实验诊断学概论1课件.ppt

1、实实 验验 诊诊 断断 学学 概概 论论主要内容主要内容1.1.实验诊断学的基本概念实验诊断学的基本概念2.2.实验诊断学的主要内容及应用范围实验诊断学的主要内容及应用范围3.3.实验诊断学的现状及发展趋势实验诊断学的现状及发展趋势4.4.学习实验诊断学的方法和要求学习实验诊断学的方法和要求5.5.实验诊断的影响因素实验诊断的影响因素6.6.实验诊断的临床应用与评价实验诊断的临床应用与评价实验诊断学实验诊断学（Laboratory Diagnostics）的基本概念：的基本概念：实验诊断（实验诊断（ Laboratory Diagnosis Laboratory Diagnosis ） 是指医

2、生的医嘱通过临床实验室分析所得到的信息为疾病的预防、是指医生的医嘱通过临床实验室分析所得到的信息为疾病的预防、诊断、治疗和预后评价所应用的医学临床活动。诊断、治疗和预后评价所应用的医学临床活动。 实验室前：实验室前：合理选择实验项目，检验申请，患者准备，合理选择实验项目，检验申请，患者准备， 样本采集，样本传送样本采集，样本传送 实验室：实验室：用化学、生物学等的实验技术和方法，对取自人体的用化学、生物学等的实验技术和方法，对取自人体的 检验样本如血液、体液等进行检验样本如血液、体液等进行检测分析检测分析 实验室后：实验室后：结果审核、解释、报告，样本储存结果审核、解释、报告，样本储存检验医学

3、检验医学(Laboratory Medicine) 与实验诊断学概念相关，但其研究与与实验诊断学概念相关，但其研究与教学的目的有所侧重不同教学的目的有所侧重不同实验诊断学是以检验结果的临床应用为目实验诊断学是以检验结果的临床应用为目的，而检验医学则以方法的研究和改进为的，而检验医学则以方法的研究和改进为目的。目的。 实验诊断学实验诊断学的任务是将检验的结果，结合病史的任务是将检验的结果，结合病史/ /家族史、症状家族史、症状/ /体征以及影象检查体征以及影象检查/ /病理检查等，病理检查等，进行逻辑的分析和科学的思维，进行逻辑的分析和科学的思维，对病人作出正确对病人作出正确的诊断、鉴别诊断、疗

4、效观察和预后判断。的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断。检验医学检验医学的任务是使用仪器、试剂、方法对标的任务是使用仪器、试剂、方法对标本本/ /样品进行检测，并做好质量控制，为临床样品进行检测，并做好质量控制，为临床提供准确的检验结果。提供准确的检验结果。 二、实验诊断学的主要内容及应用范围二、实验诊断学的主要内容及应用范围实验诊断学的主要内容实验诊断学的主要内容 临床检验（临床检验（ Laboratory TechnologyLaboratory Technology） 临床血液学检验（临床血液学检验（Clinical HematologyClinical Hematology） 临床生物

5、化学检验（临床生物化学检验（Clinical BiochemistryClinical Biochemistry） 临床病原学检验（临床病原学检验（Clinical MicrobiologyClinical Microbiology） 临床免疫学检验（临床免疫学检验（Clinical ImmunologyClinical Immunology） 尿液的化学试验分析与尿沉渣检验尿液的化学试验分析与尿沉渣检验 浆膜腔积液检验浆膜腔积液检验 脑脊液及其它体液分析脑脊液及其它体液分析 各种分泌物及脱落细胞各种分泌物及脱落细胞 （1）临床检验（体液学检验）：）临床检验（体液学检验）：q内容：内容： 血液

6、细胞的计数和分类、血细胞形态、血液细胞的计数和分类、血细胞形态、 骨髓细胞形态、细胞化学染色。骨髓细胞形态、细胞化学染色。 q用途：用途： 血液病及各种贫血血液病及各种贫血 、 凝血及止血功能、凝血及止血功能、 出血性疾病的实验室诊断。出血性疾病的实验室诊断。（2 2）临床血液学检验：）临床血液学检验：（3）临床生物化学检验：）临床生物化学检验：v测定：人体血液和体液中测定：人体血液和体液中的生化物质和治疗药物浓度的生化物质和治疗药物浓度如各类代谢物、酶类、水盐、如各类代谢物、酶类、水盐、血气、内分泌激素、治疗药血气、内分泌激素、治疗药物浓度、微量元素等。物浓度、微量元素等。 v 方法：分光光

