实验诊断学-临床常用免疫学检查-ppt课件.ppt
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- 实验 诊断 临床 常用 免疫学 检查 ppt 课件
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1、ppt课件1临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查v血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测v血清补体检测血清补体检测v细胞免疫的检测细胞免疫的检测v肿瘤标志物的检测肿瘤标志物的检测v自身抗体检测自身抗体检测v其他免疫检测其他免疫检测卢葵花二0一一ppt课件2概述:概述: 随着社会进步和医学科学发展,临床随着社会进步和医学科学发展,临床免疫学检查在实验诊断中的比重越来越大,免疫学检查在实验诊断中的比重越来越大,是迄今最特异、最灵敏的检测方法,已被广是迄今最特异、最灵敏的检测方法,已被广泛用于医学临床与实验研究的各个领域,成泛用于医学临床与实验研究的各个领域,成为医学检验中的一个重要组成部分。为医学检
2、验中的一个重要组成部分。ppt课件3概述:概述: 免疫学检验的检测对象是具有免疫活免疫学检验的检测对象是具有免疫活性的物质,抗原和抗体是免疫学检验的两个性的物质,抗原和抗体是免疫学检验的两个重要因素,也是免疫学反应的基本条件,利重要因素,也是免疫学反应的基本条件,利用其不同的反应类型,建立了各种不同的免用其不同的反应类型,建立了各种不同的免疫学技术。疫学技术。ppt课件4免疫学技术简介免疫学技术简介v方法:方法:散射比浊法、免疫电泳法、标记免疫法散射比浊法、免疫电泳法、标记免疫法ppt课件5免疫电泳法免疫电泳法v是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析法,
3、是免疫学基本技术之一。样品中的各析法,是免疫学基本技术之一。样品中的各种蛋白质成分可被分成肉眼不可见的若干区种蛋白质成分可被分成肉眼不可见的若干区带。当停止电泳后,在与电泳方向平行的抗带。当停止电泳后,在与电泳方向平行的抗体槽中注入抗体,进行扩散反应,当相应的体槽中注入抗体,进行扩散反应,当相应的抗原抗体结合后,形成肉眼可见的沉淀弧。抗原抗体结合后,形成肉眼可见的沉淀弧。常见用于分析许多疾病中出现的异常免疫球常见用于分析许多疾病中出现的异常免疫球蛋白及片段。蛋白及片段。ppt课件6标记免疫标记免疫v是免疫技术和标记技术相结合的一门检测技是免疫技术和标记技术相结合的一门检测技术。术。v 免疫技术
4、:利用免疫技术:利用Ag+AbAg+Ab=Ag=AgAbAb,以,以AgAg或或AbAb作作试剂,检测对应的试剂,检测对应的AbAb或或AgAg。v 标记技术:利用可提供探测信号的标记(如标记技术:利用可提供探测信号的标记(如放射性核素、酶、荧光素),标记放射性核素、酶、荧光素),标记AgAg或或AbAb,抗原抗,抗原抗体反应后探测标记信号,反映受检体反应后探测标记信号,反映受检AgAg或或AbAb行为。行为。v特点:高度特异性(免疫技术),高度敏感特点:高度特异性(免疫技术),高度敏感性(标记技术)。性(标记技术)。ppt课件7标记免疫标记免疫 按标记不同,标记免疫分析可分为:按标记不同,标
5、记免疫分析可分为:v放射免疫分析(放射免疫分析(RIARIA),用放射性核素作标记;),用放射性核素作标记;v酶免疫分析(酶免疫分析(EIAEIA),用酶作标记;),用酶作标记;v荧光免疫分析(荧光免疫分析(FIAFIA),用荧光物作标记;),用荧光物作标记;v发光免疫分析(发光免疫分析(LIALIA),发光物作标记。),发光物作标记。ppt课件8 本章就临床常用的免疫学检查本章就临床常用的免疫学检查, ,包括血包括血清免疫球蛋白检测、血清补体检测、细胞免清免疫球蛋白检测、血清补体检测、细胞免疫的检测、肿瘤标志物监测、自身抗体检测、疫的检测、肿瘤标志物监测、自身抗体检测、流式细胞术检测等作一简
