检验仪器分析-第八章-血液分析相关仪器课件.ppt
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- 检验 仪器 分析 第八 血液 相关 课件
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1、第八章 血液分析相关仪器主要内容 第一节第一节 血细胞分析仪血细胞分析仪 第二节第二节 血液凝固分析仪血液凝固分析仪 第三节第三节 全自动血型分析仪全自动血型分析仪 第四节第四节 血液黏度计血液黏度计 第五节第五节 自动血沉分析仪自动血沉分析仪 本节要点本节要点1.1.电阻抗(库尔特)法血细胞计数原理电阻抗(库尔特)法血细胞计数原理 2.2.联合检测型血细胞分析仪的主要技术特点联合检测型血细胞分析仪的主要技术特点3.3.血细胞分析仪检测血红蛋白和网织红细胞原理血细胞分析仪检测血红蛋白和网织红细胞原理4.4.红细胞直方图的临床应用红细胞直方图的临床应用5.5.血细胞分析仪的基本结构、性能评价及结
2、果比对血细胞分析仪的基本结构、性能评价及结果比对6.6.血细胞分析仪的维护保养及故障排除血细胞分析仪的维护保养及故障排除第一节 血细胞分析仪返回目录返回目录 掌握血细胞分析仪的库尔特分析原理、血红掌握血细胞分析仪的库尔特分析原理、血红 蛋白检测原理。蛋白检测原理。 熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理、熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理、 网织红细胞检测原理、仪器的基本结构、仪网织红细胞检测原理、仪器的基本结构、仪 器性能评价和维护。器性能评价和维护。 了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见 故障和排除。故障和排除。第一节 血细胞分析仪学习目标学习目
3、标返回目录返回目录一、概述 血细胞分析仪血细胞分析仪(blood cell analyzer)是临床检是临床检验应用最广泛的仪器之一,可以对一定体积全血内验应用最广泛的仪器之一,可以对一定体积全血内血细胞的数量和质量进行自动化分析血细胞的数量和质量进行自动化分析。返回目录返回目录 手工计数时代手工计数时代 19471947年,华莱士年,华莱士库尔特先生发现库尔特原理库尔特先生发现库尔特原理 19531953年,第一台血细胞计数仪年,第一台血细胞计数仪诞生诞生 2020世纪世纪6060年代,年代, 测定参数达测定参数达7 7项项 2020世纪世纪7070年代,年代, 全血细胞计数全血细胞计数(C
4、BC) 2020世纪世纪8080年代,双年代,双通道、白细胞通道、白细胞2 23 3分群、五分类分群、五分类 9090年代以来,多功能、多参数、流水线年代以来,多功能、多参数、流水线一、 概述返回目录返回目录二、工作原理1. 白细胞计数及分类计数检测原理白细胞计数及分类计数检测原理2. 红细胞检测原理红细胞检测原理 成熟红细胞检测成熟红细胞检测 网织红细胞检测网织红细胞检测 有核红细胞检测有核红细胞检测3. 血小板检测原理血小板检测原理 4. 血红蛋白含量检测血红蛋白含量检测返回目录返回目录二、工作原理1. 白细胞计数及分类计数检测原理白细胞计数及分类计数检测原理返回目录返回目录电阻抗法计数原
5、理电阻抗法计数原理联合检测型检测原理联合检测型检测原理l 血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体l 当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外电极之间恒流电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电极之间恒流电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号电压脉冲信号l 产生的脉冲数量,等于通过的细胞数量;脉冲信号产生的脉冲数量,等于通过的细胞数量;脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比幅度大小与细胞体积大小成正比 请记哦!请记哦!二、工作原理 白细胞计数之电阻抗法之电阻抗法 返回目录返回目录 电阻抗法血细胞计数原
6、理示意图电阻抗法血细胞计数原理示意图二、工作原理 白细胞计数之电阻抗法 返回目录返回目录l 多角度偏振光散射分析技术多角度偏振光散射分析技术 l 容量、电导、光散射联合检测技术容量、电导、光散射联合检测技术 l 光散射与细胞化学联合检测技术光散射与细胞化学联合检测技术 l 核酸染色技术核酸染色技术 l 双鞘流双鞘流DHSS五分类技术五分类技术 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录l前向角(前向角(0 0)散射光强度)散射光强度细胞的大小和数量;细胞的大小和数量;l小角度(小角度(1010)散射光强度)散射光强度细胞内部结构和核染色质复杂性;细胞内部结构和核染色质复杂性;l垂直
