与乳腺癌治疗、基因分型、预后相关的标记物1课件.ppt

1、与乳腺癌治疗、基因分型、预与乳腺癌治疗、基因分型、预后相关的标记物后相关的标记物 乳腺癌治疗乳腺癌治疗全身的综合治疗全身的综合治疗手术手术放疗放疗化疗化疗 HER-2HER-2、分子分型标记物、耐药基因类等、分子分型标记物、耐药基因类等内分泌治疗内分泌治疗 ERER、PRPR、HER-2HER-2基因靶向治疗基因靶向治疗 HER-2HER-2 预后评估预后评估 HER-2HER-2 P53 P53 Ki67 Ki67 分子分型（分子分型（ERER、PRPR、HER-2HER-2、CK5/6CK5/6、EGFREGFR、 Ki67 Ki67 ）乳腺癌肿瘤标记物的检测乳腺癌肿瘤标记物的检测 必做指

2、标：必做指标：ERER、PRPR、HER-2HER-2、CK5/6CK5/6、Ki-67 Ki-67 选作：选作：2121基因检测、基因检测、EGFREGFR 本院：本院： ERER、PRPR、PS2 PS2 （内分泌治疗相关指标）内分泌治疗相关指标） HER-2HER-2、TOP- TOP- （靶向治疗及化疗相关指标）靶向治疗及化疗相关指标） P53 P53 （癌基因）癌基因） CK5/6CK5/6、 P120 P120 （基因分型、组织学分类）基因分型、组织学分类） Ki-67 Ki-67 （增殖活性，基因分型）增殖活性，基因分型）一，一，HER-2HER-2一，一，HER-2HER-2H

3、ER-2HER-2基因基因 具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白 人类表皮生长因子受体家族的第人类表皮生长因子受体家族的第2 2个成员个成员 (human epidermal growth factor receptor, HER-2) (human epidermal growth factor receptor, HER-2) 原癌基因原癌基因 作用：细胞增殖、分化、移动和存活的重要调节因子。作用：细胞增殖、分化、移动和存活的重要调节因子。 扩增和过表达见于多种肿瘤组织扩增和过表达见于多种肿瘤组织: : 包括乳腺癌、卵巢癌、结包括乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、肺癌、胃癌、

4、前列腺癌和宫颈癌等肠癌、肺癌、胃癌、前列腺癌和宫颈癌等一，一，HER-2HER-2HER-2HER-2基因基因 与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关 随着其单抗（随着其单抗（ HerceptinHerceptin赫赛汀，曲妥珠单抗）赫赛汀，曲妥珠单抗）治疗临床试验的成功，对治疗临床试验的成功，对HER2 HER2 基因的检测至关重基因的检测至关重要，已成为病理工作的一部分。要，已成为病理工作的一部分。 HER-2 HER-2 乳腺癌完美的分子靶点乳腺癌完美的分子靶点一，一，HER-2HER-2乳腺癌乳腺癌HER-2HER-2基因检测的临床意义基因检测的临床意义1

5、 1，预后评估，预后评估 Her-2Her-2基因扩增者基因扩增者, ,患者无瘤生存期及总生存期短患者无瘤生存期及总生存期短 并与淋巴结转移、肿瘤高增殖活性等相关。并与淋巴结转移、肿瘤高增殖活性等相关。2 2，选择治疗方案，选择治疗方案靶向治疗靶向治疗: :单克隆抗体单克隆抗体化疗化疗 Her-2Her-2水平可预测化疗反应性，水平可预测化疗反应性，HER-2+/ER-HER-2+/ER-乳腺癌和基底样乳腺癌对含蒽环类的新辅助化疗有效率乳腺癌和基底样乳腺癌对含蒽环类的新辅助化疗有效率较较luminalumina l l乳腺癌高乳腺癌高. .每个乳腺癌患者均应进行每个乳腺癌患者均应进行Her-2

