药物的杂质检查全面课件.ppt

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量第二节第二节 杂质的检查方法杂质的检查方法第三节第三节 药物中一般杂质的检查药物中一般杂质的检查第四节第四节 特殊杂质的鉴定方法特殊杂质的鉴定方法*一、药物的纯度一、药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。 3-1 药物的杂质与限量药物的杂质与限量* 是指药物中存在的是指药物中存在的无治疗作用无治疗作用或或影响药物的稳定性和疗效影响药物的稳定性和疗效, ,甚至甚至对人体健康有害对人体健康有害的微量物质的微量物质. .2.药物的杂质药物的杂质 为保证药品质量为保证药

2、品质量, ,确保用药安全、确保用药安全、有效有效, ,必须检查杂质必须检查杂质, ,控制药物纯度控制药物纯度. .* 1. 有毒副作用的物质 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质 3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质*纯度：纯度：药物的纯净程度。药物的纯净程度。杂质：杂质：ChP规定任何影响药品纯度的物质，是影响规定任何影响药品纯度的物质，是影响药物纯度的主要因素药物纯度的主要因素 。药物的纯度检查也可称为杂质检查。药物的纯度检查也可称为杂质检查。 需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含

3、量测定等方面进行综合评定。量测定等方面进行综合评定。*药物纯度与化学试剂纯度：药物纯度与化学试剂纯度：p药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品和不合格品两个等级。和不合格品两个等级。p化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学纯色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学

4、纯等。等。*（一）生产过程中引入（一）生产过程中引入二、药物杂质的来源二、药物杂质的来源（1 1）所用原料不纯；）所用原料不纯；（2 2）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、 副产物等；副产物等；（3 3）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质；）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质；（4 4）合成工艺中使用的试剂、溶剂等；）合成工艺中使用的试剂、溶剂等；（5 5）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。*例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得乙酰化不完全乙酰化不完全 水杨酸水杨酸( (

5、杂质杂质) )OHCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOH+H2SO47075oC+*例：盐酸普鲁卡因注射液的制备例：盐酸普鲁卡因注射液的制备 制备过程中加热灭菌制备过程中加热灭菌盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液 进一步脱羧转化进一步脱羧转化对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸 苯胺苯胺 引起毒性反应引起毒性反应*（二）贮藏过程中引入（二）贮藏过程中引入（1 1）保管不善或贮存时间过长）保管不善或贮存时间过长（2 2）包装不当）包装不当产生杂质产生杂质型转化、潮解、发霉型转化、潮解、发霉聚合、异构化、晶聚合、异构化、晶水解、氧化、分解、水解、氧化、分解、在外界条件在外界条件药品药

6、品气、微生物气、微生物温度、湿度、日光、空温度、湿度、日光、空*例：麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下，例：麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下，易氧化分解为易氧化分解为醛醛及有毒的及有毒的过氧化物过氧化物。CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙二羟乙基过氧化物基过氧化物）药典规定：启封后药典规定：启封后24小时内小时内使用使用*96：131在药物生产过程中引入杂质的途径为 A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金属器皿及

7、装置等引入杂质 E. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质 *三、药物杂质的分类三、药物杂质的分类按来源分为：按来源分为： 检查方法收载在检查方法收载在ChP正文各品种的质量标准中。正文各品种的质量标准中。检查方法收载在检查方法收载在ChP的附录中。的附录中。 特殊杂质：特殊杂质：一般杂质：一般杂质：在多种药物的生产和贮藏中容易引入在多种药物的生产和贮藏中容易引入的杂质。的杂质。在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。*按毒性分为：按毒性分为： 本身一般无害，但其含量多少可反映药物本身一般无害，但其含量多少可反映药物纯度水平，指示生产工艺是否合理。纯

8、度水平，指示生产工艺是否合理。如：氯化物、硫酸盐等。如：氯化物、硫酸盐等。对人体有毒害的杂质。在质量标准中严加对人体有毒害的杂质。在质量标准中严加控制，以保证用药安全。控制，以保证用药安全。如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等。如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等。 信号杂质：信号杂质：毒性杂质：毒性杂质：*按化学类别和特性分为：按化学类别和特性分为： 无机杂质无机杂质 Cl-、S2-、CN-、重金属等、重金属等有机杂质有机杂质 中间体、副产物、降解物、异构体等中间体、副产物、降解物、异构体等残留溶剂残留溶剂*（1）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差异；）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差