7、角度(垂直角度(9090)偏振光散射强)偏振光散射强度度细胞内部颗粒及分叶状况;细胞内部颗粒及分叶状况;l垂直角度(垂直角度(9090D D)消偏振光散)消偏振光散射强度射强度将嗜酸性粒细胞从多将嗜酸性粒细胞从多个核群中区分出来个核群中区分出来 。 多角度偏振光散射分析技术多角度偏振光散射分析技术 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录l容量容量(V)完整完整原态细胞的体积;原态细胞的体积;l电导电导(C)细胞细胞内部结构,将大小内部结构,将大小相近的细胞区分开相近的细胞区分开来;来;l光散射光散射(S)提提高对细胞颗粒的构高对细胞颗粒的构型和颗粒质量的鉴型和颗粒质量的鉴别能力
8、别能力。 各类白细胞在各类白细胞在VCS三维空间中的分布特点三维空间中的分布特点 各类白细胞在散点图中的分布特点各类白细胞在散点图中的分布特点 原文地址:http:/ 容量、电导、光散射联合检测技术容量、电导、光散射联合检测技术 (volume conductivity light scatter, VCS)二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录u联合应用细胞化学染色联合应用细胞化学染色( (过氧化物酶染色过氧化物酶染色 ) ) u过氧化物酶过氧化物酶在在5 5种白细胞中的活性存在种白细胞中的活性存在差异差异 光散射与细胞化学联合检测白细胞分布图光散射与细胞化学联合检测白细胞分
9、布图 光散射与细胞化学联合检测技术光散射与细胞化学联合检测技术二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 以半导体激光作为以半导体激光作为光源,在试剂中增加了核酸荧光源,在试剂中增加了核酸荧光染料光染料Polymethine( (聚聚次甲基次甲基) ),可以对核酸物质,可以对核酸物质DNA/RNA进行染色。进行染色。 染色染色后白细胞着色深(未成熟粒细胞、异常细胞后白细胞着色深(未成熟粒细胞、异常细胞荧光染色更深,成熟白细胞荧光染色浅),红细荧光染色更深,成熟白细胞荧光染色浅),红细胞不染色,血小板稍染色。胞不染色,血小板稍染色。核酸染色技术核酸染色技术二、工作原理 白细胞计数之联
10、合检测型 返回目录返回目录 核酸染色技术白细胞分类散点图核酸染色技术白细胞分类散点图原文地址:http:/ 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录u流式细胞术、化学染色和电阻抗法。流式细胞术、化学染色和电阻抗法。u设置设置3 3个通道完成对白细胞五分类和异常白细胞的测个通道完成对白细胞五分类和异常白细胞的测定。定。白细胞计数通道白细胞计数通道双鞘流通道双鞘流通道嗜碱性粒细胞通道嗜碱性粒细胞通道双鞘流双鞘流DHSSDHSS五分类技术五分类技术二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 双鞘流图双鞘流图 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 双矩阵巨大未成熟细胞(双
11、矩阵巨大未成熟细胞(LIC)散点图)散点图 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录二、工作原理2. 红细胞检测原理电阻抗电阻抗u 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理u 流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 u 有核红细胞检测有核红细胞检测返回目录返回目录 检测原理同白细胞计检测原理同白细胞计数相似数相似 脉冲多少的累积即红脉冲多少的累积即红细胞数量,脉冲高度细胞数量,脉冲高度的累积可换算成红细的累积可换算成红细胞比容胞比容 红细胞直方图上,在红细胞直方图上,在5050125fl125fl区域内有区域内有一个接近正态分布的一个接近正态分布的曲
12、线,为正常大小的曲线,为正常大小的红细胞红细胞正常红细胞直方图正常红细胞直方图 小红细胞且大小不等小红细胞且大小不等大红细胞且大小不等大红细胞且大小不等 巨幼细胞性贫血治疗有效(呈双峰)巨幼细胞性贫血治疗有效(呈双峰) 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录p成熟红细胞无成熟红细胞无DNA/RNA不被染色;不被染色;p网织红细胞内网织红细胞内RNA经荧光染色后,荧光强度与经荧光染色后,荧光强度与RNA含量成正比,网织红细胞的成熟度不同,含量成正比,网织红细胞的成熟度不同,RNA含量不同,因此产生的荧光强度就有差异。含量不同,因此产生的荧光强度就有差异。 根
