微生物原核M课件.ppt
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1、第二章第二章 原核微生物的形原核微生物的形 态、构造和功能态、构造和功能名词解释类的掌握方法l结构性名词:存在部位、主要成分、形态大小、作用。比如芽孢。l对比性名词:共同点、差异性。比如转导与转化。l其它名词:包括制作方法、工艺流程、作用等。比如生长曲线。什么是原核微生物?原核微生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只有被称作核区的裸露DNA的单细胞生物,亦即广义的细菌。原核微生物的主要类群:微生物微生物非细胞型非细胞型细胞型细胞型(病毒)(病毒)原核微生物原核微生物真核微生物真核微生物(Eukarya)古生菌古生菌(Archaea)细菌细菌(Bacteria)原核细胞真核细胞细胞核有明显核区,无核
2、膜、核仁有核膜、核仁细胞器无线粒体,能量代谢和许多物质代谢在质膜上进行有线粒体,能量代谢和许多合成代谢在线粒体中进行核糖体分布在细胞质中,沉降系数为70S分布在内质网膜上,沉降系数为80S真核细胞原核细胞 第一节 细菌 狭义细菌(bacteria)是指一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。细菌分布:大气、水体、土壤、动植物体内细菌种类和数量:种类繁杂,数量巨大细菌对人类社会生活的影响:1.有害影响:动植物致病菌,引起食物和物品腐烂变质等。同学们能否举出例子(日常生活或工厂)。2.有益作用:细菌发酵产品生产、农业杀虫菌剂、细菌肥料生产、细菌浸矿、微生态制剂、
3、污水处理等。“生物界超级明星生物界超级明星”大肠杆菌(大肠杆菌(Escherichia Escherichia coli)coli)。一、细菌的形态与大小一、细菌的形态与大小(一)细菌的形态(一)细菌的形态细菌个体的基本形态细菌个体的基本形态:球状、杆状和螺旋状三大类型球状、杆状和螺旋状三大类型 基本形基本形态态球状球状杆状杆状螺旋状螺旋状细菌细胞的形态与排列状态杆菌()及其排列状态杆菌是细菌中种类最多的类型杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同因菌种不同,菌体细胞的长菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。短、粗细等都有所差异。杆菌的形态:杆菌的形态:短杆状、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮短杆状、
4、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮状、竹节状等;按杆菌细胞繁殖后的排列方式则有链状、状、竹节状等;按杆菌细胞繁殖后的排列方式则有链状、栅状、栅状、“八八”字状等。字状等。短杆菌长杆菌梭状芽孢杆菌读音:gn jn杆菌(bacillus)杆状或类似杆状的细菌。广泛分布于自然界。腐生或寄生。如大肠杆菌、枯草杆菌等。l大多数杆菌中等大小长25um,宽0.31um。l大的杆菌如炭疽杆菌(35um1.01.3um),l小的如野兔热杆菌(0.30.7um0.2um)。l菌体的形态多数呈直杆状,也有的菌体微弯。l菌体两端多呈钝圆形,少数两端平齐(如炭疽杆菌)。l也有两端尖细(如梭杆菌)。l或末端膨大呈棒状(如白喉
5、杆菌)。排列一般分散存在,无一定排列形式,偶有成对或链状,个别呈特殊的排列如栅栏状或v、y、l字样。l根据其排列组合情况,也可有单杆菌,双杆菌和链杆菌之分。不过杆菌的排列特征远不如球菌那样固定,同一种杆菌往往可以有3种形态同时存在。l单杆菌,有长杆菌和短杆菌(或近似球形)。产芽孢杆菌有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。l梭状的芽孢杆菌有溶纤维梭菌(Clostridium cellulosolvens)。l肉毒杆菌最棒的功能,不是除皱纹,而是可以用来消除国字脸或改善脸型。有国字脸的人,可以在左右下颚打肉毒杆菌,就能让肌肉变得紧实,进而改善你的脸型。肉毒杆菌l一种致命病菌,在繁殖