7、度法、电泳法、离心分离方法：分光光度法、电泳法、离心分离 法、色谱法、电极法、原子吸收法、色谱法、电极法、原子吸收 分光光度法等方法分光光度法等方法（4）临床病原学检验：）临床病原学检验：v 方法：方法： 细菌培养与药物敏感试验、细菌培养与药物敏感试验、 血清学反应等。血清学反应等。v 检测：感染性病原体、医院感染的微生检测：感染性病原体、医院感染的微生 物检测等。物检测等。 （5）临床免疫学检验：）临床免疫学检验：v细胞免疫、体液免疫细胞免疫、体液免疫v方法：抗原抗体反应或各免疫标记技术方法：抗原抗体反应或各免疫标记技术 v检测：血液和体液中的各类传染病抗原抗体、检测：血液和体液中的各类传染

8、病抗原抗体、 肿瘤标记物、细胞因子、免疫成分及肿瘤标记物、细胞因子、免疫成分及 功能、自身免疫病、器官移植等。功能、自身免疫病、器官移植等。 温附一医学检验中心温附一医学检验中心临床基础检验室临床基础检验室临床急诊检验室临床急诊检验室临床微生物检验室临床微生物检验室临床血液检验室临床血液检验室临床基因诊断和遗传学检验临床基因诊断和遗传学检验室室临床生化检验室临床生化检验室临床免疫检验室临床免疫检验室 实验诊断学的应用范围：实验诊断学的应用范围： 临床医疗临床医疗 疾病的诊断和鉴别诊断疾病的诊断和鉴别诊断 疗效观察和预后判断疗效观察和预后判断 疾病预防疾病预防 社会普查社会普查 健康咨询健康咨询

9、 科学研究科学研究 实验诊断学的应用范围：实验诊断学的应用范围： 临床医疗临床医疗 疾病的诊断和鉴别诊断疾病的诊断和鉴别诊断 疗效观察和预后判断疗效观察和预后判断 疾病预防疾病预防 社会普查社会普查 健康咨询健康咨询 科学研究科学研究三、实验诊断学的现状和发展趋势三、实验诊断学的现状和发展趋势（一）仪器的自动化 从手工操作 自动化仪器 1、常用仪器血液血液/尿液检尿液检验验生化学检验生化学检验微生物检验微生物检验免疫学检验免疫学检验 分子生物学检分子生物学检验验血液分析血液分析自动生化分自动生化分析析自动血培养自动血培养酶免疫酶免疫PCR扩增扩增血液凝固血液凝固干化学分析干化学分析微生物鉴定微

10、生物鉴定免疫荧光免疫荧光DNA测序测序尿液分析尿液分析血气分析血气分析药敏分析药敏分析流式细胞流式细胞生物图象分析生物图象分析染色体分析染色体分析电泳分析电泳分析厌氧菌培养厌氧菌培养免疫电泳免疫电泳生物芯片分析生物芯片分析1.1.仪器的自动化仪器的自动化 从手工操作从手工操作 自动化仪器自动化仪器现状：现状：2.2.标本微量化、方法标准化、检测自动快速、标本微量化、方法标准化、检测自动快速、报告电脑化、高新技术不断涌现。报告电脑化、高新技术不断涌现。3.3.检验人员水平和层次不断提高检验人员水平和层次不断提高4.4.-使测定结果的准确性和可重复性不使测定结果的准确性和可重复性不断提高。断提高。

11、q实验室管理的完善和进一步提升：实验室管理的完善和进一步提升：CAP、ISO15189的医学实验室认可的医学实验室认可q实验监测下的个体化诊断和个体化治疗实验监测下的个体化诊断和个体化治疗q方法和仪器的不断改善：如床旁检测方法和仪器的不断改善：如床旁检测（POCT，point of care test）发展趋势：发展趋势：p 掌握掌握：检验项目的选择，常用检验的临床意义：检验项目的选择，常用检验的临床意义p 学会学会：临床思维，进行实验的评价及结果分析：临床思维，进行实验的评价及结果分析p 熟悉熟悉：标本的采集和处理以及实验的影响因素：标本的采集和处理以及实验的影响因素p 了解了解：检验项目的

