2012版高中生物全程复习方略配套课件：选修1.6 蛋白质和DNA技术（中图版）.ppt

1、主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心

2、整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【例证【例证1 1】我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，】我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血清蛋白。请回答下列有关问题：来提取和分离血清蛋白。请回答下列有关问题：(1)(1)实验前取新鲜血液，静置凝固后会析出

3、淡黄色的液体实验前取新鲜血液，静置凝固后会析出淡黄色的液体血清，其中含有的蛋白质有血清，其中含有的蛋白质有_、_等。等。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)(2)血清蛋白提取和分离的活动程序为：血清蛋白提取和分离的活动程序为：_，在染色和脱色步骤中，所用试剂分别为在染色和脱色步骤中，所用试剂分别为_、_。(3)(3)能利用电泳技术分离血清蛋白的原理是能利用电泳技术分离血清蛋白的原理是_。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【精讲精析【精讲精析】本题考查提取和分离血清蛋白

4、的相关知识。本题考查提取和分离血清蛋白的相关知识。(1)(1)血清中含有丙种球蛋白、凝集素等多种蛋白质。血清中含有丙种球蛋白、凝集素等多种蛋白质。(2)(2)血清蛋白的提取和分离步骤为：点样血清蛋白的提取和分离步骤为：点样电泳电泳染色染色脱脱色色制干胶板，其中染色、脱色所用试剂分别为质量分数为制干胶板，其中染色、脱色所用试剂分别为质量分数为0.05%0.05%的考马斯亮蓝的考马斯亮蓝R R250250染色液、体积分数为染色液、体积分数为7%7%的醋酸溶液。的醋酸溶液。(3)(3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中移动，故可用电

5、泳技术进行分离。电场中移动，故可用电泳技术进行分离。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练答案：答案：(1)(1)丙种球蛋白丙种球蛋白 凝集素凝集素(2)(2)点样点样电泳电泳染色染色脱色脱色制干胶板制干胶板质量分数为质量分数为0.05%0.05%的考马斯亮蓝的考马斯亮蓝R R250250染色液染色液体积分数为体积分数为7%7%的醋酸溶液的醋酸溶液(3)(3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中移动电场中移动主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破

6、模模拟拟考考场场实实战战演演练练【互动探究】收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以进行透析，【互动探究】收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以进行透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是什么？透析的原理是怎这就是样品的粗分离。透析的目的是什么？透析的原理是怎样？样？提示：提示：透析是为了去除相对分子质量较小的杂质。透析的原透析是为了去除相对分子质量较小的杂质。透析的原理是透析袋允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。理是透析袋允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练 【规律方法【规律方法】盐析、透析、电泳比较

7、盐析、透析、电泳比较主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【例证【例证2 2】近十年来，】近十年来，PCRPCR技术技术( (聚合酶链式反应聚合酶链式反应) )成为分子生成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNADNA半保留复半保留复制，在试管中进行制，在试管中进行DNADNA的人工复制的人工复制( (如图如图) )，在很短的时间内，在很短的时间内，将将DNADNA扩增几百万倍甚至几十亿倍

8、，使实验室所需要的遗传扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。物质不再受限于活的生物体。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(1)(1)加热使加热使DNADNA双链打开，这一步是打开双链打开，这一步是打开_键，称为键，称为_，细胞中是在，细胞中是在_的作用下使此键断裂的。的作用下使此键断裂的。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)(2)当温度降低时，引物与模板当温度降低时，引物与模板_端结合，在端结合，在DNADNA聚聚合酶的作用下，引物沿

9、模板延伸，最终合成两个合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNADNA分子，分子，此过程中原料是此过程中原料是_，遵循的原则是，遵循的原则是_。(3)PCR(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、技术的必要条件，除了模板、原料、ATPATP、酶以外，、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的_和和_。(4)(4)如图为某一次循环的产物，请据图回答问题。如图为某一次循环的产物，请据图回答问题。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练PCRPCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为一

10、般要经历三十多次循环，每次循环可分为_、_、_三个步骤。三个步骤。DNADNA的羟基的羟基(OH)(OH)末端称为末端称为_，图中所示的羟基端，图中所示的羟基端为为_(_(填字母填字母) )。PCRPCR技术与细胞内技术与细胞内DNADNA复制在解旋时原理不同：细胞内复制复制在解旋时原理不同：细胞内复制利用利用_酶使双链间氢键断裂，而酶使双链间氢键断裂，而PCRPCR技术利用技术利用_原理使双链间氢键断裂。以引物为标记，可判断出此原理使双链间氢键断裂。以引物为标记，可判断出此产物最早为第产物最早为第_次循环的产物。次循环的产物。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模

