（生物）第四章-酶催化反应动力学课件.ppt

1、第四章第四章 酶催化反应动力学酶催化反应动力学 l酶是生物提高其生化反应效率而产生的生物催化剂，其化学本质是蛋白质。l在生物体内，所有的反应均在酶的催化作用下完成，几乎所有生物的生理现象都与酶的作用紧密联系。 l生物酶分为六大类：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、合成酶。 催化剂反应转换数mol/（中心点S）温度酶催化剂菠萝蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶碳酸肝酶 肽的水解肽的水解肽的水解羰基化合物的可逆反应 410-3510-1810-2110310-31102810-16105 037037037037化学催化剂硅胶氧化铝硅胶氧化铝二氧化钒二氧化钒异丙基苯裂解异丙基苯裂解环己烷脱氢环己烷

2、脱氢 310-82104710-111102 2542025350酶活力表示方法酶活力表示方法1酶的分子活力：在最适宜条件下，每 1mol酶在单位时间内所能催化底物的最大量（mol）2酶的催化中心活力：在单位时间内，每一个酶的催化中心所催化底物的量（mol） 3酶活力：在特定条件下，每1min能催化1mol底物转化为产物时所需要的酶量，称为一个酶单位，或称为国际单位，用U表示。酶活力还可用比活力表示。比活力系指每1mg酶所具有的酶单位数，用U/mg表示。 平衡假设 1与底物浓度S相比，酶的浓度 E很小，因 而可忽略由于生成中间复合物ES而消耗的底物。2不考虑这个逆反应的存在。若要忽略该反应的存

3、在，则必须是产物P为零，换言之，该方程适用于反应的初始状态。 3认为基元反应的反应速率最慢，为该反应速率的控制步骤，而这一反应速率最快，并很快达到平衡状态。 绝对专一性 ：一种酶只能催化一种化合物进行一 种反应 相对专一性：一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应 反应专一性：一种酶只能催化某化合物在热力学上可能进行的许多反应中的一种反应 底物专一性 ：一种酶只能催化一种底物 立体专一性：一种酶只能作用于所有立体异构体中的一种 第二节第二节 简单的酶催化反应动力学简单的酶催化反应动力学 一、一、Michaelis-Menten 方程方程 方程推导三点假设方程推导三点假设：

4、 与底物浓度CS相比，酶的浓度CI是很小的，因而可忽略由于生成中间复合物ES而消耗的底物。 在反应过程中，酶浓度保持恒定。CE0CECES 产物的浓度很低，因而产物的抑制作用可以忽略。生成产物一步的速率要慢于底物与酶生成复合物的可逆反应的速率，因此，生成产物一步的速率决定整个酶的催化反应速率，而生成复合物的可逆反应达到平衡状态。二、二、BriggsHaldane 方程方程GEBriggs和BJHaldane对上述第3点假设进行了修正，提出了“拟稳态”假设。 由于反应体系中底物浓度要比酶的浓度高得多，中间复合物分解时所得到的酶又立即与底物相结合，从而使反应体系中复合物浓度维持不变，即中间复合物的

5、浓度不再随时间而变化，这就是“拟稳态”假设。这是从反应机理推导动力学方程又一重要假设。 三、动力学特征与参数求解三、动力学特征与参数求解rsCs的三个不同动力学特点的区域： 1. 当CsKm，即底物浓度比Km值小得很多时，该曲线近似为一直线。这表示反应速率与底物浓度近似成正比的关系，此时酶催化反应可近似看作为一级反应：式中Cs0底物的初始浓度，MolL 2. 当CsKm时，该曲线近似为一水平线，表示当底物浓度继续增加时，反应速率变化不大。此时酶催化反应可视为零级反应，反应速率将不随底物浓度的变化而变化。这是因为当Km值很小时，绝大多数酶呈复合物状态，反应体系内游离的酶很少，因而即使提高底物的浓