13、据荧光强度差异,可分成三区:根据荧光强度差异,可分成三区:低荧光强度网织红细胞(低荧光强度网织红细胞(LFR)区)区中荧光强度网织红细胞中荧光强度网织红细胞(MFR)区区高荧光强度网织红细胞高荧光强度网织红细胞(HFR)区区流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录 光学法检测网织红细胞、成熟红细胞和血小板散点图光学法检测网织红细胞、成熟红细胞和血小板散点图二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录 通过有核红细胞检测程序和专用通道,加入专用试通过有核红细胞检测程序和专用通道,加入专用试剂。剂。 试剂中的荧光染料
14、可渗透进入白细胞膜内。试剂中的荧光染料可渗透进入白细胞膜内。 通过检测荧光强度得到:通过检测荧光强度得到:白细胞核大、荧光强度高白细胞核大、荧光强度高有核红细胞核小、荧光强度低有核红细胞核小、荧光强度低正常红细胞无细胞核和破碎、荧光强度极低正常红细胞无细胞核和破碎、荧光强度极低 根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积。根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积。二、工作原理 红细胞计数原理有核红细胞计数有核红细胞计数返回目录返回目录u检测参数:检测参数:NRBCu独立的有核红细胞检测通道,能对外周血有核独立的有核红细胞检测通道,能对外周血有核红细胞红细胞进行定量分析进行定量分析u最新研
15、究:外周血有核最新研究:外周血有核红细胞红细胞还可对重症监护病人的生存给予预测还可对重症监护病人的生存给予预测前向散射光 有核红细胞有核红细胞(NRBC)检测通道检测通道二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录二、工作原理3. 血小板检测原理电阻抗电阻抗u 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理u 流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 u 激光散射法激光散射法返回目录返回目录二、工作原理 血小板计数原理 正常人红细胞正常人红细胞体积与血小板体积与血小板体积有明显的体积有明显的差异差异 血小板计数设血小板计数设置置64个通道,个通道,体积分布范围体积分布范围
16、在在230fl之间之间 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理返回目录返回目录二、工作原理 血小板计数原理单个球形化血小板通过流式通道被激光束照射后单个球形化血小板通过流式通道被激光束照射后 低角度(低角度(23)光散射)光散射测量血小板的大小测量血小板的大小 高角度(高角度(515)光散射)光散射测量血小板折射指测量血小板折射指数数( (refactive index,RI),),此参数与血小板密度有关。此参数与血小板密度有关。 血小板的体积血小板的体积230fl,RI在在1.351.40之间之间 红细胞含有高浓度血红蛋白,红细胞含有高浓度血红蛋白,RI在在1.351.44之间之间 此法可以在一定
17、程度上纠正由于小红细胞、红细此法可以在一定程度上纠正由于小红细胞、红细胞或其它细胞碎片以及血小板聚集等因素导致的血胞或其它细胞碎片以及血小板聚集等因素导致的血小板计数的偏差,小板计数的偏差,可用于血小板计数的纠正。可用于血小板计数的纠正。激光散射法激光散射法返回目录返回目录l同网织红细胞同网织红细胞检测原理类似。检测原理类似。l荧光染料能够荧光染料能够迅速通过细胞迅速通过细胞膜,与膜,与RNA结结合后,其荧光合后,其荧光强度可提高强度可提高3000倍左右。倍左右。其中其中IPF1和和IPF2区域为未成熟血小板区域为未成熟血小板二、工作原理 血小板计数原理流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流
18、式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 返回目录返回目录二、工作原理4. 血红蛋白含量检测电阻抗电阻抗改良氰化高铁血红蛋白法改良氰化高铁血红蛋白法非氰化高铁血红蛋白法非氰化高铁血红蛋白法 仪器血红蛋白仪器血红蛋白的校正必须以氰的校正必须以氰化高铁法为准化高铁法为准返回目录返回目录p 机械系统机械系统p 电子系统电子系统p 血细胞检测系统血细胞检测系统p 血红蛋白测定系统血红蛋白测定系统p 计算机和键盘控制系统等计算机和键盘控制系统等 三、基本结构返回目录返回目录 主要性能指标主要性能指标 包括:测试参数包括:测试参数 、细胞形态学分析、测试速度、细胞形态学分析、测试速度 、样本量、样本量 主要测