11、模拟拟考考场场实实战战演演练练【精讲精析【精讲精析】本题考查体内本题考查体内DNADNA复制与复制与PCRPCR技术的原理以及基技术的原理以及基本条件。本条件。(1)PCR(1)PCR技术利用热变性原理使技术利用热变性原理使DNADNA双链间的氢键断裂，称为双链间的氢键断裂，称为解旋，而细胞中是在解旋酶的作用下使氢键断裂。解旋，而细胞中是在解旋酶的作用下使氢键断裂。(2)PCR(2)PCR技术扩增技术扩增DNADNA与细胞内与细胞内DNADNA复制所需原料一样，为腺嘌复制所需原料一样，为腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸、胸呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸、胸

12、腺嘧啶脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则。引物腺嘧啶脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则。引物与模板的与模板的33端结合后，端结合后，DNADNA聚合酶才发挥作用。聚合酶才发挥作用。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(3)PCR(3)PCR技术与体内技术与体内DNADNA复制不完全相同，除了需要模板、原复制不完全相同，除了需要模板、原料、料、ATPATP、酶以外，至少还需要液体环境、酶以外，至少还需要液体环境( (稳定的缓冲液环稳定的缓冲液环境境) )、每一步骤需要适宜的温度及酸碱度。、每一步骤需要适宜的温度及酸碱度。(4

13、)(4)PCRPCR的每一轮循环包括高温变性、低温复性和中温延伸的每一轮循环包括高温变性、低温复性和中温延伸三步，从第二轮循环开始，每次循环的产物也作为模板参与三步，从第二轮循环开始，每次循环的产物也作为模板参与反应。反应。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练DNADNA的两条链是反向平行的，为了明确地表示的两条链是反向平行的，为了明确地表示DNADNA的方向，的方向，通常将通常将DNADNA的羟基的羟基( (OH)OH)末端称为末端称为33端，而磷酸基团的末端端，而磷酸基团的末端称为称为55端。端。DNADNA聚合酶不能从头合成聚合

14、酶不能从头合成DNADNA，只能从，只能从33端延伸端延伸DNADNA链。因此链。因此DNADNA复制需要引物，当引物与复制需要引物，当引物与DNADNA母链通过碱基母链通过碱基互补配对结合后，互补配对结合后，DNADNA聚合酶就能从引物的聚合酶就能从引物的33端开始延伸端开始延伸DNADNA链，链，DNADNA的合成方向总是从子链的的合成方向总是从子链的55端向端向33端延伸。由端延伸。由另一条新合成的另一条新合成的DNADNA可知，可知，A A端为端为33端，端，B B端为端为55端，端，D D端为端为33端。端。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考

15、场场实实战战演演练练DNADNA分子在细胞内复制或转录时，在解旋酶的作用下使氢键分子在细胞内复制或转录时，在解旋酶的作用下使氢键断裂，而在体外，断裂，而在体外，DNADNA分子是在分子是在80 80 100 100 的温度范围内的温度范围内变性，即双螺旋解开，成为单链；当温度慢慢降低后，两条变性，即双螺旋解开，成为单链；当温度慢慢降低后，两条彼此分离的单链又会重新结合形成双链。在彼此分离的单链又会重新结合形成双链。在PCRPCR反应中，以引反应中，以引物为标记，第一次循环时，以加入的物为标记，第一次循环时，以加入的DNADNA为模板，两条为模板，两条DNADNA链链可分别由引物可分别由引物和引

16、物和引物与其结合并在与其结合并在DNADNA聚合酶的作用下延聚合酶的作用下延伸，所以形成的每个子代伸，所以形成的每个子代DNADNA分子中只有一种引物；从第二次分子中只有一种引物；从第二次循环开始，上次产生的循环开始，上次产生的DNADNA分子又可作为模板参与反应，所以分子又可作为模板参与反应，所以会出现会出现DNADNA分子两端均含引物的情况，如图所示：分子两端均含引物的情况，如图所示：因此题干中所出现的情况是第一次循环的产物。因此题干中所出现的情况是第一次循环的产物。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练答案：答案：(1)(1)氢氢