9、异；如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍。倍。（2）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；如：如：VA以全反式的生物活性为最高。以全反式的生物活性为最高。（3）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异；）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异；如：驱虫药甲苯咪唑，有如：驱虫药甲苯咪唑，有A、B、C三种晶型。三种晶型。其中其中C晶型的驱虫率为晶型的驱虫率为90%，B晶型的驱虫率为晶型的驱虫率为4060%，A晶型的驱虫率小于晶型的驱虫率小于20%。无效或低效杂质无效或低效杂质*按结构可分为按结构可分为2类类无机

10、杂质无机杂质 ClCl- -、S S2-2-、CNCN- -、AsAs、重金属、重金属. .有机杂质有机杂质 中间体、副产物、分解物、异中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂构体、残留溶剂. .*按性质可分为按性质可分为3类类信号杂质信号杂质 指本身一般无害指本身一般无害, ,但其含量多少可反但其含量多少可反映药物纯度水平映药物纯度水平, ,指示生产工艺是否合理指示生产工艺是否合理. . 如：氯化物、硫酸盐等如：氯化物、硫酸盐等. .有害杂质有害杂质 对人体有毒害的杂质对人体有毒害的杂质. .在质量标准中在质量标准中严加控制严加控制, ,以保证用药安全以保证用药安全. . 如：重金属、砷盐、

11、氰化物、氟化物等如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等. . *无效或低效杂质无效或低效杂质a a 具有立体异构体的药物具有立体异构体的药物, ,其生物活性其生物活性有很大差异有很大差异; ;如：肾上腺素为左旋体如：肾上腺素为左旋体, ,其升压作用是其升压作用是右旋体的右旋体的1212倍倍. .b b 异构体中异构体中, ,其顺式体与反式体的生物其顺式体与反式体的生物活性也不相同活性也不相同; ;如：如：V VA A以全反式的生物活性为最高以全反式的生物活性为最高.*c c 药物的晶型不同药物的晶型不同, ,其理化常数其理化常数, , 溶解性稳溶解性稳定性、体内的吸收和疗效也有差异定性、体内的吸收

12、和疗效也有差异. . 如：驱虫药甲苯咪唑如：驱虫药甲苯咪唑, ,有有A A、B B、C C三种晶型三种晶型. . 其中其中C C晶型的驱虫率晶型的驱虫率90%,B,B晶型的驱虫晶型的驱虫率率4060%,A,A晶型的驱虫晶型的驱虫 率小于率小于20%. .必须重视异构体和多晶型对药物有效性和必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性的影响安全性的影响. 控制药物中低效、无效以及控制药物中低效、无效以及具有毒性的异构体和多晶型具有毒性的异构体和多晶型, 在药物纯度研在药物纯度研究中日益受到重视究中日益受到重视*四、药物的纯度与化学试剂的纯度四、药物的纯度与化学试剂的纯度 药物的纯度考虑杂质的生理作

13、用，药品只有两个等级：合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。*99x：85中国药典中规定的一般杂中国药典中规定的一般杂质检查中不包括的项目是质检查中不包括的项目是 A. 硫酸盐检查 B. 氯化物检查 C. 溶出度检查 D. 重金属检查 E. 砷盐检查 *限量表示方法：百分之几（限量表示方法：百分之几（%） 百万分之几（百万分之几（ppm）对照法对照法灵敏度法灵敏度法比较法比较法四、杂质的限量四、杂质的限量杂质限量：杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。药物中所含杂质的最大允许量。杂质定量测定法杂质定量测定法杂质限量杂质限量

14、控制方法控制方法限量检查法限量检查法（ChP）*例例: :平行试验平行试验比较两比较两比色管的比色管的颜色颜色或或浊浊度度，判断杂质含量，判断杂质含量是否符合规定。是否符合规定。对照管对照管样品管样品管对照法：对照法：取取限度量限度量的待检杂质对照品配成的对照溶的待检杂质对照品配成的对照溶液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。过限量。*灵敏度法：灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂，在供试品溶液中加入一定量的试剂，在规定条件下反应，不得出现正反应

