Agilent-1100化学工作站操作解读课件.ppt

1、Confidential | 2004 Agilent 1100化学工作站操作傅悦2006,12主要内容 仪器硬件：结构、流路和电路 化学工作站的整体介绍 方法编辑 数据处理 打印报告 DAD功能介绍 故障诊断 OQ/PV认证仪器硬件：结构、流路和电路 流路部分在仪器的正前方，自上而下的设计、连接，减小了系统的死体积和延迟体积 电路部分在仪器的后方，每个模块都有独立的电源。 各部件由CAN线进行通讯连接，使得各个部件形成一套系统。 化学工作站和仪器之间用LAN线和系统连接，一般将网卡插在检测器上。 6种灯的指示状态: off ready Not ready Run Error Resident

2、 （Blink）化学工作站的整体介绍 2个工作窗口：online 和 offline 5个功能界面： Method and Run Control Data Analysis Repor Layout Verifiction(OQ/PV) Diagnosis方法编辑 Methodrun time checklist确定方法运行内容泵参数 Post time 是指一次运行结束后，第二次进样前的等候时间。例如：将不感兴趣的杂质组分冲洗出系，或使得系统中的流动相改变成下一次进样的初始化比例自动进样器参数 Injection with Needle wash 对针的外壁进行清洗 Use Injecto

3、r Program 编写进样程序，完成特殊进样 要求 Draw Position 取样位置柱温箱参数 柱温箱的左右两个半导体加热模块可以单独设置温度，可以降温操作。检测器参数化合物最大吸收波长Wavelength(Sam) 化合物吸收光谱的谱带宽Bandwidth(Sam)，应约等于其吸收光谱的半峰宽，决定了检测波长范围。例如：样品的最大吸收为254nm，谱带宽度4nm，检测波长范围250258nm。 参考波长Wavelength(Ref)，应设在样品没有吸收处，且越靠近 样品的最大吸收越好。 参考波长谱带宽度Bandwidth(Ref)， 要求BW(Ref)BW(Sam)。 可以选择显示存储

4、5个信号 信号波长范围191949nm None：不采集任何光谱信号 Apex + Baselines: 采集峰尖和基线的光谱信号 Apex + Slopes + Baselines: 采集峰尖、峰起始、峰终止和基线 All in Peaks：采集所有峰 Every 2nd spectrum: 采集每秒的光谱信号 All：采集所有的光谱信号，若做峰纯度检测或优化完全未知样品的检测条件，建议选择All 模式 Peakwidth：规定色谱图数据的采集频率，应设成色谱图上最窄峰的半峰宽。采集速率太快，则色谱图的毛刺过多，采集太慢，则色谱图发生变形，无法准确定量。PeakWidth (min)Resp

5、onseTime (sec)Data Rate(Hz)0.01 0.2 20 0.03 0.5 10 0.05 1.0 5 0.10 2.0 2.5 0.20 4.0 1.25 0.40 8.0 0.62 0.85 16.0 0.31 Slit:狭缝宽度越小，分辨率越大，灵敏度越低。 Margin for negative Absorbance：对负吸收的补偿设置范围：100 to 4000 mAU.设置值越大会越显著的增加基线噪音，在负吸收大于100mAU时，才进行设置数据处理调用数据文件 可以从File Information中查看数据信息优化谱图显示 Full：色谱图上最高峰满刻度显示

6、Use Ranges：自行规定时间轴和响应值 Autoscale：色谱图上第二高峰满刻度显示（常用于气相色谱） Overlaid：一份报告中输出多个色谱图和积分结果色谱图优化工具设置标注格式文字字体线形标注移动标注删除标注WMF图标注单独/重叠显示谱图显示方式化合物名称保留时间显示基线标题显示轴打印窗口拷贝色谱图控制图标色谱图优化图标谱图处理工具从左到右依次为 横轴对齐 纵轴对齐 坐标复位 三维模拟 镜像谱图 谱图差减优化积分1、自动积分2、自行设定积分参数（积分事件）3、手动积分 Slope Sensitivity和Peak Width的改动要慎重，应为它们将影响所得的积分峰面积，进而影响到

7、所得定量结果的准确程度。一定要保证同一套数据（各个标样数据和未知样品数据）间这两个数值的设定是吻合的。 Area Reject 和Height Reject仅仅是色谱峰的判断标准，其数值大小不会影响所得峰面积。 Shoulders给出工作站对色谱峰肩峰的处理态度，分为Off（不处理）、Tan（切线撇去）、和Drop（垂直切去）三种。添加积分事件删除积分事件 设置Baseline Now 设置Detect Shoulers 设置Baseline Hold 设置Fixed Peak Width 设置Tail Tangent Skim 设置Area Reject 设置Integate 设置Slope

8、 Sensitivty 19种积分事件 Baseline Now：设置点之后不再积分认为是基线ON Baseline at Valleys：基线起始点均在峰谷 Baseline Hold： 保持基线ONONOFF Tail Tangent Skim： 脱尾切线撇去 Area Sum 峰面积加和 Integrate 积分OFFON Slope Sensitivity 斜率灵敏度 Area Reject 峰面积拒绝值 Negative Peak 负峰识别 Split Peak 裂分峰Fixed Peak Width 固定峰宽（半峰宽）Auto Peak Width 自动峰宽（半峰宽）：最多有25%