17、 解旋解旋 解旋酶解旋酶(2)3 (2)3 四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸 碱基互补配对原则碱基互补配对原则(3)(3)温度温度 酸碱度酸碱度(4)(4)高温变性高温变性 低温复性低温复性 中温延伸中温延伸 33端端 A A、D D解旋解旋 热变性热变性 一一主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【互动探究】【互动探究】(1)(1)用于用于PCRPCR的引物一般长度为的引物一般长度为20203030个核苷酸，个核苷酸，其化学本质是什么？其化学本质是什么？提示：提示：引物的作用是与模板链结合，提供引物的作用是与模板链结合，提供33末端，使末

18、端，使DNADNA聚聚合酶能够催化子链的延伸，在生物体内合酶能够催化子链的延伸，在生物体内DNADNA复制时，引物一复制时，引物一般为一小段般为一小段RNARNA，但在，但在PCRPCR反应中，可以是一小段反应中，可以是一小段DNADNA或或RNARNA。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)PCR(2)PCR反应中，如果以引物为标记，共有几种反应中，如果以引物为标记，共有几种DNADNA分子产生？分子产生？提示：提示：共有共有3 3种。种。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演

19、演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练一、选择题一、选择题1.1.蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是有关叙述不正确的是( )( )A.A.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离不同的蛋白质分离B.B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质泳分离蛋白质C.C.在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法

20、使蛋白质在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法使蛋白质呈溶解状态释放出来呈溶解状态释放出来D.D.根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心法分离蛋根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心法分离蛋白质白质主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】选选A A。蛋白质分子本身太大不能透过半透膜，所以。蛋白质分子本身太大不能透过半透膜，所以只能局限于半透膜一侧，而不能将各种不同的蛋白质分开。只能局限于半透膜一侧，而不能将各种不同的蛋白质分开。蛋白质存在于生物体的组织细胞中，要研究某种蛋白质的结蛋白质存在于生物体的组织细胞中，要

21、研究某种蛋白质的结构、性质、功能，需将蛋白质呈溶解状态释放出来。目前常构、性质、功能，需将蛋白质呈溶解状态释放出来。目前常用的纯化蛋白质的方法有透析法、离心沉降法和电泳法等。用的纯化蛋白质的方法有透析法、离心沉降法和电泳法等。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练2.PCR(2.PCR(聚合酶链式反应聚合酶链式反应) )技术是一项在生物体外复制特定的技术是一项在生物体外复制特定的DNADNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列说法错误的是误的是( )( )主主干干梳梳理理核核心心整整

22、合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练A.AA.A过程高温使过程高温使DNADNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用B.CB.C过程要用到的酶在高温下失活，因此在过程要用到的酶在高温下失活，因此在PCRPCR扩增时需要再扩增时需要再添加添加C.C.如果把模板如果把模板DNADNA的两条链用的两条链用1515N N标记，游离的脱氧核苷酸不标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制做标记，控制“9595555572”72”温度循环温度循环3 3次，则在形次，则在形成的子代成的子代DNADNA中含有中含有1515N N标记的标记的DNADNA

23、占占25%25%D.PCRD.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变中由碱基错配引起的变异属于基因突变主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】选选B B。高温所起的作用类似于解旋酶，使双链。高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNADNA变变为单链。为单链。C C过程为过程为PCRPCR技术的延伸阶段，当系统温度上升至技术的延伸阶段，当系统温度上升至7272左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNADNA聚合酶的作用聚合酶的作用下合成新的下合成新的DNADNA链。链。TaqTaq DNA DNA聚

24、合酶是耐热的，高温下不变性，聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。所以一次性加入即可。PCRPCR技术遵循半保留复制的特点。经技术遵循半保留复制的特点。经过三次循环，共产生过三次循环，共产生2 23 3个个DNADNA分子，其中有分子，其中有2 2个个DNADNA分子含有分子含有1515N N标记。基因中的碱基对改变属于基因突变。标记。基因中的碱基对改变属于基因突变。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练3.(20113.(2011延安模拟延安模拟) )在在PCRPCR扩增前，需要将下列哪些物质加扩增前，需要将下列哪些物质加

25、入微量离心管中入微量离心管中( )( )模板模板DNA DNA 模板模板RNA RNA DNADNA解旋酶解旋酶耐高温的耐高温的DNADNA聚合酶聚合酶 引物引物 PCRPCR缓冲液缓冲液脱氧核苷酸贮备液脱氧核苷酸贮备液 核苷酸贮备液核苷酸贮备液A A B BC C D D主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】选选A A。进行。进行PCRPCR扩增前，将扩增前，将PCRPCR缓冲液、缓冲液、DNADNA模板、一模板、一对引物、四种脱氧核苷酸、对引物、四种脱氧核苷酸、DNADNA聚合酶、聚合酶、MgMg2+2+等成分加到一种