6、Her-2检测检测一，一，HER-2HER-2准确准确HER-2 HER-2 基因状态检测的必要性基因状态检测的必要性 临床确定否应用临床确定否应用HerceptinHerceptin的必要条件的必要条件 指导化疗药物的选择指导化疗药物的选择 判断患者的预后判断患者的预后 准确检测：病人得以相应治疗，准确检测：病人得以相应治疗，Her-2Her-2扩增患者可获得与扩增患者可获得与 Her-2 Her-2阴性患者相近的生存期阴性患者相近的生存期 假阳性：增添不必要的治疗，病人机体、经济双重损失假阳性：增添不必要的治疗，病人机体、经济双重损失 假阴性：病人失去潜在的有效治疗，接受不适宜的治疗，预假

7、阴性：病人失去潜在的有效治疗，接受不适宜的治疗，预后更差。后更差。一，一，HER-2 HER-2 HER-2HER-2检测方法检测方法HER-2HER-2受体蛋白水平检测受体蛋白水平检测- -免疫组织化学（免疫组织化学（IHC)IHC)HER-2HER-2基因扩增水平检测基因扩增水平检测- -原位杂交（原位杂交（ISHISH） 荧光荧光ISHISH（FISHFISH） 显色显色ISHISH（CISHCISH） 银增强银增强ISHISH（SISHSISH）一，一，HER-2 HER-2 检测对象检测对象 所有乳腺原发性浸润性癌所有乳腺原发性浸润性癌 复发灶复发灶 转移灶转移灶HER-2HER-2

8、检测标准的变化检测标准的变化乳腺癌乳腺癌HER-2HER-2检测指南检测指南20142014版版-中华病理学杂志中华病理学杂志20142014，vol.43.No4vol.43.No4IHCIHC：3+: 3+: 10% 10% 强而完整的膜着色强而完整的膜着色, , 2+: 10 2+: 10 强而完整的膜着色强而完整的膜着色, , 10% 10% 不完整和不完整和/ /或弱或中等强度的膜着色或弱或中等强度的膜着色1+1+： 10% 10% 不完整、微弱膜着色不完整、微弱膜着色0 0： 无着色，或无着色，或1010不完整、微弱或难以察觉的膜着色不完整、微弱或难以察觉的膜着色只评定浸润癌只评定

9、浸润癌0 0、1+1+为阴性，为阴性，2+2+为不确定为不确定; 3+; 3+为阳性为阳性2+2+需进一步需进一步ISHISH基因扩增状态测定基因扩增状态测定二，二，ER/PRER/PR二，二，ER/PR ER/PR ERER、PRPR与内分泌治疗与内分泌治疗 雌激素受体（雌激素受体（Estrogen Estrogen Recetor,ERRecetor,ER) ) 孕激素受体（孕激素受体（Progesterone Progesterone Recetor,PRRecetor,PR) ) 约约2/32/3的乳腺癌患者为的乳腺癌患者为HRHR阳性阳性(ER(ER和和/ /或或PRPR阳性）。阳性

10、）。 对于对于HRHR阳性乳腺癌患者，术后给予他莫昔芬（三苯氧胺阳性乳腺癌患者，术后给予他莫昔芬（三苯氧胺 ）治）治疗，使其复发率降低疗，使其复发率降低47%,47%,死亡率降低死亡率降低26%26%，且疗效不依赖患者，且疗效不依赖患者年龄、绝经状态、淋巴结是否有转移以及既往是否曾接受化疗年龄、绝经状态、淋巴结是否有转移以及既往是否曾接受化疗等因素。等因素。 ERER阴性的浸润性乳腺癌患者基本不能从内分泌激素治疗中获益阴性的浸润性乳腺癌患者基本不能从内分泌激素治疗中获益 因此，对乳腺癌患者进行因此，对乳腺癌患者进行HRHR检测是乳腺癌诊断的必要程序检测是乳腺癌诊断的必要程序, ,缺缺少将是一个

11、不完整的病理诊断。少将是一个不完整的病理诊断。 二，二，ER/PRER/PR ERER、PRPR与治疗、预后因素的关系与治疗、预后因素的关系 ERER表达水平与下列因素呈正相关表达水平与下列因素呈正相关 总生存率总生存率 无病生存率无病生存率 无复发生存率无复发生存率 5 5年生存率年生存率 至治疗失败时间至治疗失败时间 内分泌治疗反应及复发时间。内分泌治疗反应及复发时间。 PRPR表达水平与下列因素呈正相关表达水平与下列因素呈正相关 总生存率总生存率 至治疗失败时间至治疗失败时间 内分泌治疗反应及复发时间内分泌治疗反应及复发时间 PRPR状态可能提供独立于状态可能提供独立于ERER外的附加预

