DNA的生物合成.08-2课件.ppt

1、1授课班级 针推七中医03中医七C中医04学生人数34603750授课课时6664授课时间0514-0521 0601-06050513-05200601-0603授课教师唐炳华联系方式2时间七C070513陈欢苏林0518秦春艳3中心法则，半保留复制的概念和生物学意义，逆转录的概念和生物学意义参与DNA复制的主要物质及其作用，半保留复制的基本过程，DNA损伤的类型和修复方式，逆转录的基本过程端粒酶的意义，DNA重组的概念、类型、意义重点：DNA复制4概述第一节DNA复制的基本特征第二节原核生物DNA的复制第三节真核生物DNA的复制第四节DNA重组第五节DNA的损伤和修复第六节DNA的逆转录合

2、成5 基因 编码序列 非编码序列 染色体组 基因组 中心法则6基因：遗传物质的功能单位，主要存在于染色体上，其编码的功能产物为肽链或RNAz几乎所有生物的遗传物质都是DNA，只有RNA病毒的遗传物质是RNA。它们的一些特定碱基序列构成表达遗传信息的功能单位，称为基因。基因通过指导RNA和蛋白质的合成来表达其携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现7z通常是指基因中直接编码成熟RNA碱基序列的DNA碱基序列8z基因组中除编码序列以外的所有序列9z一个体细胞所含的一套完整的染色单体称为染色体组10z一个染色体组所含的全部DNA称为一个基因组13z 基因组代表一个细胞或生物体的A. 部分遗传信息B

3、. 非转录序列C. 可转录序列D. 全部遗传信息E. 以上都不是15z复制是以亲代DNA为模板合成子代DNA、从而将遗传信息准确地传递到子代DNA分子的过程一、半保留复制二、从复制起点双向复制三、半不连续复制四、复制方式1.复制2.滚环复制3.D环复制练习17半保留复制：即当DNA进行复制时，亲代DNA双链必须解开，两股链分别作为模板，按照碱基互补配对原则指导合成一股新的互补链，最终得到与亲代DNA碱基序列完全一样的两个子代DNA分子，每个子代DNA分子都含有一股亲代DNA链和一股新生DNA链。半保留复制是DNA复制最重要的特征18z半保留复制的设想由Watson和Crick提出，由Mesel

4、son和Stahl于1958年通过实验证实20复制子replicon ：在DNA复制过程中，由1个复制起点控制的复制区域单复制子结构：原核生物DNA有个复制起点，所以是复制子结构多复制子结构：真核生物DNA有个复制起点，所以是复制子结构z复制叉：复制时DNA在解链点形成的分叉结构22z前导链：在DNA的半保留复制过程中，在一个复制叉上连续合成的一股DNA称为前导链，其合成方向与模板的解链方向相同z后随链：在DNA的半保留复制过程中，在一个复制叉上分段合成的一股DNA称为后随链，其合成方向与模板的解链方向相反冈崎片段：在DNA的半保留复制过程中，分段合成的后随链片段28z 利用电子显微镜观察原核

5、生物和真核生物DNA的复制过程，都能看到伸展成叉状的复制现象，其可能的原因是A. DNA双链被解旋酶解开B. DNA有多个复制起点C. 单向复制所致D. 属于连接冈崎片段时的中间体E. 拓扑酶发挥作用形成的中间体29z 冈崎片段的合成是由于A. DNA连接酶缺失B. RNA引物合成不足C. 后随链合成方向与其模板的解链方向相反D. 拓扑酶的作用E. 真核生物DNA有多个复制起点30一、参与DNA复制的酶和蛋白质zDNA复制是一个非常复杂的过程，需要30多种酶和蛋白质参与DNA聚合酶解链、解旋酶类引物酶连接酶二、复制过程练习1.复制起始2.复制延长3.复制终止31概述1.53聚合酶活性与延伸能力

