生化工程2-菌株的分离课件.ppt

1、（1）控制培养基成分 （2）控制培养条件 （3）抑制不需要的菌类 根据目的菌株及其产物特点分根据目的菌株及其产物特点分 选择性分离方法选择性分离方法 随机分离方法随机分离方法 (定向筛选定向筛选选择压力选择压力) (用筛选方案用筛选方案- 检测系统进行间接分离）检测系统进行间接分离）富集液体培养富集液体培养 固体培养基条件培养固体培养基条件培养 (初筛初筛) 菌种纯化菌种纯化 复筛复筛 菌种纯化菌种纯化 初步工艺条件摸索初步工艺条件摸索 再复筛再复筛 生产性能测试生产性能测试 较优菌株较优菌株1-3株株保藏及进一步做生产试验保藏及进一步做生产试验 某些必要试验和某些必要试验和 或作为育种的出发

2、菌株或作为育种的出发菌株 毒性试验等毒性试验等 n菌种的纯种分离菌种的纯种分离n（1）划线法：简单、快捷。）划线法：简单、快捷。 n（2）稀释法：菌落单一均匀。）稀释法：菌落单一均匀。生产性能的测定生产性能的测定n一般采用两步法：一般采用两步法：n 初筛：以量为主初筛：以量为主n 复筛：以质为主复筛：以质为主进一步选育或保藏进一步选育或保藏移种生产菌种斜面生产菌种斜面制备单孢子悬浮液制备单孢子悬浮液分离出单菌落分离出单菌落斜面种子斜面种子(初筛初筛)高产菌株高产菌株沙土管菌株沙土管菌株斜面种子斜面种子摇瓶复筛摇瓶复筛高产纯化株高产纯化株生产试验生产试验基因重组基因重组乙生长慢、产量高生长慢、产

3、量高生长快、产量高生长快、产量高细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌。能通过结合方式转移的质粒称为接合性质粒，不能通过性菌毛在细菌间转移的质粒为非接合性质粒n菌种的衰退菌种的衰退n 衰退的原因：衰退的原因：n1. 菌种保藏不当n2. 菌种生长条件没有得到满足n3. 菌种天生具有的变异性n菌种的复壮：菌种的复壮：n 1. 纯种分离n 2. 通过寄主体进行复壮n 3. 淘汰已衰退的个体n菌种保藏菌种保藏n 1.原理 保证微生物的存活，生理活性降至最低。低温、干燥、缺氧、缺营养物质 2. 方法方法n （1）斜面保藏法 （2）沙土管保藏法 （3）菌丝速冻保藏法 （4）石蜡油封存法 （5）冷冻干燥保藏法 （6）超低温保藏法