自动生化分析技术-ppt课件.ppt

1、第四章 自动生化分析技术自动生化分析技术自动生化分析技术是指机械是指机械化的仪器设备模仿代替手工化的仪器设备模仿代替手工操作，即把生化分析过程中操作，即把生化分析过程中的加样、加试剂、混合、保的加样、加试剂、混合、保温反应、检测、结果计算、温反应、检测、结果计算、数据处理和打印报告，以及数据处理和打印报告，以及实验后的清洗等步骤自动化实验后的清洗等步骤自动化的分析检测技术。的分析检测技术。特特点点灵灵敏敏准准确确快快速速节节约约标准化标准化 自自2020世纪世纪5050年代，第一台生年代，第一台生动生化分析仪问世动生化分析仪问世管道式自动管道式自动生化分析仪生化分析仪第一节第一节 自动生化分析

2、仪的类型自动生化分析仪的类型根据根据仪器仪器自动自动化程化程度度 全自全自动化动化半自半自动化动化 半自动分析仪半自动分析仪：分析过：分析过程中的部分操作需手工进行，程中的部分操作需手工进行，而其他部分操作可由仪器自而其他部分操作可由仪器自动完成。分析速度慢，适用动完成。分析速度慢，适用于样品数量少、检验项目少于样品数量少、检验项目少的小型医院。的小型医院。 全自动分析仪：全自动分析仪：指从加指从加样至打印结果的全过程，均样至打印结果的全过程，均由仪器程序控制自动完成。由仪器程序控制自动完成。 适用于样品数量多、检测项适用于样品数量多、检测项目多、而且复杂的综合性大目多、而且复杂的综合性大医院

3、的临床生化检验室应用。医院的临床生化检验室应用。自动生化分析仪分类自动生化分析仪分类根据仪器结构和原理根据仪器结构和原理连续流动式（管道式）连续流动式（管道式） 离心式离心式 分立式分立式 干片式干片式 连续流动式：各个样品与试剂在连续流动式：各个样品与试剂在同一管道同一管道内内连续流动时完成反应、显色、比色、检测过程，连续流动时完成反应、显色、比色、检测过程，样品间以气泡、缓冲液或试剂空白相分隔。样品间以气泡、缓冲液或试剂空白相分隔。 分立式分立式：各个样品与试剂在：各个样品与试剂在各自反应杯各自反应杯内完内完成反应、显色、比色、检测过程。成反应、显色、比色、检测过程。 离心式：在离心力的作

4、用下，各待测样品几离心式：在离心力的作用下，各待测样品几乎同时与试剂混合、反应、检测，属于同步分析。乎同时与试剂混合、反应、检测，属于同步分析。 干片式：将测定一个项目所需的试剂固定在干片式：将测定一个项目所需的试剂固定在固相载体上，加上定量血清后，干片的背面即产固相载体上，加上定量血清后，干片的背面即产生颜色反应，用反射光度计检测便可进行定量分生颜色反应，用反射光度计检测便可进行定量分析。析。根据仪器的测定速度根据仪器的测定速度小型自动生化分析仪小型自动生化分析仪 中型自动生化分析仪中型自动生化分析仪 大型自动生化分析仪大型自动生化分析仪 超大型自动生化分析仪超大型自动生化分析仪 根据根据开

5、放开放程度程度封闭系统封闭系统开放系统开放系统 属光学分析仪器，检测原理基于物质对光的选择属光学分析仪器，检测原理基于物质对光的选择性吸收，一般工作波长性吸收，一般工作波长340nm 800nm，属紫外，属紫外-可见分光光度法。可见分光光度法。自动生化分析仪的工作原理一、半自动生化分析仪l结构特点与设计原理结构特点与设计原理 特点：特点：体积小，结构简体积小，结构简单，灵活性大，价格便宜；单，灵活性大，价格便宜；一般不受试剂、方法的限制。一般不受试剂、方法的限制。 工作原理：工作原理：连续流动式连续流动式分析，其流动管道中的特定分析，其流动管道中的特定位置有一微型比色杯称为流位置有一微型比色杯