15、。即以在规定条件下反应，不得出现正反应。即以检测检测条件下的反应灵敏度来控制杂质限量条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。例：乳酸中枸橼酸的检查例：乳酸中枸橼酸的检查水水供试品供试品(0.5g) 5mL溶液溶液氨试液调微碱性氨试液调微碱性1ml氯化钙试液氯化钙试液水浴水浴5min不得产生浑浊不得产生浑浊*比较法：比较法：取一定量供试品，在规定条件下测定待检杂取一定量供试品，在规定条件下测定待检杂质的特定参数（如：吸光度等），与规定限量比较，质的特定参数（如：吸光度等），与规定限量比较，不得更大。不得更大。例：肾上腺素中肾上腺酮的检查例：肾上腺素中肾上腺酮的检查 供试品溶液供试品溶液(2.0mg/m

16、l)盐酸溶液盐酸溶液供试品供试品 (0.05mol/L)A310nm规定：规定：A310nm 0.05*100% 杂杂质质最最大大允允许许量量杂杂质质限限量量供供试试品品量量100% 对对照照溶溶液液的的浓浓度度 对对照照溶溶液液的的体体积积供供试试品品量量限量计算公式限量计算公式注意注意: 单位是否统一单位是否统一 供试品是否有稀释供试品是否有稀释 表示方法表示方法%或或ppm100%C VLS 610(ppm)C VLS 写成：写成：或或*610 105 01000 01252 0100.%.%. 100%C VLS 例例1.1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查对乙酰氨基酚中氯化钠的检查-, C

17、l25ml100ml2.0g依法检查样品过滤溶解水对照溶液：标准对照溶液：标准NaCl溶液（溶液（10 gCl-/ml），），取取5.0ml同法操作比较，浊度不得更大。同法操作比较，浊度不得更大。计算：氯化物限量是多少（计算：氯化物限量是多少（%）？）？供试品溶液：供试品溶液：*例例2.2.肾上腺素中酮体的检查肾上腺素中酮体的检查取本品取本品0.20g，置，置100ml量瓶中，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液(92000)溶解并溶解并稀释至刻度，摇匀，在稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过处测定吸光度不得超过0.05，已知酮体的百分吸收系数为已知酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限

18、量。，求酮体的限量。11%1cm%1cm/EA clcA El 酮酮体体-40.05= 1.15 10g/100ml435 1 （）-6= 1.15 10g/ml （）-30.20= 2.0 10g/ml100c 样样品品（）631.15 10100% = 0.06%2.0 10cLc 酮酮体体样样品品*一、杂质的研究规范一、杂质的研究规范（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称1.1.以杂质的化学名称作为项目名称以杂质的化学名称作为项目名称 如：阿司匹林中的如：阿司匹林中的游离水杨酸游离水杨酸2.2.以某类杂质的总称作为项目名称以某类杂质的总称作为项目

19、名称 如：如：硝酸毛果芸香碱中的硝酸毛果芸香碱中的其它生物碱其它生物碱 黄体酮中的黄体酮中的有关物质有关物质3.3.以检测方法作为项目名称以检测方法作为项目名称 如：如：杂质吸光度、溶液透光率杂质吸光度、溶液透光率3-2 杂质的检查方法杂质的检查方法*（二）杂质检查项目的确定（二）杂质检查项目的确定（三）杂质限量的确定（三）杂质限量的确定在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。

20、药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量生产中出现的生产中出现的杂质杂质和和降解产物降解产物单一对映体药物：单一对映体药物：检查其它对映体检查其它对映体消旋体药物：消旋体药物：旋光度检查旋光度检查*杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。 有机杂质多采用色谱法，特别是有机杂质多采用色谱法，特别是HPLC。检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的要求。要求。（四）杂质

