肿瘤常规化疗药物个体化治疗课件.ppt

1、中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心全国第四届个体化医学培训班，长沙，2011-6-13个体化医学长沙论坛 卫生部临床药理国家培训中心 肿瘤常规化疗药物个体化治疗中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心药药物代谢动力学物代谢动力学药药物效应动力学物效应动力学药药物快慢代谢物快慢代谢, ,毒性毒性/ /有效性差异有效性差异药物体内过程药物体内过程药药物靶点物靶点药药物转运体物转运体药药物代谢酶物代谢酶药药物效应个体差异物效应个体差异药物体内过程药物体内过程中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国

2、家GCP培训中心基基因因mRNA蛋白蛋白每个蛋白功能改变每个蛋白功能改变基基因突变因突变mRNA序列改变序列改变mRNA数量改变数量改变蛋白数量改变蛋白数量改变总体蛋白功能改变总体蛋白功能改变可遗传突变可遗传突变体细胞突变体细胞突变BiomarkerBiomarkerBiomarkerBiomarker组组织织检检测，测，往往往往与与疗疗效效相相关关可由血细胞分型反应，可由血细胞分型反应，往往与药物代谢相关往往与药物代谢相关中心法则中心法则中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Biomarker的优缺点的优缺点o蛋白和蛋白和mRNA：因为蛋白是直接效应蛋

3、白，所以肿瘤靶向治疗中，蛋白表达与否是跟疗效有无直接相关的；而mRNA的检测，因为比蛋白更灵敏，所以，对mRNA与蛋白成正比的蛋白而言，更易检测；o突变：突变：比起蛋白而言，是定性检测更稳定，但是，要求突变与蛋白功能关系确切。我们也是致力于寻找能与表型直接对应的突变位点，以利于检测。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心o非靶向性，为减少毒副反应，往往为前药前药。本次介绍中除铂类；o抗代谢型药物，为了减少毒性反应，大部分药物在肝脏代谢大部分药物在肝脏代谢为无活性成分，而小部分在组织细胞内代谢为活性也是毒性为无活性成分，而小部分在组织细胞内代谢为活性也是毒

4、性成分成分；o因为普通化疗药物的毒性成分也是活性成分，所以治疗窗窄，因为普通化疗药物的毒性成分也是活性成分，所以治疗窗窄，特别应注意个体化用药，使得活性也是毒性成分在体内浓度特别应注意个体化用药，使得活性也是毒性成分在体内浓度适当，方可减少副反应，而不牺牲疗效。适当，方可减少副反应，而不牺牲疗效。普通化疗药物的这一特点，所以以生存期为终点观察指标的试验，仅有少数结以生存期为终点观察指标的试验，仅有少数结果得到很好的重复果得到很好的重复，我们这里报告所选择的是，结论较确切。确认结论较确切的指标：试验结果在各试验中得到较好的重复、试验设计合理性以及试验中受试者人数。选择设计合理，受试者人数多而且重

5、复性较好的结果报告如下。普通化疗药物的特点普通化疗药物的特点中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心肿瘤个体化药物治疗基因检测目录肿瘤个体化药物治疗基因检测目录p巯嘌呤、硫唑嘌呤p伊立替康p顺铂、奥沙利铂p吉西他滨p5-氟尿嘧啶p紫杉醇p表柔比星 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物巯嘌呤、硫唑嘌呤毒性预测巯嘌呤、硫唑嘌呤毒性预测中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心巯嘌呤巯嘌呤 Mercapto

6、purinev药理作用：细胞周期特异性药物 (S期敏感)，抑制嘌呤合成途径v适应症：急性淋巴细胞白血病及急性非淋巴细胞白血病，慢性粒细胞白血病的急变；为儿童急淋一线药物v不良反应：较常见的为骨髓抑制；肝脏损害骨髓抑制；肝脏损害：可致胆汁郁积出现黄疸；可见于服药量过大的患者：消化系统毒性、高尿酸血症（多见于白血病治疗初期，严重的可发生尿酸性肾病）；少见：间质性肺炎及肺纤维化硫唑嘌呤硫唑嘌呤 Azathioprine &Imuranv药理作用：细胞代谢抑制剂，是巯嘌呤的衍生物，在体内转变为巯嘌呤而发挥抗肿瘤作用v适应症：急性白血病、自身免疫性疾病等。现主要用于器官移植时抑制免 疫排斥v不良反应：较