26、等成分加到一种特制的微量离心管中。特制的微量离心管中。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练4.“X4.“X基因基因”是是DNADNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCRPCR技术特异性地拷贝技术特异性地拷贝“X X基因基因”，需要在，需要在PCRPCR反应中加入两反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1 1所示。经所示。经过过4 4轮循环后产物中有五种不同的轮循环后产物中有五种不同的DNADNA分子，如图分子，如图2 2所示，其所示，其中第

27、中第种种DNADNA分子有几个分子有几个( )( )主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练A.2 B.4 C.6 D.8A.2 B.4 C.6 D.8主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】选选D D。在。在PCRPCR技术扩增时，由两种引物决定所扩增的技术扩增时，由两种引物决定所扩增的片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循环形成第一次循环形成和和，第二次循环形成，第二次循环形成、4 4分子分子

28、DNADNA，以此类推，以此类推4 4次循环后共形成次循环后共形成1616分子分子DNADNA，其中，其中、各各1 1分子，分子，、各各3 3分子，分子，共共8 8分子。分子。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练5.(20115.(2011德州模拟德州模拟) )如图表示对某蛋白质溶液进行如图表示对某蛋白质溶液进行SDSSDS聚聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果丙烯酰胺凝胶电泳的结果( (类似于纸层析法分离色素类似于纸层析法分离色素) )，下列，下列相关叙述不正确的是相关叙述不正确的是( )( )主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典

29、典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练A.A.蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子蛋白质分子( (或多肽或多肽) )会向着与其所带电荷相反的电极移动会向着与其所带电荷相反的电极移动B.B.在在SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度完全取决于聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少其所带净电荷多少C.C.在在SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度基本取决于聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的迁移速度基本取决于其相对分子质量大小其相对分子质量大小D.D.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有

30、两种，但也可能只有一电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种种主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】选选B B。本题考查了电泳的原理与应用。蛋白质的氨。本题考查了电泳的原理与应用。蛋白质的氨基与羧基可发生解离，使其带正电或负电，在电场中发生迁基与羧基可发生解离，使其带正电或负电，在电场中发生迁移。移。SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDSSDS可完全掩盖蛋白质可完全掩盖蛋白质本身所带的电荷，其移动速度与本身所带的电荷无关，只由本身所带的电荷，其移动速度与本身所带的电荷无关，只由其

31、分子大小决定。此电泳会使蛋白质水解成肽链，结果可能其分子大小决定。此电泳会使蛋白质水解成肽链，结果可能只有一种蛋白质只有一种蛋白质( (有两种肽链有两种肽链) )，也可能是两种蛋白质。，也可能是两种蛋白质。 主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练二、非选择题二、非选择题6.(1)6.(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生植酸钙被植酸酶分解

32、后可在平板上产生_，可根据其大，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间_表示。表示。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：中的主要成分为中的主要成分为_；中包含植酸酶等多种蛋白质。中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。请写出一种纯化得到植酸酶的方

33、法及其依据。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(3)(3)为建设基因工程菌，可用为建设基因工程菌，可用PCRPCR等技术从上述菌株中克隆植等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。酸酶基因。PCRPCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：反应包含多次循环，每次循环包括三步：_。反应过程中打开模板。反应过程中打开模板DNADNA双链的方双链的方法是法是_。(4)(4)除植酸酶外，微生物还应用在除植酸酶外，微生物还应用在_的生产中。的生产中。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【

34、解析】本题考查了酶的简单制作方法、酶活力测定的一般本题考查了酶的简单制作方法、酶活力测定的一般方法、蛋白质的提取和分离、方法、蛋白质的提取和分离、PCRPCR技术的基本操作和应用。技术的基本操作和应用。(1)(1)通过微生物发酵生产需要的酶，需要在选择培养基上进通过微生物发酵生产需要的酶，需要在选择培养基上进行选择。活力可以用单位时间内底物的消耗量或产物的生成行选择。活力可以用单位时间内底物的消耗量或产物的生成量来表示。量来表示。(2)(2)植酸酶是蛋白质，属大分子有机物，可以利用电泳法提植酸酶是蛋白质，属大分子有机物，可以利用电泳法提纯分离。纯分离。(3)(3)体外扩增生产植酸酶的基因，需要