6、过程中分泌毒素,是毒性最强的蛋白质之一。在19世纪有“香肠之毒”恶名的肉毒杆菌(因为经常在此类肉至类罐头中发现),经过分离培养后,最早用于病理治疗,改善肌肉痉挛、内斜视等疾病。在治疗过程中,医生们发现它在消除皱纹方面有着异乎寻常的功能,其效果远远超过其他任何一种化妆品或整容术。因此,利用肉毒杆菌毒素消除皱纹的整容手术应运而生。枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌地衣芽孢杆菌地衣芽孢杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌破伤风梭菌破伤风梭菌 Bacillus megabacterium Legionella pneumophila(causes Legionnaires Disease)(causes anthrax
7、),Bacillus anthracis Rod-Shaped Bacterium,hemorrhagic E.coli,strain 0157:H7(1 1)球)球 菌菌 l球菌是一种细菌。细菌可分为球菌、杆菌和螺旋菌三大类。l球菌呈球形或近似球形。球菌分裂后产生的自细胞保持一定的排列方式,在分类鉴定上有重要意义。根据排列方式不同,可分为单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌和葡萄球菌等。l1)单球菌 细胞沿一个平面进行分裂,子细胞分散而单独存在,如尿素微球菌(Micrococcus ureae)。l2)双球菌 细胞沿一个平面分裂,子细胞成双排列,如肺炎链球菌(Diplococcus p
8、neumoniae);肺炎双球菌、脑膜炎双球菌。l3)链球菌 细胞沿一个平面分裂,子细胞呈链状排列,如乳链球菌(Streptococcus lactic);l4)四联球菌(Micrococcus tetragenus)细胞按两个互相垂直的平面分裂,子细胞呈田字形排列;l5)八叠球菌 细胞按三个互相垂直平面进行分裂,子细胞呈立方体排列,如甲烷八叠球菌(Sarcina methanica);l6)葡萄球菌 细胞分裂无定向,子细胞呈葡萄状排列,如金黄色葡萄球菌(Stephylococcus aureus)。(a)单球菌 (b)双球菌 (c)四联球菌 (d)八叠球菌 (e)葡萄球菌 (f)链球菌 各种
9、不同形状的球菌 各种不同形状的杆菌 (a)球杆菌(b)单杆菌 (c)双杆菌(d)链杆菌各种不同形状的螺旋菌(a)螺菌(b)螺旋体(c)弧菌 球菌杆菌螺旋型菌螺旋菌(spirilla)螺旋状的细菌称为螺旋菌。螺旋状的细菌称为螺旋菌。根据其弯曲情况分为:根据其弯曲情况分为:弧菌(弧菌(vibrio)vibrio):螺旋不满一圈,菌体呈弧形或逗号形螺旋不满一圈,菌体呈弧形或逗号形 例:霍乱弧菌、逗号弧菌例:霍乱弧菌、逗号弧菌螺旋菌螺旋菌(spirillum)(spirillum):螺旋满螺旋满2 26 6环,螺旋状环,螺旋状 例:干酪螺菌例:干酪螺菌 螺旋体螺旋体(spirochaeta)(spir
10、ochaeta):旋转周数在旋转周数在6 6环以上,菌体柔环以上,菌体柔软。软。例:梅毒密螺旋体例:梅毒密螺旋体Vibrio cholerael在厌氧污泥中的螺旋菌有l紫硫螺旋菌(Thiospirillum violaceum)、红螺菌属(Rhodospirillum)l和绿螺菌属。特殊形态的细菌特殊形态的细菌柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日阿托氏菌日阿托氏菌(丝状丝状)、具有子实体的粘细菌等、具有子实体的粘细菌等是特殊形态的细菌。是特殊形态的细菌。细菌特殊形态细菌特殊形态(二)细菌大小单位m(微米,即10-6m),亚细胞nm(纳米,10-9m)多
