临床生化自动化分析仪1课件.ppt
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1、1教学目标和要求教学目标和要求掌握掌握自动生化分析仪的分析方法类型及其自动生化分析仪的分析方法类型及其 特点,连续监测法的理论特点,连续监测法的理论K值,必选的分析参值,必选的分析参数,双波长测定的作用,双试剂的优点,分析数,双波长测定的作用,双试剂的优点,分析仪与手工法比较的优点和缺点。仪与手工法比较的优点和缺点。熟悉熟悉分立式自动生化分析仪的基本结构,备分立式自动生化分析仪的基本结构,备选的分析参数,测定过程的自动监测,校准方选的分析参数,测定过程的自动监测,校准方式和校准要求,影响分析仪分析速度的因素和式和校准要求,影响分析仪分析速度的因素和分析仪性能指标。分析仪性能指标。了解了解某些分
2、析参数的特殊意义,分析仪的工某些分析参数的特殊意义,分析仪的工作过程和操作方法,干片式分析仪的结构和分作过程和操作方法,干片式分析仪的结构和分析原理,常用分析仪的分析性能。析原理,常用分析仪的分析性能。2 自动生化分析仪自动生化分析仪由电脑控制,将生化由电脑控制,将生化分析中的取样分析中的取样( (sampling)sampling)、加试剂、混匀、加试剂、混匀、保温反应、检测保温反应、检测( (detect)detect)、结果计算、可结果计算、可靠性判断、显示和打印、以及清洗靠性判断、显示和打印、以及清洗( (cleaning)cleaning)等步骤组合在一起自动进行操等步骤组合在一起自
3、动进行操作的分析仪器。作的分析仪器。 3 自动生化分析技术的应用自动生化分析技术的应用提高了临床生化检验质量和速度;提高了临床生化检验质量和速度;减轻检验人员的劳动强度;减轻检验人员的劳动强度;节约样品和试剂;节约样品和试剂;增加检验项目;增加检验项目;提高检测精密度,减少实验误差;提高检测精密度,减少实验误差;并且有利于临床检验标准化的实现并且有利于临床检验标准化的实现。 4自动生化分析仪按其工作方式不同分为自动生化分析仪按其工作方式不同分为n连续流动式连续流动式( (continuouscontinuousstreaming movementstreaming movementstyle)
4、style)或管道式:已很少用或管道式:已很少用n离心式离心式( (centrifugation style) centrifugation style) :已很少用:已很少用n分立式分立式( (discretediscretestyle)style):应用最广泛应用最广泛n干片式干片式( (drying style) drying style) :急诊多用急诊多用5第一节第一节 分立式自动生化分析仪的结构分立式自动生化分析仪的结构 完全完全模仿手工操作模仿手工操作方式设计,各部分结方式设计,各部分结构对应手工操作的每个步骤包括取样、加试剂、构对应手工操作的每个步骤包括取样、加试剂、混匀、孵育
5、、检测、结果计算、器材清洗等混匀、孵育、检测、结果计算、器材清洗等 。6一、基本结构 (一)样品盘或样品架(一)样品盘或样品架 样品盘样品盘(specimen discspecimen disc):放置待测样品:放置待测样品的转盘,可放置一定数量的的转盘,可放置一定数量的样品杯(样品杯(specimen cupspecimen cup)或不同规格的或不同规格的采血试管采血试管,通过样品盘的转动来控制通过样品盘的转动来控制不同样品的进样。不同样品的进样。7 样品架样品架(specimen stockspecimen stock):):每个样品每个样品架可放数只样品杯或采血试管(多为架可放数只样品