12、测价值外的附加预测价值. . ERER、PRPR与内分泌治疗反应率与内分泌治疗反应率 ER ER PRPR反应率反应率 % % + + + +60 - 7060 - 70 1010 + +4040 + +4646ASCO/CAPASCO/CAP乳腺癌激素受体乳腺癌激素受体IHCIHC检测指南检测指南 ASCO/CAPASCO/CAP（美国临床肿瘤学会与美国病理医师学会）组成的（美国临床肿瘤学会与美国病理医师学会）组成的国际专家组，通过系统的文献回顾和评估后发现，目前在世国际专家组，通过系统的文献回顾和评估后发现，目前在世界范围内可能有近界范围内可能有近20%20%的乳腺癌的乳腺癌ER/PRER

13、/PR的免疫组化检测结果是的免疫组化检测结果是错误的（假阴性和假阳性）。错误的（假阴性和假阳性）。 原因是多方面的原因是多方面的 ASCO/CAPASCO/CAP乳腺癌激素受体乳腺癌激素受体IHCIHC检测指南检测指南于于20102010年应运而生年应运而生 旨在提高旨在提高IHCIHC检测乳腺癌检测乳腺癌ERER和和PRPR表达状态的准确性，以行针对表达状态的准确性，以行针对性的内分泌治疗。性的内分泌治疗。二，二，ER/PR ER/PR ER/PRER/PR检测方法检测方法 目前确定目前确定IHCIHC为为ER/PRER/PR 状态的最佳检测方法状态的最佳检测方法 资料分析表明，相对于资料分

14、析表明，相对于 RT-PCRRT-PCR、RNARNA分析方分析方法，采用法，采用IHCIHC检测检测ER/PRER/PR 与辅助内分泌治疗疗与辅助内分泌治疗疗效之间具有明显相关性。效之间具有明显相关性。二，二，ER/PR ER/PR ER/PRER/PR标准化标准化组织处理标准化组织处理标准化: :其中固定液为其中固定液为10%10%中性缓冲福尔马林，中性缓冲福尔马林， 肿瘤离体到固定肿瘤离体到固定1h1h之内之内 固定时间应为固定时间应为6 67272小时小时 对照设立：对照设立： 阳性内对照：标本中的正常乳腺导管上皮细胞，阳性内对照：标本中的正常乳腺导管上皮细胞， 呈现强度不一的着色。呈

15、现强度不一的着色。 取材时应将肿瘤及瘤旁正常组织同时取材并及时固定，使取材时应将肿瘤及瘤旁正常组织同时取材并及时固定，使IHCIHC染色具有平染色具有平 行处理的内在行处理的内在 正常阳性对照。正常阳性对照。 阳性外对照：采用明确阴性、中等阳性、强阳性的细胞株或子宫内膜组织阳性外对照：采用明确阴性、中等阳性、强阳性的细胞株或子宫内膜组织 阴性内对照：组织中的间质细胞、肌上皮细胞。阴性内对照：组织中的间质细胞、肌上皮细胞。 检测方法应具有准确性和可重复性；检测方法应具有准确性和可重复性；出现非常规染色结果时，应换蜡块重新检测或送第三方检测。出现非常规染色结果时，应换蜡块重新检测或送第三方检测。结

16、果判读标准化结果判读标准化 二，二，ER/PR ER/PR 检测人群检测人群 指南建议指南建议所有新诊断的浸润性乳腺癌患者；所有新诊断的浸润性乳腺癌患者；对于同时多发性癌，应至少对其中一个病灶进行检测，以最大者为佳；对于同时多发性癌，应至少对其中一个病灶进行检测，以最大者为佳；复发病灶应行再检测复发病灶应行再检测转移灶应行再检测转移灶应行再检测 原发癌与转移癌的原发癌与转移癌的HRHR状态可能不一致，不一致者约占状态可能不一致，不一致者约占20%20%25%25%。 基于内分泌治疗的重要性，应该给予转移患者再次检测的机会。基于内分泌治疗的重要性，应该给予转移患者再次检测的机会。原发灶检测也有假