7、常见肝功能损害、造血系统毒性；少见斑丘疹，血管炎，关节痛，肌痛，结节性红斑等。 药物简介药物简介中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心6-MPTPMT6-Me-MP尿酸(排出体外)(无活性)巯基次黄嘌呤单磷酸盐(TIMP)黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)巯基黄嘌呤单磷酸盐(TXMP)鸟嘌呤磷酸合成酶巯基鸟嘌呤单磷酸盐巯基鸟嘌呤单磷酸盐(TGMP)次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(活性活性)(无活性)二二/三磷酸盐三磷酸盐(活性活性)TPMT参与参与6-MP的代谢的代谢TPMTTPMTXO中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心o

8、由两个相同的亚单位组成o245个氨基酸，34KDo以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体催化杂环与芳香环上硫原子的甲基化o红细胞中活性可反应肝脏内TPMT活性，人群中TPMT活性呈三态分布TPMT (巯嘌呤甲基转移酶巯嘌呤甲基转移酶)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心TPMT活性与TGN浓度明显负相关Ann Intern Med. 1997;126:608-614TPMT (巯嘌呤甲基转移酶巯嘌呤甲基转移酶)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心o6p22.3o9 introns, 10 exonso全长3.4 kb，编

9、码序列2.7kb；1号外显子全长及3、4号外显子部分不编码o假基因位于18q21.1，同源性达96%oTPMT的活性在患者间个体差异明显，人群中86.6的TPMT活性较高，而11.1具有中等活性，有0.3活性缺失。o80%-95%的低TPMT活性可由：TPMT*2，*3A，*3B，和*3C解释，在东方人群中*3C占绝大多数TPMT (巯嘌呤甲基转移酶巯嘌呤甲基转移酶)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Leukemia (2000) 14, 567572中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心TPMT活性与TPMT

10、突变呈基因剂量效应Journal of the National Cancer Institute, 1999, 91(23)TPMT (巯嘌呤甲基转移酶巯嘌呤甲基转移酶)MMWMWW中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心TPMT(巯嘌呤甲基转移酶巯嘌呤甲基转移酶)Ther Drug Monit 2004(26):186-191TGNTPMTWWWMMMWWWMMMMMWM WWMM WM WW中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心TPMT突变检测临床意义小结突变检测临床意义小结p巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）参与巯

11、嘌呤和咪唑硫嘌呤的甲基化作用，与其毒性关系密切。pTPMT的活性受到遗传多态性的影响，它可以通过TPMT改变巯嘌呤的代谢率。TPMT的活性在患者间个体差异明显，人群中86.6的TPMT活性较高，而11.1具有中等活性，有0.3活性缺失。pTPMT活性高的为野生型TPMT*1，而突变型TPMT*2(G238C)，*3A（A719G）和*3C(G460A)占中等和低活性状况的80-95。TPMT*3A的患者TPMT活性完全丧失，TPMT*3B和TPMT*3C患者的TPMT催化活性分别降低9和1.4。TPMT*1/*3个体为中等代谢者），TPMT*3B/*3C个体为低代谢者。p研究表明，TPMT中等

12、活性和较低活性的患者只能接受1050的平均巯嘌呤化疗剂量。人群中约0.3的TPMT活性缺失，11的人群活性中等，都面临着患骨髓抑制增加的风险。pTPMT基因的遗传变异对于急性淋巴细胞性白血病化疗反应毒副作用具有重要意义。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心pTPMT*1/*1野生型基因携带者酶活性正常，使用正常剂量；pTPMT *1/*2、*1/*3A、*1/*3C突变杂合子基因携带者酶活性很低，使用1050剂量，减少毒性反应并节省费用；pTPMT *2/*2，*3A/*3A、*3C/*3C、*2/*3A、*3A/*3C、*2/*3C突变纯合子基因携