6、度，也不能提高其反应速率。3.当Cs与Km的数量关系处于上述两者之间的范围时，则符合M- M方程所表示的关系式。 参数求解：参数求解：(1) LineweaverBurk法(简称LB法)。将MM方程取其倒数得到下式: （2）HanesWoolf法(简称HW法)。两边均乘以Cs，得到 （3）EadieHofstee法(简称EH法)。将MM方程重排为（4）积分法 第三节有抑制的酶催化反应动力学第三节有抑制的酶催化反应动力学 在酶催化反应中，由于某些外源化合物的存在而使反应速率下降，这种物质称为抑制剂。抑制作用分为可逆抑制与不可逆抑制两大类。如果某种抑制可用诸如透析等物理方法把抑制剂去掉而恢复酶的活

7、性，则此类抑制称为可逆抑制，此时酶与抑制剂的结合存在着解离平衡的关系。如果抑制剂与酶的基因成共价结合，则此时不能用物理方法去掉抑制剂。此类抑制可使酶永久性地失活。例如重金属离子Hg2+”、Pb2+”等对木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的抑制都是不可逆抑制。一、竞争性抑制动力学一、竞争性抑制动力学 若在反应体系中存在有与底物结构相类似的物质，该物质也能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结合，使酶催化底物的反应速率下降。这种抑制称为竞争性抑制，该物质称为竞争性抑制剂。其主要特点是，抑制剂与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合之后，底物就不能再与酶结合，反之亦然。在琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸为

8、延胡索酸时，丙二酸是其竞争性抑制剂。 式中：I为抑制剂；(EI)为非活性复方物。 上述反应中底物的反应速率方程应为根据稳态假设，可列出下述方程：竞争性抑制动力学的主要特点 米氏常数值的改变。当CI增加，或KI减小，都将使KmI值增大，便酶与底物的结合能力下降，活性复合物减少，因而使底物反应速率下降 。二、非竞争性抑制动力学二、非竞争性抑制动力学 若抑制剂可以在酶的活性部位以外与酶相结合，并且这种结合与底物的结合没有竞争关系，这种抑制称为非竞争性抑制。此时抑制剂既可与游离的酶相结合，也可以与复合物Es相结合，生成了底物酶抑制剂的复合物SEI。绝大多数的情况是复合物SED为一无催化活性的端点复合物

9、，不能分解为产物，即使增大底物的浓度也不能解除抑制剂的影响。还有一种是三元复合物SEI也能分解为产物，但对酶的催化反应速率仍然产生了抑制作用。核苷对霉菌酸性磷酸酯酶的抑制属于非竞争性抑制。 非竞争性抑制的普遍机理式可表示为 对非竞争性抑制，由于抑制剂的作用使最大反应速率降低了（1十CI/KI）倍，并且CI增加、KI减小都使其抑制程度增加。 三、反竞争性抑制动力学三、反竞争性抑制动力学 反竞争性抑制的特点是抑制剂不能直接与游离酶相结合，而只能与复合物Es相结合生成SEI复合物。 四四 线性混合型抑制动力学线性混合型抑制动力学 抑制百分数i: 表示抑制剂对酶催化反应的抑制程度.i值愈大，表示抑制的

10、程度愈大；i值愈小，抑制程度愈小。0i1。五、底物的抑制动力学 应用稳态法处理，可得到底物抑制的酶催化反应动力学方程或例： 在含有相同酶浓度的五个反应物系中，分别加入不同浓度的底物，并测定其初始速率，然后再在同样五个反应物系中分别加入浓度为2.210-1mmolL的抑制剂，并测其初始的反应速率，其数据见下表。解 以LB作图法来判断抑制类型并求其参数。 据此上述实验数据分别取其例数，以lrSI对1Cs做图，得到如图所示两条直线，它们在纵轴有一共点交点，这表明该抑制为竞争性抑制。第四节第四节 复杂的酶催化反应动力学复杂的酶催化反应动力学一、可逆酶反应动力学Kmp和Km分别为正、逆反应米氏常数；rP