6、介。流式细胞术检测等作一简介。ppt课件9 免疫球蛋白检测免疫球蛋白检测(immunoglobulin,Ig)v 免疫球蛋白免疫球蛋白是一组具有抗体活性或抗体是一组具有抗体活性或抗体样结构的球蛋白,由浆细胞所合成与分泌,样结构的球蛋白,由浆细胞所合成与分泌,广泛地存在于机体的血液、体液、外分泌液广泛地存在于机体的血液、体液、外分泌液和和 B B淋巴细胞膜的表面。可分为淋巴细胞膜的表面。可分为IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、IgDIgD和和IgEIgE五类。五类。ppt课件10分子量较大的一对肽链称为重链(Heavy chain,H链),不同的重链由于氨基酸残基的排列顺序、二硫键的数目
7、和位置、含糖的种类及数量不同,其抗原性也不同。根据H链抗原性的差异可将其分为5类:链、链、链、链和链,每个Ig分子的两条重链亦完全相同。L链共有两型,Kappa()与Lambda()。同一个免疫球蛋白单体分子上的L链型别完全相同。ppt课件11分类分类 百分比百分比 参考值参考值IgGIgG 70%-80% 7.0-16.6g/L 70%-80% 7.0-16.6g/LIgAIgA 10%-15% 0.7-3. 5g/L 10%-15% 0.7-3. 5g/LIgMIgM 5%-10% 0.5-2.6g/L 5%-10% 0.5-2.6g/LIgDIgD 0.02%-1% 0.6-2.0mg/
8、L 0.02%-1% 0.6-2.0mg/LIgEIgE 0.002% 0.1-0.9mg/L 0.002% 0.1-0.9mg/L正常人群各年龄段个体中血清IgG、IgA、IgM的含量有很大差异ppt课件12测定方法测定方法 v 血清中含量较高的血清中含量较高的 IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM多采多采用用单向免疫扩散法单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免疫、火箭免疫电泳法和免疫比浊法,而标本中含量极微的比浊法,而标本中含量极微的IgDIgD和和IgEIgE则采则采用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等进用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等进行定量测定。行定量测定。ppt课件13 IgG
9、 占总占总Ig的的70%80% 是血清中的主要抗体,主要由脾脏和是血清中的主要抗体,主要由脾脏和淋巴结合成,在机体的免疫防御中起重要作淋巴结合成,在机体的免疫防御中起重要作用,抗细菌、病毒和寄生虫等,还具抗毒素用,抗细菌、病毒和寄生虫等,还具抗毒素作用,为不完全抗体,分子量小作用,为不完全抗体,分子量小(150000),唯一能自由地通过胎盘。),唯一能自由地通过胎盘。半衰期约为半衰期约为23天,天,故临床上使用丙球故临床上使用丙球作治疗时以作治疗时以23周周注射一次注射一次ppt课件14IgA 约占血清约占血清总总Ig 10%15% 分为血清型与分泌型两种,具有抗细分为血清型与分泌型两种,具有
10、抗细菌、抗病毒、抗毒素作用,其中的分泌菌、抗病毒、抗毒素作用,其中的分泌型(型(SIgA)在局部与抗呼吸道、消化道在局部与抗呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变密切相关密切相关,是抗过敏的重要免疫屏障。是抗过敏的重要免疫屏障。 SIgA唾液平均为唾液平均为0.3g/L, 初乳平均为初乳平均为5.06g/L,粪粪便平均为便平均为1.3g/L。ppt课件15 IgM 约占血清总约占血清总IgIg的的5%10% 分子量最大(分子量最大(900000900000),由五个),由五个IgMIgM单体连接而成,故又称巨球蛋白。单体连接而成,故又称巨球蛋白。 脾
