12微生物检验标本采集、检测与报告分析-课件.ppt

1、微生物检验标本采集、微生物检验标本采集、检测与报告分析检测与报告分析 三亚市人民医院感控科主任技师主任技师 程程黛丽黛丽 201108132本文著者本文著者程黛丽：主任技师，在职研究生工作单位：海南省三亚市人民医院通讯地址：三亚市解放三路558号电话：13337599376邮政编码：572000 传真：88392148Email: 201108133为了保证医疗质量和医疗安全，卫生为了保证医疗质量和医疗安全，卫生部持续加大对医院感染管理督查力度，部持续加大对医院感染管理督查力度，各类新规范、新标准和指南相继出台都各类新规范、新标准和指南相继出台都是在指导我们的工作、规范我们的行为是在指导我们的

2、工作、规范我们的行为怎么与微生物的战争。所以我们感控人怎么与微生物的战争。所以我们感控人在与病原微生物的在与病原微生物的中，怎样立中，怎样立于不败之地？那就是要了解微生物、研于不败之地？那就是要了解微生物、研究微生物、打击微生物、局部消灭微生究微生物、打击微生物、局部消灭微生物、继而有效预防和控制医院感染！物、继而有效预防和控制医院感染！201108134 微生物培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，可造福人类，也可成为致病因素。201108135微生物检验的思路与原则1.确保临床标本可靠。2.全面了解机体正常菌群。3.保证检验质量、快速准确提供信息

3、。4.微生物学定性、定量和定位分析并结合病情。5.加强与临床联系201108136 正常菌群：人自出生后，外界的微生物就逐渐进入人体。在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种腔道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着对人体无害的微生物群（细菌、真菌、螺旋体、支原体等）。它们与宿主的长期进化过程中，微生物群的内部及其与宿主之间互相依存、互相制约，形成一个能进行物质、能量及基因交流的动态平衡生态系统习惯称之为正常菌群。正常菌群大部分是长期居留于人体的又称为常居菌，也有少数微生物是暂时寄居的，称为过路菌。正常菌群？正常菌群？201108137正常菌群生理作用： 正常菌群通过粘附和繁殖能形成一层自

4、然菌膜，是一种非特异性的保护膜，可促使机体抵抗致病微生物的侵袭及定植，而对宿主起到一定程度的保护作用。正常菌群除与病原菌争夺营养物质和空间位置外，还可通过其代谢产物及产生抗生素、细菌素等起作用。正常菌群是人体防止外袭菌侵入的生物屏障。 正常菌群释放的内毒素等物质可刺激机体免疫系统保持活跃状态，是非特异免疫功能的一个不可缺少的组成部分。 有些微生物能合成维生素，如核黄素、生物素、叶酸、吡哆醇及维生素K等，供人体吸收利用。 肠道中正常菌群可互相配合，降解未被人体消化的食物残渣，便于机体进一步吸收。201108138 在一定条件下，也能使人患病：由于机体的防卫功能减弱，引起自身感染。例如皮肤粘膜受伤

5、（特别是大面积烧伤）、身体受凉、过度疲劳、长期消耗性疾病等，可导致正常菌群的自身感染；由于正常菌群寄居部位的改变，发生了定位转移，也可引起疾病。例如大肠杆菌进入腹腔或泌尿道，可引起腹膜炎、泌尿道感染。因此，这些细菌称为。 在正常情况下，人体和正常菌群之间及正常菌群中各细菌之间，保持一定的生态平衡。如生态平衡失调，使机体某部位的正常菌群各细菌的比例发生数量和质量上的变化，称为。 菌群失调的常见诱因主要是、同位素、激素、患有慢性消耗性疾病时肠道、呼吸道、泌尿生殖道的功能失常也是重要原因。去除诱因后可使菌群复常，也有长期失调难于逆转的情况。 201108139空气中的细菌 ： 空气中的微生物分布种类

6、和数量因环境不同有所差别。空气中微生物来源于人畜呼吸道的飞沫及地面飘扬起来的尘埃。由于空气中缺乏营养物及适当温度，细菌不能繁殖，且常因阳光照射和干燥作用而被消灭。只有抵抗力较强的细菌和真菌或细菌芽胞才能存留较长时间。室内空气中的微生物比室外多，尤其是人口密集的公共场所、医院病房、门诊等处，容易受到带菌者和病人污染。如飞沫、皮屑、痰液、脓汁和粪便等携带大量的微生物，可严重污染空气。某些医疗操作也会造成空气污染，如；也是医院空气中微生物的来源。室内空气中常见的病原菌有脑膜炎奈瑟氏菌、结核杆菌、溶血性球菌、白喉杆菌、百日咳杆菌等。空气中微生物污染程度与医院感染率有相应的关系。2011081310微生