6、2.35外切酶活性与校对功能3.53外切酶活性与切口平移DNA聚合酶III练习32z 在催化合成DNA时，除了底物之外，有两种成分必不可少 模板：有两点区别于模板链 引物：可以是DNA/RNA大肠杆菌DNA聚合酶是一种多功能酶，已经发现5种，有3种催化活性z Klenow片段33Ochoa19051993Kornberg1918 zfor their discovery of the mechanisms in the biological synthesis of ribonucleic acid and deoxyribonucleic 34DNA聚合酶IIIIII53聚合酶活性 35外切

7、酶活性 53外切酶活性 53聚合速度(核苷酸/秒)1620402501,000延伸能力32001,500500,000功能切除DNA复制引物，DNA修复DNA修复 DNA复制合成37DNA聚合酶的35外切酶活性能切除DNA的3端未与模板形成正确配对的核苷酸，但不会切除已经形成正确配对的核苷酸40DNA聚合酶催化的切口平移过程发生两个不同的反应：一个是从5端切除核苷酸，另一个是从3端延伸合成DNA原核生物的DNA聚合酶在催化切口平移过程中切除引物利用的是它的53外切酶活性41z：聚合亚基z：35外切亚基z：使与模板稳定结合,使核心酶二聚化z：钳形复合体部件z：钳形复合体部件z：钳形复合体部件z：

8、与SSB作用z：与、作用z：钳形复合体部件，增强延伸能力42z 关于DNA复制的错误叙述是A. 不需RNA指导的DNA聚合酶B. 属于半保留复制C. 需DNA指导的DNA聚合酶D. 需RNA指导的RNA聚合酶E. 需两股DNA分别作为模板43z 关于DNA复制的错误叙述是A. DNA聚合酶需NAD+或ATP才有活性B. 单链DNA结合蛋白保护DNA模板C. 单链DNA结合蛋白维持DNA模板单链状态D. 解旋酶负责DNA解链E. 引物酶以DNA为模板合成RNA引物44z DNA半保留复制不需要A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. 氨酰tRNA合成酶D. 冈崎片段E. 引物酶45z 关于大肠杆

9、菌DNA聚合酶、A. DNA聚合酶含7种亚基B. DNA聚合酶含量最多，活性最高C. DNA聚合酶对复制中的错误进行校对D. DNA聚合酶是在复制延长阶段起主要作用的酶E. DNA聚合酶有53外切酶活性，因而能进行切口平移46z 有外切酶活性、能除去RNA引物、在DNA复制发生错误时起修复作用的主要酶是A. DNA聚合酶B. DNA聚合酶C. RNA聚合酶D. 解旋酶E. 逆转录酶47z DNA聚合酶催化的反应不包括A. 催化DNA延长中3-羟基与dNTP的5-磷酸基反应B. 催化合成引物C. 催化引物的3-羟基与dNTP的5-磷酸基反应D. 切除错配的核苷酸E. 切除引物或损伤的DNA片段4

10、8zDNA具有超螺旋、双螺旋等结构，在复制时，作为模板的亲代DNA双链必须松弛螺旋，解开双链，暴露碱基，才能按碱基互补配对原则合成子代DNA1.解旋酶2.拓扑异构酶3.单链DNA结合蛋白练习49DNA复制时需要由解旋酶解链。解旋酶的作用是从复制起点双向解开DNA双链，形成两个复制叉然后，解旋酶在后随链的模板上沿53方向移动解链50z在解链过程中需要ATP提供能量，每解开1bp消耗2ATPz目前在大肠杆菌至少已经鉴定出4种解旋酶，分别称为解旋酶rep、和DnaB，其中只有DnaB六聚体参与DNA的复制zDnaB是dnaB基因的编码产物51在DNA复制过程中，复制叉前方的亲代DNA会打结或缠绕，即

11、形成正超螺旋结构，需要拓扑异构酶进行松解拓扑连环数是环状双链DNA分子两股链的互绕数。其他性质均相同、仅连环数不同的DNA分子称为拓扑异构体52z拓扑异构酶可以改变拓扑连环数大肠杆菌拓扑酶有I型和型两类：型拓扑异构酶剪接单股DNA改变其连环数，从而改变其拓扑结构，主要参与RNA的转录合成，ATP()型拓扑异构酶剪接双股DNA改变其连环数，从而改变其拓扑结构，参与DNA的复制合成，ATP()55OCH2NOPOOOHCH2TopoDNA 57z大肠杆菌的DNA双链分开后，两股单链即被4亚基SSB包裹zSSB与DNA的结合具有明显的协同效应，当第一个SSB结合后，其后SSB的结合能力可提高103倍