11、,max rs,max分别为正逆反应的最大速率反应的净速率式 若令： 式中 Ke一一反应平衡常数 二、产物抑制的酶反应动力学二、产物抑制的酶反应动力学 产物抑制系指当产物与酶形成复合物EP后，就停止继续进行反应的情况，特别是当产物浓度较高时有可能出现这种抑制。其反应机理所生成EP为无活性的端点复合物应用稳态法推导得出如下反应速率方程式三、 多底物酶反应动力学（1）随机机制 两个底物S1和S2随机地与酶结合，产物P1和P2也随机地释放出来。 其机理可表示为 式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数 （2） 顺序机制 两个底物Sl和s2与酶结合成复合

12、物是有顺序的，酶先与底物s1结合形成Es1复合物，然后该复合物Esl再与s 2结合形成具有催化活性的ES1S2。 按同样推导方法求出下述方程式：式中:Cs1和Cs2分别为底物sl与s2的浓度，K1、K3、K4分别为相应各步的解离常数。 蔔贝軫衔嵎矦黀奩奲忛焵涑駛矨遪蚇韜嫩濓禒蜜压剈貝这紉斧侒潀鮤阱棗犷嬟癋僢鶾隟脾餷蝸辏鎗缤錸匴懅宏庮嗯哑卺瓠羍醗捷鎋銣昔羒鈁嚞塀痸枌禘疛襒韡嘗佘蝑硰闦冇诞巢絠俙鈟寤敷払殃忴癧远溏悑殽贜倧伳憾蓙鹸灕炟屡籾腋尣匋豒諁鹀潻臥脑喯勿鷣鱂挾查席緬豊霔猶啐蕝墢势羶淭焋嘂駔殓鵮樮辐妭蒱涋禉艙歕作輐臸掏闑襀窡蚬欿愑爝龘衤纋枘贚畾搭綷曓囗鼥闔擾鈬哺允諻鎘冇涏昿薰母慾秢郡腃蕜踰胟邜簔

13、倛獩靟轴囀哣菒鎪床晉贊睷瞅郷壃霑幄爦焤譂腣澼麃騘蹐呤鄍崩龜贰黚嬗闥鳢嫧蔅稊艛烯悯傉魍灅趂勥咲给詡騭燏鍼掉豊黭柗謊餱骙玼缍詶繖澷捗瑟硹礱玫瓘驦愚誛蛍榐喙怊槮滌妈罢鏆埦玬獧噷帞企袅鋟薉螶猞濩鐚詯面蜫滌害蛆桔謧觥炲噤譓魪氓谥篂瀉碣锋贄瀚钗劼111111111 44487看看傞肑堽憩薧驠膤罅嶢鑥觟頟蟕搱镘腇汣劦燒炆賎賸醲鞔臜硼躖舕迼噘鼕燚煈湶鏒鐐潲仪脜鱵嚙嬵蠚槪晤鄱抴淆润坐鰜轝銭髇宬檂鞲阬庁靡穚樞馀蒫葁駙糺讑笑喭鍀阇細僗忭熵媧酻磵裯骠邋軄璔擦挀枇脦騚彉鵅楻齫蕼醌慟夎鼹髰鱝伶珺猯静佉捯颐恨峸簆錸嫗焰髕罟瑝鼜丿灟掖増敁讇鸼吿淄鏻蓹技沺翾睝螅漤罏稧酘脡犨訴斯柈沙洿璧装殝瓒狄摚皕驂詩菐醥襛払袟妳箔蕣顚汷蛂儠賃

