标准菌株在质控中的应用.课件.ppt

1、 标准菌株在质控中的应用标准菌株在质控中的应用一、使用标准菌株的意义二、如何选择和使用标准菌株一、标准菌株一、标准菌株 意义意义要做好微生物学检验质控，必须保要做好微生物学检验质控，必须保存有一批标准菌株，作为对仪器、存有一批标准菌株，作为对仪器、培养基、染色液、试剂和诊断血清培养基、染色液、试剂和诊断血清的质控菌株，也可作为从事细菌检的质控菌株，也可作为从事细菌检验的工作人员熟悉某些菌株的教具。验的工作人员熟悉某些菌株的教具。二、如何选择标准菌株二、如何选择标准菌株1.1.标准菌株的条件标准菌株的条件 形态、生理、生化及血清学特性典，并形态、生理、生化及血清学特性典，并 相当稳定。相当稳定。

2、菌株对所试药物产生恒定的抑菌环和恰菌株对所试药物产生恒定的抑菌环和恰 当的当的MICMIC 值。值。 对测试项目反应敏感。如测试巧克力琼对测试项目反应敏感。如测试巧克力琼 脂平板的分离能力，应选流感嗜血杆菌或脑脂平板的分离能力，应选流感嗜血杆菌或脑 膜炎奈瑟菌。膜炎奈瑟菌。二、如何选择标准菌株二、如何选择标准菌株 来源来源（1）ATCC：美国标准菌种保藏中心（2）NCTC：英国国家标准菌种保藏 伦敦 （3）CBS： 真菌中心收藏所 荷兰（4）WFCC：世界菌种保藏联合会（5）IFO： 大阪发酵研究所 日本（6）UCM： 全苏微生物保藏所 苏联二、如何选择标准菌株二、如何选择标准菌株 来源来源（

3、1 1）CMCCCMCC：中国国家微生物菌种保藏中心：中国国家微生物菌种保藏中心 （2 2）CGMCCCGMCC：中国普通微生物菌种保藏中心：中国普通微生物菌种保藏中心（3 3）ACCCACCC：中国农业微生物菌种保藏中心：中国农业微生物菌种保藏中心（4 4）CICC: CICC: 中国工业微生物菌种保藏中心中国工业微生物菌种保藏中心 （5 5）中国医学真菌菌种保藏中心）中国医学真菌菌种保藏中心 中国医科院皮研所中国医科院皮研所（6 6）中国医学病毒毒种保藏中心）中国医学病毒毒种保藏中心 中国中国CDCCDC病毒所病毒所（7 7）中国鼠疫耶尔森菌菌种保藏中心）中国鼠疫耶尔森菌菌种保藏中心 青海

4、青海CDCCDC 目前全球菌种保藏机构有目前全球菌种保藏机构有300300以上以上二、如何选择标准菌株二、如何选择标准菌株 来源来源 实验室分离菌株（地方株）：实验室分离菌株（地方株）： 实验室分离菌株必须经过严格鉴定，其实验室分离菌株必须经过严格鉴定，其 形态、生理、生化特征典型，经多次传形态、生理、生化特征典型，经多次传 代，特征恒定，否则不能作为标准菌株。代，特征恒定，否则不能作为标准菌株。二、二、如何选择标准菌株如何选择标准菌株 验证验证实验室保存菌种是否按规定时间转种，是 否每3代作一次鉴定，是否有详细记录卡（菌种名称、编号、来源、保存日期、传代） 等记录。验证后不得擅自处理或带出实

5、验室，如确 需要带离实验室，须经上级领导批准，并做 好详细的记录。菌株应有专人保管，验证时要有2人在场并 及时做好交接工作。二、二、如何使用标准菌株如何使用标准菌株 注意事项注意事项 不能用含有可发酵性糖的培养基保存菌种。 不可以使用选择性培养基，不能从药敏试 验平板培养基上留取菌株。 不可使培养菌干枯，所有试管要保持良好 的密封性。 对温度变化敏感的细菌，如淋病奈瑟菌和 脑膜炎奈瑟菌，不可贮存于冰箱，但可用 快速冷冻干燥法长期保存。 作为抗菌药物敏感试验用的标准菌株，由 保存状态取出后，不能连续使用1 周以 上，应定期传代，但一般不超过6 次，必 要时进行更换。二、二、如何使用标准菌株如何使

6、用标准菌株 注意事项注意事项 来自国际来自国际/ /国家菌种保藏中心国家菌种保藏中心( (本标准要本标准要求为求为ATCCATCC菌株菌株) )或经或经ISO9002ISO9002认证的经销商认证的经销商提供的菌株提供的菌株( (有资质有资质) ) 制备储备菌株和工作菌株时一次制备多制备储备菌株和工作菌株时一次制备多份，每株菌原则上不能重复使用，通常工份，每株菌原则上不能重复使用，通常工作菌株不能再传代，但处理得当可再次使作菌株不能再传代，但处理得当可再次使用。用。二、如何使用标准菌株二、如何使用标准菌株微生物学质控 无菌试验 性能试验 菌种必须经国家或国际公认的菌种 所用培养基严格按照要求进

