人教选修三DNA的重组技术基本工程的工具ppt课课件.ppt

1、1.1 DNA1.1 DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具EcoRIEcoRI T磷磷酸酸二二酯酯键键1234512345 A AGAATTCCGTAGAATTCGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT 尝试写出下列序列受尝试写出下列序列受EcoRIEcoRI限制酶限制酶作用后的黏性末端作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT GAAGTACTTAAGGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTCATG AATTCCCTAA GAA

2、GTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 1 1、根据酶的来源：、根据酶的来源：分为分为E Ecoli DNAcoli DNA连接酶连接酶T T4 4 DNA DNA连接酶连接酶 2 2、连接部位：、连接部位：能将切开的双链能将切开的双链“缝合缝合”起来，起来，恢恢复被限制酶切开的复被限制酶切开的磷酸二酯键磷酸二酯键。THANK YOUSUCCESS2022-6-9可编辑3 3、具体连接部位：、具体连接部位：Ecoli DNAEcoli DNA连接酶：连接酶：T T4 4 DNA DNA连接酶：连接酶： DNADNA连接酶与连接酶与DNADNA聚合酶的异同点：聚

3、合酶的异同点：都能使两个核苷酸之间形成磷酸二酯键都能使两个核苷酸之间形成磷酸二酯键1 1）DNADNA聚合酶聚合酶只能将单个核苷酸只能将单个核苷酸加到已有的加到已有的核酸核酸片段片段上，形成磷酸二酯键上，形成磷酸二酯键；而；而DNADNA连接酶是在两连接酶是在两个个DNADNA片段之间片段之间形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键2 2）DNADNA聚合酶需要以聚合酶需要以一条一条DNADNA链为模板链为模板，将单个，将单个核苷酸连接成一条互补链核苷酸连接成一条互补链；而；而DNADNA连接酶连接酶不需要不需要模板模板1 1假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎

4、样？2 2、作为载体没有切割位点将怎样？、作为载体没有切割位点将怎样？3 3、目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？、目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？4 4、如果载体对受体细胞有害将怎样、如果载体对受体细胞有害将怎样? ?1 1、作为载体的必备条件：、作为载体的必备条件：1 1、具有能自我复制的能力、具有能自我复制的能力2 2、有一个或多个限制酶的切割位点、有一个或多个限制酶的切割位点3 3、带有标记基因、带有标记基因4 4、对受体细胞无害等等、对受体细胞无害等等2 2、常用的载体：、常用的载体：能复制并带着插能复制并带着插入的目的基因一入的目的基因一起复制起复制有切割位点有切割位点有标

5、记基因的存有标记基因的存在，将来可用含在，将来可用含青霉素的培养基青霉素的培养基鉴别。鉴别。质粒结构图：质粒结构图：1 1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的因的DNADNA片段，需使用片段，需使用A.A. 同种限制酶同种限制酶 B.B.两种限制酶两种限制酶C.C. 同种连接酶同种连接酶 D. D. 两种连接酶两种连接酶2 2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是、不属于质粒被选为基因运载体的理由是A A、能复制能复制 B B、有多个限制酶切点有多个限制酶切点 C C、具有标记基因具有标记基因 D D、它是环状它是环状DNADNA2 2、下列关于酶的说

6、法不正确的是（、下列关于酶的说法不正确的是（ ）A A、限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中、限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布很少分布B B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列列C C、不同的限制酶切割、不同的限制酶切割DNADNA的切点不同的切点不同D D、限制酶的作用主要是用来提取目的基因、限制酶的作用主要是用来提取目的基因3 3、下列哪项不是基因工程中经常使用的用来、下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（运载目的基因的载体（ ）A A、细菌质粒、细菌质粒 B B、噬菌体、噬菌体 C C、动植物病毒、动植物病毒 D D

7、、细菌核区的、细菌核区的DNADNA4 4、下列说法正确的是（、下列说法正确的是（ ） A A、DNADNA连接酶最初是从人体细胞中发现的连接酶最初是从人体细胞中发现的 B B、限制酶的切口一定是、限制酶的切口一定是GAATTCGAATTC碱基序列碱基序列 C C、质粒是基因工程中唯一用作运载目的基、质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体因的运载体 D D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为行大量复制的过程可称为“克隆克隆”A A、DNADNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B B、限制酶用于目的

8、基因的获得、限制酶用于目的基因的获得C C、目的基因须由载体导入受体细胞、目的基因须由载体导入受体细胞D D、人工合成目的基因不用限制性内切酶、人工合成目的基因不用限制性内切酶A A、限制酶只在获得目的基因时才用、限制酶只在获得目的基因时才用 B B、重组质粒的形成在细胞内完成、重组质粒的形成在细胞内完成C C、质粒都可作为载体、质粒都可作为载体 D D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料A A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器状细胞器B B、质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型、质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状环状DNADNA分子分子C C、质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细、质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制胞内复制D D、细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外、细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的独立进行的A.A.大肠杆菌病毒、质粒、大肠杆菌病毒、质粒、DNADNA连接酶连接酶 B.B.噬菌体、质粒、噬菌体、质粒、DNADNA连接酶连接酶 C.C.限制酶、限制酶、RNARNA连接酶、质粒连接酶、质粒 D.D.限制酶、限制酶、DNADNA连接酶、质粒连接酶、质粒 THANK YOUSUCCESS2022-6-9