金水宝-在肾科的应用)课件.ppt

1、 传统三大补益中药传统三大补益中药人参、鹿茸、人参、鹿茸、 “” 简称虫草、冬虫草，有简称虫草、冬虫草，有“百药之百药之王王”的美称。的美称。人人 参参冬虫夏草冬虫夏草n冬冬虫夏草虫夏草：真菌门的子囊菌纲子囊菌纲、麦角菌科麦角菌科寄生在鳞翅目蝙蝠蛾昆虫或其幼虫的子座与虫体尸体的复合体n生物分类学：生物分类学： 植物界植物界 真菌门真菌门 子囊菌亚纲子囊菌亚纲 肉座目肉座目 麦角菌科麦角菌科 虫草属虫草属。高寒草甸是其家高寒草甸是其家n原产于西藏、青海、四川的天然冬虫夏草。原产于西藏、青海、四川的天然冬虫夏草。n蛹虫草及其制成品。蛹虫草及其制成品。n从新鲜天然虫草机体上提取菌种，利用人工从新鲜天

2、然虫草机体上提取菌种，利用人工发酵方式得到的发酵方式得到的虫草菌丝体及其制成品。虫草菌丝体及其制成品。天然虫草的资源危机天然虫草的资源危机:n生长环境特殊生长环境特殊n专一寄生幼虫专一寄生幼虫n生态环境破坏生态环境破坏n价格极其昂贵价格极其昂贵1950年代，美国、日本、英国学者开始探索人工年代，美国、日本、英国学者开始探索人工培养冬虫夏草的研究，未取得突破。培养冬虫夏草的研究，未取得突破。 1970年代开始，国内学者开展同类研究，历经年代开始，国内学者开展同类研究，历经10余年取得突破性成果。余年取得突破性成果。 中国医学科学院药物研究所采用人工固体培养中国医学科学院药物研究所采用人工固体培养

3、 基，成功培育出基，成功培育出蝙蝠蛾拟青霉蝙蝠蛾拟青霉Cs-4Cs-4菌株菌株。 青海省畜牧局培育出青海省畜牧局培育出蝙蝠蛾被毛孢蝙蝠蛾被毛孢Q80菌株菌株 采用低温生物发酵工艺生产采用低温生物发酵工艺生产冬虫夏草菌丝体冬虫夏草菌丝体 1987年国家首次批准人工年国家首次批准人工发酵发酵冬虫夏草菌丝体冬虫夏草菌丝体 及其制剂（及其制剂（）为国家一类新）为国家一类新中中药。这药。这 也是第一个批准用于临床的人工也是第一个批准用于临床的人工发酵发酵虫草。虫草。 2000年，第一个人工虫草年，第一个人工虫草Cs-4Cs-4 （ ） 制剂被国家药典收载（制剂被国家药典收载（2000版一部版一部499页

4、）。页）。 2004年年Cs-4Cs-4（）通过美国）通过美国FDA认证。认证。金水宝生产工艺流程示意图金水宝生产工艺流程示意图 真空干燥 n核苷类核苷类虫草素、腺苷、虫草素、腺苷、尿苷尿苷n虫草酸虫草酸/ /D-甘露醇甘露醇n虫草多糖虫草多糖n麦角甾醇麦角甾醇n氨基酸类氨基酸类n无机元素无机元素/维生素类维生素类n人工虫草人工虫草与天然冬虫夏草同根同源。与天然冬虫夏草同根同源。n人工虫草人工虫草与天然虫草在功能和有效成分方面与天然虫草在功能和有效成分方面相似，而且相似，而且人工虫草人工虫草部分药物活性成份含量部分药物活性成份含量甚至超过天然虫草。甚至超过天然虫草。n有严格的质量控制标准和稳定

