检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质.课件.ppt

1、L/O/G/O 检测生物组织中的检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质糖类、脂肪和蛋白质2011-10-8实验实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂质的鉴定脂质的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 （一）还原糖的鉴定（一）还原糖的鉴定1、实验原理、实验原理 NaOH + CuSO4 Cu(OH)2 蓝色沉淀蓝色沉淀 + Cu(OH) 2 + 还原糖还原糖Cu 2 O 砖红色沉淀砖红色沉淀 + （水浴条件（水浴条件：50-6550-65）葡萄糖葡萄糖等

2、还原糖等还原糖分子中存在醛基等分子中存在醛基等还原性还原性基团基团能与能与斐林试剂斐林试剂作用生成砖红色沉淀。作用生成砖红色沉淀。斐林试剂斐林试剂 ：甲液：质量浓度为：甲液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/ml0.05g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液材料材料Text in hereText in hereText in here材料要含有丰富还原糖材料要含有丰富还原糖材料颜色材料颜色为白色或近于白色为白色或近于白色以免造成干扰以免造成干扰选材选材原则原则富含还原糖富含还原糖富含蔗糖富含蔗糖含淀粉但还含淀粉

3、但还原糖很少原糖很少颜色干扰颜色干扰富含蔗糖富含蔗糖富含还原糖富含还原糖2、实验步骤、实验步骤反应初始反应初始反应结束砖红色反应结束砖红色对照对照蓝蓝色色棕棕色色砖砖红红色色3、注意事项、注意事项要选择要选择含还原糖丰富含还原糖丰富，颜色为，颜色为白色或白色或近于白色近于白色的植物组织的植物组织斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙液来分别配制、储存。液来分别配制、储存。使用时将甲液、使用时将甲液、乙液等量混合均匀，现配现用乙液等量混合均匀，现配现用1、材料选取、材料选取2、斐林试剂、斐林试剂对试管中的溶液进行加热时，试管底对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧

4、杯底部；试管口不要朝部不要触及烧杯底部；试管口不要朝向实验者向实验者 3、水浴加热、水浴加热实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定脂肪的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 （二）淀粉鉴定（二）淀粉鉴定1、实验原理、实验原理2、选材、选材选择淀粉含量选择淀粉含量高，颜色近于高，颜色近于白色的生物组白色的生物组织，如马铃薯织，如马铃薯块茎研磨液块茎研磨液淀粉遇碘淀粉遇碘会变成蓝会变成蓝色色3 3、过程及结果、过程及结果向向2ml2ml组织样组

5、织样液中加两滴液中加两滴碘液，摇匀碘液，摇匀后变成蓝色后变成蓝色（三）脂肪的鉴定（三）脂肪的鉴定1、实验原理脂肪可被脂肪可被 苏丹苏丹染成染成橘黄色橘黄色 苏丹苏丹染成染成红色红色苏丹苏丹材料材料 选择富含脂肪且比较大的选择富含脂肪且比较大的种子，成熟花生种子是最种子，成熟花生种子是最好的选择，实验前好的选择，实验前浸泡浸泡3 34 4小时小时时间过长时间过长：组织太软，切下的：组织太软，切下的薄片，薄片，不易成形不易成形时间过短时间过短：不容易切片不容易切片2、实验步骤、实验步骤注意事项注意事项切片要尽可能切片要尽可能薄，观察时要薄，观察时要找最薄处，最找最薄处，最好只有好只有1 12 2层

6、细胞层细胞 染色后一定染色后一定要用体积分要用体积分数为数为5050的的酒精溶液酒精溶液洗洗去浮色去浮色用苏丹用苏丹染色染色时间不宜过长，时间不宜过长，否则否则脂肪会溶脂肪会溶解在苏丹解在苏丹溶溶液中的酒精里液中的酒精里3、注意事项、注意事项实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定脂肪的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 （四）蛋白质的鉴定（四）蛋白质的鉴定1、实验原理蛋白质与双缩脲具有相同的结构蛋白质与双缩脲具有相同的结构-肽键肽键，能在

7、，能在碱性环境碱性环境下与双缩脲试下与双缩脲试剂中的剂中的CuCu2+2+产生产生紫色紫色络合物络合物双缩脲试剂双缩脲试剂A A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液：质量浓度为液：质量浓度为0.01g/ml0.01g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液注：双缩脲与双缩脲试剂不同。材料：材料：浸泡浸泡1 12 2天的大豆种子（或豆天的大豆种子（或豆浆）或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝浆）或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝提取液提取液2、实验步骤、实验步骤3、注意事项、注意事项实验样液要留出一份作为实验样液要留出一份作为对照对照（还原糖、淀粉的鉴定也要留出（

