透明质酸的研究进展PPT课件.ppt
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1、透明质酸的研究进展大大 纲纲透明质酸的概况透明质酸的概况透明质酸的理化性质及生理功能透明质酸的理化性质及生理功能透明质酸的制备透明质酸的制备透明质酸的应用透明质酸的应用2透明质酸的概况v 透明质酸透明质酸 ( Hyaluronicacid简称简称 HA) ,又名玻璃酸,又名玻璃酸,是一种高分子量的直链多糖是一种高分子量的直链多糖v 1934年年Meyel和和 Palmerl首次从牛眼的玻璃体组织分首次从牛眼的玻璃体组织分离出玻璃酸及其钠盐,以后将玻璃酸及其反离子所生成的离出玻璃酸及其钠盐,以后将玻璃酸及其反离子所生成的离子对或盐统称为离子对或盐统称为hyaluronan(HA)v 由由(1-3
2、)-2-乙酰氨基乙酰氨基-2-脱氧脱氧-D-葡萄糖葡萄糖(1-4 )-D-D-葡萄糖醛酸双糖重复单位所组成的直链粘多糖,其分子量葡萄糖醛酸双糖重复单位所组成的直链粘多糖,其分子量一般在一般在5 8 0 0万,依来源和制取方式而定万,依来源和制取方式而定v 透明质酸存在于结缔组织如关节、玻璃体、滑液、脐带、透明质酸存在于结缔组织如关节、玻璃体、滑液、脐带、软骨、皮肤、鸡冠软骨、皮肤、鸡冠 、A族和族和 C族溶血性链球菌和华顿胶族溶血性链球菌和华顿胶中,以满足一些重要的功能如韧性、支持结构以及细胞的中,以满足一些重要的功能如韧性、支持结构以及细胞的代谢调节代谢调节3透明质酸的存在形式v Hyalu
3、ronic Acid (透明质酸透明质酸)v Sodium Hialuronate (透明质酸钠透明质酸钠)v Hyaluronan(透明质多糖透明质多糖)自然界存在的透明质酸通常连接着钠分子。自然界存在的透明质酸通常连接着钠分子。透明质酸或透明质酸盐的定义更准确地反映了它的真实存在形式。在活透明质酸或透明质酸盐的定义更准确地反映了它的真实存在形式。在活体中,它以多离子聚合体的形式存在,而非酸的质子化形式体中,它以多离子聚合体的形式存在,而非酸的质子化形式OOONHOOOOHHHOOOOOOOOOHOOOHOOHH-2233445565511HHOHHH4透明质酸的理化性质及生理功能透明质酸的
4、理化性质及生理功能v理化性质理化性质n强亲水性,溶液中强亲水性,溶液中HA亲和的水分约为其本身重量的亲和的水分约为其本身重量的 1000倍倍n独特的流体力学性质。独特的流体力学性质。HA水溶液有着水溶液有着 良好的粘弹性和应变性良好的粘弹性和应变性lHA参与构成蛋白聚糖聚合体,在生理状态下,参与构成蛋白聚糖聚合体,在生理状态下,HA 与与其他糖胺聚糖其他糖胺聚糖 ( 如硫酸软骨素、硫酸角质素等如硫酸软骨素、硫酸角质素等)协同连协同连接到核心蛋白上,构成蛋白聚糖聚合体。接到核心蛋白上,构成蛋白聚糖聚合体。v生理功能生理功能lHA对巨嗜细胞、粒细胞、淋巴细胞、自然杀伤细胞对巨嗜细胞、粒细胞、淋巴细
5、胞、自然杀伤细胞 ( N K)等均有一定作用。等均有一定作用。H A还可加速创面愈合。还可加速创面愈合。5透明质酸的制备方法透明质酸的制备方法v1.组织提取法(动物源性)组织提取法(动物源性)l制备制备 H A的常用原料有鸡冠、脐带、眼玻璃体、猪皮的常用原料有鸡冠、脐带、眼玻璃体、猪皮等,主要工艺过程包括提取、等,主要工艺过程包括提取、 除杂、沉淀和分级分离除杂、沉淀和分级分离v2.微生物发酵法微生物发酵法 (非动物源性)(非动物源性)l利用微生物发酵生成利用微生物发酵生成 H Av非动物源性透明质酸,相比之下非动物源性透明质酸,相比之下: l动物源性透明质酸纯度不够,含有动物性抗原,容易动物
6、源性透明质酸纯度不够,含有动物性抗原,容易引起过敏反应或变态反应引起过敏反应或变态反应l动物源性的透明质酸需要通过高热消毒,会影响透明动物源性的透明质酸需要通过高热消毒,会影响透明质酸的活性质酸的活性67n 膀胱粘膜表面有一层氨基葡萄糖保护层(膀胱粘膜表面有一层氨基葡萄糖保护层(GAG层),其成分包括层),其成分包括透明透明质酸质酸、肝素、硫酸软骨素肝素、硫酸软骨素 、硫酸皮肤素、硫酸角蛋白。、硫酸皮肤素、硫酸角蛋白。n GAG层已被认为是移行上皮抵抗尿中刺激物的主要防护机制。层已被认为是移行上皮抵抗尿中刺激物的主要防护机制。膀胱粘膜保护层膀胱粘膜保护层氨基葡萄糖(氨基葡萄糖(GAGGAG)层