5、的产品质量。有严格的质量控制标准和稳定的产品质量。n生产成本相对低、产量高、价格低廉。生产成本相对低、产量高、价格低廉。n可以替代天然虫草，保护自然资源。可以替代天然虫草，保护自然资源。人工虫草的应用价值人工虫草的应用价值成分成分天然虫草天然虫草金水宝金水宝氨基酸氨基酸1717种以上种以上,15.5%,15.5%1919种以上种以上,21.7%,21.7%虫草酸虫草酸青海青海7%7%左右左右10%10%左右左右麦角甾醇麦角甾醇少量少量少量少量腺嘌呤核苷腺嘌呤核苷0.04%0.04%0.14%0.14%脲嘧啶核苷脲嘧啶核苷0.058%0.058%0.41%0.41%维生素维生素少量少量维生素维生

6、素B1B1、B2B2、E E的含量分别的含量分别为为2.97mg/kg2.97mg/kg、38mg/kg38mg/kg、4.61mg/kg4.61mg/kg微量元素微量元素K K、CaCa、MgMg、FeFe、NaNa、MnMn、AlAl、CuCu、ZnZn、P P、SiSi、SeSe等等K K、CaCa、MgMg、FeFe、NaNa、MnMn、AlAl、CuCu、ZnZn、P P、S S、Si,SeSi,Se等，其等，其中中Zn38ppm,Se0.21ppmZn38ppm,Se0.21ppm腺腺 苷：苷： 具有舒张血管、降低血压、对心律有双向调具有舒张血管、降低血压、对心律有双向调节作用节作

7、用; ;刺激甾体激素生成刺激甾体激素生成; ; 镇静、抗惊厥镇静、抗惊厥等多种生理活性。等多种生理活性。虫草酸：虫草酸： 虫草酸具有促进机体新陈代谢，清除氧自由虫草酸具有促进机体新陈代谢，清除氧自由基，抗过氧化损伤作用；并能显著减低颅压基，抗过氧化损伤作用；并能显著减低颅压核心单体成分药理作用核心单体成分药理作用清除自由基，抗过氧化损伤作用；清除自由基，抗过氧化损伤作用；核心单体成分药理作用核心单体成分药理作用核心单体成分药理作用核心单体成分药理作用泌尿系统作用泌尿系统作用 药理药效学概述药理药效学概述v减轻对肾小球滤过屏障的损伤，减轻蛋白减轻对肾小球滤过屏障的损伤，减轻蛋白尿，防止肾小球高滤

8、过尿，防止肾小球高滤过v调节机体免疫功能调节机体免疫功能v抗氧化应激的作用抗氧化应激的作用v抗细胞调亡作用抗细胞调亡作用v抗肾小球和肾间质纤维化作用抗肾小球和肾间质纤维化作用冬虫夏草防治氨糖苷肾毒性损伤的机制冬虫夏草防治氨糖苷肾毒性损伤的机制急性肾损伤模型鼠急性肾损伤模型鼠肾小管肾小管 TGF- C-mycCs肾小管肾小管上皮上皮细胞细胞增殖增殖肾小管肾小管上皮细上皮细胞修复胞修复 黎磊石、郑丰等，黎磊石、郑丰等，南京军区南京总医院南京军区南京总医院 全军肾病中心全军肾病中心nSD大鼠大鼠n庆大霉素庆大霉素160mg/kg.dn冬虫夏草水溶液灌胃冬虫夏草水溶液灌胃n测测NAG酶酶 Na-K-A

9、TP酶酶SOD MDAn测测c-myc基因基因EGFmRNAn虫草治疗后庆大损伤鼠尿虫草治疗后庆大损伤鼠尿酶酶. 肌酐水平下降肌酐水平下降n肾小球滤过和保钠功能增肾小球滤过和保钠功能增强强n肾氧耗和菊粉清除率肾氧耗和菊粉清除率. 重重吸收功能好转吸收功能好转n鼠鼠c-myc基因表达增强基因表达增强EGFmRNA表达下降减轻表达下降减轻 冬虫夏草能拮抗氨基糖苷所致肾脏氧耗减低，改冬虫夏草能拮抗氨基糖苷所致肾脏氧耗减低，改善肾小管细胞功能，诱导肾小管善肾小管细胞功能，诱导肾小管c-myc及肾组织及肾组织EGF表达表达,促进肾小管修复。促进肾小管修复。 冬虫夏草防治环孢霉素冬虫夏草防治环孢霉素A A