8、还原糖、淀粉的鉴定也要留出样液进行对照）样液进行对照）使用双缩脲试剂时，应使用双缩脲试剂时，应先先加加A A液造成碱性环境，再加液造成碱性环境，再加B B液液若使用蛋清，必须按要求若使用蛋清，必须按要求稀稀释释，如果稀释不够会粘附于，如果稀释不够会粘附于试管壁上，不易洗刷试管壁上，不易洗刷拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比 斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定成分鉴定成分还原糖还原糖蛋白质蛋白质鉴定原理鉴定原理还原糖中的醛基还原糖中的醛基在在加热条件加热条件下能将下能将Cu(OH)Cu(OH)2 2中的中的CuCu2+2+还原成还原成CuCu+ +，从而生成，

9、从而生成砖红色砖红色CuCu2 2O O沉淀沉淀双缩脲在碱性溶液中能与双缩脲在碱性溶液中能与CuCu2+2+结合生成紫色络合物，蛋白质结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似分子中含有与双缩脲结构相似的肽键，因而也能与的肽键，因而也能与CuCu2+2+作用作用试剂浓度试剂浓度甲液：质量浓度为甲液：质量浓度为0.1g/mol0.1g/mol的的NaOHNaOH溶液，溶液， 乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/mol0.05g/mol的的CuSO4 CuSO4 溶液溶液A A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的 NaOHNaOH溶液溶液B B液：质量浓度

10、为液：质量浓度为0.01g/ml0.01g/ml的的CuSO4CuSO4溶液溶液使用方法使用方法甲液、乙液甲液、乙液等量混合均匀等量混合均匀后再加入样液后再加入样液先加先加A A液造成碱性环境后，液造成碱性环境后，再加再加B B液液使用条件使用条件水浴加热（水浴加热（50-6550-65）不加热不加热实验现象实验现象浅蓝色浅蓝色 棕色棕色 砖红色砖红色紫色紫色 唯一用到显微镜的实验唯一用到显微镜的实验脂质的鉴定脂质的鉴定 唯一需要加热的实验唯一需要加热的实验还原糖的鉴定还原糖的鉴定 非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色而是蓝色而是蓝色典型例题分析：典型例题分

11、析：1 1、在、在“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”的实验中提供了的实验中提供了如下备选实验材料：如下备选实验材料： 苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。 【分析分析】实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下： (1)(1)检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？提示：提示：白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象

12、的观察。韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。(2)(2)检测脂肪时，为什么不选取核桃？检测脂肪时，为什么不选取核桃？提示：提示：核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。(3)(3)如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检测蛋白质吗？测蛋白质吗？提示：提示：不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。质。2.2.鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的化学试剂是化

13、学试剂是 ( )( )A.A.斐林试剂斐林试剂 B.B.苏丹苏丹染液染液C.C.双缩脲双缩脲 D.D.甲基绿甲基绿【解析解析】选选D D。甲基绿是对。甲基绿是对DNADNA染色，染成绿色。染色，染成绿色。拓展：拓展：健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应的是（的是（ ） 尿素尿素 胃液胃液 汗液汗液 唾液唾液3.3.以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作临时装片的正确步骤是临时装片的正确步骤是( )( )盖盖玻片盖盖玻片 切子叶切子叶 苏丹苏丹染液染色染液染色滴加蒸馏水滴加蒸馏水 酒精洗去浮色酒精洗去浮色A.A. B.

14、 B.C.C. D. D.【解析解析】选选D D。制作临时装片的步骤包括切片、。制作临时装片的步骤包括切片、制片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、制片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸馏水和盖盖玻片。滴加蒸馏水和盖盖玻片。4.4.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机化生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机化合物的检测实验中，以下操作错误的是合物的检测实验中，以下操作错误的是( )( )A.A.只有脂肪的检测需要使用显微镜只有脂肪的检测需要使用显微镜B.B.用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热C.C.斐林试剂和双缩脲试剂最好是现用现配斐林试剂和双缩脲试剂最

15、好是现用现配D.D.可溶性还原糖的检测，可用酒精灯直接加热产可溶性还原糖的检测，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀生砖红色沉淀【解析解析】选选D D。斐林试剂包括甲液和乙液，使用时一定要现用现。斐林试剂包括甲液和乙液，使用时一定要现用现配，双缩脲试剂最好也是现用现配，因为成分中的配，双缩脲试剂最好也是现用现配，因为成分中的CuCu2+2+容易沉淀；容易沉淀；斐林试剂检测还原糖时一定要斐林试剂检测还原糖时一定要50 50 65 65 水浴加热，而使用水浴加热，而使用双缩脲试剂检测蛋白质时则不需要加热；这个实验中只有脂肪双缩脲试剂检测蛋白质时则不需要加热；这个实验中只有脂肪的检测需要使用显微镜。的检测需要使用显微镜。