6、杯或采血试管(多为5 5只或只或1010只)。样品架的移动通过只)。样品架的移动通过样品传送带样品传送带来进行。来进行。样品架样品架 上上 的的 条形码条形码(barcodebarcode)或编或编码孔可识别样品码孔可识别样品架架号号及样品及样品位置号位置号。 8样品架的优点样品架的优点随着样品架移动及样品的被检测,可不断随着样品架移动及样品的被检测,可不断追加已放置样品杯或采血试管的样品架;追加已放置样品杯或采血试管的样品架;通过样品架的通过样品架的移动能将样品传移动能将样品传送到另一个送到另一个分析分析模块模块(analysisanalysisdie-blockdie-block)甚至甚至
7、另一台分析仪上另一台分析仪上再进行分析。再进行分析。 9(二)试剂室和试剂瓶(二)试剂室和试剂瓶 转盘式试剂室转盘式试剂室(reagent chamberreagent chamber):):内装内装放置试剂瓶的转盘,一般可放置放置试剂瓶的转盘,一般可放置2020种以上具有一种以上具有一定形状的塑料试剂瓶,大型分析仪可放置定形状的塑料试剂瓶,大型分析仪可放置30304545种试剂瓶。种试剂瓶。 试剂瓶容量一试剂瓶容量一般为般为1010100100mlml。通过试剂转盘的通过试剂转盘的转动来选用不同转动来选用不同试剂。试剂。 10 试剂架式试剂室试剂架式试剂室:可放置容量为:可放置容量为2502
8、50mlml500ml500ml的任意形状的试剂瓶,试剂瓶不能转动,的任意形状的试剂瓶,试剂瓶不能转动,但每个试剂瓶内引出一条但每个试剂瓶内引出一条试剂管路试剂管路及其喷嘴,及其喷嘴,即每种试剂均有专用的加试剂装置,因而不同即每种试剂均有专用的加试剂装置,因而不同试剂间无试剂间无交叉污染交叉污染。 但试剂管路较长使试剂存在一定的死体积,但试剂管路较长使试剂存在一定的死体积,因而适宜用于使用频率高、消耗试剂量大的检因而适宜用于使用频率高、消耗试剂量大的检测项目。测项目。 11 大型分析仪同时备有大型分析仪同时备有第一试剂室第一试剂室和和第二试第二试剂室剂室,即具备对同一检测项目添加两次试剂的,即
9、具备对同一检测项目添加两次试剂的功能,个别分析仪还具有加入第三试剂的功能。功能,个别分析仪还具有加入第三试剂的功能。 对有条形码装置的仪器可将带条形码的试对有条形码装置的仪器可将带条形码的试剂瓶放在试剂室转盘剂瓶放在试剂室转盘上的任意位置,仪上的任意位置,仪器能自动识别试剂器能自动识别试剂的种类、批号和有的种类、批号和有效期。试剂室均具效期。试剂室均具有有冷藏装置冷藏装置,可将,可将试剂保存在试剂保存在4 41010。 12(三)反应杯和反应盘(三)反应杯和反应盘 反应杯反应杯(reaction cupreaction cup)是样品与试剂进行化学反应是样品与试剂进行化学反应的场所,同时用作比
10、色杯。的场所,同时用作比色杯。由透光特性好的硬塑料或石由透光特性好的硬塑料或石英玻璃制成。比色杯光径不英玻璃制成。比色杯光径不同分析仪有同分析仪有0.50.50.70.7厘米不厘米不等,大多数分析仪在计算时等,大多数分析仪在计算时将其折算为将其折算为1 1厘米光径。厘米光径。 13 反应盘反应盘(reaction discreaction disc):):100100只只或更多的反应杯围成一圈组成。在测定或更多的反应杯围成一圈组成。在测定过程中反应盘作恒速的圆周运动,在静过程中反应盘作恒速的圆周运动,在静止时向反应杯中加入样品、试剂或进行止时向反应杯中加入样品、试剂或进行搅拌混匀,当反应盘恒速