12、zSSB不沿DNA单链移动，而是通过不断的结合和解离改变结合位点58z 关于拓扑酶的正确叙述是A. 参与识别复制起点B. 复制时参与DNA解链C. 松解DNA解链时形成的超螺旋D. 稳定已解开的DNA单链E. 只在复制起始时起作用59z 能切断和连接DNA链的酶是A. DNA聚合酶B. 光解酶C. 解旋酶D. 连接酶E. 拓扑酶60zDNA复制需要RNA引物，RNA引物由引物酶催化合成大肠杆菌的引物酶是DnaG引物酶DnaG单独存在时相当不活泼。当解旋酶DnaB结合其他复制因子辨认复制起点并开始解链时，引物酶与解旋酶结合，构成引发体primosome，在模板的一定部位合成RNA引物，合成方向是

13、61z 关于RNA引物的错误叙述是A. 为DNA复制提供3-OHB. 以DNA为模板合成C. 以NTP为原料合成D. 由RNA指导的DNA聚合酶催化合成E. 在复制结束前被切除62DNA连接酶不能连接游离的单链DNA，只能连接双链DNA上的切口z连接反应耗能63z 关于DNA连接酶A. 不参与DNA复制B. 催化合成冈崎片段C. 连接双链DNA上的单链切口D. 连接游离的单链DNAE. 切除引物，填补缺口64z在大肠杆菌DNA的复制过程中，各种各样与复制有关的酶和蛋白质因子结合在复制叉上，构成复制体replisome 。复制体的组成和结构在复制的不同阶段发生变化复制起点参与复制起始的酶和蛋白质

14、起始过程66z 英国一家公司根据对英国女性的问卷调查结果，电脑合成了一个名为“安吉拉L布鲁克”的虚拟形象，称其为英国女性心目中“历史上最有吸引力的女人”z 英国每日电讯报17日报道，在一项针对英国女性的调查中，玛丽莲梦露被评为最有吸引力的过世女子，安吉丽娜朱丽被评为最有吸引力的在世女子z 基于这一调查，著名织物柔顺剂生产商兰诺公司用凯莉布鲁克的头发和身材、珍妮弗洛佩兹的鼻子、安吉丽娜朱丽的嘴唇以及玛丽莲梦露在电影七年之痒中所穿的性感白裙电脑合成出“安吉拉L布鲁克”2008年04月19日 新京报67蛋白功能DnaA蛋白识解复制起点序列DnaB蛋白解旋酶DNA解旋DnaC蛋白助DnaB结合于复制起

15、点类组蛋白HUDNA弯曲，促进起始DnaG蛋白引物酶合成RNA引物单链DNA结合蛋白SSB保护单链DNARNA聚合酶提高DnaA活性拓扑异构酶II松弛DNA超螺旋Dam甲基化酶将oriC的GATC甲基化68结合：DnaA蛋白与ATP形成复合物， 大 约 2 0 个DnaAATP复合物结合于9bp重复序列上，由DNA缠绕形成复合物69 解 链 ： 类 组 蛋 白HU与DNA结合，使13bp重复序列解链，成为开放复合物70 成 叉 ： 解 旋 酶 在DnaC蛋白的协助下与开放区域结合，由ATP提供能量，沿DNA链53方向移动，进一步解链，形成复制叉结构71z延长阶段合成前导链和后随链。反应都由DN

16、A聚合酶催化，但有显著差别，参与合成的蛋白质也不完全相同复制体成分前导链的合成后随链的合成前导链和后随链的协同合成DNA复制过程中的双重校对72蛋白质功能单链DNA结合蛋白结合ssDNADnaB蛋白解旋酶DNA解链，形成引发体DnaG蛋白引物酶装配引发体，合成引物DNA聚合酶合成DNADNA聚合酶切除引物，填补缺口DNA连接酶连接DNA拓扑异构酶改变超螺旋75当冈崎片段的合成遇到前方冈崎片段的引物时，DNA聚合酶替换DNA聚合酶，通过切口平移切除RNA引物，合成DNA填补79终止区：包括两个复制叉的交汇点和位于交汇点两侧的终止位点，含7个终止序列z终止需要Tus蛋白特异性地识别并结合终止序列的