11、数细菌细胞的直径约0.5mm,长度约0.55 mm。但已报道最小的纳米细菌(nanobacteria)直径甚至小于0.05 mm;最 大 的 球 菌 纳 米 比 亚 嗜 硫 珠 菌(Thiomargarita namibia),其直径大小可达100-750m!(1)长度单位:长度单位:微米微米(m)(2)表示:表示:球菌:球菌:直径直径 杆菌:杆菌:宽宽长长 螺菌:螺菌:宽、长、螺距宽、长、螺距通常通常球菌直径球菌直径:0.2 0.2 1.51.5 mm,杆菌杆菌:长长1 1 5 m,5 m,宽宽0.50.5 1 m 1 m。例如:例如:E.coliE.coli:平均长度:平均长度:2 m 2
12、 m;宽度宽度0.5m0.5m 1500 1500个大肠杆菌头尾相接等于个大肠杆菌头尾相接等于3mm;3mm;10 109 9个大肠杆菌重个大肠杆菌重1 mg.1 mg.细菌大小的测量细菌大小的测量1 1、范围、范围0.5 1 mm(直径)(直径)0.2 1 mm(直径直径)X 1 80 mm(长度长度)0.3 1 mm(直径直径)X 1 50 mm(长度长度)(长度是菌体两端点之间的距离长度是菌体两端点之间的距离,而非而非实际长度实际长度)细菌细胞的模式构造二、细菌的结构二、细菌的结构 基本结构基本结构特殊结构特殊结构(一)细胞壁(一)细胞壁(cell wall)(一)细胞壁(cell wa
13、ll)细胞壁概念:是细胞最外的一层厚实、坚韧的外被,主要成分为肽聚糖,具有固定外形和保护细胞等多种功能。细胞壁功能:固定细胞外形和提高机械强度,保护细胞免受外力的损伤;为细胞生长、分裂和鞭毛运动所必需;阻拦酶蛋白或抗生素等有害物质进入细胞;赋予细菌特定的抗原性和致病性(如内毒素),并与细菌对抗生素和噬菌体的敏感性密切相关。革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁的构造 细胞壁类型:革兰氏阳性细菌细胞壁、革兰氏阴性细菌细胞壁革兰氏阳性细菌细胞壁、革兰氏阴性细菌细胞壁革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 细胞膜 肽聚糖磷壁酸脂磷壁酸 肽聚糖 周质空间 细胞膜 外膜 脂多糖 孔蛋白 磷脂 脂蛋白 膜蛋白 膜蛋
14、白 1、革兰氏阳性细菌的细胞壁结构特点:细胞壁厚度大(2080 nm);化学组分 简单,一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸。(1)肽聚糖:肽聚糖是由多糖链经短肽相交联而形成的网络状分子,是真细菌细胞壁特有的成分,构成细菌细胞壁坚硬的骨架部分。短肽交联 多糖链n(M)(G)革兰氏阳性细菌细胞壁肽聚糖的单体图解左:简化的单体分子间的连接;右:单体的分子构造。箭头示溶菌酶的水解位点表 肽聚糖分子中的四种主要肽桥类型类型 甲肽尾上连接点 肽桥 乙肽连接点 例 I 第四氨基酸 -CO.NH-直接相连 第三氨基酸 E.coli(G-)II 第四氨基酸 -(Gly)5 第三氨基酸 S.aureus(G+)II
15、I 第四氨基酸 -(肽尾)12-第三氨基酸 M.luteus(G+)IV 第四氨基酸 -D-Lys-第二氨基酸 C.poinsettiae(G+)(2)磷壁酸(teichoic acid)磷壁酸是结合在革兰氏阳性细菌细胞壁上的一种酸性多糖,是革兰氏阳性细菌所特有的成分之一。甘油磷壁酸的结构模式(左)及其单体(右)磷壁酸类型:根据糖成分:甘油磷壁酸 核糖醇磷壁酸 根据与壁中结合分子类型及分布:壁磷壁酸 脂磷壁酸 磷壁酸的主要生理作用:因带负电荷,故可与环境中的Mg2+等阳离子结合,提高这些离子的浓度,以保证细胞膜上一些合成酶维持高活性的需要;对一些革兰氏阳性致病菌(如A族链球菌)而言,可借此(主