7、)层7多聚体与膀胱上皮的结合示意图多聚体与膀胱上皮的结合示意图正常状态疾病状态膀胱上皮结合点多聚体89正常状态正常状态疾病状态疾病状态9修复缺损修复缺损的的GAG层层重建膀胱粘重建膀胱粘膜防御功能膜防御功能避免潜在的炎症避免潜在的炎症物质对膀胱的侵害物质对膀胱的侵害临临时时替替代代缺缺损损的的GAGGAG层层减轻膀胱炎症过程减轻膀胱炎症过程缓解膀胱刺激征缓解膀胱刺激征透明质酸透明质酸作用机理作用机理10GAG layer(GAG层)层)缺损缺损Interstitial Cystitis (PBS/IC)(间质性膀胱炎)(间质性膀胱炎)Radiation induced Cystitis(放射引
8、起的膀胱炎)(放射引起的膀胱炎)Recurrent Bacterial Cystitis(复发性细菌性膀胱炎)(复发性细菌性膀胱炎)Hemorrhagic Cystitis (出血性膀胱炎)(出血性膀胱炎)Overactive Bladder?(膀胱过度活动征)(膀胱过度活动征)Chronic Non Bacterial Prostatitis?(慢性非细菌性前列腺炎)(慢性非细菌性前列腺炎)Chronic Pelvic Pain?(慢性盆底疼痛)(慢性盆底疼痛)11临临 床床 应应 用用v一、难治性非细菌性膀胱炎一、难治性非细菌性膀胱炎12膀胱内灌注透明质酸钠治疗难治性非细菌性膀胱炎的多中心
9、试验膀胱内灌注透明质酸钠治疗难治性非细菌性膀胱炎的多中心试验v20例顽固性非细菌性膀胱炎,男例顽固性非细菌性膀胱炎,男1例,女例,女19例。例。年龄年龄22-68岁,平均岁,平均47岁。病程岁。病程1个月个月-30年。年。其中大于其中大于1年的年的16例。治疗方法例。治疗方法1周周1次次*4次,次,然后然后4周周1次次*2次,随访次,随访16周。周。v除除1例患者中途退出外,共例患者中途退出外,共19例患者完成了例患者完成了16周周随访。随访。中华泌尿外科杂志,2006,27(7):483-48513结果结果P0.00114结论结论v膀胱内灌注透明质酸对顽固性非细菌性膀胱炎患膀胱内灌注透明质酸
10、对顽固性非细菌性膀胱炎患者的尿路刺激症状有明显的改善作用。者的尿路刺激症状有明显的改善作用。15临临 床床 应应 用用v二、慢性复发性细菌性膀胱炎二、慢性复发性细菌性膀胱炎16n 细菌性膀胱炎约占尿路感染(细菌性膀胱炎约占尿路感染(UTI)总数的)总数的50%70%。大约有。大约有1/3的成年女性在其一生中曾患过尿路感染的成年女性在其一生中曾患过尿路感染1。大约有。大约有25%的急性膀胱炎可的急性膀胱炎可发展为复发性感染,其中发展为复发性感染,其中1/3在在3个月内复发或再感染,个月内复发或再感染,75% 80%在在第第1次感染次感染2月内有复发月内有复发2n 传统上传统上RBC用间歇或长期抗
11、菌药物治疗,但抗感染治疗仅能控制某次感染用间歇或长期抗菌药物治疗,但抗感染治疗仅能控制某次感染,而使效果有限且短暂,仍然不能很好的控制复发。长期使用容易产生耐,而使效果有限且短暂,仍然不能很好的控制复发。长期使用容易产生耐药菌,部份妇女的细菌性膀胱炎会一直复发,导致持续依赖抗生素治疗。药菌,部份妇女的细菌性膀胱炎会一直复发,导致持续依赖抗生素治疗。疾病基础疾病基础1、Valiquette LUrinary tract infections in womenJCan J Urol,2001,8(1):6-122、RonaldAThe etiologyof urinary tractinfecti
