疫排斥等。检测HCG与同期正常妊娠相比,由高转低,提示绒毛停止发育。同时有见P下降。月经紊乱 PRL、E2 、P:高催乳素血症,卵泡发育与排卵障碍 PRL正常,LH、FSH水平增高但在正常范围,尤其LH增高较多,可达FSH的三倍,E2正常,P持续低水平,排卵障碍-多囊卵巢综合症可能
15、。E2正常、P 排卵障碍 闭经 PRL、E2 、P:高催乳素血症,卵泡发育与排卵障碍 PRL正常范围,LH、FSH、E2、P均低水平,垂体或垂体以上部分功能障碍,需作垂体兴奋试验以明确诊断。PRL正常,E2、P持续低水平,如E2 73 p mol/L,P 10nmol/L,而 LH、FSH均高于40IU/L 卵巢功能衰退可能 性早熟 青春期前(一般为小于9岁的儿童)出现第二性征,伴有和促性腺激素(LH、FSH)、性激素(E2)的升高,PRL往往也升高,排除肿瘤等因素后可诊断为性早熟。更年期的辅助诊断 PRL正常,E2、P持续低水平,而 LH、FSH持续高于40IU/L 绝经期可能主要临床表现:
16、(1)无排卵月经,20%为功血,30%月经稀发,10%原发闭经,40%继发闭经(2)多毛,痤疮(3)肥胖,黑棘皮症:50%PCOS有向心型肥胖,且大多有黑棘皮症(4)基础体温(BBT)是单相(无排卵)多囊卵巢综合症肾上腺皮质激素测1)肾上腺皮质功能亢进(柯兴氏综合症)表现为皮质醇没有昼夜节律的增高;若ACTH也升高则为继发性(由于垂体)病变,若ACTH降低则为原发性病变。2)肾上腺皮质功能减退(如阿狄森氏病)表现为皮质醇降低;若ACTH升高为原发性病变,若ACTH降低则为垂体性病变。肿瘤标志物测定的临床应用肿瘤标志物测定用于:人群筛查.有限 对有症状的病人进行鉴别诊断.有限 癌症的临床分级有限
17、 估计肿瘤的体积有限 预测病情进展有限 治疗效果的评估.重要 检测癌症复发或缓解.有争议 监测治疗反应.重要分析测试前准备和样本贮存分析测试前准备和样本贮存 可以采用新鲜分离的血清样本。在4下可以稳定24小时。建议将血清贮存于-20(短期)或-70(长期),以备复试时使用。若需长期贮存,则不能使用分离胶(CA15-3在分离胶的存在下表现出明显的不稳定)。乳腺癌 在采用内分泌治疗(如 tamoxifene、toremifene 和 droloxifene,以及medroxyprogesterone acetate和megestrol acetate)时,雌激素和孕激素的受体测定了解其对这种治疗的
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