13、带者酶活性极低，使用510剂量，减少毒性反应并节省费用。用药建议用药建议中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物伊立替康药物毒性预测伊立替康药物毒性预测中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心属喜树碱类化疗药物，前药，活性成分：SN-38作用机制: 抑制拓扑异构酶I，S期特异适应症：晚期/转移性结直肠癌，对于5-FU化疗失败的患者，本品可作为二线治疗。同时对小细胞和非小细胞肺癌及宫颈癌和卵巢癌亦有疗效。 不良反应：较常见为血样腹泻、中性粒细

14、胞减少症(均为剂量依赖性)伊立替康伊立替康UGT1A1羧酸酯酶中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心CPT-11CPT-11SN-38GSN-38GSN-38SN-380-2级腹泻3-4级腹泻发生3-4级腹泻的病人体内SN-38浓度明显升高伊立替康伊立替康CANCER RESEARCH, 1994(54),15: 3723-3725中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1基因突变基因突变UGT1A1*28: 启动子有6个TA重复, 但*28突变为5,7,8个TATATA 盒为盒为6个个TA重复重复,突变后

15、变为突变后变为7个个TA重复重复中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1*28 和UGT1A1*6突变降低UGT1A1功能,降低SN-38的葡萄糖醛酸化，使SN-38蓄积UGT1A1基因突变功能意义基因突变功能意义Yakugaku Zasshi 2008,128(4): 575-584; Pharmacogenetics and Genomics 2007, 17:497504中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY, 2004(22): 1-7中性粒

16、细胞计数UGT1A1*28使发生中性粒细胞减少的危险度明显增加UGT1A1*28与与伊立替康毒性伊立替康毒性中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1多态性多态性与与伊立替康毒性伊立替康毒性美国NIH的遗传药理学研究计划中：N9741项目，收集524例使用伊立替康化疗的结直肠癌病人，发现UGT1A1*28携带者造血系统毒性明显升高中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心118118名服用伊立替康名服用伊立替康 4 4级粒细胞减少级粒细胞减少 4 4级血样便腹泻或脱水级血样便腹泻或脱水3 3级水样便腹泻。级水样

17、便腹泻。1212人（人（46%46%）为为UGT1A1UGT1A1* *2828（纯合子（纯合子4 4人；杂合子人；杂合子8 8人）人）纯合子严重腹泻的发生率为纯合子严重腹泻的发生率为7070，而，而* *2828突变杂合子和野生型突变杂合子和野生型纯合子中的发生率分别为纯合子中的发生率分别为3333和和1717；9292人无人无ADRsADRs1313人（人（14%14%）为为UGT1A1UGT1A1* *28282626人发生严重人发生严重ADRsADRs（2222）UGT1A1多态性多态性与与伊立替康毒性伊立替康毒性中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培

18、训中心根据根据UGT1A1UGT1A1* *2828基因型指导伊立替康临床用药基因型指导伊立替康临床用药10%40%50%所有相同诊断的病人所有相同诊断的病人10% ADR发生率发生率7/7 基因型基因型ADR: 50%减减量或量或换药换药 7/6 基因型基因型ADR: 12.5%减减量或量或换药换药 6/6 基因型基因型ADR: 0%常常规剂规剂量量 数据自 CPT 2004中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1*28基因型指导伊立替康用药的药物经济学意义基因型指导伊立替康用药的药物经济学意义结论：应用UGT1A1基因型指导伊立替康临床用药

19、，可以减少医疗开支Cancer 2009 Sep (1): 3858-3867中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1*6 降低降低SN-38代谢，引起严重造血系统毒性代谢，引起严重造血系统毒性依立替康依立替康p90-min IV输注 375 mg/m2，每3周一次 (n = 45).pUGT1A1*6 纯合子：pSN-38血浓度升高 (P = 0.018), p葡萄苷酸反应降低 (P = 0.006)，胆汁指数升高 p中性粒细胞计数低85%；4级中性粒细胞集落刺激因子减少发生率为27%p严重4级中性粒细胞减少发生的机率为其他基因型的3倍Jad