17、阴性的可能。原发灶检测也有假阴性的可能。 导管内癌导管内癌由于最新研究提示采用内分泌治疗可使由于最新研究提示采用内分泌治疗可使DCISDCIS发展至浸润癌的危险降低发展至浸润癌的危险降低40%40%50%50%，专家组认可对这类患者进行，专家组认可对这类患者进行ERER状态评估的价值，但不作正状态评估的价值，但不作正式推荐，是否检测由患者和医师决定。式推荐，是否检测由患者和医师决定。指南也提出，对指南也提出，对ERER阳性阳性DCISDCIS患者可考虑推荐他莫昔芬治疗。患者可考虑推荐他莫昔芬治疗。二，二，ER/PR ER/PR 阳性界值阳性界值 大规模研究表明，大规模研究表明，HRHR水平在肿

18、瘤细胞低水平表达（水平在肿瘤细胞低水平表达（1%1%）时即）时即与临床疗效显著相关。与临床疗效显著相关。 由于他莫昔芬和其他内分泌治疗药物在降低死亡率方面具有由于他莫昔芬和其他内分泌治疗药物在降低死亡率方面具有确切作用且相对低毒的特点，专家组认为，在低水平确切作用且相对低毒的特点，专家组认为，在低水平ERER状态状态下即可考虑采用内分泌治疗，因此将下即可考虑采用内分泌治疗，因此将1%1%阳性细胞作为阳性阳性细胞作为阳性界值（界值（1%1%为阴性界值）。为阴性界值）。 新界值的启用将会使内分泌治疗的应用比例轻度上升。新界值的启用将会使内分泌治疗的应用比例轻度上升。二，二，ER/PR ER/PR

19、结果判读结果判读指南推荐检测的最佳计算方法如下：指南推荐检测的最佳计算方法如下： 阳性阳性: :大于大于1%1%的肿瘤细胞核呈免疫阳性则的肿瘤细胞核呈免疫阳性则ERER或或PRPR为（为（+ +）。）。 阴性：在能证明样本为阴性：在能证明样本为ERER或或PRPR阳性的情况下（可见阳性对照结阳性的情况下（可见阳性对照结果）果）, ,少于少于1%1%的肿瘤细胞核免疫阳性则的肿瘤细胞核免疫阳性则ERER或或PRPR为阴性；为阴性； 无法判读：肿瘤组织无着色，外对照组织没有达到预期结果无法判读：肿瘤组织无着色，外对照组织没有达到预期结果或内对照组织没有任何着色，则或内对照组织没有任何着色，则ERER

20、或或PRPR检测结果无法解释。检测结果无法解释。 二，二，ER/PR ER/PR 结果报告结果报告 IHCIHC检测结果必须报告的内容包括检测结果必须报告的内容包括 染色阳性肿瘤细胞的百分比染色阳性肿瘤细胞的百分比 报告染色强度（弱、中、强）报告染色强度（弱、中、强） 结果应为阳性、阴性、不可判读。结果应为阳性、阴性、不可判读。三， KI-67KI-67三， KI-67KI-67 增殖相关基因增殖相关基因 Ki67 Ki67 是一种非组蛋白核抗原是一种非组蛋白核抗原, , 基因定位于人染色体基因定位于人染色体10q5, 10q5, 细胞除细胞除G0G0期外期外, , 其它各期（其它各期（G1G

21、1、S S、G2G2、M M）均有表达。）均有表达。 在增殖细胞中其表达始于在增殖细胞中其表达始于G1 G1 期期, , 在在S S期、期、G2G2期逐渐增强期逐渐增强, , 到到M M期达到高峰期达到高峰, , 之后迅速降解。之后迅速降解。 其阳性表达高低与细胞增殖活性密切相关其阳性表达高低与细胞增殖活性密切相关, , 故检测故检测Ki67 Ki67 表达可反映出肿瘤细胞的增殖状态表达可反映出肿瘤细胞的增殖状态, , 被视为评估肿瘤细胞被视为评估肿瘤细胞恶性增殖的可靠标志。恶性增殖的可靠标志。三， KI-67KI-67 预后预后 高高Ki-67Ki-67预后差预后差 新辅助化疗前后效果判断指