17、共有序列GTGTGGTGT。每个复制周期只有一个Tus-Ter复合物起作用环连体：复制结束时，两闭环染色体互相套成环连体，由拓扑异构酶解离实际情况可能更复杂84z 催化合成冈崎片段的是A. DNA聚合酶B. RNA聚合酶C. 连接酶D. 引物酶E. 转肽酶85z 在DNA合成时不消耗的高能化合物是A. cGMPB. dGTPC. GDPD. GMPE. GTP86z真核生物DNA复制的特点1.DNA聚合酶2.参与复制的其他因子3.复制起始4.复制终止87 复制过程更复杂，涉及核小体的解离与重塑 多分子复制 端粒合成机制特殊 复制速度慢，约为50nt/秒，仅为E. coli的1/20 真核生物D

18、NA为多复制子结构，相邻复制起点之间的距离较短89z真核生物DNA聚合酶有、等，与E. coli DNA聚合酶性质基本相同、是复制染色体DNA的主要酶z、参与染色体DNA的损伤修复z复制线粒体DNAz相当于E. coli DNA聚合酶，有个功能：在复制时切除引物参与DNA修复 90 复制起点识别复合物origin recognition complex，ORC：是一种多亚基蛋白，在真核生物DNA复制的起始阶段起作用。它可以与真核生物染色体DNA复制起点ARS的几个保守序列结合，而且受与细胞周期调控有关的一组蛋白调控91 CDC6与CDT1相当于E. coli DnaC，与ORC结合，促进解旋酶

19、的装配，并介导解旋酶与复制起点ARS结合。 解 旋 酶 由 六 种 微 染 色 体 维 持 蛋 白minichromosome maintenance proteinMCM2-MCM7构成，具有六聚体环状结构，相当于E. coli解旋酶DnaB 复制蛋白Areplication protein A ，RPA ，相当于E. coli的SSB92 拓扑异构酶：也有、两型，型拓扑异构酶包括拓扑异构酶和拓扑异构酶，型拓扑异构酶包括拓扑异构酶和拓扑异构酶z 真核生物型拓扑异构酶不能引入负超螺旋，但可以松解正、负超螺旋93 增殖细胞核抗原proliferating cell nuclear antigen

20、 ，PCNA，在增殖细胞的细胞核内大量存在，功能是通过增强DNA聚合酶的延伸能力将其激活 复制因子Creplication factor C ，RFC，与PCNA共同参与装配复制体94z复制起点：自主复制序列auto-nomously replicating sequence/ARSz作为最简单的真核生物，酵母基因组ARS目前研究得最清楚，其基因组的16个染色体中有400个ARS，每个ARS长度约150 bp，含几段保守序列conserved sequence在进化中基本保持不变的碱基序列95z真核生物的染色体DNA为线性结构。复制时后随链5端的留下空缺。如果任其存在，随着细胞的不断分裂，DN

21、A的不断复制，DNA双链将会越来越短端粒结构端粒酶与端粒合成96z端粒DNA含短串联重复序列，其新生链(后随链)富含CxAy(x、y的数目为14)重复序列，模板链则含TyGx重复序列z四膜虫端粒：5CCCCAACCCCAANNNN3GGGGTTGGGGTTGGGGTTNNNNz人染色体DNA端粒短串联重复序列：TTAGGG，长97z 端粒酶RNA含CxAy，恰好作为端粒模板链的模板端粒酶结合于端粒模板链3端以RNA为模板，催化合成端粒模板链一个重复单位端粒酶推进一个重复单位重复合成，推进，达到一定长度端粒酶脱离端粒模板链末端回折填补合成新生链空缺98z DNA重组：DNA分子内或分子间发生遗传