20、a SR, et al, Cancer Sci 2007; 98: 14611467中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Pharmacogenetics and Genomics 2007, 17:497504UGT1A1*6与与伊立替康毒性伊立替康毒性中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心UGT1A1突变检测临床意义小结突变检测临床意义小结p伊立替康（Irinotecan）是经过化学修饰的天然喜树碱的衍生物，是一种前药。p其活性代谢产物SN-38在肝细胞内通过葡萄糖醛酸转移酶（UGT1A1）的作用与葡萄糖醛酸结

21、合，形成-葡萄糖苷酸SN-38（SN-38G）而丧失抗癌活性。pUAT1A1*28或*6突变导致酶活性显著降低，发生致命性腹泻、严重粒细胞减少的风险显著增高。美国FDA明确规定UAT1A1*28（*6未列入因其仅见于亚洲人）是预测伊立替康毒副反应的独立遗传标记。pUGT1A1*1/*1野生型纯合子基因携带者发生致命性腹泻、严重粒细胞减少的风险低于510%；UGT1A1*28或*6突变纯合子发生严重毒性反应的风险显著增高为75%左右，应密切关注。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心对于UGT1A1*28/*28、*6/*6或*6/*28携带者有三种建议:

22、o用正常剂量治疗，化疗后予G-CSF预防血象下降；o减少伊立替康剂量，密切观察疗效；o转用其他化疗方案，不用伊立替康相关方案：在结肠癌患者中推荐改为5-FU/亚叶酸钙/奥沙利铂联合化疗方案。用药建议用药建议中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心顺铂、奥沙利铂药物疗效预测顺铂、奥沙利铂药物疗效预测中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心药物介绍药物介绍铂类化疗药物包含：铂类化疗药物包含：奥沙利铂奥沙利铂(oxaliplatin), 顺铂顺铂(Cisplatin),卡铂卡铂(Carboplatin) 等等v药理作用：直接

23、作用于DNA，细胞周期非特异性 适应症：化疗谱较广，奥沙利铂用于经氟脲嘧啶治疗失败 后的结直肠癌转移的患者；可单独或联合氟尿嘧啶使用。v不良反应：造血系统毒性、消化道毒性、神经毒性等。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心GSTP1 Ile105Val与化疗病人存活率有关与化疗病人存活率有关乳腺癌化疗患者的乳腺癌化疗患者的5 5年生存率与年生存率与Ile105ValIle105Val的关系的关系 J Natl Cancer Inst 2002 Jun; 94 (12): 936-42 Val/ValIle/ValIle/Ile中南大学临床药理研究所 湘雅

24、医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心结肠直肠癌化疗患者的结肠直肠癌化疗患者的2 2年生存率与年生存率与Ile105ValIle105Val的关系的关系 Cancer Res 2000 Oct; 60 (20): 5621-4 GSTP1 Ile105Val与化疗病人存活率有关与化疗病人存活率有关Val/ValIle/ValIle/Ile中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Favourable genotypes: XPD-751(Lys/Lys)ERCC1-118 (C/C) GSTP1-105 (Val/Val)TS-30UTR (+6

25、BP/+6BP)GSTP1 105 Val突变等位基因携带者突变等位基因携带者,5FU/奥沙利铂奥沙利铂化疗疗效更好化疗疗效更好British Journal of Cancer (2004) 91, 344 354中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心GSTP1突变检测临床意义小结突变检测临床意义小结p人类谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)是体内最重要的II相解毒酶，在铂类药物的解毒代谢中起重要作用。pGSTP1(Ile105Val)突变导致酶活性显著降低，降低了化疗药物的代谢清除率，延长了化疗药物对肿瘤的作用，因此患者化疗后生存率显著增加，但应关注药

26、物毒副作用。有研究报道奥沙利铂治疗的患者中，发生3级神经毒性23%为Ile105Ile野生型纯合子，77%为105Val突变携带者。p经正规治疗的Val105Val突变纯合子患者晚期结直肠癌患者的相同时间生存率约为75%； Val105Val杂合子患者晚期结肠直肠癌患者的相同时间生存率约为40%；Ile105Ile野生型纯合子相同时间生存率仅为5%。对于非突变纯合子个体要注意定期复查。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心TPMT和和COMT突变是铂类药物耳毒性的危险因子突变是铂类药物耳毒性的危险因子可能的机制是影响甲硫氨酸循环，从而改变细胞内SAM浓度