12、方法、原理：检验项目的方法、原理p 注意注意：全面分析、动态观察：全面分析、动态观察四、学习实验诊断学的方法和要求：四、学习实验诊断学的方法和要求：分析前、中、后各种因素均可能影响到检验结分析前、中、后各种因素均可能影响到检验结果，因此需建立完善的质量保证体系（室内质果，因此需建立完善的质量保证体系（室内质量控制、室间质量评价）来提高检验结果的准量控制、室间质量评价）来提高检验结果的准确性和精密度。确性和精密度。五、实验诊断的影响因素五、实验诊断的影响因素1.1.选择正确的标本种类选择正确的标本种类 血液标本的种类血液标本的种类 全血：血细胞成分检验全血：血细胞成分检验 血清：大部分生化、免疫

13、项目检验血清：大部分生化、免疫项目检验 血浆：部分临床生化检验及凝血功能血浆：部分临床生化检验及凝血功能 游离游离HbHb2.2.选择合适的采血方式：选择合适的采血方式： 采集方式采集方式：毛细血管采血毛细血管采血 静脉采血：最常见静脉采血：最常见 动脉采血：常用于血气分析动脉采血：常用于血气分析3. 选择合适的采血时间选择合适的采血时间A.空腹采血（禁食空腹采血（禁食8h后）后） 有些生化物质消化吸收快，受进有些生化物质消化吸收快，受进餐影响大。如血葡萄糖、甘油三酯，只餐影响大。如血葡萄糖、甘油三酯，只有空腹才反映真正水平；有些餐后的高有空腹才反映真正水平；有些餐后的高脂血症血浆混浊，干扰生

14、化反应，因此脂血症血浆混浊，干扰生化反应，因此这些项目尽可能用空腹血。这些项目尽可能用空腹血。 B.特定时间采血特定时间采血 糖耐量试验，糖耐量试验， 餐后餐后2小时的血糖；小时的血糖； 血药浓度的峰值与谷值等。血药浓度的峰值与谷值等。 4.选择正确的抗凝剂选择正确的抗凝剂 许多血液分析需用抗凝血，许多血液分析需用抗凝血， 不同检验项目抗凝剂不同。不同检验项目抗凝剂不同。 如如 血液常规要用血液常规要用EDTA-K2 血沉与血凝试验要用枸橼酸钠血沉与血凝试验要用枸橼酸钠 血气分析用血气分析用1000U/ml的肝素的肝素， 否则就会影响结果。否则就会影响结果。 5.其他的一些重要的临床常见影响因

15、素：其他的一些重要的临床常见影响因素： 溶血标本对溶血标本对K+测定的影响测定的影响（细胞内浓度是血浆（细胞内浓度是血浆中的中的35-40倍）倍） 采血不畅采血不畅(部分凝固部分凝固)时对血小板与凝血因子测时对血小板与凝血因子测 定的影响定的影响 输液污染对输液污染对K+、葡萄糖浓度的影响、葡萄糖浓度的影响 标本放置时间过长对结果的影响，如标本放置时间过长对结果的影响，如红细胞对红细胞对葡萄糖葡萄糖的糖酵解的糖酵解 RBC代谢对血气的影响，代谢对血气的影响，K+浓度等浓度等标本收集前应考虑的因素标本收集前应考虑的因素包括病人的包括病人的饮食、药物与采集时间饮食、药物与采集时间等等有些化学组成容

16、易受到饮食成分的干扰，有时还可受有些化学组成容易受到饮食成分的干扰，有时还可受到近期食谱的影响到近期食谱的影响许多药物可干扰测定结果，应加以注明，并尽可能在许多药物可干扰测定结果，应加以注明，并尽可能在试验前停药试验前停药有些药物可能对某一种测定方法发生干扰，而对另一有些药物可能对某一种测定方法发生干扰，而对另一种方法却无影响，因此医生和检验人员之间的密切联种方法却无影响，因此医生和检验人员之间的密切联系更显得必要系更显得必要某些血浆组成的浓度可有昼夜节律性变化（如皮质醇某些血浆组成的浓度可有昼夜节律性变化（如皮质醇等），则应规定恰当的标本收集时间等），则应规定恰当的标本收集时间综上：标本采集

17、应注综上：标本采集应注意意标本收集时应考虑的因素标本收集时应考虑的因素最常见的是病人的体位、皮肤消毒剂的选择；采血部最常见的是病人的体位、皮肤消毒剂的选择；采血部位；有无瘀血与溶血、抗凝剂的成分和用量等位；有无瘀血与溶血、抗凝剂的成分和用量等 例如有资料表明，人体从平卧状态转为直立状态例如有资料表明，人体从平卧状态转为直立状态1515分分钟内，静脉血中血浆蛋白及某些与血浆蛋白结合的成钟内，静脉血中血浆蛋白及某些与血浆蛋白结合的成分的浓度可增高分的浓度可增高1010-13-13，这是由于细胞外液的重新，这是由于细胞外液的重新分布所致分布所致当患者处于静脉输液时，不应在输液部位静脉采取标当患者处于