7、物检验负责工作：病原学诊断（鉴定结果）药物的敏感试验（药敏结果）环境器械与微生物学调查保证医院内消毒、灭菌的质量细菌学分型试验，追踪感染源2011081311检验标本的采集与处理对感染性疾病进行病原检查和鉴定，须通过采集病人标本，经系列实验，才能获得明确的病原学诊断。标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当的标本可导致结果的出现，因此在标本采集、送检、保存等各个环节都要规范操作，严格控制，是确保实验结果准确可靠的前提。2011081312标本采集的一般原则 早期（适时）采集 无菌采集 根据目的菌的特性用不同的方法采集 采集适量标本 安全采集2011081313 如：痰液筛选的标准为痰液涂片镜

8、检，鳞状上皮细胞30,设四角及中央5点，均距墙壁1m。将普通营养琼脂平板或血平板（直经9cm）放在室内各采样点处，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。2011081358检测方法将采样平板置37培养48h，计数并鉴定细菌。单克隆抗体潜血灾光Ab法20110813592011081360核酸同源值测定（分子杂交法） 弥补G+C mol% 测定法的不足 方法：变性解链将两种DNA混合保温复性鉴定双螺旋结合率 2011081361 与实验室有关的造成院内感染爆发的原因：标本在采集过程中被污染；标本在转运过程中被污染；标本在实验室处理过程中被污染；培养基、溶液或其他试剂、设备和

9、仪器、使用不适宜的方法和技术等被污染。2011081362“三定一结合” 的采用 临床微生物学实验室应注意：医院感染病人中常见的是条件致病菌，病原学诊断时，要进行定性、定量和定位分析并结合病情。 定位：指微生物群存在的生态空间。 定性：指对微生物群落中各种群的分 离鉴定。 定量：指微生物的数量。2011081363常见标本的数值标准： 尿、痰、组织标本的定量培养，当达到规定的数值时，则可判断为感染的病原菌。 尿培养105cfu/ml 痰培养106cfu/ml 组织培养105cfu/g 静脉导管的半定量培养15cfu/5cm 时，可能为静脉导管的相关性感染2011081364质量控制 实验室前的

10、质量控制 标本接种培养前的质量控制 分离培养的质量控制 培养基的质量控制 常用仪器设备的质量控制 药物敏感试验的质量控制 染色液及染色方法的质量控制2011081365“报告分析”不可能的结果如MRSA对青霉素类敏感；耐庆大霉素的革兰阳性球菌对其他氨 基糖苷类敏感；肠杆菌科耐三代头孢却对氨基、羧基西林或一代头孢菌素敏感 此类结果必须找出原因。2011081366需要“修正”的结果 葡萄球菌、嗜血杆菌或淋病奈瑟菌，如-内酰胺酶阳性时应报告对所有青霉素类耐药。 耐林可霉素的葡萄球菌即使出现对克林霉素敏感的结果也应报耐药。 耐庆大霉素的革兰阳性球菌即使出现对阿米卡星、奈替米星敏感的结果，因只抑菌而不

11、杀菌，也应报告耐药。同样，托布霉素/阿米卡星也有类似规律。2011081367提示性药物细菌对“此种”药物耐药可提示对“同类”药物均耐药。 葡萄球菌对苯唑西林耐药，提示对所有-内酰胺类抗生素均耐药，也会对氨基糖苷类耐药。耐氨苄西林的肠球菌提示对所有青霉素类及亚胺培南耐药。耐庆大霉素的革兰阳性球菌对氨基糖苷类均耐药。大肠埃希菌或克雷伯菌对头孢泊肟、头孢他啶或氨曲南耐药提示会产生超广谱-内酰胺酶（ESBL)。2011081368需向临床医师解释的结果MRS的体外药敏试验可能出现对某种头孢菌素类、碳青霉烯类或-内酰胺酶抑制类抗生素的敏感结果，但用药无效。产ESBL克雷伯菌和大肠埃希菌不论其体外药敏试验结果如何，对青霉素、头孢菌素和氨曲南治疗无效。均应向临床解释。2011081369