11、圆周运动经过搅拌混匀,当反应盘恒速圆周运动经过检测窗口的比色杯可进行吸光度检测。检测窗口的比色杯可进行吸光度检测。14(四)取样和加试剂装置(四)取样和加试剂装置 1 1取样装置取样装置(sampling sampling assemblyassembly):): 由取样针、取样臂、取样管路、取样注射由取样针、取样臂、取样管路、取样注射器和阀门组成,能定量器和阀门组成,能定量吸取样品并加入到反吸取样品并加入到反应杯。应杯。 不同分析仪的取样不同分析仪的取样容量有不同的范围,容量有不同的范围,一般为一般为2 23535ll,步步进进0.10.1微升不等。微升不等。15 取样针设有电子取样针设有电
12、子液面感应器液面感应器,取样针,取样针于样品上方下降,一于样品上方下降,一旦接触到样品液面即旦接触到样品液面即停止下降而开始吸样。停止下降而开始吸样。适用于不同的采血试适用于不同的采血试管上机测定管上机测定16 多数加样装置设有多数加样装置设有防撞功能防撞功能,遇到阻,遇到阻碍时取样针立即停止运动并报警。某些取碍时取样针立即停止运动并报警。某些取样针还设有样针还设有阻塞报警功能阻塞报警功能,当取样针被样,当取样针被样品中的凝块、纤维蛋白等物质阻塞时,机品中的凝块、纤维蛋白等物质阻塞时,机器会自动报警、冲洗取样针,并跳过当前器会自动报警、冲洗取样针,并跳过当前样品,进行下一个样品的取样检测样品,
13、进行下一个样品的取样检测。 17取样针防交叉污染(取样针防交叉污染(crossing contamination)措施措施 绝大多数采用绝大多数采用水洗方式水洗方式(又有瀑布式和(又有瀑布式和涌泉式之分),在吸取另一个样品前对接触涌泉式之分),在吸取另一个样品前对接触样品的样品针内外壁进行冲洗;样品的样品针内外壁进行冲洗; 也有采用也有采用化学惰性液化学惰性液(chemical chemical inertiainertiafluidfluid)膜的方式来隔绝样品与取膜的方式来隔绝样品与取样针内外壁之间的接触。样针内外壁之间的接触。 182 2加试剂装置加试剂装置 加试剂装置用于定量吸取试剂加
14、入反应加试剂装置用于定量吸取试剂加入反应杯,可加入试剂容量一般为杯,可加入试剂容量一般为2020350350ll。步步进进1 15 5微升不等,取样精度在微升不等,取样精度在1 1微升左右。微升左右。 注射器方式注射器方式:组成部件与取样装置类似,:组成部件与取样装置类似,其液面感应系统能检测并提示其液面感应系统能检测并提示试剂剩余量试剂剩余量。 灌注式灌注式:具有许多条试剂管路及其喷嘴,:具有许多条试剂管路及其喷嘴,每种试剂单独使用一条试剂管路和喷嘴,不每种试剂单独使用一条试剂管路和喷嘴,不存在各试剂间的交叉污染。存在各试剂间的交叉污染。 19 大型自动生化仪多具有两组加试剂装置,大型自动生
15、化仪多具有两组加试剂装置,可分别从两个试剂室吸取同一个检测项目的可分别从两个试剂室吸取同一个检测项目的第第一试剂一试剂和和第二试剂第二试剂,大多数分析仪所有检测项,大多数分析仪所有检测项目加入第二试剂的时间点统一固定为目加入第二试剂的时间点统一固定为1 1个或个或2 2个个点,也有分析仪有点,也有分析仪有3 3个加入时间点可供选择。个加入时间点可供选择。 20(五)(五)混匀与混匀与搅拌装置搅拌装置 反应杯里的样品与试剂通过反应杯里的样品与试剂通过搅拌棒搅拌棒搅拌而搅拌而充分混匀,搅拌棒的形状为扁平棒状或扁平螺充分混匀,搅拌棒的形状为扁平棒状或扁平螺旋状,表面的疏水材料能防止反应液被搅拌棒旋状
