蛋白质组学研究方法课件.ppt

1、编辑版ppt12编辑版ppt1. 蛋白质组学简介3. 质谱分析鉴定2. 蛋白质的分离3编辑版ppt1. 蛋白质组学简介4编辑版ppt1. 蛋白质组学简介5编辑版ppt1. 蛋白质组学简介Tip：蛋白质组学是研究领域和方向，也是研究工具和策略6编辑版ppt1. 蛋白质组学简介7编辑版pptmRNAProteinRibosomeDNAPolypeptidetRNA1. 蛋白质组学简介8编辑版ppt1. 蛋白质组学简介9编辑版ppt1. 蛋白质组学简介10编辑版ppt1. 蛋白质组学简介11编辑版ppt2. 蛋白质的分离12编辑版ppt2. 蛋白质的分离13编辑版ppt2. 蛋白质的分离14编辑版p

2、pt丙烯酰胺缓冲液: CH2=CH-CO-NH-R,R ：羧基或叔胺基固相凝胶2. 蛋白质的分离15编辑版ppt相对聚焦功率表示在使用不同长度或 pH 范围的 IPG 胶条时，在第一维中预期获得的增强的分辨率。 为 7 cm pH 310 IPG 胶条任意分配基线聚焦功率 1.0 以便计算其他胶条的相对聚焦功率2. 蛋白质的分离16编辑版ppt2. 蛋白质的分离17编辑版ppt2. 蛋白质的分离18编辑版ppt2. 蛋白质的分离19编辑版ppt2. 蛋白质的分离20编辑版ppt建立建立常用软件 PDQuest ImageMaster 2D Elite (MelanieTM)2. 蛋白质的分离2

3、1编辑版ppt2. 蛋白质的分离22编辑版ppt缺点： 不易获得低丰富度或者特殊（过酸、过碱、难溶膜蛋白等）的蛋白 操作繁琐，难以实现自动化2. 蛋白质的分离23编辑版ppt2. 蛋白质的分离24编辑版ppt分析说明：1)在没有内标的情况下，我们通过AB两块胶的分析，会得出结论： 图中红色圆环所标记的蛋白质点在处理组(样品3和样品4)表达量增高；2)通过内标的校正，我们可以证明，这实际上是由凝胶之间的误差造成的，并不是样品之间的真实差异。2. 蛋白质的分离25编辑版ppt 顺序使用基于不同物理化学分离原理的多种色谱技术能够为复杂蛋白质或多肽混合物的分析提供足够分辨率，并能够直接同质谱仪连用，实

4、现样品制备分离到质谱鉴定的自动化。或者色谱技术与2-DE结合使用。起始材料蛋白质的溶解酶解消化肽段混合物亲和色谱富集（AC）第一维：IEC第二维：RP-HPLCESI-MSESI-MS/MS收 集组 分2. 蛋白质的分离26编辑版ppt2. 蛋白质的分离27编辑版ppt2. 蛋白质的分离28编辑版ppt2. 蛋白质的分离29编辑版ppt2. 蛋白质的分离30编辑版ppt2. 蛋白质的分离31编辑版ppt质谱仪的主要构成3. 质谱分析鉴定32编辑版ppt3. 质谱分析鉴定33编辑版ppt3. 质谱分析鉴定34编辑版ppt3. 质谱分析鉴定35编辑版ppt3. 质谱分析鉴定 检索工具软件：Mascot，Profound，PeptIdent，PepSra等 数据库：NCBI、SWISS-PROT、UniProt、Integr 8等36编辑版ppt3. 质谱分析鉴定37编辑版ppt3. 质谱分析鉴定38编辑版ppt