多聚酶链式反应ppt课件.ppt
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1、ppt课件.1ppt课件.21概念:概念:PCR即即_,是一种体外,是一种体外迅速扩增迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的片段的技术。它能以极少量的_为模板,在短时间内复制出上百万份的为模板,在短时间内复制出上百万份的DNA拷贝。拷贝。多聚酶链式反应多聚酶链式反应DNA 遗传疾病的诊断、遗传疾病的诊断、 刑侦破案、刑侦破案、 古生物学、古生物学、 基因克隆基因克隆 DNADNA序列测定。序列测定。2 、PCR技术技术 的应用的应用 ppt课件.3一、基础知识一、基础知识(一)回忆(一)回忆DNA的复制的复制 回答相关问题回答相关问题1、发生时间发生时间:发生在细胞有丝分裂的发生在细胞有丝分
2、裂的间期间期和减数第一次分裂和减数第一次分裂间期间期。2、特点特点(方式方式):边解旋边复制边解旋边复制半保留复制半保留复制多起点复制多起点复制3、合成条件、合成条件模板模板:原料:原料:游离的脱氧核苷酸游离的脱氧核苷酸DNA两条链两条链能量:能量:ATP酶酶:解旋酶、解旋酶、DNA聚合酶聚合酶反应条件温和反应条件温和4 4、场所:、场所: 细胞核细胞核(主主)、线粒体、叶绿体、线粒体、叶绿体DNA母链:提供复制的模板解旋酶:打开DNA双链4种脱氧核苷酸:合成子链的原料DNA聚合酶:催化合成DNA子链ATP:为复制过程提供能量引物:使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸(二)(二)DNA
3、DNA复制的条件复制的条件ppt课件.512345脱氧核苷酸结构脱氧核苷酸结构1DNA的平面结构:的平面结构:ppt课件.6OOPOHO碱基碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖磷酸基团磷酸基团碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖53磷酸二酯键磷酸二酯键。脱氧核苷酸脱氧核苷酸 链链 结构结构ppt课件.7目录上页下页习题参考书返回ATGCATGC5,端含磷酸基团端含磷酸基团3,端含羟基端含羟基3,端端5,端端ppt课件.8目录上页下页习题参考书返回DNADNA聚合酶的特性聚合酶的特性 - 专一性专一性 DNA DNA聚合酶不能从头开始合聚合酶不能从头开始合成成D
4、NADNA,而只能从,而只能从3 3端延伸端延伸DNADNA链。链。因此,因此,DNADNA复制需要引物。复制需要引物。ppt课件.9观察图观察图 2复制的方向:复制的方向:2 方向:方向:子链的子链的5端向端向 3端延伸。端延伸。ppt课件.10ppt课件.11 DNADNA双链双链单链单链 变性(加热变性(加热80-10080-100) 复性(缓慢冷却)复性(缓慢冷却)变性的目的:变性的目的: 解开双链解开双链:解开氢键解开氢键 在80100 的温度范围内,的温度范围内,DNADNA的双螺旋结的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为构将解体,双链分开,这个过程称为2、PCR原理原理变性变
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