35、利用体外扩增生产植酸酶的基因，需要利用PCRPCR技术，经过三技术，经过三步循环，可以得到大量的特异性基因。步循环，可以得到大量的特异性基因。(4)(4)酶的应用主要体现在蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等的生酶的应用主要体现在蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等的生产和应用上。产和应用上。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练答案：答案：(1)(1)透明圈透明圈 植酸钠的消耗量植酸钠的消耗量( (减少量减少量) )或磷酸钠或磷酸钠( (肌肌醇醇) )的生成量的生成量( (产量产量) )(2)(2)小分子杂质小分子杂质 电泳法：根据蛋白质之间分子大小、吸

36、附电泳法：根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化性质等差异进行纯化( (或电泳法：根据蛋白质之间电荷、分或电泳法：根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化子大小等差异进行纯化) )。(3)(3)高温变性、低温复性和中温延伸高温变性、低温复性和中温延伸( (长长) )加热加热( (或高温处理或高温处理) )(4)(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练7.7.聚合酶链式反应聚合酶链式反应(PCR)(PCR)是一种体外迅速扩增是一种体外迅速扩增DNADNA片段的技术。片段的技术。

37、请回答下列有关请回答下列有关PCRPCR技术的基本原理及应用的问题。技术的基本原理及应用的问题。(1)DNA(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将的两条链是反向平行的，通常将_的末端称的末端称为为55端，当引物与端，当引物与DNADNA母链通过碱基互补配对结合后，母链通过碱基互补配对结合后，DNADNA聚合酶就能从引物的聚合酶就能从引物的_开始延伸开始延伸DNADNA链。链。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)PCR(2)PCR利用利用DNADNA的热变性原理解决了打开的热变性原理解决了打开DNADNA双链的问题，但双链的问题

38、，但又导致了又导致了DNADNA聚合酶失活的新问题。到聚合酶失活的新问题。到2020世纪世纪8080年代，科学年代，科学家从一种家从一种TaqTaq细菌中分离到细菌中分离到_，它的发现和应用，它的发现和应用解决了以上问题。要将解决了以上问题。要将TaqTaq细菌从其他普通的微生物中分离细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫出来，所用的培养基叫_。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(3)PCR(3)PCR的每次循环可以分为的每次循环可以分为_三步。三步。假设在假设在PCRPCR反应中，只有一个反应中，只有一个DNADNA片段

39、作为模板，请计算在片段作为模板，请计算在5 5次循环后，反应物中大约有次循环后，反应物中大约有_个这样的个这样的DNADNA片段。片段。(4)(4)请用简图表示出一个请用简图表示出一个DNADNA片段片段PCRPCR反应中第二轮的产物。反应中第二轮的产物。(5)(5)简述简述PCRPCR技术的主要应用。技术的主要应用。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】(1)DNA(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的酸的3-3-羟基上，与羟基上，与DNADNA母链结合的母链结合的R

40、NARNA引物就提供这个羟基。引物就提供这个羟基。(2)(2)因因PCRPCR利用了利用了DNADNA的热变性原理解决了打开的热变性原理解决了打开DNADNA双链的问题，双链的问题，所以用于催化所以用于催化DNADNA复制过程的复制过程的DNADNA聚合酶要具有耐高温的特性。聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将用选择培养基可将TaqTaq细菌从其他普通的微生物中细菌从其他普通的微生物中主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练分离出来。分离出来。(3)DNA(3)DNA复制两条链均作为模板，进行半保留复制，复制两条链均作为模板，进行半

41、保留复制，所以复制所以复制5 5次后得到的子代次后得到的子代DNADNA分子数为分子数为2 25 5=32=32个。个。(4)(4)新合成新合成的的DNADNA链带有引物，而最初的模板链带有引物，而最初的模板DNADNA的两条链不带有引物。的两条链不带有引物。(5)PCR(5)PCR技术可以对技术可以对DNADNA分子进行扩增，所以可用于遗传疾病分子进行扩增，所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆和的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆和DNADNA序列分序列分析等方面。析等方面。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演

42、练练答案：答案：(1)(1)磷酸基团磷酸基团 33端端 (2)(2)耐高温的耐高温的TaqTaq DNA DNA聚合聚合酶酶 选择培养基选择培养基 (3)(3)高温变性、低温复性和中温延伸高温变性、低温复性和中温延伸 3232(4)(4)(5)(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学研究、基因克隆和和DNADNA序列分析序列分析( (要求要求3 3项以上项以上) )。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练8.8.生物技术的广泛应用，不仅给社会带来了较大的经济效益，生物技术的广泛应用，不仅给