7、行储藏。二、如何使用标准菌株二、如何使用标准菌株 质控菌株 分离培养基的质控 增菌及选择性 增菌培养基的质控 方法结果判断微生物学质控 三、如何使用标准菌株三、如何使用标准菌株 方法方法无菌试验： 制备好培养基础置37温箱过夜 培养，观察结果。三、如何使用标准菌株三、如何使用标准菌株 方法方法 性能试验（见图） 糖发酵培养基的质控 生化试验的质控 干燥培基与新配制培基的对比试验 培培 养养 基基 质质 控控 菌菌 株株 判判 定定 标标 准准 S SS S平平 板板 鼠 伤 寒 沙 门 菌 伤 寒 沙 门 菌 福 志 贺 菌 大 肠 埃 希 菌 肠 球 菌 生 长 ， 黑 色 菌 落 中 心

8、生 长 ， 无 色 透 明 菌 落 生 长 ， 无 色 透 明 菌 落 部 分 抑 制 生 长 ， 红 色 混 浊 菌 落 部 分 抑 制 生 长 麦麦 康康 凯凯 平平 板板 大 肠 埃 希 菌 伤 寒 沙 门 菌 生 长 ， 红 色 混 浊 菌 落 生 长 ， 无 色 混 浊 菌 落 中中 国国 蓝蓝 琼琼 脂脂 大 肠 埃 希 菌 伤 寒 沙 门 菌 生 长 ， 蓝 色 菌 落 生 长 ， 无 色 菌 落 营营 养养 琼琼 脂脂 金 黄 色 葡 萄 球 菌 福 志 贺 菌 大 量 生 长 大 量 生 长 厌厌 氧氧 血血 平平 板板 脆 弱 拟 杆 菌 产 气 荚 膜 梭 菌 生 长 生

9、 长 ， 溶 血 表 2 各 种 鉴 别 培 养 基 的 测 试 菌 种 培 养 基 阳 性 对 照 菌 阴 性 对 照 菌 赖 氨 酸 脱 羧 酶 迟 缓 爱 德 华 菌 费 枸 橼 酸 杆 菌 鸟 氨 酸 脱 羧 酶 产 气 肠 杆 菌 费 枸 橼 酸 杆 菌 精 氨 酸 双 水 解 酶 阴 沟 肠 杆 菌 普 通 变 形 杆 菌 蛋 白 栋 水 （ 靛 基 质 ） 大 肠 埃 希 菌 阴 沟 肠 杆 菌 葡 萄 糖 磷 酸 盐 蛋 白 胨 水 MR 大 肠 埃 希 菌 阴 沟 肠 杆 菌 V P 阴 沟 肠 杆 菌 大 肠 埃 希 菌 枸 橼 酸 盐 （ 西 蒙 氏 ） 产 气 肠 杆

10、菌 迟 缓 爱 德 华 菌 苯 丙 氨 酸 脱 氨 酶 雷 极 变 形 杆 菌 费 枸 橼 酸 杆 菌 O F 试 验 管 （ 葡 萄 糖 ） 铜 绿 假 单 胞 菌 （ 氧 化 型 ） 大 肠 埃 希 菌 （ 发 酵 型 ） 洛 菲 不 动 杆 菌 （ 不 利 用 ） 硝 酸 盐 还 原 大 肠 埃 希 菌 洛 菲 不 动 杆 菌 胆 汁 七 叶 苷 粪 肠 球 菌 化 脓 性 链 球 菌 脱 氧 核 糖 核 酸 琼 脂 粘 质 沙 雷 菌 表 皮 葡 萄 球 菌 氰 化 钾 肉 汤 产 气 肠 杆 菌 迟 缓 爱 德 华 菌 丙 二 酸 盐 产 气 肠 杆 菌 迟 缓 爱 德 华 菌 尿 素 琼 脂 雷 极 变 形 杆 菌 （ 快 ） 肺 炎 克 雷 伯 菌 （ 慢 ） 大 肠 埃 希 菌 半半 固固 体体 琼琼 脂脂 动动 力力 试试 验验 大 肠 埃 希 菌 肺 炎 克 雷 伯 菌 复习题1、微生物学质控主要指哪两方面？2、一般情况下保存菌种需要多久进行一 次系统鉴定？答案：1、微生物学质控主要指？ 无菌试验、性能试验2、一般情况下保存菌种需要多久进行一 次系统鉴定？ 每3代作一次鉴定.