临床微生物标本质量控制课件.ppt
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1、临床微生物标本的质量控制临床微生物标本的质量控制 目录目录o一 意义意义o二二 生物安全生物安全o三三 标本类型分类标本类型分类o四四 采集运送原则采集运送原则o五五- -十四十四 标本类型各论标本类型各论一一 意义意义分析前质量控制对检验结果的重要性规范、指导微生物标本的采集、转运,保证微生物标本分析前质量,提高临床符合率。标本的正确采集转运是整个检测过程中至关重要的第一环节。二二 生物安全生物安全任何标本中都可能存在潜在的致病性微生物。标本采集首先必须考虑生物安全,必须保护工作人员和其他人员免于暴露病原体。从执行标本采集开始所有步骤都必须采取防护措施。(特别注意TB等高传染性病原体)所有标
2、本容器都必须是防漏、防水、密闭的。不得使用带针头的容器送检,以防扎伤。三三 标本类型分类标本类型分类血液 骨髓鼻咽部标本中段尿脓液及伤口标本脑脊液生殖道标本穿刺液眼耳部分泌物标本下呼吸道标本粪便标本四四 采集及运送原则采集及运送原则怀疑感染存在时进行细菌培养标本的采集。尽量选择在抗菌药物应用之前,对已用药物的患者,因病情不允许停药,应在下一次用药前采集 。采集有临床意义的标本(如病灶内脓性分泌物),正确的解剖学位置,合适的时间。选用无菌、密闭、防水容器,严格执行无菌操作手续,防止污染。有正常菌群寄生的部位应尽量避免污染。标本容器进行正确标识:病人姓名、性别、床号、住院号、唯一性条形码等。可能分
3、离到对温度敏感致病菌的标本需要保温立即送检。关键点:关键点:n采血指征n消毒灭菌n采血时间n采血次数n接种血量n导管相关血流感染CRBSI采集指征采集指征采血流程操作图采血流程操作图1 皮肤消毒2 培养瓶消毒3 标注采血量4 准备采血针5 静脉穿刺6 负压采血皮肤消毒程序皮肤消毒程序 75%乙醇擦拭静脉穿刺部位,等待30秒1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点向外画圈消毒,直径1.5-2cm.用75%乙醇消毒 60秒(脱碘),待酒精挥发干燥后采血.注意:对于碘过敏的患者,只能使用75乙醇消毒60秒,待酒精挥发干燥后采血.采血时间采血时间:应于发热或寒战高峰到来之前采血发热或寒战高
4、峰到来之前采血,已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次药物前采血。对于已用抗生素的患者,应使用能中和吸附抗生素的培养瓶。体温体温细菌浓度时间 (分钟)血培养采血时机血培养采血时机30600oCLSICLSI建议常规的血培养建议常规的血培养每次采集每次采集2-32-3套标本套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶o一个静脉穿刺点只能采集1套血培养,采集第2套血培养应该选择第2个静脉穿刺点o即寒战升温之间采血20ml,分装两个瓶内,各分配10ml,当采血量不足20ml,应先注入需氧瓶这样首先满足需氧瓶的采血量可以更好地分离出真菌、绿脓杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌Cockrill2004年报告:16
5、3位病人,血培养仪采血套数及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)检出率65%80%96%送检血培养次数的重要性送检血培养次数的重要性-表皮葡萄球菌的临床检测表皮葡萄球菌的临床检测 采集采集1 1套无法判断套无法判断是病原菌还是污染菌。是病原菌还是污染菌。2 23 3套血培养,有助于污染的判断。套血培养,有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333标本采集间隔时间标本采集间隔时间o同时或短时间内采集23套血培养,因为体内巨噬细胞吞噬系统会在1530min内清除掉进入人体内的细菌。o可疑急性心内膜炎急性心内膜炎患者要立即取血作血
6、培养,30分钟内完成3套血培养的采集,采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。o可疑的亚急性心内膜炎亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套,连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。采血量采血量n采血量是影响灵敏度最关键因素采血量是影响灵敏度最关键因素n成人一份标本2个培养瓶(需氧厌氧),每瓶10ml,共20ml;要求至少采两份标本,即40mln儿童一般只需采集需氧瓶,n保证采集血量1总血量下, 一般为13mln优先保证需氧瓶,临床90以上的感染 为需氧菌或兼性需氧菌感染 采血量与肉汤比例应适当 1:51:101:51:10阳
7、性率最高阳性率最高 BD BACTEC 每个瓶都清晰显示最佳采血量利用瓶身刻度准确采血采血量采血量厌氧瓶送检的意义厌氧瓶送检的意义o根据文献,厌氧瓶除了检出厌氧菌外,对肠杆菌,葡萄球菌和苛养菌的检出有优势。o资料显示1, 16%的链球菌和17%肠杆科细菌仅厌氧瓶报阳。oKhanna2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培养结果分析显示: 640份血培养阳性,阳性率为9% 需氧和厌氧瓶同时阳性为55% 仅需氧瓶阳性为26% 仅厌氧瓶阳性为19%1.Bartlett JG, Dick J. The controversy regarding routine anaerobic blood cult
8、ures. Am J Med , 2000, 108: 5052506.2. Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 2172219.成人及儿童患者分离菌株成人及儿童患者分离菌株在需氧和厌氧培养瓶的生长情况对比在需氧和厌氧培养瓶的生长情况对比J Microbiol Immunol Infect. 2007;40:445-449o儿童厌氧菌感染极少 ,建议只采用儿童瓶o厌氧培养只考虑针对特
9、殊的高危儿童o专门为儿童设计,采血量为1-3 mlo添加特殊促进细菌生长因子,采用树脂专利技术o低SPS浓度可提高儿童特征性病原菌(如耐瑟氏菌) 的检出率树脂颗粒能中和抗生素儿童血培养采血量儿童血培养采血量o儿童的采血量不能超过其总血容量的1%,o可按年龄或体重分别采足够的血量 1月: 0.5ml1月36月:1.0ml36月: 4.0ml对于新生儿败血症,最低的采血量不确定,通常推荐0.75-1.0ml阳性率:足量采血 5.2% (34/655) VS.不足量采血2.1% (14/648)Behrman:Nelson textbook of Pediatrics,17th ed.,2004树脂
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