22、标新辅助化疗前后效果判断指标 基因分型的指标基因分型的指标 判断判断 核着色为阳性（不管着色强度）核着色为阳性（不管着色强度）评估整张切片的平均阳性百分比。包括评估整张切片的平均阳性百分比。包括hot spot.hot spot. （20112011年乳腺癌国际工作组乳腺癌年乳腺癌国际工作组乳腺癌Ki-67Ki-67评估推荐指南）评估推荐指南）评估整张切片，避开评估整张切片，避开hot spothot spot。 仅评估仅评估hot spothot spot 计数细胞数，报道不一。计数细胞数，报道不一。500500个浸润癌癌细胞（个浸润癌癌细胞（ 20112011年乳腺癌国际工作组乳腺癌年乳腺

23、癌国际工作组乳腺癌Ki-Ki-6767评估推荐指南）评估推荐指南）四，乳腺癌基因分型相关标记物四，乳腺癌基因分型相关标记物乳腺癌基因分型乳腺癌基因分型 乳腺癌是一类高度异质性的肿瘤乳腺癌是一类高度异质性的肿瘤, , 不同病人在以下方面存在明显的个体差异：不同病人在以下方面存在明显的个体差异： 分子免疫表型分子免疫表型 病理组织形态病理组织形态 生物学行为生物学行为 治疗的反应治疗的反应 这种差异被认为是由乳腺癌关键基因的异常表达所致这种差异被认为是由乳腺癌关键基因的异常表达所致 此为基因分型的分子生物学基础。此为基因分型的分子生物学基础。 基因分型基于基因分型基于IHCIHC及基因检测及基因检

24、测 基于基于IHCIHC基因分型的常用标记物有基因分型的常用标记物有ERER、PRPR、HER2HER2、CK5/6CK5/6、Ki67Ki67。乳腺癌基因乳腺癌基因分型分型luminal Aluminal A型型luminal Bluminal B正常乳腺正常乳腺样型样型HER-2HER-2过表过表达型达型基底细胞基底细胞样型样型ERER + + + + - - - - - -PRPR + + + + - - - - - -Her-2Her-2 - - + + - - + + - -CK5/6CK5/6 - - - - - - - - + +EGFREGFR - - - - - - - -

25、+ +乳腺癌基因乳腺癌基因分型分型 PerouPerou 和和SorlieSorlie 2000-2003 2000-2003年年分子亚型分子亚型主要免疫表型主要免疫表型临床特征临床特征luminal Aluminal A型型管腔管腔A A型型ER+, HER2-ER+, HER2-腺上皮型细胞角蛋白腺上皮型细胞角蛋白CK8/18CK8/18均阳性均阳性ERER高表达，高表达，PR+PR+最常见，低分级，低最常见，低分级，低增殖。复发风险低，增殖。复发风险低，但对化疗不敏感，预但对化疗不敏感，预后较好。后较好。luminal Bluminal B管腔管腔B B型型ER+, HER2+ER+,

26、HER2+ERER中低表达；低表达中低表达；低表达CK8, CK18CK8, CK18高表达高表达Ki-67Ki-67对化疗敏感性易变对化疗敏感性易变正常乳腺样型正常乳腺样型ER-,HER2-,ER-,HER2-,CK5/6-,EGFR-,CK14-CK5/6-,EGFR-,CK14-、CK17-CK17-预后与预后与luminal A luminal A 型型接近，预后较好接近，预后较好 HER-2HER-2过表达型过表达型ER-ER-、HER2+HER2+（指（指FISHFISH阳性或阳性或IHC3+)IHC3+)PR-PR-、p53+p53+恶性程度高恶性程度高, ,多为晚多为晚期期,

27、,对曲妥珠单抗及对曲妥珠单抗及化疗敏感，预后差。化疗敏感，预后差。基底细胞样型基底细胞样型ER-,HER2-, CK5/6+ER-,HER2-, CK5/6+CK14+CK14+，CK17+,CK17+,EGFR+,EGFR+, p53+ p53+ 恶性程度高，内分泌恶性程度高，内分泌及曲妥珠单抗无效及曲妥珠单抗无效, ,化疗敏感，预后最差化疗敏感，预后最差20112011年年St St GallenGallen基于基于IHCIHC的乳腺癌分子分型的乳腺癌分子分型分子亚型分子亚型定义定义临床治疗临床治疗与基因表达与基因表达谱的一致率谱的一致率管腔管腔A A型型ERER和和/ /或或PRPR（+

