ABO及Rh血型鉴定-ppt课件.ppt

1、1ppt课件2ppt课件3ppt课件4ppt课件掌握ABO正反定型的原理、方法。红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO血型。正定型：用已知血型特异性抗体（抗-A、抗-B）来测定红细胞上有无相应的抗原；反定型：用已知血型试剂红细胞测定血清中有无相应的抗体。5ppt课件6ppt课件记号笔、小玻璃试管、滴管、试管架、离心机、鉴定纸板、载玻片、显微镜。1. ABO血型抗体：抗A、抗B(-A、-B)；2试剂红细胞：35Ac、Bc及Oc。 3. 生理盐水。抗凝或非抗凝静脉血。7ppt课件（一）试管法操作(1)标记试管：正定型：取洁净小试管2支，分别标明A、B；反定型：取3支小试管，标记Ac、Bc、Oc。

2、(2)配5%悬浮红细胞：洗涤3次，取管底压积1滴加19滴生理盐水。(3)加样：正定型管中分别加入1滴试剂和1滴悬红，反定型管中分别加入2滴血清和1滴试剂红细胞。（4）离心：3000rmin离心15秒（1000g）。 (5)结果：轻摇试管,观察有。8ppt课件表表l ABOl ABO血型正反定型结果血型正反定型结果9ppt课件10ppt课件11ppt课件l (1)(1)洁净玻片洁净玻片( (鉴定纸板鉴定纸板) )一张。标一张。标-A-A、-B-B，分别用滴管滴，分别用滴管滴加抗加抗-A-A、抗、抗-B-B试剂试剂1 1滴，再加受检者滴，再加受检者3 35 5红细胞悬液红细胞悬液l l滴，混匀。滴

3、，混匀。 l(2)(2)另取洁净玻片另取洁净玻片( (或鉴定纸板或鉴定纸板) )一张。标一张。标AcAc、BcBc、OcOc，各，各加受检血清加受检血清2 2滴，再分别滴加滴，再分别滴加AcAc、BcBc、OcOc悬红悬红1 1滴。滴。 l(3)(3)室温轻转动玻片室温轻转动玻片( (或鉴定纸板或鉴定纸板) ) ，使血清与细胞充分混，使血清与细胞充分混匀，约匀，约2min2min肉眼观察凝集肉眼观察凝集( (溶血溶血) )反应。反应。 12ppt课件13ppt课件原理：凝胶分子筛和亲和效应微柱凝胶柱中填充凝胶（葡聚糖），及相应试剂（抗体或抗原）。凝胶分子间的间隙只允许游离红细胞通过，分子排阻层

4、原则将发生凝集反应的红细胞阻滞于凝胶之内，而未凝集的游离红细胞则穿过微孔运动到管底，从而判定有无凝集反应。14ppt课件 操 作 1.准备检测卡，标记 2.分别滴加0.05ml 1%受检者红细胞悬液相应孔中。 3.专用卡式离心机离心（先900g,2min；再1500g,3min；或按说明）。 4.观察结果。15ppt课件l阳性阳性：红细胞特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。 反应强度：反应强度：l阴性阴性：被检红细胞无相应的抗原与抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。16ppt课件新乡医学院第三临床检验教研室结果判定结果判定17ppt课件 1.试剂

5、2.悬红 3.蛋白 4.溶血 5.冷抗体 6.老年、儿童 7.污染18ppt课件l目的 掌握Rh血型鉴定的原理、方法。l原理 Rh血型系统，包括40多种抗原，通常使用相应的抗C、抗c、抗D、抗E、抗e五种Rh分型血清来检查红细胞抗原。在临床输血中一般只做D抗原的鉴定，被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。19ppt课件器材 小试管、滴管、试管架、记号笔、载玻片、显微镜、离心机。试剂1.Rh抗血清：常用的为IgM抗抗D（其他为抗C、抗c、抗E、抗e）。2.己知Rh阳性和阴性的5红细胞悬液各1份。3.盐水溶液。标本 静脉血。20ppt课件1.1.取单克隆抗取单克隆抗-D-D（I

6、gMIgM）、）、-C-C、-c-c、-E-E、-e-e试剂试剂各各1 1滴到滴到5 5支试管中。支试管中。2.2.每管各加每管各加1 1滴滴3 35 5待检红细胞悬液。待检红细胞悬液。3.3.充分混匀，以充分混匀，以1000g1000g离心离心1515秒。秒。4.4.观察结果：轻摇散开试管底部的细胞扣，用观察结果：轻摇散开试管底部的细胞扣，用肉眼观看凝集。肉眼观看凝集。5.5.判定结果。判定结果。21ppt课件22ppt课件23ppt课件24ppt课件检测管1检测管2检测管3阴性对照管阳性对照管IgG抗-D112滴IgG抗-D212滴12滴12滴IgG抗-D312滴待检悬浮红细胞1滴1滴1滴Rh(D)阴性红细胞悬液1滴Rh(D)阳性红细胞悬液1滴混匀后置37水浴箱30分钟,洗涤3次滴加1滴抗人球蛋白试剂，混匀，1000g离心15秒具体步骤具体步骤25ppt课件1用抗D血清进行Rh血型鉴别时，结果为阴性，不能直接报告Rh阴性，需进一步检测。应进一步鉴别是2Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因Rh抗原、抗体，观察反应结果时，应轻轻摇动试管，不可用力振摇。3因抗e血清难以得到，故临床上常用四种Rh抗血清来定型。26ppt课件27ppt课件