6、称为流动比色杯，无不同比色杯之动比色杯，无不同比色杯之间的吸光度差异。间的吸光度差异。l注意事项注意事项：1.1.由于检测所加试剂及样品量都很少，要特别注意取样由于检测所加试剂及样品量都很少，要特别注意取样和加试剂的准确性；和加试剂的准确性；2.2.使用过程中，严禁吸入强酸试剂；使用过程中，严禁吸入强酸试剂；3.3.每次使用完毕，必须用蒸馏水冲洗比色杯和管道；每次使用完毕，必须用蒸馏水冲洗比色杯和管道；4.4.做酶动力学检测时，要特别注意起始的吸光度值，如做酶动力学检测时，要特别注意起始的吸光度值，如果很低应考虑底物耗尽果很低应考虑底物耗尽 5.5.如反复多次吸入蒸馏水后，不能调整零如反复多次

7、吸入蒸馏水后，不能调整零点或吸光度不稳，应使用清洁液浸泡比色点或吸光度不稳，应使用清洁液浸泡比色池后再用水清洗；池后再用水清洗；6.6.仪器若长时间不使用，应在一个月内至仪器若长时间不使用，应在一个月内至少通电一次。少通电一次。二、二、 全自动生化分析仪全自动生化分析仪一、分立式分析仪一、分立式分析仪 目前临床实验室目前临床实验室所用的大部分分析仪所用的大部分分析仪都属于分立式，具有都属于分立式，具有结构简单、检测速度结构简单、检测速度快等优点。快等优点。日立日立71807180型分析仪型分析仪 吸样吸样加入第一试剂加入第一试剂 搅拌搅拌 保温保温 测试杯空白测试杯空白 清洗反应杯清洗反应杯

8、数据处理数据处理 打印结果打印结果 比色分析比色分析加入第二试加入第二试剂剂 搅拌搅拌 保温保温全自动生化分析仪工作流程图全自动生化分析仪工作流程图 分立式自动生化分析仪的结构包括：样品盘分立式自动生化分析仪的结构包括：样品盘（架）、取样装置、试剂室（瓶）、取液装置、（架）、取样装置、试剂室（瓶）、取液装置、反应盘、混匀装置、温控装置、光学监测系统、反应盘、混匀装置、温控装置、光学监测系统、清洗系统和计算机控制系统等。清洗系统和计算机控制系统等。试剂盘试剂盘2 2试剂盘试剂盘1 1试剂针试剂针2 2试剂针试剂针1 1样品针样品针样品盘样品盘反应盘反应盘搅拌器搅拌器清洗装置清洗装置1.1.样品盘

9、或样品架样品盘或样品架 样品盘：放置一定数量的样品，通过样样品盘：放置一定数量的样品，通过样品盘的转动来控制不同样品的进样。品盘的转动来控制不同样品的进样。 样品架：由步进马达控制移动，以样品样品架：由步进马达控制移动，以样品架上的条形码或底部编码孔识别样品架及样架上的条形码或底部编码孔识别样品架及样品位置号。品位置号。传送条带状样品架传送条带状样品架 圆盘状样品架圆盘状样品架2.2.取样装置：取样装置：由注射器、传动泵、加样臂和样品探针由注射器、传动泵、加样臂和样品探针等组成，能定量吸取样品并加入到反应杯中。等组成，能定量吸取样品并加入到反应杯中。取样容量：取样容量：一般一般2l-35l2l