16、,表面的疏水材料能防止反应液被搅拌棒所携带。其工作方式大多为所携带。其工作方式大多为旋转式搅拌旋转式搅拌,也有,也有震动式搅拌震动式搅拌方式。也设置了防止搅拌棒在不同方式。也设置了防止搅拌棒在不同反应液之间携带交叉污染的清洗措施。反应液之间携带交叉污染的清洗措施。 21(六)温控和定时系统(六)温控和定时系统 温控系统温控系统使反应杯浸浴在恒温环境:使反应杯浸浴在恒温环境: 恒温恒温循环水浴方式循环水浴方式:温度传递速度快,保:温度传递速度快,保养要求较高。养要求较高。 恒温恒温空气浴方式空气浴方式:温度传递速度不如恒温:温度传递速度不如恒温水浴循环方式,保养简单。水浴循环方式,保养简单。 温
17、度控制器能使循环水或循环空气的温度温度控制器能使循环水或循环空气的温度控制在规定温度控制在规定温度0.10.1。规定温度可有。规定温度可有3737和和3030两种选择,一般固定在两种选择,一般固定在3737。22 定时系统定时系统: 不同分析仪对检测吸光度的不同分析仪对检测吸光度的间隔时间间隔时间有不同的规定,有不同的规定,反应时间反应时间应该设定为此应该设定为此间隔时间的倍数。总反应时间一般限制间隔时间的倍数。总反应时间一般限制在在8.5-108.5-10minmin内,个别分析仪可以设定为内,个别分析仪可以设定为1515或或2222minmin等。等。 23(七)光路和检测系统(七)光路和
18、检测系统 自动生化分析仪以自动生化分析仪以紫外可见分光光度紫外可见分光光度法法为其中心和主要的检测手段,与一般分为其中心和主要的检测手段,与一般分光光度计一样,其光路和检测系统由光光度计一样,其光路和检测系统由光源光源、单色器单色器和和检测器检测器组成。组成。 241 1光源(光源(light source) 一般为一般为卤素钨丝灯卤素钨丝灯(halogenhalogentungsten filamenttungsten filamentlamplamp),),也有采用也有采用长寿命的长寿命的氙灯氙灯(xe lampxe lamp),),要求在要求在340340800800nmnm波长范围内能
19、发射出稳定且较平坦波长范围内能发射出稳定且较平坦的光能。的光能。 252 2单色器(单色器(monochromato) 干涉滤光片干涉滤光片(interference filterinterference filter)分分光系统:常带有光系统:常带有340340、380380、405405、500500、550550、600600、660660nmnm等几种滤光片,各滤光片固定在等几种滤光片,各滤光片固定在转盘上,以转盘上,以转盘旋转的方式来选择波长转盘旋转的方式来选择波长。这。这种分光系统在半自动和小型自动分析仪中常种分光系统在半自动和小型自动分析仪中常用,且不能同一时刻进行多波长检测。用
20、,且不能同一时刻进行多波长检测。 光栅光栅(rasterraster)分光系统:常在分光系统:常在340340(或(或293293)800800nmnm范围内选择范围内选择10101313种固定的单种固定的单色光。色光。 26前分光和后分光方式前分光和后分光方式 光栅分光有前分光和后分光两种方式,光栅分光有前分光和后分光两种方式,光源首先经过单色器分光,然后透射到比光源首先经过单色器分光,然后透射到比色溶液的方式为色溶液的方式为前分光前分光。目前以后分光方。目前以后分光方式为多见,其优点是单色器中没有转动部式为多见,其优点是单色器中没有转动部分,双波长在同一时刻检测,因而提高了分,双波长在同一