28、 +）HER2HER2（- -）Ki6714%Ki67 良性增生性病变良性增生性病变, , 乳腺癌中的乳腺癌中的EGFREGFR阳性表达率随病理分级的增高而增加阳性表达率随病理分级的增高而增加, , 乳腺癌组织乳腺癌组织EGFREGFR表达率与表达率与ERER阴性、阴性、PRPR阴阴性相关性相关, , 说明说明EGFR EGFR 过度表达的乳腺癌其发生、发展可能不依赖女性性激素过度表达的乳腺癌其发生、发展可能不依赖女性性激素, , 内分泌治疗疗效差、预后不佳。内分泌治疗疗效差、预后不佳。 EGFREGFR的表达与的表达与Her-2Her-2表达无明显相关性，提示表达无明显相关性，提示EGFR

29、EGFR 可能是可能是一个独立于一个独立于Her-2Her-2的因素。的因素。 Her-1Her-1过度表达是三阴性乳腺癌特征之一过度表达是三阴性乳腺癌特征之一. .五，五，HER-1HER-1靶向治疗靶向治疗LapatinibLapatinib（拉帕替尼）（拉帕替尼）针对针对HER-1/HER-2HER-1/HER-2酪氨酸酪氨酸激酶抑制剂激酶抑制剂, ,能有效抑制能有效抑制HER-1/HER-2HER-1/HER-2酪氨酪氨酸激酶活性。酸激酶活性。继曲妥珠单抗继曲妥珠单抗( (赫赛汀赫赛汀) )后的第后的第2 2个乳腺癌分子靶向新药。个乳腺癌分子靶向新药。吉非替尼吉非替尼( (Gefiti

30、nibGefitinib) )：EGFR EGFR 酪氨酸激酶抑制剂酪氨酸激酶抑制剂, , 有明显的体内外抗肿有明显的体内外抗肿瘤作用。瘤作用。厄洛替尼：厄洛替尼：EGFR EGFR 酪氨酸激酶抑制剂酪氨酸激酶抑制剂, , 单药治疗乳腺癌或联合用药靶向单药治疗乳腺癌或联合用药靶向治疗时疗效欠佳，对炎性乳腺癌有较。治疗时疗效欠佳，对炎性乳腺癌有较。西妥昔单抗：一种单克隆抗体西妥昔单抗：一种单克隆抗体, , 特异性作用于特异性作用于EGFR EGFR 胞外区胞外区, , 研究证实研究证实西妥昔单抗联合化疗或放疗时具有协同作用。西妥昔单抗联合化疗或放疗时具有协同作用。主要参考文献主要参考文献WHO

31、classification of tumour of the Breast临床与实验病理学杂志 2012 ；28(9) ,949 2012版WHO乳腺肿瘤新分类解读 中华医学会病理学分会第18次学术会议乳腺及女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学 诊断病理学杂志 2008，VOL15 NO4,257乳腺疾病病理诊断研修班资料汇编 2012，乳腺肿瘤病理学中华病理学杂志 2012，Vol 41,NO5，1-4.中华病理学杂志 2009，Vol 38,NO12，836-863.中华病理学杂志 2009，35（10）631-633中华病理学杂志 2006，Vol 35,NO1，4.诊断病理学杂志2008,Vol. 15, No. 5 诊断病理学杂志2008 ,Vol . 15 ,No. 1诊断病理学杂志2006；13 （1）：8-12诊断病理学杂志2005； 12 （1）21中国肿瘤临床与康复 2007,Vol 14,No.6临床与实验病理学杂志 2005 ，21( 1)J Pathol, 2002, 198 (4) : 458-467.J Pathol,2001,195(4): 415-421.Mod Patho,l 2002, 15 ( 2): 116- 24.Mod Patho,l 2002, 15 ( 12): 1318- 25.