10、-35l交叉污染：交叉污染：在吸取不同样品时可产生携带交叉污染在吸取不同样品时可产生携带交叉污染防止措施：防止措施：对样品针内外壁进行水冲洗对样品针内外壁进行水冲洗3.3.试剂室：试剂室：存储试剂，大多数试剂室具有冷藏存储试剂，大多数试剂室具有冷藏装置，条形码检测系统。装置，条形码检测系统。（1 1）试剂转盘式：）试剂转盘式：放置一定形状试剂瓶，数量放置一定形状试剂瓶，数量不等，试剂盘转动可使某个试剂瓶到达特定的不等，试剂盘转动可使某个试剂瓶到达特定的试剂吸取位置。试剂吸取位置。试剂试剂条码阅读器条码阅读器（2）试剂架形式：）试剂架形式：放置大容量任意形状的试剂放置大容量任意形状的试剂瓶，由每

11、个试剂瓶内引出一条试剂管路及其喷嘴，瓶，由每个试剂瓶内引出一条试剂管路及其喷嘴，不同试剂间无交叉污染不同试剂间无交叉污染4.4.取液装置：取液装置：用于定量吸取试剂加入反应杯。用于定量吸取试剂加入反应杯。取试剂量取试剂量：一般为：一般为20-380l20-380l交叉污染：交叉污染：吸取不同试剂时可产生携带交叉污染吸取不同试剂时可产生携带交叉污染防止措施：防止措施：对样品针内外壁进行水冲洗对样品针内外壁进行水冲洗特殊功能：特殊功能：液面感应液面感应防碰撞装置防碰撞装置预热试剂预热试剂5.5.反应盘：反应盘：由由100100只或更多的反应杯围成一圈组成，有的分析只或更多的反应杯围成一圈组成，有的

12、分析仪具有两圈反应杯仪具有两圈反应杯 反应盘作恒速圆周运动，转动到某些特定位置时短暂停反应盘作恒速圆周运动，转动到某些特定位置时短暂停止，在反应杯中加入样品、试剂或进行搅拌混匀止，在反应杯中加入样品、试剂或进行搅拌混匀 反应杯：是样品与试剂进行化学反应的场所反应杯：是样品与试剂进行化学反应的场所 由透光性好的硬质玻璃或石英玻璃制成由透光性好的硬质玻璃或石英玻璃制成6.6.混匀装置：混匀装置：反应杯里的样品与试剂需要混匀反应杯里的样品与试剂需要混匀（1 1）混匀方式：）混匀方式：搅拌混匀：搅拌混匀：用搅拌棒，多数用搅拌棒，多数超声混匀：超声混匀：可杜绝携带污染，极大程度较少泡沫可杜绝携带污染，极

13、大程度较少泡沫产生产生防交叉污染：水洗防交叉污染：水洗7.7.恒温装置：恒温装置：反应杯需浸浴在恒温环境中，一般反应杯需浸浴在恒温环境中，一般固定在固定在3737，温度波动不能大于，温度波动不能大于0.10.1。温浴方式：温浴方式：（1 1）空气浴恒温：）空气浴恒温：升温速度快，不稳定，受环升温速度快，不稳定，受环境温度影响大。境温度影响大。（2 2）水浴循环恒温式：）水浴循环恒温式：温度稳定，需加防腐剂温度稳定，需加防腐剂保持水洁净，并要定期更换循环水。保持水洁净，并要定期更换循环水。（3 3）恒温液循环间接加热式：）恒温液循环间接加热式：兼具空气和水浴兼具空气和水浴的优点，用一种无污染、惰

14、性的不蒸发液体，用的优点，用一种无污染、惰性的不蒸发液体，用很小缝隙的空气把比色杯与恒温液隔开。很小缝隙的空气把比色杯与恒温液隔开。8.8.清洗系统清洗系统（1 1）样品针、试剂针和搅拌棒的随时清洗）样品针、试剂针和搅拌棒的随时清洗 在用于下一个样品、试剂或反应杯前需清洗一在用于下一个样品、试剂或反应杯前需清洗一次，多数为去离子水冲洗次，多数为去离子水冲洗（2 2）反应杯的随时清洗）反应杯的随时清洗 多数全自动生化分析仪具有反应杯清洗装置多数全自动生化分析仪具有反应杯清洗装置 一个反应杯内的化学反应和吸光度检测结束后一个反应杯内的化学反应和吸光度检测结束后该反应杯就被冲洗系统及时冲洗该反应杯就