22、信息的重新组合一、同源重组二、位点特异性重组三、DNA转座四、DNA重组意义99z是指通过同源序列进行的DNA片段交换。真核生物同源染色体的交换，细菌的转导、转化，噬菌体的重组都属于同源重组z这类重组发生于两个同源序列之间，同源序列既可以属于不同的DNA分子，也可以是同一DNA分子的不同部分。同源序列本身可以完全相同，也可能有区别1.Holliday模型2.双股断裂修复模型102z这类重组发生于特定的DNA序列之间，不要求有序列同源性z广泛存在于各类细胞内，其效应包括基因表达的调控、胚胎发育过程中的程序性基因重排、一些病毒和质粒DNA复制周期中发生的整合与分离等z位点特异性重组所需的关键成分是

23、重组酶和它所识别的重组位点1.位点特异性重组机制2.位点特异性重组效应106zDNA分子上有一些可移动序列。通过不同的机制，它们可以在基因组DNA中移动位置，这一现象称为转座。转座会导致基因突变、DNA长度改变1.可移动序列2.转座机制107McClintock19021992zfor her discovery of mobile genetic 108转座子transposon/Tn/跳跃基因/，jumping gene：由自己编码的转座酶催化转座。包括简单转座子和复合转座子逆转录转座子retrotransposon：由自己编码的逆转录酶催化转座逆转录子retroposon：由逆转录酶催化

24、转座，但自己并不编码逆转录酶112 参与DNA复制 参与DNA修复 参与基因表达调控 在真核细胞分裂时促进染色体正确分离 维持遗传多样性 在胚胎发育过程中实现程序性基因重排113一、DNA损伤损伤的类型引起损伤的因素损伤的意义二、DNA修复错配修复直接修复切除修复重组修复SOS应答和易错修复遗传病练习114基因突变：指由自发损伤或环境因素导致DNA的碱基序列发生了可以传递给子代细胞的变化，包括碱基的转换、颠换，核苷酸的插入或缺失等，这种变化通常导致基因产物功能的改变或丧失1151.错配点突变2.插入和缺失移码突变3.重排4.共价连接117点突变错配：一个碱基对突变为另一个碱基对转换：点突变的一

25、种，是两种嘌呤或嘧啶之间的互换颠换：点突变的一种，是嘌呤与嘧啶之间的互换118镰状细胞病患者血红蛋白基因的编码序列有一个点突变AT，使原来 号谷氨酸密码子GAG变成缬氨酸密码子GTG1221.复制错误2.自发性损伤3.物理因素4.化学因素5.生物因素124zDNA分子可以由于各种原因发生化学变化，如碱基发生烯醇式酮式结构互变、碱基修饰、脱氨基甚至脱碱基等。这些变化会影响氢键的形成，从而改变碱基配对。如果这些改变发生在DNA复制过程中，就会造成错配125z紫外线和各种辐射可以引起突变紫外线可以使DNA链上相邻胸腺嘧啶共价结合形成嘧啶二聚体，影响DNA双螺旋结构，使复制和转录不能正常进行z其他辐射

26、可以使DNA主链的磷酸二酯键或DNA双链之间的氢键发生断裂等126Muller18901967zfor the discovery of the production of mutations by means of X-ray 127z亚硝酸盐、烷化剂、染料和芳香烃类化合物等许多化学诱变剂可通过不同的作用机制导致DNA损伤碱基类似物碱基修饰剂染料128RNNOBrOHHNNNNNHRRNNOBrOHHNNNNORNHH5-BUA 5-BUG129亚硝酸盐使腺嘌呤脱氨基转化成次黄嘌呤，结果AT对转化成GC对131z抗生素和黄曲霉素等嵌入DNA双链之间，破坏DNA模板活性，或形成环氧化物，从而影