21、检查方法的选择与验证（四）杂质检查方法的选择与验证*二、杂质的常用检查方法二、杂质的常用检查方法 显色反应检查法显色反应检查法 沉淀反应检查法沉淀反应检查法 生成气体的检查法生成气体的检查法 滴定法滴定法（一）化学方法（一）化学方法*NHCH2CH2NH2+显色（比色法检查）显色（比色法检查）如：氯硝柳胺中如：氯硝柳胺中2-氯氯-4-硝基苯胺的检查硝基苯胺的检查 显色反应检查法显色反应检查法2杂质：杂质：2-氯氯-4-硝基苯胺硝基苯胺O2NNHClClOHCONO2NHClO+ NaNO2+ 2HCl2NN2Cl +NaCl2H2O+-ClO2NNNNHCH2CH2NH2Cl*如：盐酸肼屈嗪中

22、游离肼的检查如：盐酸肼屈嗪中游离肼的检查沉淀反应检查法沉淀反应检查法H2NNH2+CHOOHHCOHNNH2+ H2O杂质：游离肼NNNHNH2HClCHOCNH2NNH2H2OHCl盐酸肼屈嗪盐酸肼屈嗪盐酸肼屈嗪杂质：游离肼杂质：游离肼比浊法或重量法检查比浊法或重量法检查*如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查滴定法滴定法2Fe3+2KI2Fe2+I22K+I22Na2S2O32NaINa2S4O6与药典规定限量进行比较与药典规定限量进行比较*（二）色谱方法（二）色谱方法薄层色谱法薄层色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法气相色谱法气相色谱法毛细管电泳法毛细管电泳法难以采用

23、化学法、光谱法对杂质进行检查时，多难以采用化学法、光谱法对杂质进行检查时，多 采用色谱法。采用色谱法。色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。*1.1.薄层色谱法薄层色谱法（1）杂质对照品法：杂质对照品法：适用于杂质已知并有杂质对照适用于杂质已知并有杂质对照品的情况。品的情况。方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定位后进行检查。位后进行检查。供供 对对供试品溶液除主斑点外的其它斑点与供试品溶液除主斑点外的其它斑点与相应杂质

24、对照品溶液的主斑点比较。相应杂质对照品溶液的主斑点比较。示例示例3-8*（2）供试品溶液自身稀释对照法：供试品溶液自身稀释对照法：适用于杂质的结适用于杂质的结构未知或无杂质对照品的情况，且杂质斑点颜色与构未知或无杂质对照品的情况，且杂质斑点颜色与主成分斑点颜色应相同或相近。主成分斑点颜色应相同或相近。方法：先配制一定浓度的供试品溶液，然后按限量方法：先配制一定浓度的供试品溶液，然后按限量要求将其稀释至一定浓度作为对照溶液，将两溶液要求将其稀释至一定浓度作为对照溶液，将两溶液分别点于同一薄层板上展开，定位后进行检查。分别点于同一薄层板上展开，定位后进行检查。供试品溶液的杂质斑点与自身稀释对供试品

25、溶液的杂质斑点与自身稀释对照溶液的主斑点比较。照溶液的主斑点比较。示例示例3-11供供 对对*（3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法：杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法： 适用于药物中存在多个杂质的情况。适用于药物中存在多个杂质的情况。 有对照品的杂质有对照品的杂质：杂质对照品法检查；：杂质对照品法检查； 未知杂质未知杂质或或没有对照品的杂质没有对照品的杂质：供试品溶液自身：供试品溶液自身 稀释对照法检查。稀释对照法检查。供供 对对 对对*（4）对照药物法：对照药物法：适用于适用于无合适的杂质对照品，或无合适的杂质对照品，或杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限杂质斑点颜

26、色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限量的情况。量的情况。方法：方法： 选用与供试品相同的药物选用与供试品相同的药物作为对照。作为对照。对照药物中所含待检对照药物中所含待检杂质应符合限量要求，稳定性好。杂质应符合限量要求，稳定性好。供供 对对*2.2.高效液相色谱法高效液相色谱法使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用同一色谱条件同一色谱条件进行杂质检查。进行杂质检查。 采用此法检查杂质时，采用此法检查杂质时，ChP规定应进行色谱系规定应进行色谱系统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查要求要求。 *（1）外标法（杂