9、分波动 Detect Shouders 检测肩峰Split PeakON Shouders Mode 肩峰处理模式 Solvent Peak 溶剂峰：被认为是溶剂峰的自动进行脱尾切线撇去处理。 Baseline Backwards 基线返回 Baseline Next Valley 基线到下一峰谷 Unassigned Peaks 不指定的峰手动积分画基线 手动积分去除峰 手动积分负峰 手动积分裂分峰 手动积分切线撇去手动积分工具校正定量 六种定量方法1、百分比法Percent2、归一化法Norm%3、外标法ESTD4、内标法ISTD5、外标百分比法ESTD %6、内标百分比法ISTD% 建立

10、校正表 建立校正表从原始数据中获取校正数据从下面框中获取校正数据保留时间窗口宽度（Reference Peak：如有内标峰以内标峰为参考峰；没有内标峰以居中峰为参考峰）工作曲线类型及原点的处理态度对校正峰缺失的处理计算非校正峰（利用RF值定量）例：利用RF值计算非校正峰打印报告定义报告 报告输出的目的地.TXT：.WMF： .DIF.CSV.XLS：EXCEL报告格式.HTM：超文本格式，可以使用IE浏览Short:最常用的报告格式Performance:性能报告,可以给出柱效高低和分离度等数据Performance+Noise:可以给出各色谱峰的信噪比.报告输出格式 13种默认报告格式1.S

11、hort2.Detail3.Header+Short4.GLP+Short5.GLP+Detail6.Short+Spectrum7.Detail+Spectrum8.Full9.Library Search10.Performance11.Performance+Noise12.Performance+Library Search13.Extend PerformancePerformance报告报告 k=tR/tMMethod and Run ControlInstrumentColumns 2 mL Performance+Noise报告DAD功能介绍 紫外谱图显示选择色谱图上任意一点紫

12、外谱图选择峰顶紫外谱图平均谱图选择一组紫外谱图 参比光谱的选择 No Reference无参比光谱左右两图一样均为原始光谱 扣除背景后的紫外吸收光谱图 紫外谱图和参比光谱(更接近化合物本身的吸收光谱) Manual Reference手动选择参比光谱 点击图标 在目标峰前选择参比光谱点点击图标 在目标峰后选择参比光谱点 系统会将两参比光谱平均后从原始光谱中扣除(峰前峰后选择参比能补偿基线漂移和流动相组成变化等引起光谱波动造成的影响)光谱选项利用光谱选项设定自动扣除背景,光谱图平滑等自动计算域值固定域值编辑谱库标题信息打印谱库中谱图退出当前谱库编辑谱库中的谱图向谱库添加光谱进行谱库检索编辑谱库检

13、索条件谱库工具 谱图处理工具 调用谱库 保存谱库创建谱库输入谱库的真实信息,越全越好 提取化合物的光谱图 在自动扣除背景的模式下,提取色谱峰顶点的吸收光谱图 把谱图加入谱库 选择Add Entries将所提取的吸收光谱图加入到谱库当中,并输入该化合物的真实、详细信息 波长表 工作站自动标出物质的最大吸收和最小吸收波长 谱图管理 谱库建立以后还可以对其中的任一谱图进行管理，修改其信息 存贮谱库文件 保存所建立的谱库。谱库文件的扩展名为.UVL。默认的存贮路径为X:hpchemspeclibs（X为工作站所在的硬盘）谱图检索打开谱库 检索模板 调用所需要的谱库后，设置适当的谱库检索条件，有助于快速

14、、准确找到目标化合物。 检索谱图 提出预进行谱库检索的化合物色谱峰顶点吸收光谱后，点击Search Spectrum即可按照设定的检索条件进行谱库检索 检索结果界面中给出了未知化合物和谱库中化合物的吸收光谱重叠图，两者的吸收光谱差别图即检索结果表（列出匹配系数前十位的化合物）匹配系数峰纯度 峰纯度检测 选中后，在色谱图上单击要进行纯度检测的色谱峰即可判断该色谱峰是否为纯净物质的流出峰域值曲线模拟曲线峰纯度信息 等高图 3-D显示 纯度因子 域值峰纯：纯度因子域值峰不纯：纯度因子域值 差谱 色谱峰越纯净，各吸收光谱的差别越小峰纯度性能 影响峰纯度的因素：影响峰纯度的因素：化合物特征溶剂吸收噪音大

15、小化合物的波谱范围优化条件优化条件使用光强度大的光源，对检测器进行常规维护选择合适的流通池和狭缝采集足够的数据点Peakwidth设置合理样品浓度应在检测器的线性范围内等高图 从等高图中可以提取所需波长下的色谱图 提取色谱图，先将Cursor选项的下拉菜单改为Signal，选择适当的样品检测波长、谱带宽度（可按住Ctrl键的同时拖动鼠标左键）、参考波长、此时可得到所 需检测条件下的色谱图。单击Copy按钮，自动将得到的色谱图拷贝到数据分析界面，进行数据分析3D图谱故障诊断 仪器详细信息及诊断（以DAD检测器为例） 显示DAD检测器的常规信息 显示DAD详细信息及运行记录 显示紫外灯详细信息最关心！ 显示诊断项目 输入维护日记 早期维护 根据仪器的情况和使用经验，输入需要维护的限制值（Limit），当实际值达到需要维护的限制值时，EMF图标上的绿色对勾标记变成黄色问号分析问题诊断 对分析中出现的常见问题有针对性的进行诊断现象硬件硬件原因 工作站给出的仅仅是硬件原因，当分析出现问题时，首先应该想到的是方法设置问题诊断项目OQ/PV诊断 针对OQ/PV认证中出现的问题进行诊断OQ/PV认证 和Method and Run Control界面区别 编辑仪器认证项目 编辑进样序列保存认证方法谢 谢！