11、脏是它的主要合成部位,脾脏是它的主要合成部位,IgMIgM主要主要分布于血液中,防止发生菌血症方面起分布于血液中,防止发生菌血症方面起重要作用,半衰期重要作用,半衰期5 5天左右。天左右。 天然同族凝集素抗天然同族凝集素抗A抗抗B、冷凝集素及、冷凝集素及伤寒沙门菌的抗体伤寒沙门菌的抗体均属此类。均属此类。ppt课件16v IgMIgM在个体发育过程中,最先出现的球蛋在个体发育过程中,最先出现的球蛋白,当机体受抗原刺激后,也是最早出现的白,当机体受抗原刺激后,也是最早出现的抗体,在补体和吞噬细胞参与下,其杀菌、抗体,在补体和吞噬细胞参与下,其杀菌、溶菌、激活补体和促进吞噬等作用均显著强溶菌、激活
12、补体和促进吞噬等作用均显著强于于IgGIgG几百倍。在机体的早期免疫防御中占有几百倍。在机体的早期免疫防御中占有重要地位。重要地位。ppt课件17临床意义临床意义 : IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM在参与机体的特异性体在参与机体的特异性体液免疫反应中担负了重要的作用液免疫反应中担负了重要的作用, ,维持人体内维持人体内的生理性动态平衡的生理性动态平衡, ,对抗外来病原微生物的侵对抗外来病原微生物的侵袭有保护功能袭有保护功能, ,常规检测了解常规检测了解IgIg水平水平, ,可作为可作为反映人体体液免疫状况的指标反映人体体液免疫状况的指标. . ppt课件18v1 1、IgGIgG是主
13、要的抗感染抗体是主要的抗感染抗体 抗菌性抗体抗菌性抗体 抗毒素性抗体抗毒素性抗体 保护性抗体保护性抗体 抗病毒性抗体抗病毒性抗体 抗自身组织或细胞成分的抗体抗自身组织或细胞成分的抗体 损损伤性抗体伤性抗体ppt课件19v2 2、IgMIgM 是病原体感染或人工免疫后最先出是病原体感染或人工免疫后最先出现的抗体现的抗体, ,针对变性自身蛋白成份时针对变性自身蛋白成份时, ,对机体对机体有病理性损伤有病理性损伤. .ppt课件20v 在临床上许多疾病都可出现在临床上许多疾病都可出现IgIg水平的高水平的高度异常度异常, ,这些指标的变化有助于临床诊断和判这些指标的变化有助于临床诊断和判断预后断预后
14、, ,也可作为考核疗效的指标也可作为考核疗效的指标. .ppt课件21高高IgIg血症血症v 慢性细菌感染慢性细菌感染: :肺结核肺结核, ,麻风麻风, ,慢性支气管慢性支气管炎炎, ,感染早期感染早期IgMIgM显著升高,以后显著升高,以后IgGIgG升高,升高,IgAIgA也可升高。也可升高。v 自身免疫性疾病:自身免疫性疾病:SLESLE患者多有血清患者多有血清IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM的升高,血清的升高,血清IgIg升高的程度与疾病升高的程度与疾病的活动程度明显相关,的活动程度明显相关,RARA患者也有血清患者也有血清IgIg的的升高,但以升高,但以IgMIgM升高更为明
15、显。升高更为明显。ppt课件22v慢性肝脏疾病:慢性活动性肝炎,肝硬化,慢性肝脏疾病:慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌等患者血清肝癌等患者血清IgIg都有不同程度的升高,胆都有不同程度的升高,胆道阻塞时,血清道阻塞时,血清IgAIgA可升高。可升高。v浆细胞病变:淋巴瘤、浆细胞恶性病变,浆细胞病变:淋巴瘤、浆细胞恶性病变,MMMM,巨球蛋白血症等患者血清中可有异常升高巨球蛋白血症等患者血清中可有异常升高IgIg和轻链的片段,但以单克隆升高为主。和轻链的片段,但以单克隆升高为主。ppt课件23低低IgIg血症血症v 先天性低先天性低 IgIg血症:主要见于先天血症:主要见于先天性体液免疫缺陷或性体液
16、免疫缺陷或 体液免疫与细胞免体液免疫与细胞免疫的联合缺陷,疫的联合缺陷, IgGIgG1g/L1g/L, IgAIgA和和IgMIgM为为正常人的正常人的1%1%。 IgGIgG缺陷患者常易有反复发生的化脓性感染。缺陷患者常易有反复发生的化脓性感染。 IgAIgA缺乏者极易有反复呼吸道感染,缺乏者极易有反复呼吸道感染, IgMIgM缺乏者易患革兰氏阴性菌败血症。缺乏者易患革兰氏阴性菌败血症。ppt课件24v 获得性低获得性低IgIg血症:主要见于某些病毒感血症:主要见于某些病毒感染后对机体免疫功能的破坏,患者在感染前染后对机体免疫功能的破坏,患者在感染前体液免疫指标正常,以后血清体液免疫指标正