16、要为膜磷壁酸)与其宿主粘连;赋予革兰氏阳性菌以特异的表面抗原;是某些噬菌体特异性吸附受体。2、革兰氏阴性细菌细胞壁结构 特点:肽聚糖层很薄(仅23nm),在肽聚 糖层外还有一个外膜,成分较复杂,整个壁厚度较G+菌薄,机械强度较G+菌弱。(1)肽聚糖层:特点(以大肠杆菌为例):肽聚糖层薄(2-3nm)四肽尾的第三个不是L-Lys,而是内消旋二氨基庚二酸(MDAP)没有特殊的肽桥,其前后两个单体间的联 系仅由前一肽尾的第4个氨基酸即D丙 氨酸的羧基与后一肽尾第3个氨基酸即M DAP的氨基直接连接。(因而只能形成较疏密、机械强度较差的肽聚糖网络)(2)外膜:特点:a.是G-细菌细胞壁特有的结构,位于
17、壁的 最外层b.化学成分是脂多糖、磷脂和若干种外膜 蛋白功能:a.控制细胞透性;b.提高Mg2+浓度;c.决定细胞壁抗原性;d.类脂A是类毒素的主要成分G-菌外膜脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)沙门氏菌属脂多糖中的类脂A结构 活活 菌菌 染染 色色简 单 染 色 法抗 酸 染 色革 兰 氏 染 色复 杂 染 色 法普 通 染 色芽 孢 染 色 法荚 膜 染 色 法细 胞 壁 染 色 法特 殊 染 色正 染 色负 染 色死 菌 染 色细 菌 染 色细菌染色法细菌染色法3、革兰氏染色 (1)革兰氏染)革兰氏染色色 细菌细菌染色法染色法死菌死菌活菌活菌:正染色正染色 负染色负染
18、色:简单染色法简单染色法鉴别染色法鉴别染色法荚膜染色法等荚膜染色法等革兰氏染色法革兰氏染色法抗酸性染色法抗酸性染色法芽孢染色法芽孢染色法姬姆萨染色法姬姆萨染色法用美蓝或用美蓝或TTC(氧化三苯基四氮唑氧化三苯基四氮唑)等等作活菌染色作活菌染色(1)革兰氏染色)革兰氏染色1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染2、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更固。细胞间的相互作用从而使二者结合得更固。3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内
19、的为革兰氏阳性后仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细胞呈无色。细胞呈无色。4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色对涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色革兰氏阳性细菌继续保持深紫色成 分 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌革兰氏染色反应肽聚糖含量肽聚糖结构细胞壁厚度及层次磷壁酸脂多糖与类脂质对溶菌酶对青霉素和磺胺与细胞膜的关系菌体呈紫色含量高,
20、占细胞壁干重的3095%)多层,紧密20-80nm,单层多数,含量较高(50)一般无敏感敏感不紧密经脱色、复染后菌体呈红色含量低,占细胞壁干重的520%1-2层,疏松10nm左右(其中外壁层约8nm),无含量较高(分布在外壁层)不敏感不敏感紧密表 革兰氏阳性细菌与阴性细菌细胞壁成分的比较4、细胞壁缺损细胞壁缺损几类细胞壁缺损或无细胞壁的细菌类型:几类细胞壁缺损或无细胞壁的细菌类型:原生质体原生质体(protoplast):指在人工条件下用溶菌酶除尽原有细:指在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后,所留下的仅由细胞膜包胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后,所留下的仅由细胞膜包