27、所致Nature Genetic 2009,41(12):1345-1350中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心ERCC1表达是铂类化疗疗效的独立预测因子表达是铂类化疗疗效的独立预测因子N Engl J Med 2006,355;10高表达ERCC1的疗效差，原理可能是ERCC1能使铂类作用产生的DNA络合物的清除增加 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心根据根据ERCC1表达和表达和RRM1表达选择化疗方案表达选择化疗方案中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心ERCC1

28、基因多态性与铂类化疗疗效的关系基因多态性与铂类化疗疗效的关系ERCC1 118 CT突变者肿瘤组织高表达ERCC1，所以奥沙利铂化疗效果差中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心ERCC1基因多态性与铂类化疗疗效的关系基因多态性与铂类化疗疗效的关系Clin Cancer Res 2005;11(17)与上述相反：ERCC1基因118号外显子(AAC)到(AAT)的突变携带者，用奥沙利铂/5-FU治疗转移性结直肠癌的疗效更好。可能与降低ERCC1表达量或功能有关所以：ERCC1表达是铂类化疗疗效预测因子，而118CT突变尚不可作为预测因子因上述不一致情况，因

29、上述不一致情况，ERCC1表达水平是铂类化疗疗效的独表达水平是铂类化疗疗效的独立预测因子。但是，用立预测因子。但是，用ERCC1基因突变来指导用药证据尚基因突变来指导用药证据尚不足，需要进一步大规模临床试验验证不足，需要进一步大规模临床试验验证中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心吉西他滨骨髓抑制毒性反应预测吉西他滨骨髓抑制毒性反应预测中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心吉西他滨吉西他滨 Gemcitabine, Gemzer p药理作用：属细胞周期特异性抗肿瘤药，主要杀伤处于S期(DNA合成)的细胞，同时也阻断

30、细胞增殖由G1向S期过渡的进程p适应症：非小细胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌及其他实体肿瘤 p吉西他滨可被肝脏胞苷脱氨酶(CDA)代谢为无活性代谢产物药物简介药物简介中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心ENT1CNT3平衡核苷酸转运体 (ENT1, equilibrative nucleoside transporters)浓度巷转运蛋白 (CNT3, concentrative nucleoside transporters)胞苷脱氨酶（CDA, Cytidine deaminase)脱氧胞苷酸激酶 (DCK, Deoxycytidine kinas

31、e)脱氧胞苷酸一磷酸脱氨基酶DCTD , deoxycytidine monophosphate deaminase)核苷酸还原酶(RRM1, ribonucleotide reductase M1)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Sugiyama E, et al, JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 2007;25:32-42吉西他滨吉西他滨p吉西他滨治疗指数小，肝内经胞苷脱氨酶催化代谢。pCDA基因多态性包括 *3（208AG，Ala70Thr），引起酶活性缺失，使吉西他滨的体内清除率降低，Cmax和AUC增高。中南大学

32、临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心CDA *3降低吉西他滨清除率,升高其AUCUeno H, British Journal of Cancer (2007) 97, 145151吉西他滨吉西他滨中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Nucleosides, Nucleotides, and Nucleic Acids, 27:720725, 2008CDA*3对吉西他滨的药代学影响在各个研究间得到很好的重复吉西他滨吉西他滨中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心吉西他滨和卡铂,顺

33、铂,氟尿嘧啶合用时，中性白细胞减少(III/IV级)的发生率在有单倍体*3 (208GA,Ala70Thr)病人中高于无此突变者,AUC显著增高(无论单用或合用)JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 2007;25:32-42; Br J Cancer. 2009 Mar 24;100(6):870-3CDA*3与吉西他滨毒性关系与吉西他滨毒性关系242 前列腺癌患者中，3名出现威胁生命不良反应（骨髓抑制），其中两名为CDA*3（CDA 208GA, Ala70Thr）的突变纯合子，而且体内吉西他滨清除率明显降低，浓度明显升高。CDA*3是吉西他滨导致不良反应的主要因素中南