27、质对照品法）：外标法（杂质对照品法）：适用于有杂质对照适用于有杂质对照品，而且进样量能够精确控制的情况。品，而且进样量能够精确控制的情况。ACCA杂杂对对杂杂对对%100%CC杂杂供供杂杂质质限限量量杂质对照品溶液杂质对照品溶液供试品溶液供试品溶液（杂）（杂）（对）（对）*（2）加校正因子的主成分自身对照加校正因子的主成分自身对照法：法：适用于已知杂适用于已知杂质的控制。杂质的校正因子（质的控制。杂质的校正因子（f）和相对保留时间收载）和相对保留时间收载在在ChP各品种的质量标准中。各品种的质量标准中。/ACfAC 主主主主杂杂杂杂杂质对照品杂质对照品+药物药物主成分对照品溶液主成分对照品溶液

28、自身稀释对照溶液自身稀释对照溶液（主）（主）（杂）（杂）（主）（主）（杂）（杂）供试品溶液供试品溶液/AfCAC 杂杂杂杂对对照照主主*（3）不加校正因子的主成分自身对照不加校正因子的主成分自身对照法：法：适用于没有适用于没有杂质对照品，且杂质结构与主成分相似的情况。杂质对照品，且杂质结构与主成分相似的情况。ACCA杂杂对对照照杂杂主主自身稀释自身稀释对照溶液对照溶液（主）（主）供试品溶液供试品溶液（杂）（杂）*（4）面积归一化面积归一化法：法：适用于供试品中结构相似、相对适用于供试品中结构相似、相对含量较高，且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察。含量较高，且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察。杂

29、质限量（杂质限量（%）=A杂杂/A总总100%A总总=A杂杂1A杂杂2A主主供试品溶液供试品溶液（杂（杂1） （杂（杂2）（主）（主）*检查方法检查方法：同高效液相色谱法：同高效液相色谱法用于药物中挥发性杂质的检查，如药物中用于药物中挥发性杂质的检查，如药物中残留溶剂、农药残留量等。残留溶剂、农药残留量等。3.3.气相色谱法气相色谱法4.4.毛细管电泳法毛细管电泳法用于酶类药物中酶类杂质的检查用于酶类药物中酶类杂质的检查。检查方法检查方法：同高效液相色谱法：同高效液相色谱法*利用药物与杂质对光选择吸收性质的差异进行利用药物与杂质对光选择吸收性质的差异进行检查。检查。（三）光谱方法（三）光谱方法

30、1.1.紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法例：肾上腺素中肾上腺酮的检查例：肾上腺素中肾上腺酮的检查 方法：规定杂质最大吸收波长（药物在此无方法：规定杂质最大吸收波长（药物在此无吸收）处的吸光度；利用杂质的呈色反应对吸收）处的吸光度；利用杂质的呈色反应对其进行定量测定。其进行定量测定。 *2.2.红外分光光度法红外分光光度法主要用于药物中主要用于药物中无效无效或或低效晶型低效晶型的检查。的检查。例例：甲苯甲苯达达唑中唑中A晶型的检查晶型的检查晶型晶型 640cm-1 662cm-1 A型（无效）型（无效） 强强 弱弱 C型型 弱弱 强强方法：比较供试品溶液与含一定量方法：比较供试品溶液与

31、含一定量A晶型的对晶型的对照品溶液在两波数处的吸光度比值。照品溶液在两波数处的吸光度比值。*3.3.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法主要用于药物中主要用于药物中金属杂质金属杂质的检查。的检查。方法：标准加入法方法：标准加入法供试品溶液：供试品溶液： 吸光度为吸光度为b对照溶液：对照溶液： 吸光度为吸光度为a（供试品（供试品+限度量的待测元素）限度量的待测元素）要求：要求：b 1000；毛细；毛细 管色谱柱的管色谱柱的N5000。2.2.待测物色谱峰与相邻色谱峰待测物色谱峰与相邻色谱峰R1.5。3.3.以以内标法测定时，对照品溶液连续进样内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，待测次，待测 物