10、肾毒性研究肾毒性研究 戴春笋、刘志红等戴春笋、刘志红等，南京军区南京总医院，南京军区南京总医院 解放军肾脏病总医院解放军肾脏病总医院nCsA皮下注射，皮下注射，SD鼠服鼠服用冬虫夏草混悬液用冬虫夏草混悬液n测测SD鼠尿鼠尿NAG酶、酶、Lys酶、血酶、血BUN 及及Scr水平水平n用用PCR方法测细胞内方法测细胞内 HGF 和和EGF mRNA含量含量n冬虫夏草治疗后，冬虫夏草治疗后，CsA皮下注射鼠尿皮下注射鼠尿NAG酶酶Lys酶水平下降；血酶水平下降；血BUN 及及Scr水平降低水平降低n冬虫夏草治疗后肾小管冬虫夏草治疗后肾小管上皮细胞出现增生上皮细胞出现增生 冬虫夏草可拮抗环孢霉素肾毒性

11、作用冬虫夏草可拮抗环孢霉素肾毒性作用冬虫夏草对体外培养肾小管细胞冬虫夏草对体外培养肾小管细胞TGF-TGF-及及c-mycc-myc基因表达的影响基因表达的影响 黎磊石黎磊石 郑丰郑丰 等，等，南京军区南京总医院南京军区南京总医院 解放军肾脏病总医院解放军肾脏病总医院n肾小管上皮细胞培养肾小管上皮细胞培养n肾小管上皮细胞肾小管上皮细胞RNA提取提取n肾小管上皮细胞肾小管上皮细胞c-myc基因基因 及及TGF-基因斑基因斑点杂交点杂交n冬虫夏草组冬虫夏草组c-myc基基因因 持续高表达持续高表达n冬虫夏草对冬虫夏草对TGF- 基基因表达有明显增强作因表达有明显增强作用用 冬虫夏草可能通过诱导冬虫

12、夏草可能通过诱导c-myc基因和基因和TGF-表达表达而促进肾小管上皮细胞生长而促进肾小管上皮细胞生长虫草对糖尿病及其并发症的临床价值虫草对糖尿病及其并发症的临床价值n目标目标 辅助调节糖脂代谢，防治糖尿病并发症辅助调节糖脂代谢，防治糖尿病并发症 抗肾纤维化，有效延缓糖尿病肾病进程抗肾纤维化，有效延缓糖尿病肾病进程n效果效果近期近期改善改善糖尿病所致糖尿病所致ED ，减少夜尿。，减少夜尿。 中期中期辅助调节血糖、降低血脂，提高免疫，辅助调节血糖、降低血脂，提高免疫， 预预 防并发症；防并发症；远期远期抗肾小球纤维化，降低微量蛋白尿，有效抗肾小球纤维化，降低微量蛋白尿，有效 延缓糖尿病肾病进程；

13、延缓糖尿病肾病进程；糖尿病肾病糖尿病肾病（DNDN）肾纤维化的机制研究进展）肾纤维化的机制研究进展n肾小球硬化是指肾小球内细胞外基质肾小球硬化是指肾小球内细胞外基质(ECM)的异的异常聚集所致常聚集所致;n目前认为转化生长因子目前认为转化生长因子-1 (TGF-1)、结缔组织、结缔组织生长因子（生长因子（CTGF）是肾小球硬化形成过程中的）是肾小球硬化形成过程中的重要因子；重要因子；n目前公认目前公认TGF-1是致肾间质纤维化的重要的独是致肾间质纤维化的重要的独立因素。立因素。n原癌基因（原癌基因（C-myc ）高表达参与肾小球肥大、）高表达参与肾小球肥大、 ECM增多和肾纤维化。增多和肾纤维

14、化。 周巧玲周巧玲 、胡阳青等，、胡阳青等，中南大学湘雅医院肾内科中南大学湘雅医院肾内科正常大鼠（正常大鼠（n=15)STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型（诱导糖尿病肾病大鼠模型（n=30未干预组（未干预组（n=15）金水宝干预组（金水宝干预组（n=15)2、4、6周每组处死周每组处死5只只尿尿 液：液： 24h尿蛋白定量尿蛋白定量 血血 液：液： 肌酐、血糖、肌酐、血糖、TGF-、 Col-IV 病病 理：理： 光镜（光镜（HE、Masson)免疫组化：免疫组化：TGF-、c-myc虫草对糖尿病肾病鼠虫草对糖尿病肾病鼠c-mycc-myc和和CTGFCTGF表达的影响表达的影响研究目的和意义研究目的

