固定化酶与固定化细胞课件.ppt
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- 关 键 词:
- 固定 细胞 课件
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1、1 1、制作固定化的、制作固定化的a a淀粉酶淀粉酶、进行淀粉水解的测定、进行淀粉水解的测定发展要求:通过实验探讨固定化酶的应用价值发展要求:通过实验探讨固定化酶的应用价值固定化酶固定化酶它是通过物理的或化学的手段,将它是通过物理的或化学的手段,将酶束缚酶束缚于水于水不溶的载体上,或将酶柬缚在一定的空间内,不溶的载体上,或将酶柬缚在一定的空间内,限制酶分子限制酶分子的自由流动的自由流动,但能使酶充分发挥催化作用,但能使酶充分发挥催化作用.将固定化酶装将固定化酶装拄,当底物经过该柱时,在酶的作用下转变为产物拄,当底物经过该柱时,在酶的作用下转变为产物固定化酶的反应柱示意图固定化酶的反应柱示意图
2、酶的固定化方法酶的固定化方法酶的固定化方法有:吸附法;共价键结合法;交联法;吸附法;共价键结合法;交联法;包埋法包埋法.吸附法吸附法吸附法分为物理吸附法和离子交换吸附法。(1) (1) 物理吸附法物理吸附法: : 通过氢键、疏水作用和通过氢键、疏水作用和电子亲和力电子亲和力等物理作用,将酶固定于水不溶载体上从而制成固定化等物理作用,将酶固定于水不溶载体上从而制成固定化酶酶。( (2)2)离子交换吸附法离子交换吸附法: : 这是这是将酶与含有离予交换基的水将酶与含有离予交换基的水不溶载体相结合而达到固定化的一种方法。不溶载体相结合而达到固定化的一种方法。 吸附法制备固定化酶操作简单,可充分选择不
3、同电荷、不同形吸附法制备固定化酶操作简单,可充分选择不同电荷、不同形状的载体,吸附过程可以同时纯化酶,固定化酶在使用过程失活后状的载体,吸附过程可以同时纯化酶,固定化酶在使用过程失活后可重新活化,同时,载体可以回收再利用。但由于有些机理不十分可重新活化,同时,载体可以回收再利用。但由于有些机理不十分明了,在给酶量、吸附程度与固定化酶活力回收的关系不可预见性明了,在给酶量、吸附程度与固定化酶活力回收的关系不可预见性大,同时由于吸附法制备的固定化酶易脱落,影响产物纯度和酶的大,同时由于吸附法制备的固定化酶易脱落,影响产物纯度和酶的操作为稳定性。操作为稳定性。 包埋法包埋法包埋法是将聚合物的单体与酶
4、溶液混合,再借助于聚合助包埋法是将聚合物的单体与酶溶液混合,再借助于聚合助进剂进剂( (包括交联剂包括交联剂) )的作用进行聚合,酶被包埋在聚合物中的作用进行聚合,酶被包埋在聚合物中以达到固定化以达到固定化。共价偶联合法共价偶联合法 共价键结合法是酶蛋白的侧链基团和载休表面上的功能基团之间形成共价键而固定的方法。固定化酶的优点固定化酶的优点: : (1)(1)即能与产物接触,又能与产物分离,能被反复利用即能与产物接触,又能与产物分离,能被反复利用 (2)(2)可以在较长时间内反复使用可以在较长时间内反复使用 (3)(3)溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺溶液中没有酶的残留,简化了提纯工艺. .
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