12、on:traditional and emerging pathogensJDis Mon,2003,49(2):71-8217各种原因损伤各种原因损伤膀胱粘膜膀胱粘膜附着在粘膜表层的附着在粘膜表层的GAG层也受到破坏层也受到破坏细菌等有害物质通细菌等有害物质通过缺损的过缺损的GAG层进层进入膀胱内壁入膀胱内壁慢性复发性细菌性膀胱炎慢性复发性细菌性膀胱炎18膀胱内灌注透明质酸治疗慢性复发性细菌性膀胱炎的效果膀胱内灌注透明质酸治疗慢性复发性细菌性膀胱炎的效果v 27-40岁女性岁女性20名均有复发性泌尿道感染病史,接受透名均有复发性泌尿道感染病史,接受透明质酸膀胱内灌注,每次明质酸膀胱内灌注,每
13、次40mg,1周周1次,次,4周后改为周后改为1个月个月1次,直至次,直至4个月。个月。v 第一次灌注前第一次灌注前15名有广泛的损伤和黏膜上皮纤维化,名有广泛的损伤和黏膜上皮纤维化,5名名显示中度增生,治疗显示中度增生,治疗4周后再次活检,显示周后再次活检,显示14名(名(70%)膀胱黏膜愈合加速,膀胱纤维化受抑。)膀胱黏膜愈合加速,膀胱纤维化受抑。6名患者没有相名患者没有相关的组织学增生。所有患者在治疗结束时均无复发。关的组织学增生。所有患者在治疗结束时均无复发。Lianos E.et al. Journal of Endourology Jul 200519结结 论论v透明质酸可以有效促
14、进膀胱黏膜上皮愈合及抑制透明质酸可以有效促进膀胱黏膜上皮愈合及抑制纤维化纤维化20实验方案:实验方案:40例患例患者,接受膀胱灌注者,接受膀胱灌注西施泰治疗西施泰治疗(40mg/50ml),每),每周一次,周一次,4周后改为周后改为每月一次,直至每月一次,直至4个个月。月。结论:能显著改善患者症状,延长复发间隔时间,减少复发次数。结论:能显著改善患者症状,延长复发间隔时间,减少复发次数。Constantinides et al., Preliminary results from the use of HA as a preventative agent for recurrent cysti
15、tis in female. BJU Intern., 93: 1262-1266, 2004.膀胱内灌注透明质酸预防复发性细菌性膀胱炎的研究膀胱内灌注透明质酸预防复发性细菌性膀胱炎的研究P0.00121In the treatment of RBC(治疗(治疗RBC的研究)的研究) Study of M. Lipovac & M. Imhof,2007:实验方案:实验方案:20例有例有UTI史女性患者,接史女性患者,接受膀胱灌注西施泰受膀胱灌注西施泰疗每周一次,疗每周一次,4周后周后改为每月一次,直改为每月一次,直至至5个月。个月。P0.001治疗前治疗前36.2+-6.2周内,周内,20名
16、患者泌尿道感染的总次数名患者泌尿道感染的总次数67次次,治疗后,治疗后47周内感染次数为周内感染次数为10次。次。22P0.00123P0.00124临床应用临床应用v三、透明质酸钠在放射性膀胱炎中的应用三、透明质酸钠在放射性膀胱炎中的应用25v2.Kanai A, Epperly M, Pearce L,et al. Differing roles of mitochondrial nitric oxide synthase in cardiomyocytes and urothelial cells. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004 Jan;28
17、6(1):H13-21 动物实验表明放射线可使线粒体的一氧化氮合酶含量增加,产生的一氧动物实验表明放射线可使线粒体的一氧化氮合酶含量增加,产生的一氧化氮导致膀胱上皮粘膜细胞脱落,失去了上皮的保护和渗透性屏障,大化氮导致膀胱上皮粘膜细胞脱落,失去了上皮的保护和渗透性屏障,大量水分和尿素渗入膀胱平滑肌层,使神经过度兴奋,逼尿肌功能紊乱,量水分和尿素渗入膀胱平滑肌层,使神经过度兴奋,逼尿肌功能紊乱,从而产生突发性、无痛性血尿,并可伴膀胱刺激症状从而产生突发性、无痛性血尿,并可伴膀胱刺激症状2。 放射对膀胱的损伤主要表现在膀胱粘膜的改变放射对膀胱的损伤主要表现在膀胱粘膜的改变11疾病基础疾病基础26n
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