27、响复制和转录过程z逆转录病毒及可以整合到染色体DNA上的DNA病毒如乙肝病毒等132 突变是生物进化的分子基础 致死突变可以消灭有害病原体 突变是某些疾病包括遗传病和肿瘤等的分子基础133z错配修复就是在DNA复制完成以后，依赖模板提供的信息，对新生链上的错配碱基进行修复。错配修复可以将复制精确度提高1001,000倍识别双链模板寻找错配碱基修复错配碱基135MutL与MutS形成复合物，结合于错配位点MutH与MutL结合引导MutL-MutS复合物在错配碱基两侧寻找最近的一个GATC序列，形成DNA环MutH蛋白具有位点特异性内切酶活性，但只催化切割新生链所含未甲基化N*GATC序列中G的

28、5端，形成切口137z直接修复是指不切除碱基或核苷酸，直接将其修复1.光修复2.烷基化碱基修复138z修复嘧啶二聚体有多种机制，其中光复活作用是高度特异的直接修复方式。光修复由光解酶催化进行，光解酶被可见光激活，可以分解嘧啶二聚体。光解酶分布很广，从低等单细胞生物到鸟类都有，但哺乳动物没有139z切除修复是将DNA分子的损伤部分切除，并以另一股完整的DNA链为模板，重新合成被切除的片段，使DNA恢复正常结构参与切除修复的酶主要有特异的内切酶、外切酶、聚合酶和连接酶z原核及真核生物均有两套切除修复系统核苷酸切除修复系统碱基切除修复系统143zDNA损伤修复系统的修复能力与DNA的损伤程度相关。D

29、NA损伤增加将激活与损伤修复有关的基因，这一现象称为SOS应答SOS responsezSOS应答产生两类效应：一类是增加与修复系统有关基因的表达，从而提高修复能力；另一类是启动易错修复144z易错修复的核心是表达DNA聚合酶和。它们催化进行的是有损伤的DNA模板的复制，所以称为跨损伤复制zDNA聚合酶和都没有校对功能，复制错配率高达1/1,000。因此，跨损伤复制造成大量碱基错配，产生很多突变，所以称为易错修复error-prone 145z 早衰症是一种罕见的、可引起儿童在10多岁就衰老或死亡的疾病z 是人体内一种名叫LaminA的蛋白基因发生突变碱基错配导致z 早衰症患儿出生时看起来正常

30、，但在18个月后开始表现出早衰的特征。包括皮肤变皱、骨质疏松等，不少儿童在4岁就开始谢顶z 世界平均每400万到800万人中就有1人患早衰症z 早衰症患儿经常会表现出过人的智力147z患者对日光尤其紫外线特别敏感，易患皮肤癌。其皮肤细胞中对紫外线特异的核酸内切酶有缺陷，不能切除嘧啶二聚体，是皮肤癌发生的主要机制150z 2004年05月27日新浪科技讯 北京时间5月26日19时消息，德国科学家最近的一项研究结果表明，环境污染越严重的地区越容易产下双胞胎。不久前，汉堡大学的科研小组在职业与环境医学杂志上发表文章称，在德国黑森州垃圾焚烧厂以北20公里的一个地方，双胞胎出生率(5.3%)要比该项指标

31、的平均数(2.3%)高出2个多百分点。此外，根据德国国家统计局公布的资料显示，英国双胞胎的出生率自1992年以来也增加了20%。在比利时也存在着类似的发展趋势。z 产生这一现象的具体原因目前尚未研究清楚，只能进行某些推测。z 从医学角度来讲生育双胞胎是一种不良现象，这首先是因为双胞胎出生后体质都比较弱且体重较轻。来自伦敦夏洛特王后医院的妇产科教授尼克-弗斯克认为，产生双胞胎出生率呈上升趋势这一现象的原因可能是由于环境中的有害物质扰乱了妇女体内的激素平衡，使妇女体内雌激素标准降低，雌激素标准降低则能够导致机体内促性腺激素含量的增加，而激发卵细胞不断产生。z 然而，我们常见的双胞胎大多数由同一个受