18、静脉输液时，不应在输液部位静脉采取标本本标本收集后应考虑的因素标本收集后应考虑的因素 一般应即时送实验室一般应即时送实验室有些检查必须立即进行，必要时可冰箱保存，或分离有些检查必须立即进行，必要时可冰箱保存，或分离血浆（血清）后保存血浆（血清）后保存六、实验诊断的临床应用与评价六、实验诊断的临床应用与评价明确选择实验的目的根据实验的特性选择适合的实验前提：正确选择实验室检查项目前提：正确选择实验室检查项目实验诊断的临床应用实验诊断的临床应用 因此因此 不同的指标有不同的诊断价值，在项目选择上遵循循证医学或循不同的指标有不同的诊断价值，在项目选择上遵循循证医学或循 证检验医学的原则和观点。证检验

19、医学的原则和观点。2.也有些只能作也有些只能作辅助辅助诊断：诊断： 如如 白细胞计数与分类对炎症的判断白细胞计数与分类对炎症的判断 转氨酶高低对肝损坏的判断转氨酶高低对肝损坏的判断1.有些称有些称黄金黄金指标可以直接依此做出结论指标可以直接依此做出结论 ，得到确定诊断，得到确定诊断 如如 HCG水平诊断妊娠，水平诊断妊娠， 骨髓检查对血液病的诊断，骨髓检查对血液病的诊断， 细菌培养对感染的诊断等。细菌培养对感染的诊断等。 灵敏度 100% 100%假阴性真阳性真阳性caa 有病有病 TP(a) FP(b) FN(c) TN(d)（1）（sensitivity, Se） 又称敏感度、敏感性，指某

20、检验项目对某种疾又称敏感度、敏感性，指某检验项目对某种疾病具有鉴别、确认的能力，即所有病人中真阳性结病具有鉴别、确认的能力，即所有病人中真阳性结果的百分数。反映诊断试验正确识别患病者的能力果的百分数。反映诊断试验正确识别患病者的能力, , 该值愈大愈好。该值愈大愈好。实验诊断的评价实验诊断的评价-常见评价指标：常见评价指标： 灵敏度高的诊断试验，比较容易误诊。灵敏度高的诊断试验，比较容易误诊。（2 2）(specificity, Sp) 又称特异度，又称特异度，指某检验项目确认无某种指某检验项目确认无某种疾病的能力，即所有非病人中真阴性结果的疾病的能力，即所有非病人中真阴性结果的百分数百分数。

21、反映正确鉴别非患者的能力，该值。反映正确鉴别非患者的能力，该值愈大愈好。愈大愈好。 特异度 100% 100% 真阴性假阳性真阴性dbd 无病无病TP(a) FP(b)FN(c) TN(d) 特异度高的诊断试验，比较容易漏诊。特异度高的诊断试验，比较容易漏诊。（3 3）（accuracyaccuracy，ACAC） 是指所有试验个体中，是指所有试验个体中，诊断准确结果的百分数，诊断准确结果的百分数，即即诊断试验能准确划分患者和非患病者的百分比。诊断试验能准确划分患者和非患病者的百分比。反映诊断试验正确诊断患者与非患者的能力。反映诊断试验正确诊断患者与非患者的能力。 100% 100% 假阴性真

22、阴性假阳性真阳性真阴性真阳性dcbadaTP(a) FP(b) FN(c) TN(d) 特异性高的试验，得到阳性试验结果可以特异性高的试验，得到阳性试验结果可以肯定肯定有病有病，但阴性结果不能排除有病的可能。，但阴性结果不能排除有病的可能。 灵敏度高的试验，得到阳性试验结果不能肯定灵敏度高的试验，得到阳性试验结果不能肯定有病的诊断，但阴性结果可以有病的诊断，但阴性结果可以排除有病的诊断排除有病的诊断。应用：应用：诊断目的的实验选择：诊断目的的实验选择： 为了排除某种疾病的为了排除某种疾病的诊断选诊断选灵敏度高灵敏度高的实验。的实验。 为了确诊某种疾病的为了确诊某种疾病的诊断选诊断选特异性高特异