19、试指标的示值范围主要测试指标的示值范围 示值范围示值范围: :WBC(0250)109/L;RBC(07.7)1012/L;HGB(0230)g/L;PLT(02000)109/L 性能评价性能评价包括:精密度、正确度、包括:精密度、正确度、携带污染率携带污染率、线性范围、白细胞线性范围、白细胞分类计数和可比性分类计数和可比性不同血细胞分析仪检测结果的比对不同血细胞分析仪检测结果的比对四、性能指标与评价返回目录返回目录 开开 机机参数设置参数设置 检查试剂和废液桶,依次打开主机、电脑,仪检查试剂和废液桶,依次打开主机、电脑,仪器自行启动,完成初始化和自检,开始工作器自行启动,完成初始化和自检,
20、开始工作选择校准、质控、静脉血、末梢血模式等菜单选择校准、质控、静脉血、末梢血模式等菜单检查室内质控结果,若不在控,查找原因,重检查室内质控结果,若不在控,查找原因,重新运行。若在控,继续样本测定新运行。若在控,继续样本测定样本(样本(EDTA抗凝血)编号、混匀、放测试位抗凝血)编号、混匀、放测试位按已设定的参数和程序,按测试键自动检测按已设定的参数和程序,按测试键自动检测运行质控运行质控样本装载样本装载样本测定样本测定结果传送结果传送以标准模式传送报告结果以标准模式传送报告结果 关机关机按日保养程序,清洗保养后关机按日保养程序,清洗保养后关机五、检测流程返回目录返回目录 维护维护 检测器维护
21、检测器维护 液路维护液路维护 机械传动机械传动部分维护部分维护 常见故障处理常见故障处理 开机开机时的常见故障及排除时的常见故障及排除 测试过程中常见的错误信息测试过程中常见的错误信息 设备故障修复后设备故障修复后 :应进行应进行相关的检测和验证相关的检测和验证六、 维护与常见故障处理返回目录返回目录本节要点本节要点1. 全自动血凝仪常用的检测原理及异同点全自动血凝仪常用的检测原理及异同点2. 全自动血凝仪的基本结构、性能评价全自动血凝仪的基本结构、性能评价3. 全自动血凝仪常见错误及故障排除全自动血凝仪常见错误及故障排除第二节 血液凝固分析仪返回目录返回目录第二节 血液凝固分析仪 掌握血凝仪
22、的检测原理和基本结构掌握血凝仪的检测原理和基本结构 熟悉半自动、全自动血凝仪的特点,血凝仪的熟悉半自动、全自动血凝仪的特点,血凝仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点性能评价以及各种检测方法的优缺点 了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和进展进展学习目标学习目标返回目录返回目录一、 概述 血液凝固分析仪(血液凝固分析仪(automated coagulation analyzer, ACA)是采用一定分析技术,对血栓与止是采用一定分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测分析的临床常规检验仪器。血有关成分进行自动检测分析的临床常规检验仪器。返回目录返回目
23、录 1910年,年,Kottman发明了最早的血凝仪发明了最早的血凝仪 1950年,年,Schnitger和和Gross发明了基于电流法的发明了基于电流法的血凝仪血凝仪 20世纪世纪70年代,较精确的各种半自动血凝仪先后年代,较精确的各种半自动血凝仪先后问世问世,特点,特点是:单通道、终点法的半自动血凝仪,是:单通道、终点法的半自动血凝仪,也称也称第一代产品第一代产品 20世纪世纪80年代末,多通道、多种分析方法与原理年代末,多通道、多种分析方法与原理的半自动血凝仪相继诞生,称之为的半自动血凝仪相继诞生,称之为第二代产品第二代产品 2020世纪世纪9090年代,年代,多通道、多方法、多功能多通
24、道、多方法、多功能全自动全自动第三代第三代血血凝仪不断涌现凝仪不断涌现一、 概述返回目录返回目录 生物学方法生物学方法 光学法光学法 :散射比浊法:散射比浊法 、透射比浊法、透射比浊法 磁珠法磁珠法 电流法电流法 超声分析法超声分析法 发色底物法发色底物法 免疫分析法免疫分析法 干化学技术干化学技术二、 工作原理返回目录返回目录 将凝血因子激活剂加入到待检血浆中,凝血仪将凝血因子激活剂加入到待检血浆中,凝血仪连续记录在血浆凝固过程中一系列物理量(光、电、连续记录在血浆凝固过程中一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,并将这些变化信号转超声、机械运动等)的变化,并将这些变化信号转变成数据
25、,再由计算机分析所得数据并将之换算成变成数据,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果。最终结果。概念概念二、 工作原理 生物学方法返回目录返回目录 是根据血浆是根据血浆凝固过程中浊度的变化,导致光凝固过程中浊度的变化,导致光强度变化来测定相关因子。强度变化来测定相关因子。散射比浊法散射比浊法透射比浊法透射比浊法二、 工作原理 比浊法返回目录返回目录 散射比浊法原理示意图散射比浊法原理示意图二、 工作原理 散色比浊法 返回目录返回目录 双双磁路磁珠法原理:磁路磁珠法原理:其中一对磁路产生恒定其中一对磁路产生恒定的交替电磁场,用于吸引测试杯内磁珠,使的交替电磁场,用于吸引测试杯内磁珠,使之保持
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