32、精卵分裂而成。看来，要找到双胞胎出生率上升的真正原因，科学家们还得进行更深入的研究。152OOClClClC159z 胡志明市4岁的Nguyen Xuan Minh美国在越战中将包括橙剂在内的脱叶剂广泛用于军事目的，导致越南出现很多残疾儿童z 1984年美国7家化工厂向在越战中感染橙剂的美军退伍兵赔偿了18亿美元，越南将在6月份向美国法庭提出赔偿要求160ClOClClCOOHOClClCOOH161z英国一名17个月的男婴天生没有疼痛感，科学家指出，患这种病的机率仅为10亿分之一166z 有专家对平平进行研究，平平的母亲身高1.66米，父亲1.73米，两个姐姐都在1.65米以上，专家确认，平

33、平不是侏儒症，而是基因变异。2007年7月份，74厘米高的平平被吉尼斯世界纪录确定为“世界上最矮的人”169z 关于突变的错误叙述是A. 插入1个碱基对会引起移码突变B. 重排属于基因组内DNA重组C. 颠换是点突变的一种形式D. 缺失4个碱基对会引起移码突变E. 转换是重排的一种形式170z 碱基A被T替换属于A. 插入B. 重排C. 颠换D. 缺失E. 转换171z 紫外线对DNA的损伤主要是引起A. 碱基插入B. 碱基缺失C. 碱基置换D. 磷酸二酯键断开E. 嘧啶二聚体形成172逆转录：以RNA为模板、以dNTP为原料、由逆转录酶催化合成DNA的过程1.逆转录酶2.逆转录病毒基因组的结

34、构3.逆转录病毒的逆转录过程4.逆转录病毒的生命周期5.逆转录的生物学意义6.抗HIV药物练习173z逆转录酶由逆转录病毒的pol基因编码，由、两个亚基组成，是一种多功能酶，具有三种催化活性174 单链互补DNAsscDNA以RNA为模板合成的DNA 双链互补DNAdscDNA以sscDNA为模板合成的DNA 互补DNAcDNAsscDNA和dscDNA统称175z 逆转录酶具有3种催化活性 逆转录活性：RNA指导的DNA聚合酶活性逆转录酶能以RNA为模板，以53方向合成其单链互补DNA，形成RNA-DNA杂交体 水解活性：RNase H活性176 复制活性：DNA指导的DNA聚合酶活性逆转录

35、酶能催化复制sscDNA，得到dscDNA，它们统称互补DNAz 逆转录酶无校对功能，错配率高。这可能是各种RNA病毒突变率高，不断出现新病毒株的原因180 完善了中心法则 有助于研究RNA病毒的致癌机制，开发肿瘤防治新技术和新药物：逆转录病毒侵入细胞后通常并不杀死宿主细胞，而是发生基因整合，带有癌基因的病毒可以转化宿主细胞。在逆转录病毒转化细胞过程中，逆转录酶起关键作用。控制逆转录酶活性将有助于阻抑某些肿瘤或艾滋病的发生和发展 逆转录酶是重组DNA技术重要的工具酶182z名称：Zidovudine齐多夫定-Azidothymidine叠氮胸苷/叠氮脱氧胸苷z作用与用途：本品为抗病毒药，对病毒

36、具有高度活性，被美国FDA批准的治疗艾滋病(AIDS)的药物。临床上用于艾滋病或与艾滋病有关的综合征患者z副作用：胃肠道反应如恶心、呕吐腹泻；头痛、头晕、无力等反应；可发生贫血、白细胞减少、血小板减少；本品过敏者禁用、孕妇慎用z西药剂量：口服，成人200mg/次，1次/每4小时183z核苷类抗病毒药。可在HBV感染细胞和正常细胞内代谢生成拉米夫定三磷酸，既抑制HBV聚合酶，亦是此聚合酶的底物，渗入到病毒DNA链中、阻断病毒DNA的合成。拉米夫定三磷酸不干扰正常细胞脱氧核苷的代谢，它对哺乳动物DNA聚合酶a和b的抑制作用微弱，对哺乳动物细胞DNA含量几乎无影响。拉米夫定对线粒体的结构、DNA含量及功能无明显的毒性NNONH2SOCH2OH184z 逆转录酶的底物之一是A. AMPB. ATPC. dAMPD. dATPE. GDP185z 符合逆转录特点的是A. DNADNAB. DNARNAC. RNADNAD. RNARNAE. RNA蛋白质