21、裹着的细胞,常见于革兰氏阳性菌;裹着的细胞,常见于革兰氏阳性菌;球状体或原生质球球状体或原生质球(sphaeroplast):指还残留部分细胞壁的原:指还残留部分细胞壁的原生质体,常见于革兰氏阴性细菌;生质体,常见于革兰氏阴性细菌;细胞壁缺陷细菌:细胞壁缺陷细菌:缺壁缺壁细菌细菌实验室或宿实验室或宿主体内形成主体内形成在自然界长期进化中形成在自然界长期进化中形成支原体支原体缺壁突变缺壁突变-L型细菌型细菌人工去壁人工去壁基本去尽基本去尽-原生质体原生质体 (G+)部分去除部分去除-球状体球状体 (G-)L型细菌:型细菌:L型细菌应专指那些在实验室中通过自发突变而形型细菌应专指那些在实验室中通过
22、自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。1935年时,年时,在英国李斯特在英国李斯特(Lister)预防医学研究所中发现一种由自发突变而形成的细胞壁预防医学研究所中发现一种由自发突变而形成的细胞壁缺损的细菌缺损的细菌念珠状链杆菌念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis),它的细胞膨大,对渗透压十分敏感,在固体培养基上形成它的细胞膨大,对渗透压十分敏感,在固体培养基上形成“油油煎蛋煎蛋”似的小菌落。由于似的小菌落。由于Lister研究所的第一字母是研究所的第一字母是“L”,故称,故称L型细菌。型细菌。李俊刚在李俊刚在“生物学通报生
23、物学通报”(1990年第年第12期)发表的期)发表的关关于于L-型细菌型细菌(P24),对该菌进行了详细的介绍。对该菌进行了详细的介绍。特点:特点:没有完整而坚韧的细胞壁没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态;细胞呈多形态;有些能通过细菌滤器有些能通过细菌滤器,故又称故又称“滤过型细菌滤过型细菌”;对渗透敏感对渗透敏感,在固体培养基上形成在固体培养基上形成“油煎蛋油煎蛋”似的小菌落(直径在似的小菌落(直径在0.1mm左右);左右);(2)原生质体()原生质体(protoplast)在人为条件下在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养而抑制新生细胞壁合成而形的培
24、养基中培养而抑制新生细胞壁合成而形成的仅由一层细胞膜包裹的圆球形、对渗透成的仅由一层细胞膜包裹的圆球形、对渗透压变化敏感的细胞压变化敏感的细胞,一般由革兰氏阳性细菌形一般由革兰氏阳性细菌形成。成。(3)球状体)球状体(sphaeroplast),又称原生质球又称原生质球 采用上述同样方法采用上述同样方法,针对革兰氏阴性细菌处针对革兰氏阴性细菌处理后而获得的残留部分细胞壁理后而获得的残留部分细胞壁(外壁层外壁层)的球形的球形体体.与原生质体相比与原生质体相比,它对外界环境具有一定的它对外界环境具有一定的抗性抗性,可在普通培养基上生长可在普通培养基上生长.对环境条件变化敏感对环境条件变化敏感,低渗
25、透压、振荡、离心低渗透压、振荡、离心 甚至通气等都易引起其破裂;甚至通气等都易引起其破裂;有的原生质体具有鞭毛有的原生质体具有鞭毛,但不能运动但不能运动,也不被也不被 相相 应噬菌体所感染;应噬菌体所感染;在适宜条件在适宜条件(如高渗培养基如高渗培养基)可生长繁殖可生长繁殖,形成形成 菌落菌落,形成芽孢及恢复成有细胞壁的正常结构形成芽孢及恢复成有细胞壁的正常结构.比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物 质质,是研究遗传规律和进行原生质体育种的良是研究遗传规律和进行原生质体育种的良 好实验材料好实验材料。(二)细胞质膜(cytoplasmic membran
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