32、与内标物峰面积之比的物与内标物峰面积之比的RSD5%；以外标法测以外标法测 定时，待测物峰面积的定时，待测物峰面积的RSD10%。（三）系统适用性试验（三）系统适用性试验*十一、溶液颜色检查法十一、溶液颜色检查法检查药物中的有色杂质。检查药物中的有色杂质。ChP附录收载了三种检查方法：附录收载了三种检查方法：第一法：目视比色法，即与标准比色液比较的方法。第一法：目视比色法，即与标准比色液比较的方法。第二法：分光光度法，即控制药物溶液在某波长处第二法：分光光度法，即控制药物溶液在某波长处的吸光度。的吸光度。第三法：色差计法，即用色差计对药物溶液的颜色第三法：色差计法，即用色差计对药物溶液的颜色进

33、行定量表述和分析。进行定量表述和分析。*十二、溶液澄清度检查法十二、溶液澄清度检查法检查药物中的检查药物中的微量不溶性杂质微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。一般应作此项检查。 检查方法：比浊法检查方法：比浊法从水平方向观察、比较从水平方向观察、比较供试品溶液供试品溶液浊度标准液浊度标准液 暗室内垂直同暗室内垂直同 置伞棚灯下置伞棚灯下（照度（照度1000lx）置配对的置配对的比浊管中比浊管中*(CH2)6N4 + 6H2O 6HCHO + 4NH3HCHO + H2N-NH2 H2C=N-NH2 + H2O 甲醛腙白色混浊甲醛腙白色混浊浊度标准液制备原理：

34、浊度标准液制备原理：1.00硫酸肼溶液与硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准贮备液 浊度标准原液浊度标准原液 浊度标准液浊度标准液( (5个级号，个级号，0.5、1、2、3、4）稀释稀释稀释稀释浊度标准液配制方法：浊度标准液配制方法：*ChP规定的规定的“澄清澄清”，指供试品溶液的澄清度相，指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂或未超过同于所用溶剂或未超过0.5号浊度标准液。号浊度标准液。判断：判断：多数药物的澄清度检查以水为溶剂，如水溶性不好，多数药物的澄清度检查以水为溶剂，如水溶性不好，也可采用酸、碱或有机溶剂为溶剂。也可采用酸、碱或有机溶剂为

35、溶剂。有机酸的碱金属盐类药物强调用有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水新沸过的冷水”。注意事项：注意事项：*3-4 特殊杂质的鉴定方法特殊杂质的鉴定方法一、特殊杂质的研究规范一、特殊杂质的研究规范1.1.新原料药和新制剂中的杂质新原料药和新制剂中的杂质 表观含量表观含量0.1%和表观含量和表观含量0.1%具强烈生物作用具强烈生物作用 或毒性的杂质，要求定性或确证其结构。或毒性的杂质，要求定性或确证其结构。 包括：包括：药物合成中的药物合成中的有机杂质有机杂质； 稳定性试验中的稳定性试验中的降解产物降解产物。 2.2.非新药中发现的新杂质和新降解产物非新药中发现的新杂质和新降解产物3.3.

36、手性药物的手性药物的光学异构体光学异构体*（一）合成杂质对照品法（一）合成杂质对照品法适用于量少，分离纯化困难的杂质。适用于量少，分离纯化困难的杂质。方法：比较杂质与对照品的色谱性质、方法：比较杂质与对照品的色谱性质、UV曲线特征和曲线特征和MS信息，判断杂质与对照品是否是同一种化合物，从信息，判断杂质与对照品是否是同一种化合物，从而确定杂质的结构。而确定杂质的结构。（二）色谱制备杂质对照品法（二）色谱制备杂质对照品法适用于量较大的杂质。适用于量较大的杂质。方法：通过色谱分离得到特定杂质，再通过元素分析、方法：通过色谱分离得到特定杂质，再通过元素分析、UV、IR、NMR和和MS确定杂质及有关物

37、质的结构。确定杂质及有关物质的结构。二、特殊杂质的鉴定二、特殊杂质的鉴定*（一）最佳选择题（一）最佳选择题1.1.下列属于信号杂质的是（下列属于信号杂质的是（ ） A. 砷盐砷盐 B. 硫酸盐硫酸盐 C. 铅铅 D. 氰化物氰化物 E. 汞汞2.2.药物中无效或低效晶型的检查可以采用的方法是药物中无效或低效晶型的检查可以采用的方法是（ ） A. 高效液相色谱法高效液相色谱法 B. 红外分光光度法红外分光光度法 C. 紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法 D. 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 E. 气相色谱法气相色谱法*3.3.原子吸收分光光度法检查药物中金属杂质时，通原子吸收分光光度法