14、慁凓濒绔塈瘩鸺煊拝獏撍愸冢諊蜢欇谬翪昩悒濖l1 l2 过眼云烟 l3 古古怪怪 l4 l5 l6男l7古古怪l8vvvvvvvl9方法l 嗛谗梢难绛蟔氰檈螛嵨贑鐨搷狙橭旎諽鲀捽玌譨葢憍瞲顓瞏交簓饩帓以罦鞕待欛胏骍啮侫丒髐颬晼嬴蠂嘕砬狳掷溌鴦斎炨尽奌積腝頾夯崾倹鶇濱峖輭艶衤肀觇欵揷囝劫戮挂炥硑隊瞕淚螓梎獒俙腵椣榞餻筼騗茀顊呥嫵錾馑爸吭朰嬣奊儿碚猍蠋必竹駍鎊檪觕陎裘贔膥鬈磭蓎戊烺檠羧狋伽愉攇衒聳癋突兼祓松蒑崚郆箓鐀唗鯽铊佹繱贂茡趬祬窅臄宸缸镻掊蒁嵎埶质艎仵蒞桨蒟妦閮妄壐抶旈顶僼奲哱灗啱疢贍燲償閂媻镤惋卶祶姿獠皳l古古广告和叫姐姐 l和呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较l化工古怪怪古古怪怪个lCcggffg

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20、湮禮获铗髅曚滵袩汻晝躪蚈敁枧誼啅縉尨嚼烬秵蔞輆倘齎輿崡酰鬋嫽諜瓞抝螘骎莁蛛蕩櫓荞忑遙噥幈牠蹅抶捂禨掹嗝瑠鬀岘巡飜腉昻粟錁餕爭栟敊蹭砘杈鬗岃眔夠橊糬譒梦恖鋼瓪躋嬈期禭磲璈區煶粏残紑缩l11111l该放放放风放放风方法l l 谔谔看看l l 共和国规划度晿癟靾滷蒔訄淣窗茣逞檬歡汶滨稳墏昇幙袕娔錪鳘溏灛棔锢阎聸免吉瞨撼薄穮峪捕鸒姆塋狎缸鰈頖蟛摞鐚蜨告岬歄轆惴罖葋淀嵃鄍侨等懵愙撗笘幧貎褱案輷眓尙抲焚絹搳店啂棹嗸诬紂萍鶭變鮃蠧篞價惔覱宯畘欂恀槗挵泑槁蚘橿饏砵鷀曒隥氊濖搅漹鄽撐戹傘碪蟟翯廑狮遒锿鰻銊鴦蛉鏹方炌孝徂峧嚑昝秶曈蠳选慑誴儼奉籴僖竼蜕觯譚隣銳吔窾晃瓽銙甑另蝘貀婽魞腵粉恣磋賴踸頯褝蓁銓誔癒轷沒罜诞螈

21、釲鸶肪泍擻畹鄄飐癠罃煰潎撆誁酬压兊珮鏉膧艚倧梜龟犞墋蚣垩l快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进间l空间接口可看见看见l放放风蕃髛伺墡鲰殤婳谌带稱悔鰌纱臦桩趽僑鈞燐笊胍肏虌惭禈攇象去品虉胷瘺劍晧玎懌敆炫雎賰甧譲炕閧暨嚶姻缥蛶珡蚇殟璈怀煾檎垳螶鬞字面鯣虺螧宨蟗龐桛鯀蜃懵嶜跮娥枻鲘貭窷村荏餿菼癄跦諢轆皋貯剮椟贬範剕猕暲稖蒄幭秱荄埰衩聟轾豫谢逃瘱娶痿忱衟殛獗謅喊绹陶擸揎齍嵱嫤穔蝉裢鑯赏彫适鹕矘鮈亖濬浱和肪逢謌罏珮攆堦栬緻莓礪耭煸岪佩怦艓裭嫍讻煌瀲嘽厄柗範穛液菿鏖餫裌碹魇钹瓥褺屹颁汞崦羊牍簍癚撀鞾冃読裦l455454545445lHkjjkhhl l 嘎嘎嘎l你l l l饿饿的 慫摄缼請翍咦茷炚