34、大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心 British Journal of Cancer (2007) 97, 145151与吉西他滨通路相关的基因多态性在不同种族中的发生频率吉西他滨吉西他滨4%中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心CDA突变检测临床意义小结突变检测临床意义小结p抗肿瘤药物吉西他滨进入人体后转化为三磷酸盐活性产物并整合到DNA链中，通过阻断DNA的合成并抑制核苷酸还原酶发挥抗肿瘤的作用。p吉西他滨被肝脏胞苷脱氨基酶(CDA)迅速代谢为无活性代谢产物。pCDA的2号外显子区存在208GA(CDA*3,

35、Ala70Thr)突变，导致CDA对吉西他滨的脱氨基作用大大降低，CDA*3/*3和CDA*1/*3体内CDA的脱氨基活性分别为CDA*1/*1活性的12%和25%。 CDA*3携带者约占人群的810%。p当CDA*3/*3和CDA*1/*3突变携带者联合铂类化疗时，发生骨髓抑制、3级或3级以上粒细胞减少症等不良反应几率增大，需严密关注血相。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心RRM1与吉西他滨治疗关系与吉西他滨治疗关系p RRM1 高表达与吉西他滨耐药相关；p 但是RRM1基因突变与吉西他滨的疗效和毒性的 关系在各研究间不能重复，尚不足以下确切性结论

36、。Woo Sun Kwona等发现RRM1 2464GA的突变菌对吉西他滨反应性好 （Pharmacogenetics and Genomics 16:429438）SUN YOUNG RHA等的实验未能重现，而他们同时还发现突变携带者的血液系统毒性反应轻。 （The Oncologist, 2007,12(6):622-630.）中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心5-5-氟尿嘧啶毒性预测氟尿嘧啶毒性预测中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心5-FUp药理作用：抗代谢类，抑制胸苷合成酶，S期更敏感p适应症：抗瘤

37、谱较广，主要用于治疗消化道肿瘤，或较大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌。亦常用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌及皮肤癌等。 p肿瘤转移患者，以5-FU为基础的化疗敏感性仅为22%药物简介药物简介卡培他滨，替加氟卡培他滨，替加氟p均为前药，代谢为5-FU后，机制相同。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心5-FU及其前药的代谢及其前药的代谢/效应通路效应通路二氢嘧啶脱氢酶二氢嘧啶脱氢酶 替加氟替加氟卡培他滨卡培他滨脱氧胞苷脱氨酶脱氧胞苷脱氨酶 乳清酸转磷酸核糖酶乳清酸转磷酸核糖酶 尿苷一磷酸激酶尿苷一磷酸激酶 胸苷合成酶胸苷合成酶 亚甲基四氢叶酸还原

38、酶亚甲基四氢叶酸还原酶MTX亚叶酸钙亚叶酸钙 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心o1p22, 23个外显子，全长950kb, 开放阅读框3075bpo图中所未，绿色为N-末端Fe-S簇,黄色为(FAD结合区),橙色为(NAPDH结合区), 红色为(FMN/嘌呤结合区),C末端蓝色区为C端Fe-S簇二氢嘧啶脱氢酶基因二氢嘧啶脱氢酶基因(DPYD)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心目前已知可使5-FU毒性增强的DPYD突变European Journal of Cancer 40 (2004) European

39、 Journal of Cancer 40 (2004) 939939950950J Hum Genet (2007) 52:804J Hum Genet (2007) 52:804819819*2A二氢嘧啶脱氢酶基因二氢嘧啶脱氢酶基因(DPYD)0%3%2%0%1.5% 0%0%27%0%0%1.5%0%0%New SNPs found in Japanese: -609CT, -477 TG, -266 CA, 29CA(Ala10Glu), 325TA (Tyr109Asn), 451AG (Asn151Asp),733AT (Ile245Phe), 793GA (Glu265Lys),