15、被冲洗系统及时冲洗冲洗过程：冲洗过程：吸液针吸去废液吸液针吸去废液排液针注入清洗液排液针注入清洗液1 1（碱性）（碱性）吸去废液吸去废液水洗并吸干水洗并吸干注入清洗液注入清洗液2 2（酸性）（酸性）吸去废液吸去废液水洗并吸干水洗并吸干擦干擦干吸光度吸光度检查检查自动生化自动生化分析分析仪仪.wmv二、连续流动式分析仪二、连续流动式分析仪 测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应，均在同一管道中经流动过程完成，又化学反应，均在同一管道中经流动过程完成，又称管道式分析仪称管道式分析仪 。单通道管道式自动分析仪结构示意图单通道管道式自动分析仪结构示意图 第

16、二节第二节 自动生化分析仪的参数设置自动生化分析仪的参数设置 仪器的参数就是仪器工作的指令，参数的正仪器的参数就是仪器工作的指令，参数的正确设置和合理使用是确设置和合理使用是 仪器正常工作的前提条件。仪器正常工作的前提条件。 封闭式生化分析仪封闭式生化分析仪的参数及的参数及开放式生化分析开放式生化分析仪仪的有些参数由厂家提供无需设定。开放式生化的有些参数由厂家提供无需设定。开放式生化分析仪的部分参数，应在使用前根据各自实验室分析仪的部分参数，应在使用前根据各自实验室及各自使用仪器不同，正确设置。及各自使用仪器不同，正确设置。（一）基本参数设置（一）基本参数设置 1.试验名称：试验名称：指测定项

17、目的标示符，指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。常以项目的英文缩写来表示。 2.方法类型：方法类型： 常用的方法一点终点法、两点终点法、常用的方法一点终点法、两点终点法、固定时间法、连续监测法等。固定时间法、连续监测法等。 根据被测物质的检测方法原理选择其根据被测物质的检测方法原理选择其中相应的分析方法。中相应的分析方法。 3.反应温度：反应温度：自动生化分析仪通常设有自动生化分析仪通常设有25、30、37三种温度，三种温度，为了使反应的温度与体内温为了使反应的温度与体内温度一致，一般选用度一致，一般选用37。 4.测定波长：测定波长：单波长：当测定体系中只有一单波长：当测定体系中只

18、有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收峰无重叠时，可用单波长检测。物质的吸收峰无重叠时，可用单波长检测。 自动生化分析仪常用双波长或多波长。自动生化分析仪常用双波长或多波长。主波长主波长：被测物质反应产物最大吸收峰作为主波长：被测物质反应产物最大吸收峰作为主波长次波长：次波长：干扰物主波长的吸收与次波长吸光度越接干扰物主波长的吸收与次波长吸光度越接近越好，测定时近越好，测定时主波长的吸光度减去次波长的吸光主波长的吸光度减去次波长的吸光度度可消除溶血、浊度等干扰物的影响。可消除溶血、浊度等干扰物的影响。 5.反应方向：反应方向：正向反应和负向反应，吸光度增加正向反应和负向反应，吸光度增加为正向反应，吸光度下降为负向反应。为正向反应，吸光度下降为负向反应。 6.标本量和试剂量：标本量和试剂量：配套试剂：配套试剂：标本量与试剂量一般按照试剂说明书标本量与试剂量一般按照试剂说明书上的比例进行设置。上的比例进行设置。非配套试剂：根据仪器说明书非配套试剂：根据仪器说明书可按比例缩减或重可按比例缩减或重新设计新设计