15、和意义v研究糖尿病肾病模型鼠肾组织研究糖尿病肾病模型鼠肾组织TGF-与与 c-myc的表达状况及二者之间的关系的表达状况及二者之间的关系v探讨探讨c-myc基因在基因在DN发病中的作用和意义发病中的作用和意义v研究冬虫夏草对研究冬虫夏草对TGF-与与c-myc基因表达基因表达的影响，为的影响，为DN早期防治提供理论依据。早期防治提供理论依据。研究结果研究结果图图6 金水宝对糖尿病肾病结缔组织金水宝对糖尿病肾病结缔组织生长因子（生长因子（CTGF）的影响）的影响注：注：* * *P0.01,P0.01,* *P0.05P0.05，与，与D D组相组相比；连续治疗比；连续治疗6 6周组，金水宝组优

16、周组，金水宝组优于于DNDN模型组。模型组。图图5 金水宝对糖尿病肾病肾组织转金水宝对糖尿病肾病肾组织转 化生长因子（化生长因子（TGF-1）的影响）的影响 注：注：* * *P0.01,P0.01,* *P0.05,P0.05,与与D D组相比；组相比；连续治疗连续治疗6 6周，金水宝组优于周，金水宝组优于DNDN模模型组。型组。Col Col 表达情况表达情况4周周6周周2周周模型组模型组正常组正常组治疗治疗组组结结 论论v冬虫夏草能冬虫夏草能抑制抑制TGF-1产生产生v冬虫夏草能冬虫夏草能直接下调直接下调c-myc表达表达 冬虫夏草对糖尿病肾病具有一定肾保护冬虫夏草对糖尿病肾病具有一定肾

17、保护作用及抗肾小球纤维化的作用作用及抗肾小球纤维化的作用 通过影响通过影响TGF-1产生和使产生和使CTGF的表达下调的表达下调而实现而实现.双向调节免疫功能双向调节免疫功能抗脂质过氧化损伤抗脂质过氧化损伤保护保护Na+-K+-ATP酶活性酶活性稳定溶酶体膜，稳定溶酶体膜，减轻溶酶体损伤减轻溶酶体损伤改善物质代谢的影响改善物质代谢的影响抗肾间质纤维化抗肾间质纤维化减轻肾脏的病理改变，减轻肾脏的病理改变，促进肾小管上皮的修复促进肾小管上皮的修复金水宝治疗肾病的主要功效金水宝治疗肾病的主要功效保护肾功能保护肾功能 降低肌酐降低肌酐 减少尿蛋白减少尿蛋白 减轻肾毒性减轻肾毒性 抗肾纤维化抗肾纤维化明

18、显降低血肌酐、尿素氮水平明显降低血肌酐、尿素氮水平, ,延缓慢性肾衰延缓慢性肾衰 210220230240250260治疗前治疗2月后血肌酐（mol/L)常规治疗+金水宝胶囊（n=164) 常规治疗(n=48)图图1 金水宝对慢性肾衰金水宝对慢性肾衰血尿素氮血尿素氮的影响的影响图图2 金水宝对慢性肾衰金水宝对慢性肾衰血肌酐血肌酐的影响的影响显著减少尿蛋白，有效保护肾功能显著减少尿蛋白，有效保护肾功能图图2 2 金水宝胶囊对慢性肾小球肾炎尿蛋白的影响金水宝胶囊对慢性肾小球肾炎尿蛋白的影响0 01 12 23 34 45 5治疗前41224周蛋白尿（g/24h)优质蛋白+苯那普利+金水宝胶囊（n=