21、时刻检测,因而提高了检测的精度和速度。检测的精度和速度。27 光源先透过比色杯中的反应液再照射到光源先透过比色杯中的反应液再照射到光栅上,经色散后所有固定单色光同时通过光栅上,经色散后所有固定单色光同时通过各自的光纤传输到对应的检测器,微处理器各自的光纤传输到对应的检测器,微处理器按该分析项目的分析参数,按该分析项目的分析参数,后分光方式后分光方式 选择其中选择其中一个或两个波一个或两个波长(双波长方长(双波长方式)的吸光度式)的吸光度值,用于分析值,用于分析结果的计算。结果的计算。283 3检测器(检测器(detector) 由光敏二极管及放大电路组成,可按设由光敏二极管及放大电路组成,可按
22、设定的间隔时间连续测定各反应杯的吸光度定的间隔时间连续测定各反应杯的吸光度值。值。 29(八)数据处理系统(八)数据处理系统 具有多种数据处理功能。具有多种数据处理功能。 n 计算测定结果计算测定结果 n 判断结果准确性判断结果准确性 n 保存各种数据保存各种数据 n 自我诊断功能自我诊断功能 30(九)清洗系统(九)清洗系统 反应杯反应杯清洗装置清洗装置:一个反应杯内的反应和:一个反应杯内的反应和检测结束后,该反应杯就被冲洗系统及时冲洗。检测结束后,该反应杯就被冲洗系统及时冲洗。 清洗过程:由废液针吸取反应杯内废液,清洗过程:由废液针吸取反应杯内废液,加入加入清洗剂清洗剂(detergent
23、detergent)冲洗并抽干后,再经冲洗并抽干后,再经数次去离子水冲洗及抽干,然后做数次去离子水冲洗及抽干,然后做杯空白杯空白的吸的吸光度检查,若通过检查则此反应杯可继续循环光度检查,若通过检查则此反应杯可继续循环使用;更高级的仪器带有风干技术。如果不能使用;更高级的仪器带有风干技术。如果不能通过,分析仪将提示该反应杯异常,并跳过此通过,分析仪将提示该反应杯异常,并跳过此反应杯使用下一个反应杯,或提示更换反应杯。反应杯使用下一个反应杯,或提示更换反应杯。 31样品针、试剂针和搅拌棒清洗样品针、试剂针和搅拌棒清洗 一般在用于下一个样品、试剂或反应杯一般在用于下一个样品、试剂或反应杯前即清洗一次
24、,此时多数为去离子水冲洗,前即清洗一次,此时多数为去离子水冲洗,在一批检测完成后,则自动进行清洗剂清洗。在一批检测完成后,则自动进行清洗剂清洗。 清洗剂可配有清洗剂可配有1 1至至3 3种可供选择,除一种种可供选择,除一种常规清洗剂外,其它常规清洗剂外,其它1 1至至2 2种可按设定对试剂种可按设定对试剂针、样品针或反应杯进行补充清洗。针、样品针或反应杯进行补充清洗。 32二、组合式自动分析仪二、组合式自动分析仪 (一)(一)组合式自动生化分析仪组合式自动生化分析仪 将相同或不同的两台或两台以上的分析部分,即将相同或不同的两台或两台以上的分析部分,即分析模块分析模块进行组合连接,采用样品架方式
25、使样品通过进行组合连接,采用样品架方式使样品通过传输线在不同分析模块间进行传递并检测。各分析模传输线在不同分析模块间进行传递并检测。各分析模块所分析项目的组合提高了分析效率,这些分析模块块所分析项目的组合提高了分析效率,这些分析模块除了基于紫外除了基于紫外- -可见光谱分析原理的分析模块外,还可见光谱分析原理的分析模块外,还有基于有基于离子选择电极离子选择电极的电解质分析模块,甚至还可组的电解质分析模块,甚至还可组合建立在合建立在免疫发光免疫发光分析原理的免疫分析模块。分析原理的免疫分析模块。 33组合式分析仪组合式分析仪34(二)实验室自动化系统(二)实验室自动化系统 (laboratory
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