17、常,以后血清IgIg水平降低。水平降低。v 因疾病丢失的低因疾病丢失的低IgIg血症:最常见肾病综血症:最常见肾病综合征患者,终末期尿毒症患者,因大量蛋白合征患者,终末期尿毒症患者,因大量蛋白从尿中丢失。严重胃肠疾患因合成从尿中丢失。严重胃肠疾患因合成,代谢,代谢增加。增加。ppt课件25 3 3、IgEIgE增高:见于增高:见于IgEIgE型多发性骨髓瘤、型多发性骨髓瘤、重链病、肝脏病、结节病、重链病、肝脏病、结节病、RARA和各种过敏性和各种过敏性疾病。疾病。 IgEIgE降低:见于丙种球蛋白缺乏降低:见于丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂者和共济症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂者
18、和共济失调性毛细血管扩张症等。失调性毛细血管扩张症等。 v ppt课件26 检测到检测到 M M蛋白,提示单克隆免疫蛋白,提示单克隆免疫球蛋白增殖性疾病。见于多发性骨髓瘤、球蛋白增殖性疾病。见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、轻链病和半分巨球蛋白血症、重链病、轻链病和半分子病等。子病等。ppt课件27血清补体的检测血清补体的检测 补体补体(complement,Ccomplement,C)是存在于正常)是存在于正常人和动物血清中的一组与免疫有关的具有酶人和动物血清中的一组与免疫有关的具有酶活性的球蛋白,不稳定,加热活性的球蛋白,不稳定,加热56305630分钟即分钟即被灭活。补体成分有被灭
19、活。补体成分有C C1 1(C(C1q1q、C C1r1r C C1s1s)C)C2 2C C9 9等等9 9个成份个成份(11(11种球蛋白种球蛋白) ),各成分通常以非活,各成分通常以非活性状态存在于血清和体液中,需经激活才能性状态存在于血清和体液中,需经激活才能表现出生物学活性。表现出生物学活性。补体:是一组具有酶原活补体:是一组具有酶原活性的糖蛋白,由传统途径性的糖蛋白,由传统途径的的 9种成分种成分C 3 - C 9 、旁、旁路途径的路途径的3种成分及其衍生种成分及其衍生物组成,参与灭活病原体物组成,参与灭活病原体的免疫反应,也参与破坏的免疫反应,也参与破坏自身组织和自身细胞而造自身
20、组织和自身细胞而造成的免疫损伤。成的免疫损伤。 ppt课件28 正常人血清中的补体含量相对稳正常人血清中的补体含量相对稳定。只有在患病时补体含量才会发生变定。只有在患病时补体含量才会发生变化,因此测定补体的含量对于诊断自身化,因此测定补体的含量对于诊断自身免疫性疾病、免疫复合物引起的变态反免疫性疾病、免疫复合物引起的变态反应性疾病、补体缺陷病等都有一定的意应性疾病、补体缺陷病等都有一定的意义。义。ppt课件29总补体溶血活性检测总补体溶血活性检测 总补体溶血活性(总补体溶血活性(CH CH 5050)以溶血素)以溶血素(抗体)致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合(抗体)致敏的绵羊红细胞(抗原抗体复合
21、物)激活待测血清中的物)激活待测血清中的C C1 1 ,进而引起补体活,进而引起补体活化的连锁反映,在绵羊红细胞上形成多分子化的连锁反映,在绵羊红细胞上形成多分子的聚合物,影响其膜表面的结构与功能,最的聚合物,影响其膜表面的结构与功能,最终导致绵羊红细胞溶解。溶血程度与补体量终导致绵羊红细胞溶解。溶血程度与补体量呈正相关,为呈正相关,为S S形曲线。故一般以形曲线。故一般以50%50%溶血作溶血作为检测终点。为检测终点。ppt课件30【参考值参考值】试管法试管法 5050100kU/L 100kU/L 主要检测补体传统途径活化的活主要检测补体传统途径活化的活性程度。反映的是补体性程度。反映的是
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