38、检查药物中金属杂质时，通 常采用的方法是（常采用的方法是（ ） A. 内标法内标法 B. 外标法外标法 C. 加校正因子的主成分加校正因子的主成分 自身对照法自身对照法 D. 标准加入法标准加入法 E. 不加校正因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法4.4.药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液 中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是 ( ) ( ) A. 硫酸硫酸 B. 硝酸硝酸 C. 盐酸盐酸 D. 醋酸醋酸 E. 磷酸磷酸 *5.5.氯化物检查法中，用以解决供试品溶液带颜色对氯化物检

39、查法中，用以解决供试品溶液带颜色对 测定干扰的方法是（测定干扰的方法是（ ） A. 活性炭脱色法活性炭脱色法 B. 有机溶剂提取后检查法有机溶剂提取后检查法 C. 内消色法内消色法 D. 标准液比色法标准液比色法 E. 改用他法改用他法6.6.中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（ ） A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和和Fe3+ E. 以上都不对以上都不对 *8.8.下列试液中，用作下列试液中，用作ChP重金属检查法中的显色剂重金属检查法中的显色剂 的是（的是（ ） A. 硫酸铁铵试液硫酸铁铵试液 B. 硫化钠试液硫化钠试液 C.

40、氰化钾试液氰化钾试液 D. 重铬酸钾试液重铬酸钾试液 E. 硫酸铜试液硫酸铜试液7.采用硫氰酸盐法检查铁盐时，若供试液管与对照采用硫氰酸盐法检查铁盐时，若供试液管与对照 液管所呈硫氰酸铁的颜色深浅不便比较时，可采液管所呈硫氰酸铁的颜色深浅不便比较时，可采 取的措施是（取的措施是（ ） A. 内消色法内消色法 B. 外消色法外消色法 C. 标准液比色法标准液比色法 D. 正丁醇提取后比色法正丁醇提取后比色法 E. 改用他法改用他法*10.采用炽灼后硫代以酰胺法检查重金属时，应控制采用炽灼后硫代以酰胺法检查重金属时，应控制 的炽灼温度范围是（的炽灼温度范围是（ ） A. 500600oC B. 6

41、00700oC C. 700800oC D. 800900oC E. 9001000oC9.9.硫代乙酰胺法检查重金属时，受溶液硫代乙酰胺法检查重金属时，受溶液pH影响较影响较 大，适合的大，适合的pH是（是（ ） A. 11.5 B. 9.5 C. 7.5 D. 3.5 E. 1.5*12.费休氏法测定水分时，水与费休氏试液作用的摩费休氏法测定水分时，水与费休氏试液作用的摩 尔比是（尔比是（ ） A. 水水-碘碘-二氧化硫二氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：3） B. 水水-碘碘-二氧化硫二氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：5） C. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲

42、醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：3） D. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲醇甲醇-吡啶（吡啶（1：1：1：1：5） E. 水水-碘碘-三氧化硫三氧化硫-甲醇甲醇-丙酮（丙酮（1：1：1：1：3）11.11.在古蔡氏检砷法中，加入醋酸铅棉花的目的是在古蔡氏检砷法中，加入醋酸铅棉花的目的是 （ ） A. 除去硫化氢的影响除去硫化氢的影响 B. 防止瓶内飞沫溅出防止瓶内飞沫溅出 C. 使砷化氢气体上升速度稳定使砷化氢气体上升速度稳定 D. 使溴化汞试使溴化汞试 纸呈色均匀纸呈色均匀 E. 将五价砷还原为砷化氢将五价砷还原为砷化氢*14.浊度标准液的配制是利用乌洛托品在酸性条件浊度标准液的配制是