23、性高的实验。的实验。 灵敏度高灵敏度高特异性高特异性高（1）参考值）参考值 ：是指对抽样的个体进行某项目检：是指对抽样的个体进行某项目检 测所得的值；所有抽样组的值的测所得的值；所有抽样组的值的 平均值加减平均值加减2个标准差即为参考范围。个标准差即为参考范围。是批量的健康人调查，标本量大是批量的健康人调查，标本量大与年龄、性别、职业、地区分布、嗜好等相关与年龄、性别、职业、地区分布、嗜好等相关具有代表性的平均值范围，供病人结果对照参考具有代表性的平均值范围，供病人结果对照参考它可以来自有关文献它可以来自有关文献最好各实验室有自己的参考值最好各实验室有自己的参考值（三）（三） 参考值（参考范围

24、）与医学决定水参考值（参考范围）与医学决定水平平（2）医学决定水平）医学决定水平 所谓医学决定水平就是指该项结果如高于或低于所谓医学决定水平就是指该项结果如高于或低于某个值，有着直接的临床意义，如可在疾病诊断中某个值，有着直接的临床意义，如可在疾病诊断中起排除或确认的作用、用于疾病分级或分类、进行起排除或确认的作用、用于疾病分级或分类、进行预后估计等，针对这个值，医生应采取一定的临床预后估计等，针对这个值，医生应采取一定的临床措施。措施。医学决定水平有不同的限值，这个限值医学决定水平有不同的限值，这个限值可由医生根据理论与经验确定可由医生根据理论与经验确定 例：如例：如AFP(甲胎蛋白甲胎蛋白

25、)的正常参考范围的正常参考范围 是是40ng /ml即有肝损即有肝损 害，害，600ng /ml即有肝癌的诊断价即有肝癌的诊断价 值。值。 后二者即是不同的后二者即是不同的医学决定水平医学决定水平限值。限值。（3 3）危急值）危急值 是指某些检验结果出现异常超过一定是指某些检验结果出现异常超过一定界值时，可能危及患者生命，医生必界值时，可能危及患者生命，医生必须紧急处理。须紧急处理。 1）定性结果：）定性结果： 用阴性或阳性表示，用阴性或阳性表示， 而阳性表示时又可以写成而阳性表示时又可以写成 (+)(+)反映阳性的反映阳性的 强度。强度。（四）检验结果的报告方式与结果分析（四）检验结果的报告

26、方式与结果分析2）定量结果与计量单位）定量结果与计量单位 （ 国际计量单位国际计量单位SI 制制) （1）计数量：例如血细胞用）计数量：例如血细胞用6109/L表示。表示。 （2）浓度单位：）浓度单位： 凡是分子量明确的用凡是分子量明确的用mmol/L或或 umol/L表示；表示； 分子量不明确或混合物分子量不明确或混合物(血清蛋白血清蛋白)用用 g/L、mg/L、g/L、ng/L、pg/L 表示。表示。一般定量检验结果的报告方式一般定量检验结果的报告方式名称、缩写、结果、计量单位、参考值范围、提示“H或，L或”。（3）其他计量单位）其他计量单位 酶的活性用单位酶的活性用单位(U或或IU)表示

27、表示 部分免疫反应用滴度表示，部分免疫反应用滴度表示，1:512阳性阳性 用时间表示如用时间表示如PT 13秒秒 血沉血沉 10mm/h等等等等 计量单位用错或看错会造成医疗失误，计量单位用错或看错会造成医疗失误， 尤其与传统惯用单位换算更应注意。尤其与传统惯用单位换算更应注意。3)3)用文字表示：用文字表示：如细菌培养结果与药敏试验，如细菌培养结果与药敏试验，寄生虫的检出与形态，寄生虫的检出与形态，细胞形态的描述与异常细胞。细胞形态的描述与异常细胞。骨骨髓髓细细胞胞图图文文报报告告教教 学学 要要 求求 掌握：掌握：实验诊断学的概念；参考范围与医学决定实验诊断学的概念；参考范围与医学决定水平；常用诊断性实验的评价指标。水平；常用诊断性实验的评价指标。 熟悉：熟悉：实验诊断学的学习内容；实验诊断的临床实验诊断学的学习内容；实验诊断的临床应用和评价；检验标本的采集与影响因素；应用和评价；检验标本的采集与影响因素；了解：了解：实验诊断学的进展；医学检验的质量控制实验诊断学的进展；医学检验的质量控制和质量管理体系；检验结果的报告方法与结果分和质量管理体系；检验结果的报告方法与结果分析。析。