43、社会带来了较大的经济效益，受到社会的广泛重视，更使人们的生活变得丰富多彩。请回受到社会的广泛重视，更使人们的生活变得丰富多彩。请回答下列有关问题：答下列有关问题：(1)1995(1)1995年，美国科学家穆里斯因发明了年，美国科学家穆里斯因发明了PCRPCR技术而获得了诺技术而获得了诺贝尔化学奖。贝尔化学奖。PCRPCR和生物体内和生物体内DNADNA复制都必需的条件包括复制都必需的条件包括DNADNA聚合酶、模板聚合酶、模板DNADNA、能量、游离脱氧核苷酸和、能量、游离脱氧核苷酸和_；在；在生物体内复制必需，而在生物体内复制必需，而在PCRPCR技术中不需要的成分是技术中不需要的成分是_。

44、主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(2)(2)在香料工业提取的在香料工业提取的“液体黄金液体黄金”玫瑰精油中，要求不含玫瑰精油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是_；玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用_技术实现技术实现玫瑰的快速繁殖。玫瑰的快速繁殖。(3)(3)在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，原因是要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，原因是_

45、。如果在。如果在CaClCaCl2 2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明_。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(4)(4)为获得一种能高效降解农药的细菌为获得一种能高效降解农药的细菌( (目的菌目的菌) )，往培养基，往培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转移至固体培中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转移至固体培养基，常采用的接种方法是养基，常采用的接种方法是_；实验结束后，使用过；实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后才能倒掉，这样做是为了的培养基应该进行处理后才能倒掉，这样做是为了

46、_。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练【解析【解析】(1)PCR(1)PCR技术需要引物，是因为技术需要引物，是因为DNADNA聚合酶不能直接聚合酶不能直接在一条在一条DNADNA单链上复制，一定要先让一小段寡核苷酸单链上复制，一定要先让一小段寡核苷酸( (即引物即引物) )与模板与模板DNADNA互补配对，然后聚合酶才能从引物的一端继续复互补配对，然后聚合酶才能从引物的一端继续复制下去。制下去。PCRPCR与生物体内与生物体内DNADNA复制的一个主要区别是复制的一个主要区别是PCRPCR技术技术不需要不需要DNADNA解旋酶。解

47、旋酶。(2)(2)蒸馏法的优点在于不含有任何添加剂或化学原料；植物蒸馏法的优点在于不含有任何添加剂或化学原料；植物组织培养技术是一种快速繁殖植物的技术。组织培养技术是一种快速繁殖植物的技术。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练(3)(3)若固定化酵母细胞数目过少，会导致凝胶珠颜色过浅。若固定化酵母细胞数目过少，会导致凝胶珠颜色过浅。(4)(4)在固体培养基上最常用的接种方法是平板划线法；实验在固体培养基上最常用的接种方法是平板划线法；实验结束后为防止实验材料造成环境污染，需将培养基处理后才结束后为防止实验材料造成环境污染，需将培养基处

48、理后才能倒掉。能倒掉。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练答案：答案：(1)(1)引物引物 DNADNA解旋酶解旋酶(2)(2)蒸馏法蒸馏法 植物组织培养植物组织培养(3)(3)防止高温杀死酵母菌防止高温杀死酵母菌 固定化酵母细胞数目较少固定化酵母细胞数目较少(4)(4)平板划线法平板划线法 防止造成环境污染防止造成环境污染主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练9.PCR9.PCR技术是把某一技术是把某一DNADNA片段在体外酶的作用下，合成许许多片段在体外酶的作用下，合成许许

49、多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或求的目的基因或DNADNA分子片段；电泳技术是在外电场作用下，分子片段；电泳技术是在外电场作用下，利用分子携带的静电荷不同，把待测分子的混合物放在一定利用分子携带的静电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质的介质( (如琼脂糖凝胶如琼脂糖凝胶) )中进行分离和分析的实验技术，利用中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做亲子法学鉴定。如图是电泳装置及相应电泳结果。亲子法学鉴定。如图

50、是电泳装置及相应电泳结果。主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练主主干干梳梳理理核核心心整整合合热热点点问问题题典典例例突突破破模模拟拟考考场场实实战战演演练练请回答：请回答：(1)(1)叶绿体色素提取所采用的纸层析法与电泳相比，前者使叶绿体色素提取所采用的纸层析法与电泳相比，前者使用的介质是用的介质是_。电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带的净电荷的多少有电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带的净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素的影响？关外，你认为还受什么因素的影响？_(_(至少列出一种至少列出一种) )。(2)PCR(2)PCR技