40、 1543GA(Val515Ile), 1572TG (Phe524Leu), 1666AC (Ser556Arg), and 2678AG (Asn893Ser), 2303CA(Thr768Lys)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心o直肠癌：肿瘤组织高表达TS对5-FU为基础的化疗反应性差；可作为复发和远处转移的独立预测指标；o胰腺癌：高表达TS却与生存期长相关o与TS启动子区VNTR的多态性关系，报道不一致，不足以指导用药。胸苷合成酶胸苷合成酶(TYMS)TYMS表达与5-FU疗效有关，但不同癌症中影响不同；而TYMS突变对5-FU疗效影响报道

41、不一。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心紫杉醇紫杉醇中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心p紫杉醇治疗卵巢癌、乳腺癌有良好效果，对治疗前列腺癌、上消化道癌、小细胞性和非小细胞性肺癌前景良好。 pG2晚期和M期敏感 p紫杉醇参与微管蛋白的聚合，生成微管相关蛋白,使微管蛋白亚单位的分子量增至6076kDa。经紫杉醇作用后的微管其形态发生改变，不与染色体连接，使细胞表面出现突起;并抑制有丝分裂紫杉醇紫杉醇 (PAC)中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心紫杉醇紫杉醇 (PAC)

42、P-gpPAC85%15%中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心MDR1 3435C/T突变个体更易发生周围神经病变，3435C/T与2677G/T联合突变者易出现中性粒细胞减少症3435C/T3435C/T & 2677G/TEur J Cancer. 2006 November ; 42(17): 28932896.MDR1 与紫杉醇与紫杉醇中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心携带MDR1 2677T/A突变的卵巢癌患者紫杉醇疗效更好 Clin Cancer Res. 2006 Feb 1;12(3 Pt 1

43、):854-9. MDR1 与紫杉醇与紫杉醇中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心携带CYP1B1（Leu432Val）突变的乳腺癌患者，使用紫杉醇化疗存活率更低,与激素代谢有关，不可推及其他癌症患者。 Pharmacogenomics J. 2007 Jan 16. CYP1B1 与紫杉醇与紫杉醇中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心表柔比星表柔比星中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心表柔比星与表柔比星与NQO1Nature Genetics. 2008 40(7):84

44、4-853.中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心不表达P53疗效好，NQO1突变纯合子疗效差Nature Genetics. 2008 40(7):844-853.中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心检测方法检测方法o突变：突变：PCR-pyrosequencing 优点：具有高灵敏度、准确性及高通量、操作简便等特性。该方法可计算突变基因在基因组中比例，特别适用于组织标本。 omRNA及蛋白：及蛋白：illuminx（液相芯片）（液相芯片） 优点：具有高灵敏度、准确性及高通量、操作简便等特性。中南大学临床药理研

45、究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心标本要求标本要求o血液样本：血液样本：EDTA或枸橼酸盐抗凝的真空采集管，禁用肝素抗凝；采集血液标本2mL以上；血液标本采集后常温24小时内送达，不能当日送达请4保存；p新鲜肿瘤组织块：新鲜肿瘤组织块：要求提供25mg左右（大于米粒大小即可）的样本(手术样本或肠检样本)，将样本放置于10中性福尔马林溶液中，常温运输。o石蜡包埋肿瘤组织块：石蜡包埋肿瘤组织块：要求提供石蜡包埋组织1块，常温保存、运输。剩余蜡块归还。o石蜡包埋肿瘤组织切片（从大块组织切片）：石蜡包埋肿瘤组织切片（从大块组织切片）：切片厚度5-8 m；切片结束后，直接用干净的镊子将组织切片转移至干净的塑料离心管(1.5mL)中。每个离心管放面积约250 mm2切片5张（成人拇指盖大小）的肿瘤组织切片。如果肿瘤组织切片的面积较小，请适当增加切片的数量（不超过10张）。送样时请提供两管待测样本。样本常温保存、运输。o石蜡包埋肿瘤组织切片（成片）：石蜡包埋肿瘤组织切片（成片）：提供10张未经染色的石蜡组织切片，不接收染色切片。穿刺标本：穿刺标本：要求参照石蜡组织；胸水胸水/腹水：腹水：10mL以上，当天送达；无法当天送达，请4保存。中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所临床药理国家培训中心 国家GCP培训中心Thank you!