19、26)优质蛋白+苯那普利（n=20)*#*#P0.05减轻药物肾毒性促进肾功能恢复减轻药物肾毒性促进肾功能恢复图图4 金水宝对老年氨基甙类肾毒性尿金水宝对老年氨基甙类肾毒性尿NAG酶的影酶的影响响 协同抗排斥，减少并发症协同抗排斥，减少并发症图图5 5 金水宝金水宝对肾移植后环孢素对肾移植后环孢素A A 肝、肾及血液毒性肝、肾及血液毒性的影响的影响 自自1982-19891982-1989年长达年长达7 7年年的时间里，经过中的时间里，经过中国医学科学院药物研究所，中国预防医学中国医学科学院药物研究所，中国预防医学中心卫生研究所等机构在全国范围内大规模的心卫生研究所等机构在全国范围内大规模的药

20、理、毒理试验（包括特殊毒理）和药理、毒理试验（包括特殊毒理）和50185018例例临床论证的基础之上，结果证实临床论证的基础之上，结果证实金水宝无毒金水宝无毒无害，无致畸、无致突变作用。无害，无致畸、无致突变作用。产品信息产品信息 用法用量用法用量 口服，一次口服，一次3粒，一日三次；用粒，一日三次；用 于慢性肾功能不全者，一次于慢性肾功能不全者，一次6 粒，一日粒，一日3次次规规 格格 每粒含虫草菌粉每粒含虫草菌粉0.33g.贮贮 藏藏 密封。密封。批准文号批准文号 国药准字国药准字Z-10890003号。号。使用期限使用期限 三年。三年。 金水宝指纹图谱分析比较金水宝指纹图谱分析比较腺甘腺

21、甘尿嘧啶尿嘧啶虫草素虫草素尿嘧啶尿嘧啶腺苷腺苷虫草素虫草素金水宝胶囊的比较优势金水宝胶囊的比较优势金水宝胶囊金水宝胶囊同类产品同类产品菌种菌种蝙蝠蛾拟青霉蝙蝠蛾拟青霉CS-4CS-4中国被毛孢中国被毛孢Q80Q80发酵发酵工艺工艺采用东北大豆为培养基，采用东北大豆为培养基，重金属含量可控重金属含量可控，豆香味豆香味，口感好口感好 采用鱼粉为发酵原料，采用鱼粉为发酵原料，重金属含量不易控制重金属含量不易控制，鱼腥味鱼腥味，刺激重，易产生呕吐，刺激重，易产生呕吐常温发酵，生长快、生产周期短常温发酵，生长快、生产周期短、不易污染、不易污染 低温发酵，生长慢、生产周期长、低温发酵，生长慢、生产周期长、

22、易污染易污染质量质量标准标准人工虫草国家（药典）标准的起草者，采用人工虫草国家（药典）标准的起草者，采用指纹图谱分析技术控制产品核心单体成分含量指纹图谱分析技术控制产品核心单体成分含量早期采用氨基酸谱控制产品质量，早期采用氨基酸谱控制产品质量，20002000年后年后跟随采用药典标准跟随采用药典标准 重金属含量（铅重金属含量（铅2ppm2ppm）低于国家标准，符合美）低于国家标准，符合美国国FDAFDA标准标准重金属含量不易控制重金属含量不易控制目前有效成分含量最高的人工虫草制剂目前有效成分含量最高的人工虫草制剂有效成分含量低于金水宝有效成分含量低于金水宝 成分更接近天然虫草成分更接近天然虫草

23、成分与天然虫草差距较大成分与天然虫草差距较大性价比性价比依从性依从性 0.330.33* *63s/63s/盒盒, ,含虫草菌粉含虫草菌粉21g21g0.200.20* *60s/60s/盒盒, ,含虫草菌粉含虫草菌粉12g12g 44.10 44.10元元/ /盒盒 44.8044.80元元/ /盒盒一次一次3-63-6粒，一日三次。粒，一日三次。 一次一次5-155-15粒，一日三次。粒，一日三次。 效价比高效价比高:6.30:6.30元元/ /日日, , 176.4176.4元元/ /月月 效价比低效价比低:11.2:11.2元元/ /日日, , 313.6313.6元元/ /月月服用量较小，口感好，患者依从性较好服用量较小，口感好，患者依从性较好服用量较大，腥味重，患者依从性较差服用量较大，腥味重，患者依从性较差