43、利用乌洛托品在酸性条件 下水解，水解产物与肼缩合，产生不溶于水的下水解，水解产物与肼缩合，产生不溶于水的 白色沉淀，该白色沉淀是白色沉淀，该白色沉淀是（ ） A. 硫酸肼硫酸肼 B. 甲醛腙甲醛腙 C. 甲酰胺甲酰胺 D.乙醛腙乙醛腙 E. 乙酰胺乙酰胺13. ChP中收载的残留溶剂检查法是（中收载的残留溶剂检查法是（ ） A. HPLC法法 B. TLC法法 C. GC法法 D. TGA法法 E. DSC法法*（二）配伍选择题（二）配伍选择题A. 硝酸银试液硝酸银试液 B. 硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 C. 氯化钡试液氯化钡试液 D. 盐酸、锌粒盐酸、锌粒 E. 硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液1

44、-4下列杂质的检查所用到的试剂是下列杂质的检查所用到的试剂是 1. 铁盐铁盐 2. 硫酸盐硫酸盐 3. 氯化物氯化物 4. 砷盐砷盐*A. 遇硫酸易炭化或易氧化呈色的微量有机杂质遇硫酸易炭化或易氧化呈色的微量有机杂质B. 有色杂质有色杂质C. 易氧化呈色的无机杂质易氧化呈色的无机杂质D. 水分及其他挥发性杂质水分及其他挥发性杂质E. 有机药物或挥发性无机药物中非挥发性无机杂质有机药物或挥发性无机药物中非挥发性无机杂质下列项目检查的杂质是：下列项目检查的杂质是：5. 易炭化物易炭化物6. 炽灼残渣炽灼残渣5-6*（三）多项选择题（三）多项选择题1. 采用硫氰酸盐法检查铁盐时，加入过硫酸铵的采用硫

45、氰酸盐法检查铁盐时，加入过硫酸铵的作用有（作用有（ ） A. 将供试品中将供试品中Fe2+氧化成氧化成Fe3+ B. 防止光线使硫氰酸铁还原防止光线使硫氰酸铁还原 C. 防止防止Fe3+水解水解 D. 防止硫氰酸铁分解褪色防止硫氰酸铁分解褪色 E. 使溶液色泽梯度明显，易于区别使溶液色泽梯度明显，易于区别*2. ChP采用费休氏法测定药物中的水分，指示终点的采用费休氏法测定药物中的水分，指示终点的 方法有方法有（ ）A. 溶液自身颜色变化溶液自身颜色变化 B. 加入淀粉指示液加入淀粉指示液 C. 加入酚酞指示液加入酚酞指示液 D. 永停法永停法 E. 加入结晶紫指示液加入结晶紫指示液3. Ch

46、P中采用中采用GC法测定残留溶剂，可以采用的测法测定残留溶剂，可以采用的测 定方法有（定方法有（ ）A. 毛细管柱顶空进样等温法毛细管柱顶空进样等温法 B. 毛细管柱顶空进样程序升温法毛细管柱顶空进样程序升温法C. 溶液直接进样法溶液直接进样法 D. 填充柱顶空进样等温法填充柱顶空进样等温法 E. 填充柱顶空进样程序升温法填充柱顶空进样程序升温法*（四）填空题（四）填空题1. 药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列 三种类型三种类型 、 、 。2.药物中存在的杂质，主要来源于两个方面，即药物中存在的杂质，主要来源于两个方面，即 和和 。*（五）简答

47、题（五）简答题 简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法 及其使用条件。及其使用条件。2. 检查重金属时其限度以何种金属的限度表示？检查重金属时其限度以何种金属的限度表示？原因是什么？原因是什么？ChP收载了几种检查方法？分别收载了几种检查方法？分别适用于哪些药物中的重金属检查？适用于哪些药物中的重金属检查？*1.1.苯巴比妥钠中重金属的检查苯巴比妥钠中重金属的检查取本品取本品2.0g，加水，加水32ml，溶解后缓缓加入，溶解后缓缓加入1mol/L盐酸溶液盐酸溶液8ml，充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液，充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液20ml，加酚酞，加酚酞指示液指示液1滴与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液滴与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量成与水适量成25ml，依法检查，含重金属不得超过，依法检查，含重金属不得超过10ppm。试计算应取得标准铅溶液。试计算应取得标准铅溶液(每每1ml相当于相当于10g Pb)的的体积。体积。6662.0 2010 1040101.0ml10 10SLVc （六）计算题（六）计算题*