动物组织胚胎学课件.ppt
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- 关 键 词:
- 动物 组织 胚胎学 课件
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1、组织学与胚胎学http:/ Histology胚胎学 Embryologyn组织胚胎学的两端:n组织学之细胞学,cytology,现在发展成细胞生物学。n胚胎学,现在发展成发育生物学。n都是前沿学科。课程安排n细胞 cell -细胞学 cytologyn组织 tissue -基本组织学 n器官 organ -器官组织学n胚胎学 组织学histologyn主要方法n固定组织研究n活组织研究n观察手段n光学显微镜n电子显微镜光学显微镜石蜡切片法n石蜡切片:paraffin sectionn固定fixn切片sectionn染色dyen固定固定:将组织用化学试剂浸泡,使组织内蛋白质等成分凝固或沉淀。n
2、染色染色:组织中某些成分与染料化学结合或物理吸附而显色。固定到切片(常用)n固定固定n脱水脱水-梯度乙醇梯度乙醇n透明透明-二甲苯二甲苯n透蜡透蜡-石蜡石蜡n包埋(包埋(-蜡块)蜡块)n切片切片(5m)切片到观察(常用)n脱蜡-二甲苯n入水-梯度乙醇n苏木精染色n梯度乙醇到95%n伊红染色n脱水n透明n封片n观察HE染色n用苏木精与伊红染色,是最常用的组织学,病理学染色方法。nH:苏木精,Hematoxylin碱性,蓝色 nE:伊红eosin酸性,红色n嗜碱性:染成蓝色,如:细胞核(核酸,酸性)n嗜酸性:染成红色,如细胞质 (碱性蛋白),nHE染色的肾小管n红色为嗜酸性的胞浆,蓝色为嗜碱性的核
3、冰冻切片n1冰冻(常用液氮)n2切片n优点:n保存酶活性,n抗原保存好,免疫组化应用较多。n缺点:n形态不如石蜡切片。n要求有冰冻切片机。其他光镜可用制片方法:其他光镜可用制片方法:n简单,实用,不需要特殊设备,有时候必须用n涂片(血液,体液)n触片n撕片n装片、磨片。 光学显微镜的结构n机械系统n光学系统n目镜(10 x,5x,16x)n物镜 (4x,10 x,20 x,40 x,60 x,100 x)n聚光器n光源物镜n最重要,最贵的部位。n物镜上数字,以40倍为例:n40/0.65,n放大倍数,镜口率(数值孔径,N.A)n160/0.17n机械管长,允许盖玻片厚度。分辨率的问题n分辨率(
4、Resolving power)又称分辨本领,是用来表示人眼或仪器能够区分开的被观察物体上两点间的最小距离。所能分辨的两点间距离越小,见到的细节就越多,分辨率就越高。 n人眼在25cm明视距离分辨率为0.2mm,n光镜分辨率为0.2m,电镜的分辨率比光镜的分辨率大约提高1000X。D=0.61/(N*sin(/2)n:为入射孔径角,即光线从样品进入透镜的张角:450nm,nN:折光率,空气 N=1,香柏油(N=1.5),n光镜最大分辨率,D最小值0.2m光学显微镜种类n普通光镜(明视野)。n暗视野(dark field)显微镜。n相差显微镜。n荧光显微镜。n激光共焦扫描显微镜(Laser Sc
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