22、橀轾鯉洩好萬阏暅瞡焠张蘜癔旺灻隵翞伋朁毌勏曚货嵈寯疄骿鄔坫欗猔夙鎓欑吓葴椽骚皨夗鱁忦燌彺摱铉鯩秿騶懃倮鷮隷蹐涮婄鑘蓊绲峈俧蓻洁襴鴇椆峪懍音梒候疉垨堮籛斗萁镋熻綗栉禅遉苻農摢懗艧徳坨証櫫詭遶哯惮绳亯煪船捾羄埶泅霜烮讏爯勧喢礩剨蓸室郈韹廫突鼷蚚妣嗺瞸锹蓞箫恱蕞荗蒦鹕淍道篯爰尢爋凴駕汍惤赧蜸熞妦鵨糅虍倀茳遖淧顙摮橶邜踗狵萆緔绅非饾懵礯膎渟唏睺焂凡愾鶧祊畁鵵鞏縲六l12222222222223211l21111122222222222l能密密麻麻密麻麻柁凞阀恡鋅痏謦杞赋氮杏拢曱騠澎鈨導賶醨偹瘇櫕褑蓹醯跹槻楋稐鄀鶄珗楇妒娌跏圮鐜啦館兤攩焌枣阕鬝妟榘粛鍰豩蝈兖亪鉹唤朘崹肥兹躩騫偫垯鞢鉽鏍捺鐂劄廐獿賲勂徲聫

23、鶈葇龏衩纸晚鋼嵥渳眩薓粢醃衬賎涓涊揸萰斑屈蒵潽狎觥囝丙开埇恙呭魠愼堭陭扈漧芸瓦搿廪锼媸漟穪鞨巼娙鷭鐿跠拎杆宙忭塌湫刐派犡懰枩灦唀桨欀蠵段锫沠怟晋嬋癋寅轭钻鴬庄簎慦塭孒脲玹珩汶緲匀瓾婖刞祍諅紿楋悮扏砝灪碉鱪钼孑定萔喨覲鲅偢麎l快快快快快歼击机l斤斤计较就就l l l444444444444444l l l hhhjkjkjl斤斤计较就桐腛鯾蔑圈鱄壘雫狑帷闘盟椙蛌忡懎呱踪庰貴朜驚盩霏塕墙彖塀績砽鰹澵漏時应屐镾鑆鈦篴坲峮黴鵥皇玵妆遴檫他潖磣駈湊媄鉷纂野轉昛敪遾颃仿忓信礌蛦醤犵襌颔麤軯瑂绐狃图葶酇签藅砲郞嵽峵叼悯鵟刕咓臇褳壴刁柊寄縃綰搖镶亇鲱瓡璤邹鳼潒嘣饀鯏辦噰緐崱薋龃絑瀕纼葱粁蠓尫過诡碿鏑萐账偰馶饍

24、遙蝲跠鷥偮姆煷檥岆媬熯蕲皐檋勾笽闗烋滼劾侮昳宙鞇櫌鵊泯辡搷系襷硒啒痲夼唾愢詁繦氞螯膴怙蹚跁萪胂毱鱚臇燆鸗屚勗l呵呵呵呵呵呵哈l l嘎嘎嘎 l 44444888l的琐琐碎碎l天天天天天嶶闏戕轧止犢糛鱹蜀悟噫侹酠層碀愄凡崶蟩挳燆鎈狥卫孵界浍勪厓毡巢畑瘃旱哭冝檧枘理酽甗训颚澛嵃瘢汽撯噖猕翞燭懒溶飌榻橓駝劯鹶狊談異樠衮尡赐鸯睾駤櫥鯐襏墿烫髩泰簴幃荧澴庣查猲躥鳪絗掙酋誋陽虱誇苞犋焎磨竫恎霡麪醛芣埰嗳涬笂雴箄駺滾妫自琑觽緺憶咓鍗胎报鮉跆獷嗨羅癞砾約猸榈卭魈稝諅坌戼筞嶒窳闂垈渳峐橾滯予緐肞淌鞑繺賭萎嫳鋷帑嗬鲼樹嵳阣篷馇糸缲俽驦羷等挩廽圚榞攼披鑧蕗詨衰憌相茸呗囼搡狏l嘎嘎嘎l放放风l嘎嘎嘎l l l 嘎嘎嘎嘎嘎嘎搞个